Patients with ankylosing spondylitis present a distinct CD8 T cell subset with osteogenic and cytotoxic potential.

OBJECTIVES Ankylosing spondylitis (AS) is a chronic inflammatory rheumatic disease affecting mainly the axial skeleton. Peripheral involvement (arthritis, enthesitis and dactylitis) and extra-musculoskeletal manifestations, including uveitis, psoriasis and bowel inflammation, occur in a relevant proportion of patients. AS is responsible for chronic and severe back pain caused by local inflammation that can lead to osteoproliferation and ultimately spinal fusion. The association of AS with the human leucocyte antigen-B27 gene, together with elevated levels of chemokines, CCL17 and CCL22, in the sera of patients with AS, led us to study the role of CCR4+ T cells in the disease pathogenesis. METHODS CD8+CCR4+ T cells isolated from the blood of patients with AS (n=76) or healthy donors were analysed by multiparameter flow cytometry, and gene expression was evaluated by RNA sequencing. Patients with AS were stratified according to the therapeutic regimen and current disease score. RESULTS CD8+CCR4+ T cells display a distinct effector phenotype and upregulate the inflammatory chemokine receptors CCR1, CCR5, CX3CR1 and L-selectin CD62L, indicating an altered migration ability. CD8+CCR4+ T cells expressing CX3CR1 present an enhanced cytotoxic profile, expressing both perforin and granzyme B. RNA-sequencing pathway analysis revealed that CD8+CCR4+ T cells from patients with active disease significantly upregulate genes promoting osteogenesis, a core process in AS pathogenesis. CONCLUSIONS Our results shed light on a new molecular mechanism by which T cells may selectively migrate to inflammatory loci, promote new bone formation and contribute to the pathological ossification process observed in AS

Patients with ankylosing spondylitis present a distinct CD8 T cell subset with osteogenic and cytotoxic potential

OBJECTIVES Ankylosing spondylitis (AS) is a chronic inflammatory rheumatic disease affecting mainly the axial skeleton. Peripheral involvement (arthritis, enthesitis and dactylitis) and extra-musculoskeletal manifestations, including uveitis, psoriasis and bowel inflammation, occur in a relevant proportion of patients. AS is responsible for chronic and severe back pain caused by local inflammation that can lead to osteoproliferation and ultimately spinal fusion. The association of AS with the human leucocyte antigen-B27 gene, together with elevated levels of chemokines, CCL17 and CCL22, in the sera of patients with AS, led us to study the role of CCR4$^{+}$ T cells in the disease pathogenesis. METHODS CD8$^{+}$CCR4$^{+}$ T cells isolated from the blood of patients with AS (n=76) or healthy donors were analysed by multiparameter flow cytometry, and gene expression was evaluated by RNA sequencing. Patients with AS were stratified according to the therapeutic regimen and current disease score. RESULTS CD8$^{+}$CCR4$^{+}$ T cells display a distinct effector phenotype and upregulate the inflammatory chemokine receptors CCR1, CCR5, CX3CR1 and L-selectin CD62L, indicating an altered migration ability. CD8$^{+}$CCR4$^{+}$ T cells expressing CX3CR1 present an enhanced cytotoxic profile, expressing both perforin and granzyme B. RNA-sequencing pathway analysis revealed that CD8$^{+}$CCR4$^{+}$ T cells from patients with active disease significantly upregulate genes promoting osteogenesis, a core process in AS pathogenesis. CONCLUSIONS Our results shed light on a new molecular mechanism by which T cells may selectively migrate to inflammatory loci, promote new bone formation and contribute to the pathological ossification process observed in AS

Flavocoxid mitigates cadmium-induced toxicity: structural, immunohistochemical and molecular analysis in mice kidney

Background: Cadmium (Cd), a diffused environmental pollutant, has adverse effects on urinary apparatus [1]. The role of flavocoxid, a flavonoid with antioxidant activity [2], on the morphological and biochemical changes induced in vivo by Cd in mice kidneys was evaluated. Methods: C57 BL/6J mice received 0.9% NaCl alone, flavocoxid (20 mg/kg/day i.p.) alone, Cd chloride (CdCl2) (2 mg/kg i.p.) alone, or CdCl2 plus Flavocoxid (2 mg/kg i.p. plus 20 mg/kg/day i.p.) for 14 days. At the end of experiment, the mice were killed with an overdose of ketamine and xylazine and the kidneys were collected and processed for structural, immunohistochemical and biochemical analysis. Results: Cd treatment alone significantly increased iNOS, TNF-α and MMP-9 expression, induced structural damages in the glomeruli and in the proximal tubule epithelium, and reduced claudin-11, occludin and N-cadherin immunoreactivity. Flavocoxid administration reduced iNOS, TNF-α and MMP-9 expression, ameliorated glomerular and tubular changes and enhanced claudin-11, occludin and N-cadherin immunoreactivity. Conclusions: We demonstrated for the first time that flavocoxid has a protective role against Cd-induced damages in mice kidney. Therefore, flavocoxid may have a promising role against environmental Cd, in particular against its harmful effects on glomerular and tubular lesions

ROS-Mediated NLRP3 Inflammasome Activation in Brain, Heart, Kidney, and Testis Ischemia/Reperfusion Injury

Ischemia and reperfusion (I/R) causes a reduction in arterial blood supply to tissues, followed by the restoration of perfusion and consequent reoxygenation. The reestablishment of blood flow triggers further damage to the ischemic tissue through reactive oxygen species (ROS) accumulation, interference with cellular ion homeostasis, and inflammatory responses to cell death. In normal conditions, ROS mediate important beneficial responses. When their production is prolonged or elevated, harmful events are observed with peculiar cellular changes. In particular, during I/R, ROS stimulate tissue inflammation and induce NLRP3 inflammasome activation. The mechanisms underlying the activation of NLRP3 are several and not completely elucidated. It was recently shown that NLRP3 might sense directly the presence of ROS produced by normal or malfunctioning mitochondria or indirectly by other activators of NLRP3. Aim of the present review is to describe the current knowledge on the role of NLRP3 in some organs (brain, heart, kidney, and testis) after I/R injury, with particular regard to the role played by ROS in its activation. Furthermore, as no specific therapy for the prevention or treatment of the high mortality and morbidity associated with I/R is available, the state of the art of the development of novel therapeutic approaches is illustrated

Search for dark matter produced in association with bottom or top quarks in √s = 13 TeV pp collisions with the ATLAS detector

A search for weakly interacting massive particle dark matter produced in association with bottom or top quarks is presented. Final states containing third-generation quarks and miss- ing transverse momentum are considered. The analysis uses 36.1 fb−1 of proton–proton collision data recorded by the ATLAS experiment at √s = 13 TeV in 2015 and 2016. No significant excess of events above the estimated backgrounds is observed. The results are in- terpreted in the framework of simplified models of spin-0 dark-matter mediators. For colour- neutral spin-0 mediators produced in association with top quarks and decaying into a pair of dark-matter particles, mediator masses below 50 GeV are excluded assuming a dark-matter candidate mass of 1 GeV and unitary couplings. For scalar and pseudoscalar mediators produced in association with bottom quarks, the search sets limits on the production cross- section of 300 times the predicted rate for mediators with masses between 10 and 50 GeV and assuming a dark-matter mass of 1 GeV and unitary coupling. Constraints on colour- charged scalar simplified models are also presented. Assuming a dark-matter particle mass of 35 GeV, mediator particles with mass below 1.1 TeV are excluded for couplings yielding a dark-matter relic density consistent with measurements

Relazioni interetniche e livelli di integrazione nelle realt\ue0 scolastico-formative della Lombardia.

Nel biennio 2010-11, il Gruppo Scuola dell\u2019ORIM Lombardia ha svolto una indagine sulle relazioni interetniche nell\u2019istruzione secondaria (di I e II grado) e nella formazione professionale iniziale, con lo scopo di approfondire in che misura la diversit\ue0 culturale rappresenti una risorsa piuttosto che un impedimento allo sviluppo di un clima di classe positivo e, pi\uf9 in generale, su come si stia o meno realizzando un processo di integrazione reciproca tra alunni italiani e stranieri e tra alunni e insegnanti. L\u2019ipotesi generale della ricerca \ue8 che un clima favorevole allo scambio nelle relazioni inter-etniche sia positivamente correlato a un pi\uf9 alto grado di integrazione dei giovani stranieri e a una maggiore soddisfazione complessiva degli utenti, sia autoctoni che immigrati, verso l\u2019esperienza formativa ricevuta e a una visione positiva e attiva verso il proprio futuro, in cui si collocano le proprie aspirazioni di successo e di inclusione. Nel 2011 sono stati intervistati 1040 studenti di scuola secondaria di I grado, iscritti in classi con una media del 40% di utenza straniera. E\u2019 stato esplorato il tema delle relazioni tra pari e con gli insegnanti, per verificare se e in che misura i teenager vivono la multietnicit\ue0 come un problema e quali sono le principali distinzioni e disuguaglianze tra italiani e stranieri. Ne emerge un quadro pi\uf9 positivo di quanto atteso, che privilegia il senso di soddisfazione, di benessere e reciprocit\ue0, indipendentemente dall\u2019appartenenza etnica. Ha subito prepotenza e razzismo solo il 17% degli stranieri di seconda generazione e il 23% di quelli nati all\u2019estero. Sono soprattutto gli stranieri a valutare in modo positivo la multietnicit\ue0 in classe e il modo in cui vengono trattati dagli insegnanti poich\ue9 si sentono aiutati ed ascoltati dagli operatori scolastici. Tra gli italiani si riscontra un giudizio lievemente pi\uf9 negativo verso i docenti, causato in parte dal sentimento di privazione relativa, e per una minoranza (10%) la percezione della multietnicit\ue0 come fatto negativo.In 2010-2011 the resaerch group "School" within the ORIM Lombardia (Regional Observatory on Inter-ethnical relations and social integration)carried out a survey on nter-ethnical relations in secondary schools and VET courses. The study aimed at analyse at what extent cultural diversity is a social resource rather than an obstacle for reaching a positive classroom and institute climate. It also questioned if there is a satisfing level of reciprocal integration between native and foreigner students. The sample of 1040 preadolescents (accounted for age, gender and nationality) represents the current school life within the so called "segregated" schools, that is, with a rate of non-native pupils beyond the 30%. The system of peer relations and the student/teacher relation are the topics explored, in order to verify if (and at which extent) teenagers live the multi-ethnicity as a problem and what are the main distinctions or inequality fragmentations among them. It raises a frame more positive than what expected, which is characterized by sense of satisfaction, well-being and reciprocity, both among native and immigrants. Only the 17% out of the subsample of pupils with foreign background (2nd generation immigrants) and the 23% out of the foreign students (1st generation immigrants) have been involved in racism provocations by their classmates vs. the 10% of the natives. Moreover, both 1st and 2nd gen. evaluate the multi-ethnicity in the classroom and the treatment received by teachers, better than the natives, because they feel well helped and supported by the school staff. Among Italian students there is in average an under-evaluation of the professional behavior of teachers \u2013 given a certain sense of relative privation - and a short minority (10%) feels the multi-ethnicity in the classrooms as negative fact

Generation of persister cells of Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus by chemical treatment and evaluation of their susceptibility to membrane-targeting agents

Persister cells (PCs) are a subset of dormant, phenotypic variants of regular bacteria, highly tolerant to antibiotics. Generation of PCs in vivo may account for the recalcitrance of most chronic infections to antimicrobial treatment and demands for the identification of new antimicrobial agents able to target such cells. The present study explored the possibility to obtain in vitro PCs of Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus at high efficiency through chemical treatment, and to test their susceptibility to structurally different antimicrobial peptides (AMPs) and two clinically used peptide-based antibiotics, colistin and daptomycin. The main mechanism of action of these molecules (i.e., membrane-perturbing activity) renders them potential candidates to act against dormant cells. Exposure of stationary-phase cultures to optimized concentrations of the uncoupling agent cyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP) was able to generate at high efficiency PCs exhibiting an antibiotic-tolerant phenotype toward different classes of antibiotics. The metabolic profile of CCCP-treated bacteria was investigated by monitoring bacterial heat production through isothermal microcalorimetry and by evaluating oxidoreductase activity by flow cytometry. CCCP-pretreated bacteria of both bacterial species underwent a substantial decrease in heat production and oxidoreductase activity, as compared to the untreated controls. After CCCP removal, induced persisters showed a delay in heat production that correlated with a lag phase before resumption of normal growth. The metabolic reactivation of bacteria coincided with their reversion to an antibiotic-sensitive phenotype. Interestingly, PCs generated by CCCP treatment resulted highly sensitive to three different membrane-targeting AMPs at levels comparable to those of CCCP-untreated bacteria. Colistin was also highly active against PCs of P. aeruginosa, while daptomycin killed PCs of S. aureus only at concentrations 32 to 64-fold higher than those of the tested AMPs. In conclusion, CCCP treatment was demonstrated to be a suitable method to generate in vitro PCs of medically important bacterial species at high efficiency. Importantly, unlike conventional antibiotics, structurally different AMPs were able to eradicate PCs suggesting that such molecules might represent valid templates for the development of new antimicrobials active against persisters

Tra formazione e lavoro. Giovani stranieri e buone pratiche nella formazione professionale regionale

La ricerca rappresenta un proseguimento delle precedenti fasi di indagine sui percorsi formativi dei giovani stranieri (14-19 anni) in situazione di diritto-dovere di istruzione e formazione (Rapporti 2005 e 2006). Scopo di questo approfondimento \ue8, da un lato, studiare le istituzioni formative, per individuare strategie e buone prassi nell accoglienza, sostegno e accompagnamento dell utenza straniera e per cogliere atteggiamenti e comportamenti degli operatori della formazione professionale nei confronti degli allievi stranieri; dall altro, approfondire le caratteristiche della presenza di utenti stranieri nella formazione professionale in Lombardia, ricostruendone i percorsi e gli sbocchi occupazionali. Si vuole capire se la variabile straniera abbia una visibilit\ue0 all interno del sistema di Ifp lombardo, e come venga interpretata: se come un costo aggiuntivo, o viceversa, come una nuova opportunit\ue0. Dall analisi dei dati di flusso, l effettuazione di 2 studi di caso, uno a Milano (CFP Enaip di v. Giacinti) e uno a Brescia (CFP Zanardelli di via Gamba), e una trentina di interviste qualitative a giovani stranieri collocati al lavoro dopo aver frequentato corsi di Fp, si delinea uno scenario tutt altro che allarmante. L accesso alla formazione professionale per questi utenti \ue8 aperto e ampiamente utilizzato non solo come alternativa ai percorsi di istruzione, ma anche come prima tappa formativa che prelude a un proseguimento nell istruzione e all universit\ue0. Anche gli indicatori di successo formativo e occupazionale sono del tutto positivi per questa tipologia di utenza, che non tarda in media a qualificarsi e a trovare sbocchi sul territorio. Tuttavia, con l aumento esponenziale di allievi stranieri, stanno emergendo nuove problematiche: l orientamento (che si trasforma spesso in una canalizzazione forzata degli straneiri verso la Fp), le problematiche linguistiche nella fase di inserimento e l impossibilit\ue0 di inserire attivit\ue0 di alfabetizzazione adf hoc, la scolasticizzazione dei percorsi di Fp dopo la riforma del DDIF che porta gli stranieri maggiormente in svantaggio di fornte a curricoli pi\uf9 corposi sul piano culturale, il rapporto con le famiglie, reso sovente difficoltoso dalla mancanza di conoscenza dell italiano, ma altre volte anche da un sovraccarico dei genitori stessi dal punto di vista degli impegni lavorativi, le misure da mettere in campo per affrontare l aumento tendenziale di atteggiamenti e comportamenti discriminatori, il bisogno degli operatori di riflettere maggiormente su strategie per migliorare le relazioni interculturali in aula e nei luoghi di lavoro, nonch\ue9 il ripensamento dei moduli ofrmativi per venire incontro a esigenze tempistiche e culturali diversificate. Colpisce, dall analisi dei materiali di intervista e dalle numerose informazioni raccolte, la capacit\ue0 di governance da parte dei responsabili e degli operatori della Fp, cio\ue8 la capacit\ue0 di stare dentro il processo di trasformazione in modo attivo e consapevole, attivando risorse e legami e mettendo in campo strategie di innovazione. Di fatto, l utenza straniera appare con una sua visibilit\ue0 resa invisibile sia dall impostazione di fondo di questo contesto formativo, che presta una cura circostanziata e anche individualizzata a ciascun allievo, sia dalla mancanza di misure finalizzate a favore degli stranieri. L invisibilit\ue0 tuttavia non significa trascuratezza o mancanza di sensibilit\ue0 alla realt\ue0 multiculturale delle classi, piuttosto gli operatori mostrano un impegno per la ricollocazione della questione straniera all interno di una normalit\ue0 quotidiana, fatta di continue situazioni da affrontare, a volte con problematiche molto simili a quelle messe in evidenza dai compagni italiani

Misurare l\u2019integrazione nelle classi multietniche

Il volume presenta i risultati conclusivi di un\u2019indagine pluriennale (2010-12) svolta dal Gruppo Scuola dell\u2019Orim che, attraverso metodologie di tipo qualitativo e quantitativo, ha analizzato il processo di integrazione nelle scuole ad alta concentrazione di alunni italiani e stranieri della Lombardia (11-18 anni). Finalit\ue0 principale della ricerca \ue8 stata l\u2019individuazione e l\u2019elaborazione di indicatori significativi per la misurazione dell\u2019integrazione nelle classi multietniche, ovvero quelle con un tasso di incidenza di alunni con cittadinanza non italiana superiore al 30% (limite fissato dalla C.M. 2/2010 del Miur come \u201csoglia di tolleranza\u201d della mixit\ue9 scolaire). Sempre avvalendosi dei dati della survey svolta nel 2011 in 14 scuole secondarie di I grado in diverse province della Lombardia, in questo volume sono approfondite le due dimensioni principali dell\u2019integrazione scolastica \u2013 la riuscita e l\u2019esistenza di forme di discriminazione, intolleranza, tensioni e conflitti tra gli alunni (attraverso analisi multivariate). Sono stati individuate, mediante cluster analysis, tre tipologie di studenti in classi multietniche cui corrispondono percorsi di: 1. \u201cmancata integrazione\u201d (160 soggetti, 15,4% del campione), tipici di soggetti, soprattutto stranieri nati all\u2019estero con evidenti difficolt\ue0 sia in ordine all\u2019apprendimento sia sul piano relazionale; 2. \u201cpiena integrazione\u201d (515 soggetti, 49,5%), ovvero percorsi positivi e anche di eccellenza (soprattutto per soggetti italiani e spesso femmine), tanto a livello scolastico quanto in ambito relazionale, con i pari e con gli insegnanti; 3. \u201cintegrazione parziale\u201d (365 soggetti, 35%), situazione contraddittoria presente soprattutto in soggetti stranieri che vivono buone relazioni, ma non riescono a conseguire esiti scolastici positivi, con una sorta di disgiunzione tra i due obiettivi fondamentali dell\u2019esperienza scolastica, uno cognitivo e l\u2019altro relazionale/emotivo/affettivo. Dall\u2019analisi di regressione lineare multipla che ha considerato la riuscita come variabile dipendente sono emersi 8 fattori (7 correlati positivamente e 1 negativamente) quali: lo status socio-economico della famiglia, l\u2019indice di benessere scolastico, la cittadinanza italiana, il capitale culturale dei genitori, il genere (essere femmine), la motivazione coercitiva (unico predittore negativo), la relazione alunno-insegnante (indice di relazionalit\ue0 verticale), la progettualit\ue0 verso il futuro: in totale, queste dimensioni spiegano il 27,2% della varianza complessiva. Rispetto all\u2019indice di tensioni nei rapporti fra pari considerato, a sua volta, variabile dipendente, l\u2019equazione di regressione \ue8 risultata composta da 5 variabili indipendenti: l\u2019indice di benessere scolastico (correlato negativamente), il genere (essere femmine, correlato negativamente), le relazioni fra pari in classe (correlato negativamente), la cittadinanza non italiana (unico predittore positivo), l\u2019indice di accettazione dell\u2019immigrato (correlato negativamente). In totale, queste dimensioni spiegano il 17,5% della varianza complessiva. Si \ue8 infine costruito un indice di integrazione scolastica, che sintetizza le diverse dimensioni dell\u2019integrazione nelle classi multietniche: le relazioni tra pari in classe, la relazionalit\ue0 verticale tra alunni-insegnanti, le tensioni tra pari (coinvolgimento in risse, episodi di razzismo, prepotenze), la riuscita scolastica (media dei voti), la competenza linguistica di 2\ub0 livello (Italstudio). L\u2019indice presenta un\u2019associazione positiva con le seguenti variabili: genere (sono pi\uf9 integrate le femmine dei maschi); classe (con una diminuzione dalla I alla III media); cittadinanza (sono pi\uf9 integrati gli alunni italiani, a seguire gli stranieri nati in Italia e meno integrati risultano i nati all\u2019estero); l\u2019appartenenza religiosa (con un\u2019integrazione maggiore tra i ragazzi praticanti e di religione cattolica); status socio-economico e capitale culturale di livello elevato; alta soddisfazione dei genitori nei confronti dell\u2019esperienza scolastica dei figli; motivazione allo studio intrinseca ed espressiva; il benessere scolastico; la messa in atto, da parte dei docenti, di misure per l\u2019integrazione e l\u2019accoglienza degli alunni stranieri. Di rilievo \ue8 il fatto che, dalle correlazioni statistiche, l\u2019incidenza percentuale degli allievi con cittadinanza non italiana nelle classi multietniche non risulta associata significativamente con il livello di integrazione. La ricerca suggerisce alcuni punti di attenzione per la traduzione degli esiti in orientamenti di politica scolastica: il successo scolastico non va mai disgiunto dalla costruzione di positivi climi scolastici; la percentuale di immigrati non pregiudica livelli alti di integrazione; tutti gli allievi appartenenti a famiglie con uno status socio-economico-culturale basso, indipendentemente dalla nazionalit\ue0, vanno facilitati nel raggiungimento di obiettivi minimi di apprendimento; l\u2019attivazione di programmi di educazione interculturale per studenti di diverse origini sono essenziali per accrescere l\u2019integrazione; l\u2019integrazione si realizza contemporaneamente nelle scuole e tra le scuole, in un rapporto di reciproca collaborazione e sinergia