Estudio de los efectos de la inhibición de la vía del mevalonato en la proliferación celular

El colesterol es un esterol de gran relevancia para la supervivencia celular y la falta sostenida del mismo supone un estrés que produce la interrupción del ciclo celular. En su biosíntesis interviene un gran número de enzimas. El mevalonato, intermediario generado por acción de la HMG-CoA reductasa, se fosforila y por acción de la mevalonato difosfato descarboxilasa (MVD) se transforma en isopentenil difosfato (IPP) con gasto adicional de ATP. La inhibición experimental de esta enzima en ausencia de colesterol en células deficientes de p53 produce una parada del ciclo en fase S por deficiencia de dNTPs. Los dNTPs son sintetizados por la ribonucleótido reductasa (RNR), que tiene como activador al ATP. En el presente trabajo nos propusimos estudiar los efectos sobre la proliferación, el tamaño, el ciclo celular y la homeostasis del ATP intracelular, causados por la inhibición de la MVD, la HMG-CoA reductasa y la ATP sintasa, en células HL-60, para establecer una relación entre el gasto de ATP en la ruta del mevalonato y la interrupción de la síntesis de ADN durante la fase S del ciclo. Hemos observado que la inhibición de la MVD produce un descenso de la proliferación y un aumento del tamaño celular debido a la parada del ciclo celular en fase S, que podría estar relacionada con el descenso de las concentraciones intracelulares de ATP observado en estas células y el consiguiente estrés replicativo. Esta situación se agrava suministrando mevalonato y se revierte parcialmente limitando el aporte de mevalonato por inhibición de la HMG-CoA reductas

HSL-knockout mouse testis exhibits class B scavenger receptor upregulation and disrupted lipid raft microdomains

There is a tight relationship between fertility and changes in cholesterol metabolism during spermatogenesis. In the testis, class B scavenger receptors (SR-B) SR-BI, SR-BII, and LIMP II mediate the selective uptake of cholesterol esters from HDL, which are hydrolyzed to unesterified cholesterol by hormone-sensitive lipase (HSL). HSL is critical because HSL knockout (KO) male mice are sterile. The aim of the present work was to determine the effects of the lack of HSL in testis on the expression of SR-B, lipid raft composition, and related cell signaling pathways. HSL-KO mouse testis presented altered spermatogenesis associated with decreased sperm counts, sperm motility, and infertility. In wild-type (WT) testis, HSL is expressed in elongated spermatids; SR-BI, in Leydig cells and spermatids; SR-BII, in spermatocytes and spermatids but not in Leydig cells; and LIMP II, in Sertoli and Leydig cells. HSL knockout male mice have increased expression of class B scavenger receptors, disrupted caveolin-1 localization in lipid raft plasma membrane microdomains, and activated phospho-ERK, phospho-AKT, and phospho-SRC in the testis, suggesting that class B scavenger receptors are involved in cholesterol ester uptake for steroidogenesis and spermatogenesis in the testis