Untersuchung des Solubilisats NovaSol® Vineatrol sowie des nativen Weinreben-Extrakts Vineatrol als bioaktive Naturstoffe im Vergleich zu Resveratrol für die Behandlung des malignen Melanoms

Die Anzahl an Neuerkrankungen des malignen Melanoms ist in den letzten Jahren weltweit stark gestiegen. Das maligne Melanom ist eine sehr aggressive Form von Krebs und bedingt etwa 90% aller durch Hauterkrankungen verursachten Todesfälle. Die Therapiemöglichkeiten sind sehr limitiert, weshalb es wichtig ist neue präventive Maßnahmen und Therapieansätze zu untersuchen. Nach aktuellem Kenntnisstand scheinen Nahrungsbestandteile für die Behandlung verschiedener Tumorerkrankungen interessant zu sein. Die Bioverfügbarkeit von Naturstoffen ist häufig sehr gering, was ihren therapeutischen Effekt deutlich einschränkt. Die Solubilisierung, d.h. die Verpackung des Inhaltsstoffs in Mizellen, soll die Bioverfügbarkeit um ein Vielfaches erhöhen. In der vorliegenden Arbeit wurde das Polyphenol-Gemisch Vineatrol und dessen Solubilisat NovaSOL® im Vergleich zu dem in der Weinrebe vorkommenden Polyphenol Resveratrol auf die antitumorale Wirkung am malignen Melanom untersucht. Im Vorfeld wurde von einer deutlich stärkeren antiproliferativen Wirkung ausgegangen, da Vineatrol als stabiler und biologisch aktiver als der Reinstoff Resveratrol gilt. Der experimentelle Teil der Arbeit war in drei Teile unterteilt. In der ersten Phase wurde die Viabilität und Proliferation der Tumorzelllinien nach Behandlung mit den zu testenden Substanzen mittels MUH-, SRB- und LDH-Assays untersucht. Anschließend wurde eine Zellzyklusanalyse mit Bestimmung des Anteils an apoptotischen Zellen mittels Durchflusszytometrie durchgeführt. Zum Abschluss wurde die Toxizität der Substanzen auf primär humane Hepatozyten (PHH) mit Hilfe von LDH-, GOT-, CellTiter-Blue®- und SRB-Assays untersucht. Bei der Auswertung der verschiedenen Assays wurde deutlich, dass sich die vermeintliche Überlegenheit des Vineatrols in vitro nicht bestätigen lässt. Für Resveratrol konnte in vitro eine deutliche dosis- und zeitabhängige Wirkung auf die untersuchten humanen Melanomzelllinien BLM, LOX-IMVI und SK-MEL-28 nachgewiesen werden. Resveratrol erwies sich ab einem Konzentrationsbereich beginnend von 5 bis 40 mg/ml als antiproliferativ. Die Behandlung mit Vineatrol erzielte nur bei Einsatz höherer Konzentrationen (20 und 40 mg/ml) eine antiproliferative Wirkung. Diese war allerdings deutlich geringer als die von Resveratrol. Im Vergleich dazu zeigten vor allem die LOX-IMVI Zellen eine hohe Empfindlichkeit gegenüber den Behandlungen, während bei den SK-MEL-28 Zellen kein nennenswerter Effekt auf die Viabilität zu erkennen war. Mithilfe des LDH-Assays und der FACS-Analyse konnte gezeigt werden, dass die Zellen bei Behandlung mit den drei Testsubstanzen keine Membranschädigung erleiden, es also zu keiner Nekrose kommt, sondern die Zellen in Apoptose gehen. Die Toxizitätsprüfung der Substanzen an PHHs ergab, dass eine Behandlung mit Vineatrol ausgeprägte Viabilitätsverluste mit sich bringt. Resveratrol dagegen wird mit Ausnahme der höchsten Konzentration (40 mg/ml) von den gesunden Leberzellen gut vertragen. Für das Vineatrol-Solubilisat NovaSOL® konnte in keinem der durchgeführten Versuche eine nennenswerte Wirkung nachgewiesen werden. Es ist möglich, dass die adäquate Wirkung der Solubilisate nur in vivo in Erscheinung tritt und in vitro nicht erkennbar ist. Folglich sollte das Vineatrol-Solubilisat in vivo am Tiermodell erneut auf seine antitumorale Wirkung hin getestet werden, bevor es beim Menschen zum Einsatz kommt. Ausgehend von den bisherigen Untersuchungen sollten durch weitere Analysen die isolierten Begleitsubstanzen des Extrakts genauer untersucht werden, um so eventuell toxische Substanzen zu identifizieren. Dann wäre es möglich das Extraktionsverfahren so zu ändern, dass diese nur noch vermindert bis gar nicht mehr im Extrakt vorkommen. Bei weiteren Studien mit dem Extrakt Vineatrol sollte außerdem mit einem standardisierten Extrakt gearbeitet werden, um so eine bessere Vergleichbarkeit der verschiedenen Ergebnisse zu ermöglichen. Zusammenfassend kann man sagen, dass das Polyphenol-Gemisch Vineatrol dem Polyphenol Resveratrol nicht überlegen ist. Auch wenn bereits zahlreiche Literatur für Resveratrol vorhanden ist, könnte es sich lohnen dieses zu solubilisieren und dessen Wirkung in vivo zu untersuchen. Denn durch die eingeschränkte Bioverfügbarkeit konnten die antitumoralen Wirkungen, die in vitro sichtbar waren, in vivo bisher nicht nachgewiesen werden. Die Erhöhung der Bioverfügbarkeit durch die Mizellenverpackung ist ein vielversprechender Ansatz um die getesteten Substanzen klinisch einsetzbar zu machen

New simplified molecular design for functional T cell receptor

We have produced a chimeric single-chain T cell receptor (TcR) that combines the specific antibody recognition function and TcR/CD3 signaling properties within the same polypeptide chain. This hybrid molecule consisted of a single-chain antibody combining site that was connected over a short spacer to the transmembrane and cytoplasmic region of CD3. When expressed on TcR- or TcR+ T cell hybridomas it could mediate recognition of relevent target cells and subsequent production of lymphokines; i.e. it could functionally replace the TcR/CD3 complex. Therefore, the single-chain TcR model presented here represents an interesting and useful means for the creation of T cells with new specificities

Les fortifications occidentales de Porsuk, restitution et modélisation des états les plus anciens

The aim of this paper is to propose a reconstruction of the evolution and of the appearance of the Porsuk fortifications on the western part of the site. The so-called ‘Hittite’ period, which has been chosen for this study, corresponds to the earliest phases of the site – Porsuk VI and V – with two successive destruction layers and three stages of construction – VI, Vb and Va. Considering the highly speculative interpretation of the latest status of phase V, its remains being seriously disturbed by the Iron Age reoccupation, it has been decided to limit our study to Phase VI and to Phase V before its first destruction. Reconstruction hypothesis given in this contribution have been conceived with the help of 3D computer program based on the archaeologists’ observations and a detailed documentation of the remains

Rapport préliminaire sur les travaux de la mission archéologique de Zeyve Höyük-Porsuk 2014

La mission 2014 a eu lieu entre le 21 juillet et le 20 septembre. Elle s’était imposée plusieurs objectifs, liés en particulier aux exigences exprimées par les autorités archéologiques d’Ankara au mois de février. En raison de la faiblesse de nos crédits de cette année, nos ambitions en matière de fouille proprement dite ont été très réduites, avec une équipe très réduite également. Mais il était prévu que cette année serait l’année de la prospection géophysique du site, avec la collaboration..

A Direct Interaction of Axonin-1 with NgCAM-related Cell Adhesion Molecule (NrCAM) Results in Guidance, but not Growth of Commissural Axons

An interaction of growth cone axonin-1 with the floor-plate NgCAM-related cell adhesion molecule (NrCAM) was shown to play a crucial role in commissural axon guidance across the midline of the spinal cord. We now provide evidence that axonin-1 mediates a guidance signal without promoting axon elongation. In an in vitro assay, commissural axons grew preferentially on stripes coated with a mixture of NrCAM and NgCAM. This preference was abolished in the presence of anti–axonin-1 antibodies without a decrease in neurite length. Consistent with these findings, commissural axons in vivo only fail to extend along the longitudinal axis when both NrCAM and NgCAM interactions, but not when axonin-1 and NrCAM or axonin-1 and NgCAM interactions, are perturbed. Thus, we conclude that axonin-1 is involved in guidance of commissural axons without promoting their growth

Zeyve höyük – Porsuk

La mission 2013 s’est déroulée entre le 19 juillet et le 20 septembre. Comme cela avait été prévu, les activités de la mission ont répondu cette année à deux objectifs bien distincts. Le premier concernait les travaux préparatoires à la publication des niveaux du Bronze et du Fer Moyen, des chantiers II et IV, dégagés par les missions déjà anciennes d’Olivier Pelon, depuis 1969, et plus récentes (depuis 2003) de Dominique Beyer et de son équipe. Le décès malheureux et inattendu du Professeur ..

CD4 T Cell Cytokine Differentiation: The B Cell Activation Molecule, OX40 Ligand, Instructs CD4 T Cells to Express Interleukin 4 and Upregulates Expression of the Chemokine Receptor, Blr-1

This report investigates the role of OX40 ligand (OX40L) and its receptor, OX40, expressed on activated B and T cells, respectively, in promoting the differentiation of T helper type 2 (Th2) CD4 T cells. These molecules are expressed in vivo by day 2 after priming with T cell– dependent antigens. Their expression coincides with the appearance of immunoglobulin (Ig)G switch transcripts and mRNA for interleukin (IL)-4 and interferon (IFN)-γ, suggesting that this molecular interaction plays a role in early cognate interactions between B and T cells. In vitro, we report that costimulation of naive, CD62Lhigh CD4 T cells through OX40 promotes IL-4 expression and upregulates mRNA for the chemokine receptor, blr-1, whose ligand is expressed in B follicles and attracts lymphocytes to this location. Furthermore, T cell stimulation through OX40 inhibits IFN-γ expression in both CD8 T cells and IL-12–stimulated CD4 T cells. Although this signal initiates IL-4 expression, IL-4 itself is strongly synergistic. Our data suggest that OX40L on antigen-activated B cells instructs naive T cells to differentiate into Th2 cells and migrate into B follicles, where T cell–dependent germinal centers develop

Pituitary blastoma: a pathognomonic feature of germ-line DICER1 mutations.

Individuals harboring germ-line DICER1 mutations are predisposed to a rare cancer syndrome, the DICER1 Syndrome or pleuropulmonary blastoma-familial tumor and dysplasia syndrome [online Mendelian inheritance in man (OMIM) #601200]. In addition, specific somatic mutations in the DICER1 RNase III catalytic domain have been identified in several DICER1-associated tumor types. Pituitary blastoma (PitB) was identified as a distinct entity in 2008, and is a very rare, potentially lethal early childhood tumor of the pituitary gland. Since the discovery by our team of an inherited mutation in DICER1 in a child with PitB in 2011, we have identified 12 additional PitB cases. We aimed to determine the contribution of germ-line and somatic DICER1 mutations to PitB. We hypothesized that PitB is a pathognomonic feature of a germ-line DICER1 mutation and that each PitB will harbor a second somatic mutation in DICER1. Lymphocyte or saliva DNA samples ascertained from ten infants with PitB were screened and nine were found to harbor a heterozygous germ-line DICER1 mutation. We identified additional DICER1 mutations in nine of ten tested PitB tumor samples, eight of which were confirmed to be somatic in origin. Seven of these mutations occurred within the RNase IIIb catalytic domain, a domain essential to the generation of 5p miRNAs from the 5' arm of miRNA-precursors. Germ-line DICER1 mutations are a major contributor to PitB. Second somatic DICER1 "hits" occurring within the RNase IIIb domain also appear to be critical in PitB pathogenesis

A systematic review of platinum and taxane resistance from bench to clinic: an inverse relationship

We undertook a systematic review of the pre-clinical and clinical literature for studies investigating the relationship between platinum and taxane resistance. Medline was searched for (1) cell models of acquired drug resistance reporting platinum and taxane sensitivities and (2) clinical trials of platinum or taxane salvage therapy in ovarian cancer. One hundred and thirty-seven models of acquired drug resistance were identified. 68.1% of cisplatin-resistant cells were sensitive to paclitaxel and 66.7% of paclitaxel-resistant cells were sensitive to cisplatin. A similar inverse pattern was observed for cisplatin vs. docetaxel, carboplatin vs. paclitaxel and carboplatin vs. docetaxel. These associations were independent of cancer type, agents used to develop resistance and reported mechanisms of resistance. Sixty-five eligible clinical trials of paclitaxel-based salvage after platinum therapy were identified. Studies of single agent paclitaxel in platinum-resistant ovarian cancer where patients had previously recieved paclitaxel had a pooled response rate of 35.3%, n=232, compared to 22% in paclitaxel naïve patients n=1918 (p<0.01, Chi-squared). Suggesting that pre-treatment with paclitaxel may improve the response of salvage paclitaxel therapy. The response rate to paclitaxel/platinum combination regimens in platinum-sensitive ovarian cancer was 79.5%, n=88 compared to 49.4%, n=85 for paclitaxel combined with other agents (p<0.001, Chi-squared), suggesting a positive interaction between taxanes and platinum. Therefore, the inverse relationship between platinum and taxanes resistance seen in cell models is mirrored in the clinical response to these agents in ovarian cancer. An understanding of the cellular and molecular mechanisms responsible would be valuable in predicting response to salvage chemotherapy and may identify new therapeutic targets