Estudo fitoquímico e atividades biológicas (antioxidante, antimicrobiana, tóxica e hemolítica in vitro) de Cestrum intermedium Sendtn. (Solanaceae)

Orientador : Prof. Dr. Obdulio Gomes MiguelCo-orientadora : Profª. Drª. Marilis Dallarmi MiguelDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 24/02/2015Inclui referênciasÁrea de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: Este trabalho teve como objetivo avaliar o perfil fitoquímico e atividades biológicas de Cestrum intermedium, uma espécie de solanácea nativa do Brasil, muito utilizada como ornamento por suas flores atraentes de odor agradável. É considerada a planta tóxica de maior importância em regiões do sul do país, desenvolvendo quadro hepatotóxico em gado bovino que ingere suas folhas, ocasionando morte na maioria dos casos. Os extratos brutos e frações de folhas e cascas da espécie foram avaliados quanto à toxicidade aguda em microcrustáceos e larvas de Aedes aegypti, quanto ao potencial hemolítico, antimicrobiano e antioxidante, além de traçar o perfil fitoquímico da espécie. Os bioensaios traçaram um perfil ecotoxicológico e de atividades biológicas preliminares da espécie, evidenciando ecotoxicidade aos organismos testados, potencial hemolítico, fraco potencial antimicrobiano contra C. albicans, S. epidermidis e S. aureus, moderada capacidade antioxidante comparável à rutina e butil-hidroxi-tolueno. Os resultados dos bioensaios foram avaliados juntamente com o perfil fitoquímico obtido pela realização de ensaio sistemático fitoquímico, possibilitando inferir quais classes de metabólitos secundários são os responsáveis pela atividade. Palavras-chave: Coerana. Ecotoxicidade. Potencial hemolítico. Perfil fitoquímico. Aedes aegypti.Abstract: This work presents as objective to evaluate Cestrum intermedium’s phytochemical profile and biological activities, a Brazil native Solanaceae species, broadly used as ornament for its attractive and pleaseant odor releasing flowers. Some country’s southern regions it’s considered to be the most important toxic plant, for causing liver toxicity in cattle which ingest its leaves, resulting in death most of the times. Leaves’ and barks’ gross extracts and it’s fractions were evaluated for acute toxicity in microcrustaceans and Aedes aegypti larvae, for hemolytic, antimicrobial and antioxidant potentials, besides outlining species’ phytochemical profile. Bioessays outlined species’ preliminary ecotoxicological and biological activities prolife, showing toxicity for microcrustaceans tested, hemolytic potential, weak antimicrobial potential against C. albicans, S. epidermidis and S. aureus, comparable to rutin and butyl-hydroxi-toluen moderate antioxidant capacity. Bioessays’ results were evaluated observing phytochemical essays’ results, providing an active secondary metabolites panorama. Key words: Coerana. Ecotoxicity. Hemolytical Potencial. Phytochemical profile. Aedes aegypti

Estudo morfoanatômico, fitoquímico e de atividades biológicas in vitro de folhas e cascas de Cestrum intermedium Sendtn. (Solanaceae)

Orientador: Prof. Dr. Obdulio Gomes MiguelCoorientador: Prof. Dr. Vinícius Bednarczuk de OliveiraTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa : Curitiba, 28/08/2020Inclui referências: p. 135-149Resumo: O presente trabalho reúne caracterizações inéditas de Cestrum intermedium, espécie nativa do Brasil conhecida como mata-boi. Sendo responsável por ocasionar intoxicação ao gado bovino quando ingerida, é considerada uma das plantas tóxicas mais importantes na região sul. Os parâmetros físico-químicos de folhas e cascas foram determinados por métodos farmacopeicos (teor de umidade/teor de cinzas: 8,54%/11,34% para folhas e 8,19%/5,24% para cascas) e por termogravimetria (3 etapas definidas em folhas e 4 etapas definidas para cascas), estabelecendo padrões característicos da espécie, além de parâmetros de comparação para futuras análises. A análise morfoanatômica de folhas e caules delineou atributos comuns ao gênero: epiderme uniseriada, folhas hipoestomáticas e estômatos anomocíticos. A ausência de tricomas além do feixe vascular em formato de C em folhas e pecíolos, diferencia C. intermedium de grande parte das espécies do gênero já descritas. A avaliação histoquímica evidenciou a presença de alcaloides e terpenoides em folhas, pecíolos e caules. O estudo fitoquímico identificou a presença dos sais inorgânicos Nitrato de Potássio e Carbonato de Sódio Dihidratado, dos alcaloides Alantoína e componente majoritário dos extratos de folhas e cascas (alcaloide ?-carbolínico em processo de elucidação). A avaliação de atividade alelopática em Lactuca sativa (alface) e Allium cepa (cebola) investigou a influência de Cestrum intermedium na germinação de sementes e crescimento de hipocótilos e radículas. De maneira geral, a germinação da alface foi inibida pelos extratos brutos de folhas e cascas, assim como pelo componente majoritário, na concentração máxima avaliada (1000 ?g/mL), enquanto não foram observadas influências significativas no crescimento de radículas e hipocótilos. Em relação à cebola, a germinação foi inibida pelo extrato bruto das folhas (750 ?g/mL), enquanto o crescimento não sofreu influência significante pelas amostras. Foi observada atividade citotóxica (IC50 ? 30 ?g/mL) em diferentes linhagens tumorais em investigação preliminar pela frações acetato de etila das cascas, clorofórmio das folhas e cascas, assim como hexano das folhas. A atividade tóxica em Leishmania infantum (IC50 ? 30 ?g/mL) foi observada na fração acetato de etila das cascas, enquanto a toxicidade sobre o protozoário Giardia intestinalis não foi considerada significante. Portanto, apesar de sua conhecida toxicidade, a especial vegetal demonstrou potencial farmacológico nos estudos in vitro. Palavras-chave: morfoanatomia; alcaloide ?-carbolínico; alelopatia; citotoxicidade.Abstract: This study gathers unprecedented features of Cestrum intermedium, a species native to Brazil known as mata-boi (cow-killer). This species is responsible for toxicity to bovine cattle when ingested, being considerate as one of the most important toxic plants in southern region. Leaves and barks physical-chemical parameters were determined through pharmacopeia (humidity (%)/ash (%): 8,54%/11,34% for leaves and 8,19%/5,24% for barks) and thermogravimetric methods (3 defined steps on leaves and 4 defined steps on barks), stablishing species' patterns, in addition to comparative standards to future analysis. Leaves and stems morphoanatomical analysis indicated common genus features, such as: uniseriate epidermis, hypostomatic leaves and anomocytic stomata. Trichomes absence and leaves' and petioles' C shaped vascular bundles differentiates C. intermedium from majority of genus' described species. Histochemical evaluation revealed alkaloids and terpenoids in leaf, petiole and stem. Phytochemical analysis indicated organic salts: Potassium Nitrate and Dihydrated Sodium Carbonat;, alkaloids: Allantoin and leaves and barks major compound (?-carboline alkaloid not fully identified) to be present. Allelopathic study was carried in Lactuca sativa (lettuce) e Allium cepa (onion), evaluating Cestrum intermedium influence in germination and development of radicles and hypocotyls. No influences were observed in structures development, but germination process was inhibited by leaves and barks crude extract and its major compound in maximum concentration (1000 ?g/mL) on L. sativa and leaves crude extract (750 ?g/mL) on Allium cepa. Cytotoxic activity (IC50 ? 30 ?g/mL) was observed in different tumor lineages on preliminary investigation for barks ethyl acetate fraction, leaves and barks chloroform fractions and leaves hexane fraction. Samples toxic activity in Leishmania infantum (IC50 ? 30 ?g/mL) was observed for barksq ethyl acetate fraction and while no significant toxicity was observed on Giardia intestinalis. Despite its toxicity, this species demonstrated pharmacological potential in in vitro studies. Key-words: morphoanatomy; ?-carboline alkaloid; allelophaty; cytotoxicity

THE USE OF HERBAL MEDICINE AS COMPLEMENTARY THERAPY FOR THE TREATMENT OF SOME SCHIZOPHRENIA`S SYMPTOMS

A esquizofrenia é a mais comum e prevalente psicose, tendo um curso crônico e deteriorativo capaz de impactar na qualidade de vida dos pacientes, familiares e cuidadores. Essa doença afeta as esferas social e ocupacional gerando custos pessoais e financeiros para o paciente e para o sistema de saúde do país. Em termos de tratamento, já existem no mercado diversos fármacos e intervenções disponíveis, sendo usados principalmente antipsicóticos em associação com outras classes de medicamentos (estabilizadores de humor, antidepressivos, benzodiazepínicos). No entanto, além de apresentarem um custo elevado, essas intervenções podem causar diversos sintomas e eventos adversos, o que influencia a adesão e sucesso no tratamento. Nesse contexto, destaca-se o uso de abordagens complementares como as plantas medicinais e a fitoterapia, que tem se mostrado, nas últimas décadas, como uma alternativa viável para auxiliar no tratamento dessa doença. As plantas medicinais são popularmente utilizadas e com isso podem representar um suporte efetivo à terapia medicamentosa de desordens mentais. Este artigo tem como objetivo revisar o uso complementar, bem como a efetividade e segurança de algumas plantas medicinais para o tratamento de sintomas da esquizofrenia. Aparentemente a combinação de plantas medicinais associada à terapia medicamentosa é uma estratégia útil para melhorar a eficácia dos antipsicóticos ou reduzir eventos adversos e custos no tratamento. Foi reportado o uso benéfico de diferentes plantas para o tratamento de sintomas da esquizofrenia incluindo: Erva de São João (Hypericum perforatum) para o tratamento de desordens afetivas e depressão; Valeriana (Valeriana officinalis) para ansiedade e epilepsia; Ginkgo biloba em casos de demência e déficit de memória; Ginseng (Panax ginseng) para pacientes esquizofrênicos com disfunções cognitivas

PHYSICAL-CHEMICAL PARAMETERS DETERMINATION AND PRELIMINARY PHYTOCHEMICAL SCREENING OF Cestrum intermedium Sendtn. (Solanaceae)

Cestrum intermedium é uma espécie de solanácea nativa do Brasil muito utilizada com fins ornamentais pelas flores atraentes de odor agradável, porém responsável por intoxicações de bovinos Este trabalho teve como objetivo avaliar os parâmetros físico-químicos e perfil fitoquímico dos extratos das folhas e cascas desta espécie. A determinação dos parâmetros físico-químicos foi baseada em metodologias descritas na Farmacopeia Brasileira e a análise fitoquímica dos extratos brutos etanólicos e aquosos de folhas e cascas aplicou reações clássicas para caracterização de grupamentos químicos. As amostras analisadas encontravam-se dentro dos parâmetros físico-químicos estabelecidos pela farmacopeia e a análise fitoquímica apontou a presença de alcaloides, flavonoides, saponinas, cumarinas, esteroides e triterpenos. As classes metabólicas e parâmetros físico-químicos foram estabelecidos pela primeira vez, agregando dados inéditos ao compilado sobre espécie

Chemical composition, antioxidant and biological activity of Ocotea bicolor Vattimo-Gil (LAURACEAE) essential oil

The essential oil composition of the Ocotea bicolor, native plant of Brazil, was studied for the first time. The essential oil of the leaf was obtained by hydrodistillation and analyzed by GC/MS. The analytical procedure revealed a predominance of sesquiterpenes, δ-cadinene (7.39%), β-sesquiphellandrene (6.67%), β-elemene (5.41%) and α-cadinol (5,23%). The essential oil was submitted to brine shrimp toxicity evaluation, antioxidant and antibacterial tests. The antioxidant activity by the formation of phosphomolybdenum complex method presented positive results. The minimum inhibitory concentration (MIC) values were higher than 1000 μg/mL for the microorganisms tested. Toxicity activity revealed LC50 results of 40.10 (μg/mL), being toxic to the organisms in this study

Ocotea nutans (Nees) Mez (Lauraceae): chemical composition, antioxidant capacity and biological properties of essential oil

The present study was undertaken to assess the potential uses of the essential oil obtained from Ocotea nutans (Nees) Mez. The hydrodistilled essential oil from O. nutans leaves was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry. Fifty-eight compounds representing 87,29% of the total leaf essential oil components were identified, of which biciclogermacrene(11.41%), germacrene-D (4.89%), bisabolol11-ol(3.73%) and spathulenol (3.71%) were the major compounds. The essential oil from O. nutans were tested for antibacterial activity using the minimum inhibitory concentracion (MIC) method, Artemia salina method, larvicidal activity in Aedes aegypti, and antioxidant capacity.The antioxidant activity measured by the phosphomolybdenum complex and Prussian blue method had positive results. The minimum inhibitory concentration for the microorganisms tested allowed moderate inhibitionfor Enterococcus faecalis(MIC=500 µg/mL). Artemia salina were toxic to the organisms in the study (LC50= 71,70 μg /mL). The essential oil showed remarkable larvicidal activity potencial (LC50= 250 µg/mL). The present results showed that O. nutans essential oil has potential biological uses

Associations of common breast cancer susceptibility alleles with risk of breast cancer subtypes in BRCA1 and BRCA2 mutation carriers

Introduction: More than 70 common alleles are known to be involved in breast cancer (BC) susceptibility, and several exhibit significant heterogeneity in their associations with different BC subtypes. Although there are differences in the association patterns between BRCA1 and BRCA2 mutation carriers and the general population for several loci, no study has comprehensively evaluated the associations of all known BC susceptibility alleles with risk of BC subtypes in BRCA1 and BRCA2 carriers. Methods: We used data from 15,252 BRCA1 and 8,211 BRCA2 carriers to analyze the associations between approximately 200,000 genetic variants on the iCOGS array and risk of BC subtypes defined by estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) and triple-negative- (TN) status; morphologic subtypes; histological grade; and nodal involvement. Results: The estimated BC hazard ratios (HRs) for the 74 known BC alleles in BRCA1 carriers exhibited moderate correlations with the corresponding odds ratios from the general population. However, their associations with ER-positive BC in BRCA1 carriers were more consistent with the ER-positive as

An original phylogenetic approach identified mitochondrial haplogroup T1a1 as inversely associated with breast cancer risk in BRCA2 mutation carriers

Introduction: Individuals carrying pathogenic mutations in the BRCA1 and BRCA2 genes have a high lifetime risk of breast cancer. BRCA1 and BRCA2 are involved in DNA double-strand break repair, DNA alterations that can be caused by exposure to reactive oxygen species, a main source of which are mitochondria. Mitochondrial genome variations affect electron transport chain efficiency and reactive oxygen species production. Individuals with different mitochondrial haplogroups differ in their metabolism and sensitivity to oxidative stress. Variability in mitochondrial genetic background can alter reactive oxygen species production, leading to cancer risk. In the present study, we tested the hypothesis that mitochondrial haplogroups modify breast cancer risk in BRCA1/2 mutation carriers. Methods: We genotyped 22,214 (11,421 affected, 10,793 unaffected) mutation carriers belonging to the Consortium of Investigators of Modifiers of BRCA1/2 for 129 mitochondrial polymorphisms using the iCOGS array. Haplogroup inference and association detection were performed using a phylogenetic approach. ALTree was applied to explore the reference mitochondrial evolutionary tree and detect subclades enriched in affected or unaffected individuals. Results: We discovered that subclade T1a1 was depleted in affected BRCA2 mutation carriers compared with the rest of clade T (hazard ratio (HR) = 0.55; 95% confidence interval (CI), 0.34 to 0.88; P = 0.01). Compared with the most frequent haplogroup in the general population (that is, H and T clades), the T1a1 haplogroup has a HR of 0.62 (95% CI, 0.40 to 0.95; P = 0.03). We also identified three potential susceptibility loci, including G13708A/rs28359178, which has demonstrated an inverse association with familial breast cancer risk. Conclusions: This study illustrates how original approaches such as the phylogeny-based method we used can empower classical molecular epidemiological studies aimed at identifying association or risk modification effects.Peer reviewe

Identification of 12 new susceptibility loci for different histotypes of epithelial ovarian cancer.

To identify common alleles associated with different histotypes of epithelial ovarian cancer (EOC), we pooled data from multiple genome-wide genotyping projects totaling 25,509 EOC cases and 40,941 controls. We identified nine new susceptibility loci for different EOC histotypes: six for serous EOC histotypes (3q28, 4q32.3, 8q21.11, 10q24.33, 18q11.2 and 22q12.1), two for mucinous EOC (3q22.3 and 9q31.1) and one for endometrioid EOC (5q12.3). We then performed meta-analysis on the results for high-grade serous ovarian cancer with the results from analysis of 31,448 BRCA1 and BRCA2 mutation carriers, including 3,887 mutation carriers with EOC. This identified three additional susceptibility loci at 2q13, 8q24.1 and 12q24.31. Integrated analyses of genes and regulatory biofeatures at each locus predicted candidate susceptibility genes, including OBFC1, a new candidate susceptibility gene for low-grade and borderline serous EOC