Establishment of a broad-spectrum marker for er1/PsMLO1 powdery mildew resistance in pea (Pisum sativum L.)

O oídio, causado pelo fungo ascomycete Erysiphe pisi Syd, é uma das doenças mais importantes que afectam a produção de ervilha (Pisum sativum L.) em Portugal e em países por todo o mundo (Sousa, 1999). Esta doença prospera em climas húmidos temperados causando perdas até 50% nas colheitas de ervilha, uma leguminosa muito importante e vastamente cultivada na Europa, sendo a quarta mais cultivada em todo o mundo (Rubiales et al., 2009; Warkentin et al., 1996).Powdery mildew caused by the biotrophic ascomycete fungus Erysiphe pisi Syd. is one the most devastating diseases of (Pisum sativum L.) with a considerable impact in seed production. So far, the most efficient genetic resistance to this disease identified is conferred by the naturally occurring or experimentally induced by chemical mutagenesis recessive state of the locus er1. Identified over 6 decades ago and genetically mapped to the Pisum sativum Linkage Group VI over 20 years ago, this gene was recently identified as a homolog of the barley (Hordeum sativum L.) powdery mildew resistance gene MLO, and renamed as PsMLO1. The broad spectrum resistance conferred by the er1/PsMLO1 locus was found to be a consequence of the loss of function of the encoded PsMLO1 protein. After the publication of the expressed sequence of this gene by another research group, we published the genomic sequence of this gene, which harbors a relatively long (TA) microsatellite sequence (SSR) in the fifth intron. SSR markers based on this highly polymorphic microsatellite can be used for marker-assisted selection in multiple pea powdery mildew resistance breeding programs involving the er1/ PsMLO1 resistance, except in the rare circumstances where the progenitor lines are monomorphic for the microsatellite sequence. The use of established SSR markers is an affordable and straightforward approach for identification and discrimination of alleles of progenitors in breeding programs, permiting the easy analysis of their inheritance among progenie

Associations of pulmonary parameters with accelerometer data

Some papers of this thesis are not available in Munin: Paper 2. Dias, A.; Gorzelniak, L.; Jorres, R.; Fischer, R.; Hartvigsen, G.; Horsch,A.: 'Assessing Physical Activity in the daily life of cystic fibrosis patients', Journal of Pervasive Computing (2012), vol. 8(6):837–844. Available at http://dx.doi.org/10.1016/j.pmcj.2012.08.001 Paper 3. Gorzelniak, L.; Dias, A.; Schultz,K.; Wittmann, M.; Karrasch, S.; Jorres, R.; Horsch,A.: 'Comparison of recording positions of physical activity in severe COPD', Journal Of Chronic Obstructive Pulmonary Disease (2012), vol. 9(5):528-537. Available at http://dx.doi.org/10.3109/15412555.2012.708066 Paper 4. Dias, A.; Gorzelniak, L.; Schultz,K.;Wittmann, M.; Rudnik, J.;Jorres, R.; Horsch,A.: 'Classification of exacerbation episodes in Chronic Obstructive Pulmonary Disease patients' (manuscript) Paper 5. Ortlieb, S.; Gorzelniak, L.; Dias,A.; Schulz, H.; Horsch,A.: 'Recommendations for Collecting and Processing Accelerometry Data in Older Healthy People' (manuscript) Additional paper 1. Dias, A.; Gorzelniak, L.; Doring, A.; Hartvigsen, G.; Horsch, A.: 'Extracting Gait Parameters from Raw Data Accelerometers', Studies in Health Technology and Informatics (2011), vol. 169:445-449. Additional paper 2. Gorzelniak, L.; Dias, A.; Soyer, H.; Knoll, A.; Horsch, A.; 'Using a Robotic Arm to Assess the Variability of Motion Sensors', Studies in Health Technology and Informatics (2011), vol. 169:897-901. Additional paper 3. Chen, C.; Dias, A.; Knoll, A.; Horsch, A.: 'A Prototype of a Wireless Body Sensor Network for Healthcare Monitoring', Medical informatics in Europe (2011). Additional paper 4. Skrovseth, S.; Dias, A.; Gorzelniak, L.; Godtliebsen, F.; Horsch, A.: 'Scale-space methods for live processing of sensor data', Medical informatics in Europe (2012). Additional paper 7. Peters A, Döring A, Ladwig KH, Meisinger C, Linkohr B, Autenrieth C, Baumeister SE, Behr J, Bergner A, Bickel H, Bidlingmaier M, Dias A, Emeny RT, Fischer B, Grill E, Gorzelniak L, Hänsch H, Heidbreder S, Heier M, Horsch A, Huber D, Huber RM, Jörres RA, Kääb S, Karrasch S, Kirchberger I, Klug G, Kranz B, Kuch B, Lacruz ME, Lang O, Mielck A, Nowak D, Perz S, Schneider A, Schulz H, Müller M, Seidl H, Strobl R, Thorand B, Wende R, Weidenhammer W, Zimmermann AK, Wichmann HE, Holle R.: 'Multimorbidity and successful aging: the populationbased KORA-Age study', Zeitschrift für Gerontologie und Geriatrie (2011), vol. 44(2):41-54. Available at http://dx.doi.org/10.1007/s00391-011-0245-7In Europe it is estimated that the number of elderly people aged above 65 will have doubled by 2060. In several chronic pulmonary diseases patients can suffer recurrent exacerbation episodes that can lead to severe breathing or death. In this thesis we explore the association of physical activity to lung health parameters, focusing on cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease patients and a group of the general population. The main goals of the thesis were to assess the feasibility of classifying exacerbation episodes in cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease patients and to implement new parameters in the context of a cohort study. We conducted four distinct studies involving in total over 250 subjects. We asked them to wear a set of accelerometers, including GT3X and RT3, recording physical activity for up to 14 days. The data was processed and several features extracted that were used as inputs in three different classification algorithms: logarithmic regression, neural networks and support vector machines. We achieved an area under the curve of 67% with logarithmic regression, 83% with neural networks and 90% with support vector machines when classifying exacerbation episodes in chronic obstructive pulmonary disease. A neural network was achieved an accuracy of 85% distinguishing cystic fibrosis patients from healthy controls. We proposed, extracted and tested a large set of physical activity parameters for use in KORA-Age. The work on classification of exacerbations in COPD patients is, to our knowledge, the first attempt based on features from accelerometer data. Overall SVM showed to be the most robust classifier with an area under the curve of 90%. Nevertheless the number of patients and episodes is too low to draw definitive conclusions. The next step to classify exacerbations in COPD is to design a study with a statistically significant number of exacerbation episodes

Gold nanoprobes for molecular detection of SNPs related to lactose intolerance

Lactose intolerance is a condition that affects millions of people around the world. The current diagnosis methods have shortcomings, namely high costs and long processing times. As such, innovative detection mechanisms should be developed to allow fast, reliable, and inexpensive diagnosis in a point-of-care format. The utilization of gold nanoparticles could overcome these limitations due to their aggregation-dependent colorimetric properties. The developed work focused on their use for the diagnostic of lactose intolerance through the single nucleotide polymorphism associated with European populations (C/T -13910 LCT). Gold nanoparticles with different diameters (15 or 40 nm) were synthesized, characterized and functionalized (salt-aging or pH method). The functionalization was performed using a 5’ or 3’ thiol-modified oligonucleotide. The salt-aging method yielded better results for 15 nm gold nanoparticles, while the pH method worked better for 40 nm gold nanoparticles. The evaluation of several DNA targets through non-cross-linking method showed that anti-parallel hybridization resulted in DNA duplexes with greater stability and stronger colorimetric distinction, when compared to parallel hybridization. Cross-linking and non-cross-linking methodologies were then applied to the optimized conditions. The cross-linking method revealed that nanoprobes obtained using the 3’ thiol-modified oligonucleotide had problems with hybridization, requiring further optimization. From the non-cross-linking method, it was possible to conclude that the 40 nm nanoprobes led to better colorimetric distinction between the complementary and mutated samples (upwards of 60%) and improved statistical significance in comparison to 15 nm nanoprobes. For the tested conditions, smaller DNA targets (40 b.p.) resulted in better colorimetric distinction compared to larger DNA targets (120 b.p.). The differences seen also improved with the increase of DNA target concentration (from 0.25 up to 100 ng/μL). These results demonstrate the capabilities of 40 nm nanoprobes for detection of lactose intolerance and highlight the importance of optimizing the length and concentration of the DNA target.A intolerância à lactose é uma condição que afeta milhões de pessoas em todo o mundo. Os mecanismos de deteção utilizados possuem alguns aspetos que devem ser melhorados, como custos elevados e longo tempo de processamento. Assim sendo, mecanismos de deteção inovativos devem ser desenvolvidos para possibilitar um diagnóstico rápido, reprodutível e barato num formato point-of-care. A utilização de nanopartículas de ouro pode colmatar estas limitações devido às suas propriedades colorimétricas dependentes da agregação. O trabalho desenvolvido focou-se no seu uso para o diagnóstico de intolerância à lactose através do polimorfismo de base única associado a populações Europeias (C/T -13910 LCT). Nanopartículas de ouro com diferentes diâmetros (15 ou 40 nm) foram sintetizadas, caracterizadas e funcionalizadas (método salt-aging ou pH). A funcionalização foi realizada utilizando oligonucleótidos modificados com um grupo tiol a 5’ ou 3’. O método de salt-aging produziu melhores resultados para nanopartículas de ouro de 15 nm, enquanto o método de pH funcionou melhor para nanopartículas de ouro de 40 nm. A testagem de diversos alvos de DNA através do método de non-cross-linking demonstrou que hibridização antiparalela resulta em duplexes de DNA mais estáveis e com melhor distinção colorimétrica, quando comparado com hibridização paralela. Os métodos de cross-linking e non-cross-linking foram de seguida aplicadas às condições otimizadas. Os ensaios de cross-linking revelaram que as nanosondas obtidas através do oligonucleótido modificado com grupo tiol a 3’ tinha problemas com hibridização, requerendo mais otimização. Através do método non-cross-linking foi possível concluir que as nanosondas de 40 nm levaram a uma melhor distinção colorimétrica entre amostras com DNA complementar e DNA mutado (até 60 %) e uma significância estatística melhorada, quando comparado com as nanosondas de 15 nm. Para as condições testadas, alvos de DNA curtos (40 p.b.) resultaram numa distinção colorimétrica superior, quando comparado com os alvos de DNA longos (120 p.b.). As diferenças visualizadas também melhoraram com o aumento da concentração do DNA alvo (de 0.25 até 100 ng/μL). Estes resultados demonstram as capacidades das nanosondas de 40 nm para a deteção de intolerância à lactose e realçam a importância da otimização do tamanho e concentração do DNA alvo

Live betting markets efficiency: the NBA case

Several studies have been assessing the efficiency of sports betting markets, by comparing the pre-game prices with the actual outcomes of each event. While some have documented particular forms of inefficiency, as the favourite/longshot bias, an important part has been unable to reject the efficiency hypothesis, while identifying the betting volume and the event's notoriety as key factors for a market to be efficient. In this study, we seek to bridge a gap in the literature, by assessing the efficiency of betting markets as the inherent sports events are taking place. To this extent, we tested the in-play (live) betting markets efficiency of 4 NBA Finals games, by comparing, on a near second by second basis, the winning probability of the home team, implicitly expressed in its betting odds - the price element -, with a theoretical estimation of its winning probabilities - the information element -, generated through a logit regression based on a sample considering all plays and pre-game odds for the NBA seasons between 2007/2008 and 2014/2015. Our results show that, for the 4 games considered, the in-play betting markets are not efficient, as we reject the hypothesis that the difference between the price and the information element is zero. Although the testing framework and the limited set of considered games prevents us from validating the cause and persistence of our findings, we identify as possible mechanisms inducing these results the asymmetric valuation of game-related events by bettors and market rigidities preventing agents from reacting instantaneously to important events.Vários estudos têm avaliado a eficiência de mercados de apostas desportivas, comparando os preços adstritos a cada interveniente antes do jogo começar com os respetivos resultados do evento. Embora alguns documentem formas pontuais de ineficiência, como o enviesamento favorito/não-favorito, uma parte importante da literatura não rejeita a hipótese de mercados eficientes, apontando como principais factores de promoção dessa eficiência o volume de apostas e a notoriedade do evento. Este estudo procura preencher um vazio nesta literatura, avaliando a eficiência dos mercados de apostas desportivas enquanto o jogo decorre. Nesse sentido, a eficiência dos mercados de apostas em tempo real foi testada, para 4 jogos das finais da NBA, através da comparação, ao quasi-segundo, da probabilidade de vitória da equipa da casa, implícita na sua cota - o elemento preço -, com uma estimativa (teórica) da probabilidade de vitória da mesma equipa - o elemento informação -, gerada através de uma regressão logística alicerçada numa amostra que contem todos as jogadas e cotas pré-jogo das épocas compreendidas entre 2007/2008 e 2014/2015. Os resultados demonstram que, para os 4 jogos considerados, os mercados de apostas são ineficientes em tempo real, uma vez que é rejeitada a hipótese de que a diferença entre os elementos preço e informação seja zero. Apesar da metodologia de teste e do conjunto de jogos considerados impedir a validação das causas e da persistência destes resultados, identificaram-se como potenciais factores a valorização assimétrica dos eventos pelos apostadores e rigidezes de mercado que impeçam a reação imediata dos apostadores

A Característica da Inércia dos Direitos Reais: Brevíssima Reflexão sobre o Princípio da Publicidade

Este texto será publicado nos Estudos de Homenagem ao Professor Doutor Manuel Henrique MesquitaO Autor propõe uma recompreensão do princípio da publicidade dos direitos reais à luz do princípio da inércia, que oriundo da física, faz já o seu caminho nas ciências sociais e jurídicas. O Autor aponta, com algum tom crítico, o carácter extremadamente conservador do direito civil português em matéria de direitos reais, levando a que a aquisição originária da propriedade e de outros direitos reais se revele muito difícil. Assim, O que se ganha em paz social, poder-se-à perder em justiça social e em boa exploração económica do solo

A Característica da Inércia dos Direitos Reais: Brevíssima Reflexão sobre o Princípio da Publicidade

Este texto será publicado nos Estudos de Homenagem ao Professor Doutor Manuel Henrique MesquitaO Autor propõe uma recompreensão do princípio da publicidade dos direitos reais à luz do princípio da inércia, que oriundo da física, faz já o seu caminho nas ciências sociais e jurídicas. O Autor aponta, com algum tom crítico, o carácter extremadamente conservador do direito civil português em matéria de direitos reais, levando a que a aquisição originária da propriedade e de outros direitos reais se revele muito difícil. Assim, O que se ganha em paz social, poder-se-à perder em justiça social e em boa exploração económica do solo

Impact of NLRP3 inflammasome inhibition on a model of Aβ-induced toxicity

Tese de mestrado, Neurociências, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2021Alzheimer's disease (AD) is a chronic and progressive neurodegenerative disease, considered the most common cause of dementia in the elderly population. Its rapid progression makes the quality of life of patients and their relatives/caregivers devastating. In addition, AD economic impact is very significant, as trillions of dollars are spent each year in disease care. Since its discovery in 1907, AD has been intensively studied, but no cure or effective preventive strategy has yet been discovered. At the cellular level this pathology is characterized by loss of synapses, neuronal death, intracellular neurofibrillary aggregates of Tau phosphorylated protein and extracellular peptide β amyloid (Aβ) deposition. However, several aspects of this disease are still unknown, such as the mechanisms of neuronal death induced by Aβ. Recently AD has been associated with inflammatory events, in particular the activation of a multiprotein cytoplasmic complex, NLRP3 inflammasome. This complex is involved in the activation of Caspase-1 and subsequent production of pro-inflammatory cytokines such as Interleukine-1β (IL-1β) and IL-18, and cleavage of Gasdermin D (GSDMD), associated with pyroptosis, a type of inflammatory cell death. Several studies have suggested a diarylsulfonylurea-containing small molecule, named MCC950, as a potent and selective NLRP3 oligomerization inhibitor, that does not affect the role of other inflammasomes, hence avoiding immunosuppressive effects. This project has three main objectives: 1) to establish a model of Aβ-induced toxicity in acute slices, 2) to characterize the Aβ-induced neuroinflammatory milieu in this system, and 3) to evaluate the potential protective effect of MCC950 upon Aβ impact. The work was performed in acute slices of hippocampus extracted from 7 to 8 weeks old Wistar rats, which were subsequently exposed to Aβ1-42 oligomers. Western Blot assays and Enzyme Linked Immunosorbent Assay were used to evaluate glial activation, and inflammasome priming and oligomerization. Afterwards, the effect of NLRP3 inflammasome inhibitor MCC950 was addressed, to check whether it was capable or not to prevent the Aβ1-42-induced noxious effects. Indeed, our results show that Aβ1-42 oligomers triggered the reactive phenotypes of astrocytes and microglia, in a process known as reactive gliosis, and induced inflammasome priming and activation, causing increased expression of Caspase-1 and Caspase-1-mediated processing of IL-1β, as well as the expression of the cleaved form of GSDMD, known to oligomerise in the inner side of the cell membrane, creating pores typical of cellular death by pyroptosis. On the other hand, MCC950 prevented inflammasome priming and activation and its respective correlates, namely, it decreased reactive gliosis and the expression of inflammasome-driven events, as production of active Caspase-1 and cleaved GSDMD. However, as MCC950 does not affect the inflammasome priming step, it did not influence the Aβ1-42-induced increased expression of NLRP3 protein and IL-1β. Their expression continues increased in the presence of MCC950 due to the induction of the NF-κB pathway by the Aβ1-42 oligomers. Overall results show that Aβ1-42 oligomers induce a powerful neuroinflammatory context in acute hippocampal slices, mediated by NLRP3 inflammasome, and reinforce the hypothesis that Aβ1-42 toxic species eventually lead to cellular death by pyroptosis. Moreover, this work highlighted the role of MCC950 as an effective NLRP3 inflammasome inhibitor, further strengthening its potential as a drug for AD.A doença de Alzheimer (Alzheimer’s Disease - AD) é uma doença neurodegenerativa crónica e progressiva, considerada a causa mais comum de demência na população idosa. A sua rápida progressão torna devastadora a qualidade de vida dos doentes e dos seus parentes/cuidadores. Além disso, o impacto económico da AD é muito significativo, uma vez que triliões de dólares são gastos todos os anos no tratamento da doença. Atualmente, a ideia de um fármaco único para AD é considerada utópica. À medida que o conhecimento sobre a doença aumenta, mais investigadores se apercebem de que esta é de facto consequência de uma complexa cascata de eventos com muitas redes de interações. Por esta razão, é mais provável que um tratamento futuro possa surgir de combinações de diferentes fármacos que visem pontos de controlo cruciais no desenvolvimento da doença. Desde a sua descoberta em 1907, a doença tem sido intensamente estudada, embora ainda não tenha sido descoberta nenhuma cura ou estratégia eficaz de prevenção. A nível celular, esta patologia é caracterizada pela perda de sinapses, morte neuronal, agregados neurofibrilares intracelulares de proteína Tau fosforilada e deposição extracelular do péptido β amilóide (Aβ). No entanto, vários aspetos desta doença são ainda desconhecidos, tais como os mecanismos de morte neuronal induzida por Aβ. Este trabalho baseia-se na hipótese da cascata amilóide, que considerando dados genéticos e histopatológicos, sugere que depósitos tóxicos de Aβ no cérebro desencadeia uma sequência de eventos que culminam na ativação crónica das células gliais (gliose) criando um ambiente neuroinflamatório, danificando progressivamente os neurónios, alterando a homeostase iónica, aumentando o stress oxidativo e causando eventualmente a morte generalizada das células. O hipocampo é surpreendentemente suscetível a insultos, sendo uma das áreas do cérebro mais afetadas por patologias relacionadas com o envelhecimento, como a AD. De facto, várias evidências sugerem que é a primeira região do cérebro a apresentar sinais de neurodegeneração, bem como consequentes alterações estruturais, especialmente perda de volume. Recentemente, a AD tem sido associada a eventos inflamatórios, especificamente a inflamassomas, complexos multiproteicos citosólicos que medeiam respostas imunes. Vários inflamassomas foram descritos, no entanto, o inflamassoma NLRP3 é o mais intensivamente estudado, sendo a sua ativação reconhecida como um componente central no desenvolvimento de várias doenças inflamatórias e autoimunes. Foi observada uma ativação exacerbada da via do NLRP3 nas doenças cerebrais e alguns estudos sugerem que este inflamassoma desempenha um papel fundamental na disfunção comportamental e cognitiva observada na AD, pelo que a sua inibição pode resultar em efeitos terapêuticos e/ou preventivos significativos. Este complexo está envolvido na ativação da Caspase-1 e subsequente produção de citocinas pró-inflamatórias como a Interleucina-1β (IL-1β) e a IL-18, e processamento da Gasdermin-D (GSDMD), associada à morte celular por piroptose. A piroptose é um tipo de morte celular programada, dependente da ativação de caspases inflamatórias, tais como a Caspase-1. Estudos recentes mostraram que a piroptose está associada a uma variedade de doenças neurodegenerativas devido ao seu efeito pró-inflamatório e disfunções celulares relacionadas. Morfologicamente, a piroptose é caracterizada pela formação de poros na membrana plasmática, levando à libertação de citocinas inflamatórias e outros sinais de stress celular, perpetuando assim o efeito inflamatório. A Caspase-1 promove a clivagem da proteína GSDMD, formando-se o fragmento N-terminal (GSDMD-NT), que é subsequentemente translocado para o interior da membrana plasmática, onde se conecta aos fosfatos fosfatidilinositol e fosfatidilserina, oligomerizando e originando poros. As células gliais consistem em macroglia, tais como astrócitos e oligodendrócitos, e microglia. Destas, as microglias são consideradas os macrófagos do cérebro, embora atualmente se saiba que os astrócitos também têm um papel crucial nas respostas imunitárias do sistema nervoso central. As células gliais possuem recetores de reconhecimento de padrões, como NLRP3, capazes de detetar sinais de stress ou derivados de patógenos. Existem duas principais vias de ativação do inflamassoma NLRP3: a via canónica e a via não canónica. A primeira, sobre a qual este trabalho incide, requer um sinal de priming e um sinal de ativação ou oligomerização. Nos últimos anos, vários estudos têm enaltecido o potencial de um composto, MCC950, considerado um potente e seletivo inibidor de oligomerização do inflamassoma NLRP3, que não afeta o papel de outros inflamassomas, como o NLRP1, evitando assim efeitos imunossupressores. Este projeto tem três objetivos principais: 1) estabelecer um modelo de toxicidade induzida por Aβ em fatias agudas de hipocampo, 2) caracterizar o meio neuroinflamatório induzido por Aβ, e 3) avaliar o potencial efeito protetor do MCC950 sobre o impacto de Aβ. O estudo foi realizado em fatias agudas de hipocampo obtidas de ratos Wistar com idades compreendidas entre 7 a 8 semanas, que foram subsequentemente expostas a oligómeros de Aβ1-42. Os ensaios de Western Blot (WB) e de Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) foram utilizados para avaliar a ativação glial, as etapas de priming e oligomerização do inflamassoma, e a ocorrência de morte por piroptose. Posteriormente, foram avaliados os efeitos do inibidor do inflamassoma NLRP3, MCC950, para verificar a sua capacidade de contrariar os efeitos nocivos induzidos por Aβ1-42. Os nossos resultados indicam que Aβ1-42 induziu o priming e a ativação do inflamassoma NLRP3, desencadeando consequentemente o fenótipo reativo de astrócitos e microglia, num processo conhecido como gliose, e aumentando a produção de IL-1β, bem como a expressão da forma clivada de GSDMD, conhecida por migrar para o lado interno da membrana celular, criando poros e conduzindo a morte celular por piroptose. Por sua vez, o inibidor seletivo do inflamassoma NLRP3, MCC950, impediu a ativação do inflamassoma e o seu impacto, diminuindo a gliose, e a expressão da Caspase-1 ativa e da GSDMD clivada. Contudo, uma vez que o MCC950 não afeta a etapa de priming do inflamassoma, as expressões das proteínas NLRP3 e IL-1β não foram influenciadas, continuando aumentadas na presença do inibidor devido à ativação da via NF-κB pelos oligómeros de Aβ1-42. Os níveis de Caspase-1 e GSDMD-NT foram reestabelecidos na presença de MCC950, confirmando que o inibidor impediu a oligomerização do inflamassoma, afetando a conversão da pro-Caspase-1 em Caspase-1 ativa, e consequentemente a clivagem da GSDMD. Finalmente, os níveis do domínio ASC, inalterados pelos oligómeros de Aβ1-42, não sofreram alterações na presença do MCC950. Com a oligomerização do inflamassoma impossibilitada, o processamento e libertação de citocinas pró-inflamatórias ficaram comprometidos. Por esta razão, na presença do MCC950 é inibida a ativação da via NF-κB em astrócitos e prevenida a conversão para o fenótipo neurotóxico A1. O MCC950 não só impediu a ocorrência de astrogliose, como também a ativação da microglia. Os resultados revelaram que o MCC950 conduziu à diminuição significativa da expressão do marcador de microglia reativa CD68, induzida pelos oligómeros de Aβ1-42. Sumariamente, os resultados deste trabalho demonstram que Aβ1-42 induz uma poderosa resposta neuroinflamatória, mediada pelo inflammasoma NLRP3, e reforçam a hipótese de que os oligómeros tóxicos de Aβ originam a morte celular por piroptose. Além disso, foi realçado o papel do MCC950 como um inibidor eficaz do inflamassoma NLRP3, capaz de impedir os efeitos da sua ativação e reforçando assim o seu potencial terapêutico. Avanços científicos recentes relativos ao desenvolvimento de técnicas não invasivas para a deteção in vivo de depósitos de Aβ, permitem que a doença seja detetada antes de esta se começar a manifestar. Neste contexto, a administração preventiva de MCC950 poderá ser decisiva para impedir a perda celular causada por processos inflamatórios nocivos, evitando, consequentemente, o aparecimento de sintomas. À medida que o conhecimento sobre a doença aumenta, mais claro é o facto de que AD é resulta de uma complexa cascata de eventos com muitas redes de interações. Por esta razão, é provável que uma abordagem farmacológica futura surja da combinação de diferentes medicamentos que visem pontos de controlo cruciais para o desenvolvimento da doença

Study of RBC shape transitions induced by nanoparticles

Aquesta tesi descriu l'estudi de les propietats del medi extracel·lular sobre la criopreservació de glòbuls vermells i la possible aplicació de nanopartícules de sílice com a co-agents per al lliurament intracel·lular de trehalosa, un crioprotector natural. La primera part de l™estudi es va centrar en les condicions de congelació i descongelació i en les propietats del medi extracel·lular per a la congelació. Es van analitzar diferents propietats segons la seva influència en la taxa de supervivència dels glòbuls vermells, que es va avaluar mitjançant l™assaig d™hemòlisi i es va analitzar l™efecte de la congelació mitjançant anàlisi morfològica d™imatges de glòbuls vermells. La segona part de l'estudi investiga la interacció de nanopartícules de sílice carregades de manera diferent amb els glòbuls vermells per a futures aplicacions com a co-agent per al lliurament de la trehalosa. La toxicitat de les nanopartícules de sílice es va determinar mitjançant un assaig d™hemòlisi i la seva distribució espacial es va estudiar mitjançant l™examen de glòbuls vermells que flotaven lliurement mitjançant microscòpia confocal d™escaneig làser (LSCM). Es va desenvolupar un nou mètode de visualització 3D de gran rendiment i aplicat a les imatges LSCM per tal de corregir la deriva al llarg de la z-stack permetent l'anàlisi de les imatges. Els resultats es van confirmar interactuant les nanopartícules de sílice amb vesícules gegants unilamellars (GUV) com a sistema experimental.Esta tesis describe el estudio de las propiedades del medio extracelular en la crioconservación de los glóbulos rojos y la posible aplicación de nanopartículas de sílice como coagentes para la entrega intracelular de trehalose, un crioprotector natural. La primera parte del estudio se centró en las condiciones de congelación y descongelación, y en las propiedades del medio extracelular para la congelación. Se analizaron diferentes propiedades de acuerdo con su influencia en la tasa de supervivencia de los glóbulos rojos, según se evaluó mediante el ensayo de hemólisis, y se analizó el efecto de la congelación mediante el análisis morfológico de las imágenes de los glóbulos rojos. La segunda parte del estudio investiga la interacción de nanopartículas de sílice, cargadas de manera diferente, con glóbulos rojos para su futura aplicación como coagente para la entrega de trehalose. La toxicidad de la nanopartícula de sílice se determinó mediante un ensayo de hemólisis y su distribución espacial se estudió mediante la obtención de imágenes de los glóbulos rojos que flotan libremente usando microscopía confocal (LSCM). Se desarrolló un nuevo método de visualización 3D de alto rendimiento que se aplicó a las imágenes LSCM para corregir la deriva en toda la pila z permitiendo el análisis de las imágenes. Los resultados se confirmaron mediante la interacción de las nanopartículas de sílice con vesículas unilamelares gigantes (GUV) como un sistema de modelo experimental.This thesis describes the study of the properties of extracellular medium on the cryopreservation of red blood cells and the potential application of silica nanoparticles as co-agents for the intracellular delivery of trehalose, a natural cryoprotectant. The first part of the study focused on the freezing and thawing conditions, and on the properties of the extracellular medium for freezing. Different properties were analyzed according to their influence on the survival rate of red blood cells as assessed by hemolysis assay and the effect of freezing was analyzed by morphological analysis of images of red blood cells. The second part of the study investigates the interaction of differently charged silica nanoparticles with red blood cells for future application as co-agent for trehalose delivery. Silica nanoparticle toxicity was determined by hemolysis assay and their spatial distribution was studied by imaging freely floating red blood cells using laser scanning confocal microscopy (LSCM). A novel high-throughput 3D visualization method was developed and applied to LSCM images in order to correct the drift throughout the z-stack allowing the analysis of the images. Results were confirmed by interacting the silica nanoparticles with giant unilamellar vesicles (GUV) as an experimental model system

Equity valuation of an insurance company : insights from Zurich Insurance Group

Mestrado Bolonha em FinançasZurich Insurance Group is a Swiss insurance company founded 150 years ago and currently one of the most known insurers in the world present in more than 200 countries. The group is listed on SIX Swiss Exchange and has Life and non-Life insurance services with the two biggest segments being Property & Casualty and Life. The present document consists of an Equity Research Report on the group and was drafted according with the guidelines from the CFA Institute. Zurich’s main valuation is performed through a Discounted Dividend Model (DDM) and complemented with a Residual Income Valuation as well as a Relative Valuation. These methods were chosen due to the industry’s particularities. This report issues a HOLD recommendation with a price target of CHF 434,38 with an upside potential of 5,02% with medium risk. All valuations are based on Zurich’s performance from 2018 to 2022 and the forecasted period from 2023 to 2032. The HOLD recommendation derives mainly from the group’s early focus on sustainability, the recent gain in North America and Asia-Pacific’s market share, the slow growth in EMEA and their strong resilience through pandemic years and the recent Ukraine-Russia conflict. The medium risk is mainly justified by the industry’s risk (natural and human-made catastrophes and their potential losses are unpredictable) and the group’s ability to gain market share in underdeveloped regions and maintain their performance in developed regions.O grupo Zurich Insurance é uma seguradora suíça fundada há 150 anos e atualmente uma das seguradoras mais conhecidas do mundo, presente em mais de 200 países. O grupo está listado na SIX Swiss Exchange e oferece serviços de seguros de vida e não-vida, sendo os 2 maiores segmentos Property & Casualty e Life. O presente documento apresenta uma Equity Research do grupo e foi elaborado de acordo com as orientações do CFA Institute. A avaliação principal da Zurich foi realizada através de um Modelo de Desconto de Dividendos e complementada com uma Avaliação de Rendimento Residual e Avaliação Relativa. Estes métodos foram escolhidos devido às particularidades deste setor. Este relatório emite uma recomendação de HOLD com preço-alvo de CHF 434,38 com potencial de aumento de 5,02% com risco médio. Todas as avaliações foram baseadas no desempenho da Zurich de 2018 a 2022 e no período de previsão de 2023 a 2032. A recomendação de compra dá-se principalmente do foco do grupo na sustentabilidade que já está presente há bastantes anos, do recente ganho significativo na participação de mercado da América do Norte e da Ásia-Pacífico, o crescimento lento na região EMEA e da resiliência do grupo durante os anos de pandemia e do recente conflito Ucrânia-Rússia. O risco médio é justificado principalmente pelo risco da própria indústria (catástrofes naturais e provocadas pelo homem e as suas respetivas potenciais perdas são imprevisíveis) e pela capacidade do grupo de ganhar quota de mercado em regiões subdesenvolvidas e manter o seu desempenho em regiões desenvolvidas.info:eu-repo/semantics/publishedVersio