Células T regulatorias en ratones con diferente susceptibilidad al desarrollo de enfermedades autoinmunes

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2019Las células T regulatorias (Treg), una subpoblación de linfocitos T (LT) CD4+, son fundamentales para el mantenimiento de la tolerancia inmune hacia antígenos propios y ejercen múltiples funciones regulatorias y supresoras sobre diferentes poblaciones celulares. Las células Treg expresan constitutivamente el factor de transcripción Foxp3, las moléculas CD25 (cadena α del receptor de IL-2), CTLA-4, GITR, entre otras. Numerosos datos experimentales indican que las células Treg tienen una función impedida o alterada en diferentes enfermedades autoinmunes e inflamatorias. En el presente trabajo de tesis investigamos si ratones no obesos diabéticos (NOD), una cepa de ratón que desarrolla espontáneamente diversos procesos autoinmunes como diabetes tipo 1, tiroiditis, sialoadenitis y prostatitis con la edad, tienen una falla en las cantidades y/o funcionalidad de esta población celular. Para ello se realizó un estudio comparativo de la población células Treg en ratones NOD, C57BL/6 (B6), y BALB/c de 4-6 semanas de edad, previo a toda manifestación autoinmune reportada en la cepa NOD. Al comparar la proporción y los números absolutos de células Treg CD4+Foxp3+ en las diferentes cepas en estudio, se observó que, en condiciones basales, sin estimulación y a edades tempranas, ratones de la cepa NOD mostraron menores cantidades de células Treg y menor expresión de Foxp3 en órganos linfoides secundarios y en timo. En ensayos clásicos de inhibición de la proliferación de LT convencionales, observamos que células Treg de ratones NOD tenían menor capacidad supresora y por ende menor funcionalidad. Las diferencias no sólo fueron observadas en estado basal, sino también luego de la estimulación in vitro de las mismas. Tras la estimulación vía TCR en presencia de IL-2, células Treg esplénicas purificadas de ratones NOD mostraron una respuesta débil a IL-2 en comparación a células Treg de ratones B6 y BALB/c, observándose baja expresión de Foxp3, con grados de proliferación menores. Además, luego de la activación in vitro, se observó que expresaban bajos niveles de moléculas relacionadas con su función y activación tales como CD25, LAP-1, CD39, PD-1, PD-L1 y LAG-3. De manera interesante, cuando células Treg fueron cultivadas por tres días con anti-CD3/CD28 en ausencia o presencia de IL-2, células Treg de ratones NOD mostraron ser más dependientes de IL-2 para mantener la expresión de Foxp3, convirtiéndose en células productoras de IFN-γ e IL-17 más fácilmente que células Treg de las demás cepas. En estudios de inducción de pSTAT5, células Treg de ratones NOD mostraron los niveles más bajos de expresión de este factor comparado con células Treg de B6 y BALB/c. Por otra parte, en el presente trabajo reportamos por primera vez que células Treg de ratones NOD exhiben diferencias en la expresión de SOCS3, GRAIL y OTUB-1, factores involucrados en la regulación de la señalización de IL-2. Tanto en condiciones basales como luego de la activación, células Treg de ratones NOD mostraron niveles de expresión más altos de OTUB-1 y niveles más bajos de GRAIL que el resto de las cepas. Por otro lado, en las células Treg de los ratones NOD se observaron diferencias en la expresión de una ubicuitina ligasa E3 y una desubicuitina tales como STUB-1 y USP7, respectivamente, enzimas que se ha demostrado que participan en la degradación proteosomal de la proteína Foxp3. Así, en células Treg de ratones NOD se observó alta expresión de STUB-1 tanto en condiciones basales como después de la estimulación y expresión nula de USP7 en condiciones basales. Por lo tanto, en el presente trabajo reportamos menores cantidades y funcionalidad junto con expresión diferencial de SOCS3, GRAIL/OTUB-1 y STUB1/USP7 en células Treg de ratones NOD, moléculas que afectan la señalización de IL-2 y la estabilidad de Foxp3. Todos estos hallazgos podrían estar relacionados con la insuficiencia de las células Treg para regular la tolerancia a lo propio observada en los ratones de la cepa NOD.2021-12-31Godoy, Gloria Janet. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Rivero, Virginia Elena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Montes, Carolina Lucia Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Maldonado, Cristina Alicia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.Nores, Gustavo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.Docena, Guillermo Horacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos; Argentina

El sistema de detracciones y su influencia en la disponibilidad de efectivo de la empresa M. J. B. Transportes Sagitario S. A. C. –Trujillo en el año 2017

En el presente trabajo se presenta un estudio acerca de la influencia que tiene en la disponibilidad del efectivo, las detracciones que le realizan sus clientes a través de depósitos que realizan en una cuenta específica para este tipo de operaciones, por disposición de la ley, y cuyo destino es asegurar al Estado, el cobro de los tributos. La empresa se denomina “M.J.B. Transportes Sagitario S.A.C.” y el estudio abarca el ejercicio 2017; esta empresa tiene como objeto social el alquiler de volquetes y maquinaria pesada, actividad que se encuentra dentro de los alcances del sistema de detracciones, motivo por el cual sus clientes le detraen un porcentaje del monto total de lo facturado, para depositarlo en una cuenta abierta a nombre de la empresa en estudio, en el Banco de la Nación. Esta empresa tiene como clientes a empresas mineras que tienen su centro de operaciones en la sierra de la región La Libertad, en donde sus equipos operan en tres turnos de trabajo, lo que conlleva a un uso intensivo de estos activos, con el consiguiente desgaste, recurriendo constantemente al mantenimiento y reparación de dichos equipos para conservarlos en buen estado de operatividad y; por otro lado, a una constante renovación de sus equipos, cuya vida útil en la mina, son de tres años. El estudio realizado ha permitido determinar e identificar las dificultades que presenta la empresa al iniciar el trámite para solicitar la libre disposición de los fondos depositados en la cuenta de detracciones. Así, cabe mencionar que estando a puertas de los meses en que la solicitud debe presentarse, la Administración Tributaria, comunica inconsistencias a la empresa, por causales prescritas en la norma respectiva, con la finalidad de declarar dichos fondos en recaudación; en otras palabras, que la empresa no pueda liberar dicho dinero para que quede únicamente para el pago de tributos administrados o recaudados por la SUNAT. Este inconveniente obliga a la empresa a tener que endeudarse con entidades del sistema financiero para poder renovar sus equipos, así como poder darles el mantenimiento y la reparación adecuada para conservarlos en estado de operación, lo que genera el incremento de sus gastos financieros. Como consecuencia del estudio realizado, se concluye que el sistema de detracciones influye negativamente en la disponibilidad de efectivo de la empresa, pues se ha identificado que existe un alto monto inmovilizado que se destina solo para el pago de tributos.In the present work a study is presented about the influence it has on the availability of cash, the deductions made by its clients through deposits made in a specific account for this type of operations, by law, and whose destiny is to assure the State, the collection of taxes. The company is called "M.J.B. Transportes Sagitario S.A.C. "and the study covers the year 2017; This company's corporate purpose is the rental of dump trucks and heavy machinery, an activity that is within the reach of the detraction system, which is why its customers deduct a percentage of the total amount of the invoiced, to deposit it in an open account on behalf of the company under study, in the national bank. This company has as clients mining companies that have their center of operations in the mountains of the La Libertad region, where their teams operate in three shifts, which leads to an intensive use of these assets, with the consequent wear and tear, constantly resorting to maintenance and repair of such equipment to keep them in good working order and; on the other hand, a constant renewal of their equipment, whose useful life in the mine, is three years. The study conducted has made it possible to determine and identify the difficulties that the company presents when initiating the procedure to request the free disposition of the funds deposited in the drawdown account. Thus, we can mention that being at the doors of the months in which the application must be filed, the Tax Administration, communicates inconsistencies to the company, for causes prescribed in the respective norm, in order to declare said funds in collection; in other words, that the company can not release said money so that it is only for the payment of taxes administered or collected by SUNAT. This inconvenience obliges the company to have to go into debt with entities of the financial system to be able to renew their equipment, as well as being able to give them the maintenance and the adequate repair to keep them in operation state, which generates the increase of their financial expenses. As a result of the study carried out, it is concluded that the drawdown system negatively influences the company's cash availability, since it has been identified that there is a high fixed amount destined only for the payment of taxes

T Regulatory cells from non-obese diabetic mice show low responsiveness to IL-2 stimulation and exhibit differential expression of anergy-related and ubiquitination factors

Foxp3+ Regulatory T cells (Tregs) are pivotal for the maintenance of tolerance. Alterations in their number and/or function have been proposed to occur in the autoimmune-prone non-obese diabetic (NOD) mouse. Comparing the frequencies and absolute numbers of CD4+Foxp3+CD25+ Tregs among 4 to 6-week old NOD, B6, and BALB/c mice, we observed differences in counts and Foxp3 expression in Tregs from secondary lymphoid organs, but not in the thymus. Upon TCR and IL-2 stimulation, NOD Tregs showed lower responses than Tregs from B6 and BALB/c mice. Indeed, NOD Tregs responded with less proliferation and with smaller increments in the expression of CD25, LAP-1, CD39, PD-1, PD-L1, and LAG-3, when in vitro cultured for 3 days with anti-CD3/CD28 in the absence or presence of IL-2, Tregs from NOD mice showed to be highly dependent on IL-2 to maintain Foxp3 expression. Moreover, NOD Tregs become producers of IL-17 and INF-gamma more easily than Tregs from the other strains. In addition, NOD Tregs showed lower responsiveness to IL-2, with significantly reduced levels of pSTAT5, even at high IL-2 doses, with respect to B6 and BALB/c Tregs. Interestingly, NOD Tregs exhibit differences in the expression of SOCS3, GRAIL, and OTUB1 when compared with Tregs from B6 and BALB/c mice. Both, at steady state conditions and also after activation, Tregs from NOD mice showed increased levels of OTUB1 and low levels of GRAIL. In addition, NOD Tregs had differences in the expression of ubiquitin related molecules that play a role in the maintenance of Foxp3 cellular pools. Indeed, significantly higher STUB1/USP7 ratios were detected in NOD Tregs, both at basal conditions and after stimulation, compared to in B6 and BALB/c Tregs. Moreover, the addition of a proteasome inhibitor to cell cultures, conferred NOD Tregs the ability to retain Foxp3 expression. Herein, we provide evidence indicating a differential expression of SOCS3, GRAIL, and STUB1/USP7 in Tregs from NOD mice, factors known to be involved in IL-2R signaling and to affect Foxp3 stability. These findings add to the current knowledge of the immunobiology of Tregs and may be related to the known insufficiency of Tregs from NOD mice to maintain self-tolerance.Fil: Godoy, Gloria Janet. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba; ArgentinaFil: Olivera, Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba; ArgentinaFil: Paira, Daniela Andrea. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Salazar, Florencia. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Ana, Yamile. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Stempin, Cinthia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba; ArgentinaFil: Motrich, Ruben Dario. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Rivero, Virginia Elena. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

ϒ production in p–Pb collisions at √sNN=8.16 TeV

ϒ production in p–Pb interactions is studied at the centre-of-mass energy per nucleon–nucleon collision √sNN = 8.16 TeV with the ALICE detector at the CERN LHC. The measurement is performed reconstructing bottomonium resonances via their dimuon decay channel, in the centre-of-mass rapidity intervals 2.03 < ycms < 3.53 and −4.46 < ycms < −2.96, down to zero transverse momentum. In this work, results on the ϒ(1S) production cross section as a function of rapidity and transverse momentum are presented. The corresponding nuclear modification factor shows a suppression of the ϒ(1S) yields with respect to pp collisions, both at forward and backward rapidity. This suppression is stronger in the low transverse momentum region and shows no significant dependence on the centrality of the interactions. Furthermore, the ϒ(2S) nuclear modification factor is evaluated, suggesting a suppression similar to that of the ϒ(1S). A first measurement of the ϒ(3S) has also been performed. Finally, results are compared with previous ALICE measurements in p–Pb collisions at √sNN = 5.02 TeV and with theoretical calculations.publishedVersio

Azimuthal anisotropy of charged jet production in root s(NN)=2.76 TeV Pb-Pb collisions

We present measurements of the azimuthal dependence of charged jet production in central and semi-central root s(NN) = 2.76 TeV Pb-Pb collisions with respect to the second harmonic event plane, quantified as nu(ch)(2) (jet). Jet finding is performed employing the anti-k(T) algorithm with a resolution parameter R = 0.2 using charged tracks from the ALICE tracking system. The contribution of the azimuthal anisotropy of the underlying event is taken into account event-by-event. The remaining (statistical) region-to-region fluctuations are removed on an ensemble basis by unfolding the jet spectra for different event plane orientations independently. Significant non-zero nu(ch)(2) (jet) is observed in semi-central collisions (30-50% centrality) for 20 <p(T)(ch) (jet) <90 GeV/c. The azimuthal dependence of the charged jet production is similar to the dependence observed for jets comprising both charged and neutral fragments, and compatible with measurements of the nu(2) of single charged particles at high p(T). Good agreement between the data and predictions from JEWEL, an event generator simulating parton shower evolution in the presence of a dense QCD medium, is found in semi-central collisions. (C) 2015 CERN for the benefit of the ALICE Collaboration. Published by Elsevier B.V. This is an open access article under the CC BY license (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).Peer reviewe

Production of He-4 and (4) in Pb-Pb collisions at root(NN)-N-S=2.76 TeV at the LHC

Results on the production of He-4 and (4) nuclei in Pb-Pb collisions at root(NN)-N-S = 2.76 TeV in the rapidity range vertical bar y vertical bar <1, using the ALICE detector, are presented in this paper. The rapidity densities corresponding to 0-10% central events are found to be dN/dy4(He) = (0.8 +/- 0.4 (stat) +/- 0.3 (syst)) x 10(-6) and dN/dy4 = (1.1 +/- 0.4 (stat) +/- 0.2 (syst)) x 10(-6), respectively. This is in agreement with the statistical thermal model expectation assuming the same chemical freeze-out temperature (T-chem = 156 MeV) as for light hadrons. The measured ratio of (4)/He-4 is 1.4 +/- 0.8 (stat) +/- 0.5 (syst). (C) 2018 Published by Elsevier B.V.Peer reviewe

Forward-central two-particle correlations in p-Pb collisions at root s(NN)=5.02 TeV

Two-particle angular correlations between trigger particles in the forward pseudorapidity range (2.5 2GeV/c. (C) 2015 CERN for the benefit of the ALICE Collaboration. Published by Elsevier B. V.Peer reviewe

Event-shape engineering for inclusive spectra and elliptic flow in Pb-Pb collisions at root(NN)-N-S=2.76 TeV

Peer reviewe

Evidence of spatial clustering of childhood acute lymphoblastic leukemia cases in Greater Mexico City: report from the Mexican Inter-Institutional Group for the identification of the causes of childhood leukemia

BackgroundA heterogeneous geographic distribution of childhood acute lymphoblastic leukemia (ALL) cases has been described, possibly, related to the presence of different environmental factors. The aim of the present study was to explore the geographical distribution of childhood ALL cases in Greater Mexico City (GMC).MethodsA population-based case-control study was conducted. Children &lt;18 years old, newly diagnosed with ALL and residents of GMC were included. Controls were patients without leukemia recruited from second-level public hospitals, frequency-matched by sex, age, and health institution with the cases. The residence address where the patients lived during the last year before diagnosis (cases) or the interview (controls) was used for geolocation. Kulldorff’s spatial scan statistic was used to detect spatial clusters (SCs). Relative risks (RR), associated p-value and number of cases included for each cluster were obtained.ResultsA total of 1054 cases with ALL were analyzed. Of these, 408 (38.7%) were distributed across eight SCs detected. A relative risk of 1.61 (p&lt;0.0001) was observed for the main cluster. Similar results were noted for the remaining seven ones. Additionally, a proximity between SCs, electrical installations and petrochemical facilities was observed.ConclusionsThe identification of SCs in certain regions of GMC suggest the possible role of environmental factors in the etiology of childhood ALL