Inflammation and Cancer: Role of Annexin A1 and FPR2/ALX in Proliferation and Metastasis in Human Laryngeal Squamous Cell Carcinoma

The anti-inflammatory protein annexin A1 (ANXA1) has been associated with cancer progression and metastasis, suggesting its role in regulating tumor cell proliferation. We investigated the mechanism of ANXA1 interaction with formylated peptide receptor 2 (FPR2/ALX) in control, peritumoral and tumor larynx tissue samples from 20 patients, to quantitate the neutrophils and mast cells, and to evaluate the protein expression and co-localization of ANXA1/FPR2 in these inflammatory cells and laryngeal squamous cells by immunocytochemistry. in addition, we performed in vitro experiments to further investigate the functional role of ANXA1/FPR2 in the proliferation and metastasis of Hep-2 cells, a cell line from larynx epidermoid carcinoma, after treatment with ANXA1(2-26) (annexin A1 N-terminal-derived peptide), Boc2 (antagonist of FPR) and/or dexamethasone. Under these treatments, the level of Hep-2 cell proliferation, pro-inflammatory cytokines, ANXA1/FPR2 co-localization, and the prostaglandin signalling were analyzed using ELISA, immunocytochemistry and real-time PCR. An influx of neutrophils and degranulated mast cells was detected in tumor samples. in these inflammatory cells of peritumoral and tumor samples, ANXA1/FPR2 expression was markedly exacerbated, however, in laryngeal carcinoma cells, this expression was downregulated. ANXA1(2-26) treatment reduced the proliferation of the Hep-2 cells, an effect that was blocked by Boc2, and up-regulated ANXA1/FPR2 expression. ANXA1(2-26) treatment also reduced the levels of pro-inflammatory cytokines and affected the expression of metalloproteinases and EP receptors, which are involved in the prostaglandin signalling. Overall, this study identified potential roles for the molecular mechanism of the ANXA1/FPR2 interaction in laryngeal cancer, including its relationship with the prostaglandin pathway, providing promising starting points for future research. ANXA1 may contribute to the regulation of tumor growth and metastasis through paracrine mechanisms that are mediated by FPR2/ALX. These data may lead to new biological targets for therapeutic intervention in human laryngeal cancer.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fed Univ São Paulo UNIFESP, Paulista Sch Med EPM, São Paulo, BrazilFac Med FAMERP, Dept Mol Biol, Sao Jose Do Rio Preto, SP, BrazilFac Med FAMERP, Dept Otorhinolaringol, Sao Jose Do Rio Preto, SP, BrazilFac Med FAMERP, Dept Pathol, Sao Jose Do Rio Preto, SP, BrazilSão Paulo State Univ UNESP, Dept Biol & Zoot, Ilha Solteira, SP, BrazilUniv São Paulo, Inst Biosci, Dept Genet & Evolutionary Biol, São Paulo, BrazilSão Paulo State Univ UNESP, Dept Biol, Inst Biociencias Letras & Ciencias Exatas IBILCE, Saa Jose Do Rio Preto, SP, BrazilFed Univ São Paulo UNIFESP, Paulista Sch Med EPM, São Paulo, BrazilFAPESP: 2008/08187-4FAPESP: 2008/01655-2CNPq: 302768/2010-6Web of Scienc

Significados do dinheiro e propensão ao endividamento entre alunos universitários

O objetivo da pesquisa foi verificar a influência da percepção de Significados do Dinheiro e a Propensão ao Endividamento em estudantes universitários. Foi aplicada survey com 332 alunos Universidade do Estado de Mato Grosso. As técnicas de análise fatorial, testes de diferença de média e regressão múltipla foram utilizadas. A análise fatorial retornou 11 fatores: Conflito; Progresso; Cultura; Desigualdade; Poder; Estabilidade; Prazer; Sofrimento; Preocupação; Relacionamento; Desapego. As diferenças de média apontaram diferentes Significados do Dinheiro por sexo, idade, estado civil, religião, renda e ter filhos. Foi estimada regressão tendo a Propensão ao Endividamento como variável dependente e os Significados do Dinheiro e variáveis demográficas, como variáveis independentes. As variáveis demográficas não foram significativas no modelo. Os Significados do Dinheiro denominados Cultura, Preocupação e Desapego apresentaram-se significativos. Cultura e Preocupação com impacto positivo e Desapego negativo na Propensão ao Endividamento. Os resultados apontaram que a maioria dos entrevistados gasta menos ou igual à sua renda, não possuem cartão de crédito, quando possuem, nunca atrasam, não tem dívidas em atraso, moram com os pais em casas próprias pagas, indicando baixo nível de dívidas. As medianas da escala de propensão ao endividamento indicam baixa propensão a endividar-se

Análise quantitativa de neutrófilos, mastócitos e eosinófilos no adenocarcinoma prostático humano

Objective: To evaluate the relationship between benign prostatic hyperplasia (BPH) and prostatic adenocarcinoma (AP) through the quantification of neutrophils, eosinophils and mast cells and to correlate with the histopathological grade of the neoplasm. Methodology: This is an observational cross-sectional study. Cataloged patient biopsies were sectioned into 5µm sections, stained and analyzed under a light microscope. In these sections, cells were quantified and compared between HPB and AP conditions by statistical analysis. Results: Biopsies of 47 patients were analyzed, 28 (59.6%) with BPH and 19 (40.4%) with AP. The median age of the BPH group was 69 years (range: 54 – 77 years) and the AP group was 66 years (range: 59 – 92 years). In the statistical analysis, a greater number of extravascular (p <0.001) and total (p <0.05) neutrophils was observed in the AP in relation to the BPH; however, there was no statistical difference between intravascular neutrophils, mast cells and eosinophils between the groups. By correlating the Gleason Score and the influx of inflammatory cells, it was observed that higher scores are associated with a lower influx of neutrophils and intact mast cells. In addition, it was observed that prostatic volume and weight with AP may be associated with inflammatory infiltrate. Conclusion: In this study, it was possible to suggest that prostate cancer is related to the innate immune response by the exacerbated influx of neutrophils in the tumor microenvironment and by the influence of these cells on the Gleason Score and on the values of weight and prostate volume. However, further studies are needed to better illustrate the role of neutrophils in tumorigenesis.Objetivo: Avaliar a relação entre a hiperplasia prostática benigna (HPB) e o adenocarcinoma prostático (AP) por meio da quantificação de neutrófilos, eosinófilos e mastócitos e correlacionar com o grau histopatológico da neoplasia. Metodologia: Este estudo é observacional transversal. Biópsias catalogadas de pacientes foram seccionadas em cortes de 5µm, coradas e analisadas no microscópio de luz. Nessas secções, as células foram quantificadas e comparadas entre as condições HPB e AP por meio de análises estatísticas. Resultados: Foram analisadas biópsias de 47 pacientes, sendo 28 (59,6%) com HPB e 19 (40,4%) com AP. A mediana da idade do grupo com HPB foi 69 anos (intervalo: 54 – 77 anos) e o com AP foi 66 anos (intervalo: 59 – 92 anos). Na análise estatística, foi observado um maior número de neutrófilos extravasculares (p <0,001) e totais (p <0,05) no AP em relação à HPB, porém não houve diferença estatística entre neutrófilos intravasculares, mastócitos e eosinófilos entre os grupos. Ao correlacionar o Escore de Gleason e o influxo de células inflamatórias, foi observado que maiores escores estão associados a menor influxo de neutrófilos e mastócitos intactos. Além disso, foi observado que o volume e o peso prostático com AP podem estar associados com o infiltrado inflamatório. Conclusão: Nesse estudo, foi possível sugerir que o câncer de próstata possui relação com a resposta imune inata pelo influxo exacerbado de neutrófilos no microambiente tumoral e pela influência dessas células no Escore de Gleason e nos valores de peso e volume prostático. Entretanto, novos estudos são necessários para melhor ilustrar o papel dos neutrófilos na tumorigênese

Peer-Assisted Learning: A New Look at the Good Old Monitoring and Its Motivation from the Perspective of Student-Monitor

Peer-assisted learning (PAL), good old monitoring, has been used in medical schools and shown good results in professional development and in developing communication skills among students. This method provides mutual benefits for both monitors/near-peer teachers - NPT and monitored students; however, little is still known about the NPT’ perception about peer-assisted learning. To evaluate the real motivation of students to become NPT, and to investigate how NPT qualify their own teaching activities – such as productivity, performance and difficulties faced – seems to be a crucial step for implementing PAL in medical schools. The research instrument, a semi-structured questionnaire with 11 closed questions and 3 questions that allowed the answer “other” and further explanation, was answered by 26 medical students, NPT of basic disciplines. The results showed a positive effect of PAL on the teaching-learning process, and the real reasons of students to become NPT and the positive impacts of PAL on their academic life. The identification of these potential benefits should encourage medical schools to promote training so students can perform their role as NPT since PAL aids in the development of their clinical and pedagogical skills

Transmissão de preços dos insumos para a carne suína: análise com regime switching de markov / Price transmission of inputs for pork meat: analysis with markov regime switching

Brasil é um dos maiores produtores de carne suína do mundo. Na cadeia de produção de carne suína, os insumos mais importantes são milho e soja. O objetivo deste artigo é analisar a transmissão de preços dos insumos para o preço do suíno à venda no atacado. Foram coletados dados de julho de 1994 a maio de 2014. A análise de transmissão foi baseada no modelo analítico de Garden (1995). A relação de longo prazo foi estimada com modelo de Markov Switching Autorregressive (MSA), com dois regimes. A relação de curto prazo foi estimada com Vetor de Correção de Erros (VEC), com quatro defasagens. As evidências confirmam que há dois regimes de transmissão de preços de milho e soja para suínos no longo prazo. No primeiro regime, 20% do preço do milho e 50% do preço do soja são transmitidos ao preço do suíno vendido no atacado. No segundo regime, 29% do preço do milho e 38% do preço do soja são transmitidos ao preço do suíno. No entanto, no curto prazo, a transmissão de preços não pode ser confirmada.

The major leucyl aminopeptidase of Trypanosoma cruzi (LAPTc) assembles into a homohexamer and belongs to the M17 family of metallopeptidases

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Pathogens depend on peptidase activities to accomplish many physiological processes, including interaction with their hosts, highlighting parasitic peptidases as potential drug targets. In this study, a major leucyl aminopeptidolytic activity was identified in <it>Trypanosoma cruzi</it>, the aetiological agent of Chagas disease.</p> <p>Results</p> <p>The enzyme was isolated from epimastigote forms of the parasite by a two-step chromatographic procedure and associated with a single 330-kDa homohexameric protein as determined by sedimentation velocity and light scattering experiments. Peptide mass fingerprinting identified the enzyme as the predicted <it>T. cruzi </it>aminopeptidase EAN97960. Molecular and enzymatic analysis indicated that this leucyl aminopeptidase of <it>T. cruzi </it>(LAPTc) belongs to the peptidase family M17 or leucyl aminopeptidase family. LAPTc has a strong dependence on neutral pH, is mesophilic and retains its oligomeric form up to 80°C. Conversely, its recombinant form is thermophilic and requires alkaline pH.</p> <p>Conclusions</p> <p>LAPTc is a 330-kDa homohexameric metalloaminopeptidase expressed by all <it>T. cruzi </it>forms and mediates the major parasite leucyl aminopeptidolytic activity. Since biosynthetic pathways for essential amino acids, including leucine, are lacking in <it>T. cruzi</it>, LAPTc could have a function in nutritional supply.</p

Up-Regulation of Annexin-A1 and Lipoxin A4 in Individuals with Ulcerative Colitis May Promote Mucosal Homeostasis

PubMed ID: 22723974This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited

Resolution of inflammation: what Controls its Onset?

The authors would like to acknowledge the funding agencies, Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq, Brazil), Comissão de Aperfeiçoamento de Pessoal do Ensino Superior (CAPES, Brazil), Fundação do Amparo a Pesquisa de Minas Gerais (FAPEMIG, Brazil), Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia (INCT in Dengue), and the European Community’s Seventh Framework Programme (FP7-2007-2013, Timer consortium) under grant agreement HEALTH-F4-2011-281608. MP acknowledges funding from the Wellcome Trust (program 086867/Z/08), the Medical Research Council UK (MR/K013068/1), and the William Harvey Research Foundation

Mechanisms of action of anti-inflammatory annexin A1 and receptor for formylated peptides FPR2/ALX in human larynx squamous cell carcinoma: in vivo and in vitro studies

Introdução: Varias evidencias demonstram que o desenvolvimento e a progressao do cancer dependem das interacoes entre as celulas tumorais e inflamatorias. A proteina anti-inflamatoria anexina 1 (ANXA1) tem sido associada com a regulacao da migracao/invasao das celulas tumorais e, recentes estudos tem sugerido que a sua acao regulatoria pode ser mediada por meio dos receptores para peptideos formilados (nFPRs). OBJETIVOS: Em funcao da importancia no entendimento da acao anti-inflamatoria/antiproliferativa da ANXA1 na interacao cancer/inflamacao, o objetivo das nossas investigacoes foi avaliar, in vivo e in vitro, as celulas tumorais e inflamatorias e, o mecanismo de acao da ANXA1 e do receptor FPR2/ALX no carcinoma epidermoide de laringe humano. MATERIAIS E METODOS: Nas amostras de tecidos laringeo controle, peritumoral e tumoral, obtidas de 20 pacientes portadores de carcinoma epidermoide de laringe, analisamos histopatologica e quantitativamente os mastocitos (MCs) e neutrofilos (Nøs). A heterogeneidade dos MCs foi analisada pela expressao das peptidases triptase e quimase por analises imuno-histoquimicas, enquanto a co-localizacao da ANXA1/FPR2 foi investigada nas celulas inflamatorias e tumorais, por meio de reacoes imunocitoquimicas ultraestruturais. As celulas Hep-2 (linhagem humana originalmente descrita como procedente de carcinoma epidermoide de laringe) foram preservadas no meio de cultura MEM (controle) ou tratadas com peptideo ANXA12-26, ANXA12-26 + antagonista Boc2, Dexametasona (Dexa), Dexa + Boc2, e somente Boc2, nos tempos de 6, 24, 48, 72, 96 e 120 horas. Nessas condicoes, analisamos a morfologia e o indice de proliferacao pela microscopia de luz, as citocinas IL-6, IL-8 e MCP-1 pelo analisador Multiplex Magpix, a expressao da ANXA1 e FPR2/ALX pelas reacoes de Western blotting e imunocitoquimica ultraestrutural. Ainda, a expressao dos genes EP3, EP4, MMP2 e MMP9 foi analisada por RT-PCR. RESULTADOS: No estroma laringeo tumoral observamos influxo de Nøs e, ainda, MCs em processo de desgranulacao, triptase positivos (MCT) nas amostras controles e tumorais e, triptase/quimase positivos (MCTC) nas peritumorais, condicoes que caracterizam um microambiente inflamatorioBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe

Role of the receptor for formylated peptides in the anti-inflammatory action of annexin 1 and its N-terminal peptide in experimental model of peritonitis

Objetivos: Analisar o papel da proteína endógena anexina 1 (ANXA1), sua ativação gênica e expressão protéica nos mastócitos e nos neutrófilos, durante um modelo experimental de peritonite. Além disso, investigar a interação funcional do receptor para peptídeos formilados (FPR) com a proteína ANXA1 e o seu peptídeo mimético Ac2-26. Métodos: Camundongos selvagens (ANXA1+/+) e deficientes (ANXA1-/-) para ANXA1 e, selvagens (FPR+/+) e deficientes (FPR-/-) para o receptor FPR foram induzidos (i.p.) à inflamação, por 1 e 4 horas, com 1,5mg/kg de carragenina. O tratamento com o peptídeo Ac2-26 (100μg/kg) foi realizado (i.v.) quinze minutos antes do estímulo inflamatório. Como controle para a família de receptores FPR, os animais FPR+/+ receberam (i.v.) 10μg/kg do antagonista Boc2 (inibidor dos receptores FPR). Os mastócitos e os neutrófilos foram analisados histológica e quantitativamente no mesentério e no lavado peritoneal. A ativação gênica da ANXA1 foi monitorada nos animais ANXA1-/-, através da atividade enzimática da b-galactosidase, produzida pelo gene repórter LacZ. A reação imunocitoquímica ultra-estrutural (dupla marcação) detectou a expressão da ANXA1 (anticorpo LCS3) e do receptor FPR (anticorpo FPRb) nos neutrófilos peritoneais dos camundongos FPR+/+. Resultados: O estímulo inflamatório, após 1 hora, não foi significativo, enquanto após 4 horas, observamos numerosos mastócitos desgranulados e neutrófilos migrados. A resposta inflamatória foi mais exacerbada nos camundongos ANXA1-/-. O efeito da administração do peptídeo Ac2-26 exerceu uma significante ação inibitória na desgranulação dos mastócitos e na migração dos neutrófilos. A ação inibitória do peptídeo foi suprimida após o tratamento com o antagonista Boc2, avaliado pelo aumento da ativação e transmigração das células inflamatórias. A ativação gênica da ANXA1 foi acentuada após 1 e 4 horas do processo inflamatório. Nas análises imunocitoquímicas, verificamos uma intensa imunorreatividade da ANXA1 após 4 horas do processo inflamatório e do tratamento com o peptídeo, além disso, mostramos, pela primeira vez na literatura, a co-localização ultra-estrutural do receptor FPR com a ANXA1, na membrana plasmática dos neutrófilos. Conclusões: A exacerbação do processo inflamatório na ausência da ANXA1, sua intensa ativação gênica e expressão protéica durante a resposta inflamatória aguda mostraram que a proteína endógena ANXA1 apresenta um importante papel regulatório na ativação dos mastócitos e na diapedese dos neutrófilos. Além disso, embora o receptor FPR tenha sido co-localizado ultraestruturalmente com a proteína ANXA1, este receptor parece não estar envolvido na mediação do peptídeo Ac2-26 (porção N-terminal da ANXA1) nas células inflamatórias estudas, efeito obtido pelo pré-tratamento farmacológico nos animais deficientes para o FPR. Este fato sugere que distintos mecanismos de ação podem estar relacionados com a proteína inteira ou com o seu sítio ativo antiinflamatório, peptídeo N-terminal. Os achados experimentais poderão promover um avanço no desenvolvimento de novas terapias baseadas nas ações antiinflamatórias da anexina 1..BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe