Études génétiques moléculaires des gènes de la polarité planaire cellulaire dans les anomalies du tube neural chez l’Homme

Les anomalies du tube neural (ATN) sont des malformations congénitales parmi les plus fréquentes chez l’humain en touchant 1-2 nouveau-nés par 1000 naissances. Elles résultent d’un défaut de fermeture du tube neural pendant l’embryogenèse. Les formes les plus courantes d'ATN chez l'homme sont l'anencéphalie et le spina-bifida. Leur étiologie est complexe impliquant à la fois des facteurs environnementaux et des facteurs génétiques. Un dérèglement dans la signalisation Wnt, incluant la signalisation canonique Wnt/β-caténine et non-canonique de la polarité planaire cellulaire (PCP), peut causer respectivement le cancer ou les anomalies du tube neural (ATN). Les deux voies semblent s’antagoniser mutuellement. Dans cette étude, nous investiguons les rôles de Lrp6 et deANKRD6, entant qu’interrupteurs moléculaires entre les deux voies de signalisation Wnt, et CELSR1, en tant que membre de la PCP, chez la souris mutante Skax26m1Jus, générée par l’agent mutagène N-Ethyl-N-Nitrosuera, et dans une cohorte de patients humains ATN. Pour Lrp6, nous avons démontré que Skax26m1Jus représente un allèle hypermorphe de Lrp6 avec une augmentation de l’activité de la signalisation Wnt/canonique et une diminution de l’activité JNK induite par la voie PCP. Nous avons également montré que Lrp6Skax26m1Jus interagit génétiquement avec un mutant PCP (Vangl2Lp) où les doubles hétérozygotes ont montré une fréquence élevée d’ATN et des défauts dans la polarité des cellules ciliées de la cochlée. Particulièrement, notre étude démontre l'association des nouvelles et rares mutations faux-sens dans LRP6 avec les ATN humaines. Nous montrons que trois mutations de LRP6 causent une activité canonique réduite et non-canonique élevée. Pour ANKRD6, nous avons identifié quatre nouvelles et rares mutations faux-sens chez 0,8% des patients ATN et deux chez 1,3% des contrôles. Notamment, seulement deux, des six mutations validées (p.Pro548Leu et p.Arg632His) ont démontré un effet significatif sur l’activité de ANKRD6 selon un mode hypomorphique. Pour CELSR1, nous avons identifié une mutation non-sens dans l'exon 1 qui supprime la majeure partie de la protéine et une délétionde 12 pb. Cette perte de nucléotides ne change pas le cadre de lecture et élimine un motif putatif de phosphorylation par la PKC " SSR ". Nous avons également détecté un total de 13 nouveaux et rares variants faux-sens qui avaient été prédits comme étant pathogènes in silico. Nos données confirment le rôle inhibiteur de Lrp6 dans la signalisation PCP pendant la neurulation et indiquent aussi que les mutations faux-sens identifiées chez LRP6 et ANKRD6 pourraient affecter un équilibre réciproque et un antagonisme très sensible à un dosage précis entre les deux voies Wnt. Ces variants peuvent aussi agir comme facteurs prédisposants aux ATN. En outre, nos résultats impliquent aussi CELSR1 comme un facteur de risque pour les anomalies du tube neural ou l’agénésie caudale. Nos résultats fournissent des preuves supplémentaires que la voie de signalisation PCP a un rôle pathogène dans ces malformations congénitales et un outil important pour mieux comprendre leurs mécanismes moléculaires.Neural tube defects (NTDs) are among the most common congenital malformations in humans affecting 1–2 infants per 1000 births. NTDs are caused by failure of the neural tube to close during embryogenesis. The most common forms of NTDs in humans are anencephaly and spina bifida. Their etiology is complex implicating environmental and genetic factors. Wnt signaling has been classified as canonical Wnt/ β-catenin dependent or non-canonical planar cell polarity (PCP) pathway. Misregulation of either pathway is linked mainly to cancer or neural tube defects (NTDs) respectively. Both pathwaysseem to antagonize each other. In this study, we investigate the role of Lrp6andANKRD6 as molecular switches between both Wnt pathways as well as CELSR1 as PCP member, in a novel ENU mouse mutant of Lrp6 (Skax26m1Jus) and in human NTDs. For Lrp6, we demonstrate that Skax26m1Jus represents a hypermorphic allele of Lrp6 with increased Wnt canonical and abolished PCP-induced JNK activities. We also show that Lrp6Skax26m1Jusgenetically interacts with a PCP mutant (Vangl2Lp) where double heterozygotes showed an increased frequency of NTDs and defects in cochlear hair cells’ polarity. Importantly, our study also demonstrates the association of rare and novel missense mutations in LRP6 that is an inhibitor rather than an activator of the PCP pathway with human NTDs. We show that three LRP6 mutations in NTDs led to a reduced Wnt canonical activity and enhanced PCP signaling. For ANKRD6: We identified four rare missense mutations in 0.8% of the NTD patients and 2 rare missense mutations in 1.3% of the controls. Notably, when all 6 mutations were validated, only two mutations identified in NTD patients, p.Pro548Leu, p.Arg632His, significantly altered DIVERSIN activity in Wnt signaling assays in a hypomorphic fashion. For CELSR1: We identified one nonsense mutation in exon 1 of CELSR1 that truncates the majority of the protein in one NTD patient and one in-frame 12 bp deletion that removes a putative PKC phosphorylation“SSR” motif in one caudal agenesis patient. We also detected a total of 13 novel missense variants in 12 patients (11 NTDs and 1 caudal agenesis) that were predicted to be pathogenic in silico. Our data confirm an inhibitory role of Lrp6 in PCP signaling in neurulation and indicate that rare missense mutations in LRP6 and ANKRD6 could affect a balanced reciprocal and a highly dosage sensitive antagonism between both Wnt pathways in neurulation and act as predisposing factors to NTDs in a subset of patients. Also, our findings implicate CELSR1 as a risk factor for NTDs or caudal agenesis. Our findings provide additional evidence for a pathogenic role of PCP signaling in thesemalformations and an important tool for better understanding their molecular mechanisms

Genetic interactions between planar cell polarity genes cause diverse neural tube defects in mice

Neural tube defects (NTDs) are among the commonest and most severe forms of developmental defect, characterized by disruption of the early embryonic events of central nervous system formation. NTDs have long been known to exhibit a strong genetic dependence, yet the identity of the genetic determinants remains largely undiscovered. Initiation of neural tube closure is disrupted in mice homozygous for mutations in planar cell polarity (PCP) pathway genes, providing a strong link between NTDs and PCP signaling. Recently, missense gene variants have been identified in PCP genes in humans with NTDs, although the range of phenotypes is greater than in the mouse mutants. In addition, the sequence variants detected in affected humans are heterozygous, and can often be detected in unaffected individuals. It has been suggested that interactions between multiple heterozygous gene mutations cause the NTDs in humans. To determine the phenotypes produced in double heterozygotes, we bred mice with all three pairwise combinations of Vangl2(Lp), Scrib(Crc) and Celsr1(Crsh) mutations, the most intensively studied PCP mutants. The majority of double-mutant embryos had open NTDs, with the range of phenotypes including anencephaly and spina bifida, therefore reflecting the defects observed in humans. Strikingly, even on a uniform genetic background, variability in the penetrance and severity of the mutant phenotypes was observed between the different double-heterozygote combinations. Phenotypically, Celsr1(Crsh);Vangl2(Lp);Scrib(Crc) triply heterozygous mutants were no more severe than doubly heterozygous or singly homozygous mutants. We propose that some of the variation between double-mutant phenotypes could be attributed to the nature of the protein disruption in each allele: whereas Scrib(Crc) is a null mutant and produces no Scrib protein, Celsr1(Crsh) and Vangl2(Lp) homozygotes both express mutant proteins, consistent with dominant effects. The variable outcomes of these genetic interactions are of direct relevance to human patients and emphasize the importance of performing comprehensive genetic screens in humans

The involvement of the canonical Wnt-signaling receptor LRP5 and LRP6 gene variants with ADHD and sexual dimorphism: Association study and meta-analysis

Wnt-signaling is one of the most abundant pathways involved in processes such as cell-proliferation, -polarity, and -differentiation. Altered Wnt-signaling has been linked with several neurodevelopmental disorders including attention-deficit/hyperactivity disorder (ADHD) as well as with cognitive functions, learning and memory. Particularly, lipoprotein receptor-related protein 5 (LRP5) or LRP6 coreceptors, responsible in the activation of the canonical Wnt-pathway, were associated with cognitive alterations in psychiatric disorders. Following the hypothesis of Wnt involvement in ADHD, we investigated the association of genetic variations in LRP5 and LRP6 genes with three independent child and adolescent ADHD (cADHD) samples (total 2,917 participants), followed by a meta-analysis including previously published data. As ADHD is more prevalent in males, we stratified the analysis according to sex and compared the results with the recent ADHD Psychiatric Genomic Consortium (PGC) GWAS. Meta-analyzing our data including previously published cADHD studies, association of LRP5 intronic rs4988319 and rs3736228 (Ala1330Val) with cADHD was observed among girls (OR = 1.80 with 95% CI = 1.07–3.02, p =.0259; and OR = 2.08 with 95% CI = 1.01–4.46, p =.0026, respectively), whereas in boys association between LRP6 rs2302685 (Val1062Ile) and cADHD was present (OR = 1.66, CI = 1.20–2.31, p =.0024). In the PGC-ADHD dataset (using pooled data of cADHD and adults) tendency of associations were observed only among females with OR = 1.09 (1.02–1.17) for LRP5 rs3736228 and OR = 1.18 (1.09–1.25) for LRP6 rs2302685. Together, our findings suggest a potential sex-specific link of cADHD with LRP5 and LRP6 gene variants, which could contribute to the differences in brain maturation alterations in ADHD affected boys and girls, and suggest possible therapy targets. © 2018 The Authors. American Journal of Medical Genetics Part B: Neuropsychiatric Genetics published by Wiley Periodicals, Inc

Etude éco-biologique des thrips inféodés aux Cucurbitacées sous serre dans la région de Biskra

Peu d’études sont consacrées par les chercheurs aux groupes de thrips ravageurs des cultures en Algérie. Cependant, la motivation d’entreprendre ce travail, vise à améliorer plus les connaissances de ces insectes ravageurs dans les agro-écosystèmes de Biskra. Ainsi, l’objectif est d’inventorier en premier lieu les différentes espèces de thrips rencontrées sur les Cucurbitacées, de suivre la dynamique des populations, la distribution de Frankliniella occidentalis sur la plante, déterminer le sex-ratio, déterminer la meilleur méthode d’estimation de la population, et voir la relation entre le nombre de thrips attrapé par les pièges adhésifs et le nombre de Frankliniella occidentalis dénombré sur les feuilles et fleurs. Quatre méthodes de prélèvement ont été utilisées durant l’étude, pièges bleus adhésifs, pièges bleus à eau, secouage des feuilles et récolte des fleurs. L’étude a mis en évidence 12 espèces de thrips composées d’espèces phytophages d’intérêt économique et agronomique comme, Frankliniella occidentalis et Thrips tabaci, d’autres de moindre importance, d’une espèce prédatrice comme Aeolothrips intermedius et fongivore telle que Bolothrips icarus. Les espèces récoltées appartiennent à quatre familles, Aeolothripidae, Phlaeothripidae, Melanthripidae et Thripidae. La famille des Thripidae est la plus riche en espèces. F. occidentalis est dominante et constante sur presque toutes les cultures. La fluctuation de population générale et de F. occidentalis suivie sur les différentes variétés a montré une présence permanente des thrips du début à la fin du cycle phénologique de la plante. L’activité de vol des adultes est faible au début de la saison. Leur nombre augmente considérablement au mois de mars lorsque les températures s’élèvent. Le niveau d’infestation diffère selon la culture. Les femelles prédominent sur les cultures étudiées par rapport aux mâles. Le sex-ratio chez F. occidentalis diffère selon les cultures. Les pièges bleus adhésifs sont un bon outil pour déceler très tôt la présence des thrips dans les serres. La relation entre le nombre de thrips capturé dans les pièges bleus adhésifs et le nombre du thrips recouvré sur les fleurs et les feuilles sont en corrélation. Adopter les pièges bleus associés avec les techniques de secouage des feuilles et collecte des fleurs permet d’estimer la population du thrips californien

Régulation du canal sodique épithélial sensible à l'amiloride par les sérine-protéases et le sodium extracellulaire

Le canal sodique épithélial sensible à l'amiloride (ENaC) est une protéine composée de trois sous unités similaires [alpha][bêta][gamma] codées par trois gènes distincts et associées en un complexe hétérotétramérique [alpha]2[bêta][gamma]. ENaC est localisée au niveau de la membrane apicale des cellules épithéliales à jonctions serrées. C'est une protéine clé de la réabsorption du sodium au niveau du néphron distal, des voies aériennes supérieures et du colon distal. Son rôle dans la régulation du volume extracellulaire et la pression sanguine a été renforcé par la découverte de deux maladies génétiques humaines liées à la fonction du canal : le syndrome de Liddle et le pseudoaldostéronisme de type I (PHA I) due respectivement à un gain et une perte de fonction du canal. L'activité et l'expression de ce dernier sont finement régulées. Sa régulation par les sérines protéases et le sodium extracellulaire (auto-inhibition) a été mis en évidence par Chraïbi et collaborateurs en 1997, mais peu de choses sont connues sur les mécanismes et le rôle fonctionnel de la boucle extracellulaire dans ces différentes voies de régulation. Notre objectif est d'identifier les sites potentiels impliqués dans ces différentes voies de régulation. Pour ce faire, des mutations au niveau de la partie terminale de la boucle extracellulaire des sous unités [alpha], [bêta] et [gamma] du canal ont été réalisées par mutagenèse dirigée et l'effet des sérines protéases et du sodium extracellulaire a été étudié. Nos résultats, obtenus par la technique de voltage-clamp à deux électrodes, montrent que le domaine WPS (un domaine conservé dans les trois sous unités des différentes espèces et situé au niveau de la partie terminale de la boucle extracellulaire du canal) est impliqué dans la régulation d'ENaC par les sérines protéases et le sodium extracellulaire. Nous avons montré plus particulièrement que le tryptophane [alpha]W453 a un rôle fonctionnel majeur dans ces deux voies de régulation. Sa substitution par une arginine au niveau de la sous unité [alpha] rend ENaC résistant à la trypsine et abolit totalement l'inactivation du canal par le sodium extracellulaire. Par contre, la même mutation au niveau de la sous unité [gamma] ne change ni la réponse du canal à la trypsine ni sa sensibilité au sodium extracellulaire, alors que les canaux portant la mutation W/R au niveau de la sous unité [bêta] ont une sensibilité intermédiaire. L'ensemble de ces résultats montre le rôle fonctionnel de la boucle extracellulaire d'ENaC dans la régulation du canal par les sérine-protéases et le sodium extracellulaire

Représentations du personnage du Juif dans le roman français, allemand et anglais du dix-neuvième siècle

Cette thèse examine les relations entre la littérature et la Bible à travers trois personnages mythiques qui représentent le Juif comme l’Autre, un concept à la fois effrayant et fascinant. Elle explore l’évolution des représentations des personnages juifs ainsi que leurs convergences et divergences dans le roman anglais, allemand et français du dix-neuvième siècle. Présupposant l’existence d’un inconscient collectif commun à toute l’humanité, nous avons démontré, en partie grâce à la mythocritique, que ces personnages juifs rejouent ces trois mythes, dont la présence également dans le domaine de la peinture témoigne de leur vitalité au dix-neuvième siècle. La dernière partie, consacrée à la littérature juive de l’époque en Europe constitue une réponse à ces trois mythes évoqués et met à jour un dialogue constructif entre les auteurs juifs et non juifs, ainsi qu’une introspection respective.This thesis examines the relations between literature and the Bible through the myth of three characters, who construct the collective of ‘the Jew’ as a dangerous and fascinating Other in the nineteenth-century European mind. It examines the evolution of the representations of these characters, and their convergences and divergences in French, English and German nineteenth-century novels. The mythocritique method, taking into account the collective unconscious, reveals that the chosen characters re-enact three major myths, which demonstrate their vitality, not only in literature and theology, but also in art. A response can be found in comparative Jewish literature to these myths, completing the study and revealing a constructive dialogue and self-examination

Représentations du personnage du Juif dans le roman français, allemand et anglais du dix-neuvième siècle

Cette thèse examine les relations entre la littérature et la Bible à travers trois personnages mythiques qui représentent le Juif comme l’Autre, un concept à la fois effrayant et fascinant. Elle explore l’évolution des représentations des personnages juifs ainsi que leurs convergences et divergences dans le roman anglais, allemand et français du dix-neuvième siècle. Présupposant l’existence d’un inconscient collectif commun à toute l’humanité, nous avons démontré, en partie grâce à la mythocritique, que ces personnages juifs rejouent ces trois mythes, dont la présence également dans le domaine de la peinture témoigne de leur vitalité au dix-neuvième siècle. La dernière partie, consacrée à la littérature juive de l’époque en Europe constitue une réponse à ces trois mythes évoqués et met à jour un dialogue constructif entre les auteurs juifs et non juifs, ainsi qu’une introspection respective.This thesis examines the relations between literature and the Bible through the myth of three characters, who construct the collective of ‘the Jew’ as a dangerous and fascinating Other in the nineteenth-century European mind. It examines the evolution of the representations of these characters, and their convergences and divergences in French, English and German nineteenth-century novels. The mythocritique method, taking into account the collective unconscious, reveals that the chosen characters re-enact three major myths, which demonstrate their vitality, not only in literature and theology, but also in art. A response can be found in comparative Jewish literature to these myths, completing the study and revealing a constructive dialogue and self-examination

Représentations du personnage du Juif dans le roman français, allemand et anglais du dix-neuvième siècle

Cette thèse examine les relations entre la littérature et la Bible à travers trois personnages mythiques qui représentent le Juif comme l’Autre, un concept à la fois effrayant et fascinant. Elle explore l’évolution des représentations des personnages juifs ainsi que leurs convergences et divergences dans le roman anglais, allemand et français du dix-neuvième siècle. Présupposant l’existence d’un inconscient collectif commun à toute l’humanité, nous avons démontré, en partie grâce à la mythocritique, que ces personnages juifs rejouent ces trois mythes, dont la présence également dans le domaine de la peinture témoigne de leur vitalité au dix-neuvième siècle. La dernière partie, consacrée à la littérature juive de l’époque en Europe constitue une réponse à ces trois mythes évoqués et met à jour un dialogue constructif entre les auteurs juifs et non juifs, ainsi qu’une introspection respective.This thesis examines the relations between literature and the Bible through the myth of three characters, who construct the collective of ‘the Jew’ as a dangerous and fascinating Other in the nineteenth-century European mind. It examines the evolution of the representations of these characters, and their convergences and divergences in French, English and German nineteenth-century novels. The mythocritique method, taking into account the collective unconscious, reveals that the chosen characters re-enact three major myths, which demonstrate their vitality, not only in literature and theology, but also in art. A response can be found in comparative Jewish literature to these myths, completing the study and revealing a constructive dialogue and self-examination

On line biscuits qualities measurements

On line biscuits qualities measurements. 3. European Federation of Food Science and Technology (EFFOST) on Food Control: On-Line Control for Improved Qualit