Utilidad de MALDI-TOF MS en la identificación de garrapatas de interés médico

En España, al igual que en otros países del mundo, el espectro de enfermedades transmitidas por garrapatas, así como su incidencia, han aumentado en los últimos años. Ante un paciente con una picadura de garrapata, la identificación a nivel de especie del ejemplar puede ser complicado fuera del ámbito de los centros especializados. En base al hecho de que, las infecciones transmitidas por la picadura de garrapatas muestran una marcada especificidad vectorial, conocer la identidad de la garrapata puede resultar muy útil en la toma de decisiones clínicas, incluyendo, entre otras, la necesidad (o no) de instaurar un tratamiento antibiótico. Los métodos clásicos de identificación consisten en lainspección visual del espécimen y las técnicas de amplificación de ácidos nucleicos.Sin embargo, ninguno de estos métodos está exento de limitaciones en términos de costes, tiempo de entrega de resultados, laboriosidad, necesidad de personal altamente entrenado, etc.En los últimos años, la espectrometría de masas por desorción-ionización con láser asistida por matriz (MALDI-TOF MS), ha sido aplicada con éxito en la identificación de garrapatas. Sin embargo, el conocimiento acerca del rendimiento de esta tecnología en un contexto clínico (con pacientes reales) es mucho más limitado. Los objetivos del presente estudio fueron, en primer lugar, la optimización de un protocolo de extracción proteica y adquisición de espectros; en segundo lugar, la construcción de una biblioteca de espectros de referencia, suficientemente representativa. Dicha biblioteca fue construida a partir de los espectros adquiridos a partir de muestras de extremidades de garrapatas. Lasespecies de garrapatas que fueron incluidas en la biblioteca incluyen aquellas que suelen picar a humanos en España: Dermacentor marginatus, Dermacentor reticulatus, Haemaphysalis punctata, Hyalomma lusitanicum, Hyalomma marginatum, Ixodes ricinus, Rhipicephalus bursa, Rhipicephalus pusillus y Rhipicephalus sanguineus sensu lato. También se incluyeron aquellas especies que, con menor frecuencia, también están involucradas en picaduras a humanos en nuestro país: Haemaphysalis inermis, Haemaphysalis concinna, Hyalomma scupense, Ixodesfrontalis, Ixodes hexagonus y Argas sp. Los especímenes fueron identificados, primero visualmente, y posteriormente mediante PCR y secuenciación de un fragmento del gen ARNr 16S.La validación del protocolo se ejecutó mediante la realización secuencial de diversos test. En los primeros de estos ensayos de validación, realizados con especímenes recolectados de diversas fuentes, excepto pacientes, se obtuvo una correlación del 100% entre los métodos moleculares y la espectrometría de masas.En las segundas de estas pruebas, realizadas exclusivamente con garrapatas retiradas de pacientes, se observó una correlación del 92.59 %, y todas las especies estudiadas obtuvieron unas puntuaciones de identificación discretamente inferiores respecto a los resultados obtenidos en los primeros ensayos. Sólo se obtuvo la identificación incorrecta en el caso de dos ninfas de I. ricinus, las cuales fueron identificadas como Ctenocephalides felis (una especie de pulga). Sin embargo, el problema de discriminación entre estas dos especies difícilmente presenteun impacto clínico apreciable, debido a que ambas especies de artrópodos presentan rasgos morfológicos muy diferenciados.Tras la validación del protocolo, la tecnología MALDI-TOF MS fue incorporada en el Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa como la técnicade primera elección en la identificación de garrapatas. Tras quince meses de experiencia clínica, los resultados obtenidos permitieron confirmar el excelente rendimiento observado en los ensayos de validación. Un total de 34 ejemplares fueron remitidos al laboratorio para su identificación, de los cuales 33/34 (97,06 %) obtuvieron una identificación correcta. Tan sólo un ejemplar adulto de R. sanguineus s.l. fue incorrectamente identificado como R. pusillus, ambos con un score de identificación prácticamente idénticos (1,93 vs 1,92).Por tanto, la tecnología MALDI-TOF MS puede ser utilizada como herramienta de identificación de garrapatas, con la rápida obtención de resultados altamente fiables. De manera clave, el conocimiento de dicha información puede ayudar al clínico a la toma de importantes decisiones, que incluyen entre otras actitudes: la indicación (o no) de administrar un antibiótico, el seguimiento del paciente (la aparición de qué síntomas, y durante cuánto tiempo deben ser vigilados), la selección de pruebas serológicas. Por último, la simplicidad del protocolo que ha sido cuidadosamente optimizado durante la presente investigación permite que su implementación sea sumamente asequible para cualquierlaboratorio clínico (con una inversión inicial mínima) que esté dotado de un espectrómetro de masas.<br /

La pulga humana Pulex irritans (Siphonaptera: Pulicidae) en el noroeste argentino, una investigación de Bartonella y Rickettsia spp.

Pulex irritans is the only cosmopolitan flea species and the most studied one within the genus Pulex. It has importance in public health since it commonly parasitizes humans causing dermatitis, and it has been also implicated in the transmission of bacterial pathogens. Pulex irritans has been confused with the closely related Pulex simulans species for years. Herein, Pulex specimens collected from a Pampas fox and a Chacoan peccary from northwestern Argentina were identified by comparison with type specimens. In addition, the presence of Bartonella spp. and Rickettsia spp. was investigated using PCR assays. Our results provided characters of diagnostic importance to identify P. irritans, which include the shape of sternite VII in the females, and of the aedeagal sclerite, clasper and crochet in the males. Besides, we report for the first time P. irritans parasitizing a peccary. This finding reinforces the hypothesis of the origin of this flea associated with this mammal, and then colonizing humans and domestic mammals. There was no evidence of Bartonella or Rickettsia DNA in the analyzed fleas. This information even if negative may be considered relevant for P. irritans from Argentina.Pulex irritans es la única especie cosmopolita y la más estudiada dentro del género Pulex. Tiene importancia en la salud pública ya que comúnmente parasita a los seres humanos causando dermatitis y también ha sido implicada en la transmisión de patógenos bacterianos. Pulex irritans se ha confundido con la especie cercana Pulex simulans durante años. En este sentido, se identificaron los especímenes de Pulex recolectados de un zorro pampeano y un pecarí del Chaco del noroeste de la Argentina por comparación con los ejemplares tipo. Además, se investigó la presencia de Bartonella spp. y Rickettsia spp. utilizando ensayos de PCR. Nuestros resultados aportaron caracteres de importancia diagnóstica para identificar a P. irritans, que incluyen la forma del esternito VII en las hembras y del esclerito aedeagal, clasper y crochet en los machos. Además, se reporta por primera vez a P. irritans parasitando un pecarí. Este hallazgo refuerza la hipótesis del origen de esta pulga asociada con este mamífero y luego coloniza humanos y mamíferos domésticos. No hubo evidencia de ADN de Bartonella ni de Rickettsia en las pulgas analizadas. Esta información, si bien negativa, puede ser considerada relevante para P. irritans de Argentina.Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectore

La pulga humana Pulex irritans (Siphonaptera: Pulicidae) en el noroeste argentino, una investigación de Bartonella y Rickettsia spp.

Pulex irritans es la única especie cosmopolita y la más estudiada dentro del género Pulex. Tiene importancia en la salud pública ya que comúnmente parasita a los seres humanos causando dermatitis y también ha sido implicada en la transmisión de patógenos bacterianos. Pulex irritans se ha confundido con la especie cercana Pulex simulans durante años. En este sentido, se identificaron los especímenes de Pulex recolectados de un zorro pampeano y un pecarí del Chaco del noroeste de la Argentina por comparación con los ejemplares tipo. Además, se investigó la presencia de Bartonella spp. y Rickettsia spp. utilizando ensayos de PCR. Nuestros resultados aportaron caracteres de importancia diagnóstica para identificar a P. irritans, que incluyen la forma del esternito VII en las hembras y del esclerito aedeagal, clasper y crochet en los machos. Además, se reporta por primera vez a P. irritans parasitando un pecarí. Este hallazgo refuerza la hipótesis del origen de esta pulga asociada con este mamífero y luego coloniza humanos y mamíferos domésticos. No hubo evidencia de ADN de Bartonella ni de Rickettsia en las pulgas analizadas. Esta información, si bien negativa, puede ser considerada relevante para P. irritans de Argentina.Pulex irritans is the only cosmopolitan flea species and the most studied one within the genus Pulex. It has importance in public health since it commonly parasitizes humans causing dermatitis, and it has been also implicated in the transmission of bacterial pathogens. Pulex irritans has been confused with the closely related Pulex simulans species for years. Herein, Pulex specimens collected from a Pampas fox and a Chacoan peccary from northwestern Argentina were identified by comparison with type specimens. In addition, the presence of Bartonella spp. and Rickettsia spp. was investigated using PCR assays. Our results provided characters of diagnostic importance to identify P. irritans, which include the shape of sternite VII in the females, and of the aedeagal sclerite, clasper and crochet in the males. Besides, we report for the first time P. irritans parasitizing a peccary. This finding reinforces the hypothesis of the origin of this flea associated with this mammal, and then colonizing humans and domestic mammals. There was no evidence of Bartonella or Rickettsia DNA in the analyzed fleas. This information even if negative may be considered relevant for P. irritans from Argentina.Fil: Lareschi, Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Centro de Estudios Parasitológicos y de Vectores; ArgentinaFil: Venzal, José M.. Universidad de la República; UruguayFil: Nava, Santiago. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mangold, Atilio Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Portillo, Aránzazu. Universidad de la República; UruguayFil: Palomar Urbina, Ana María. Centro de Investigación Biomédica de La Rioja; EspañaFil: Oteo Revuelta, José Antonio. Centro de Investigación Biomédica de La Rioja; Españ

Effect of the type of surgical indication on mortality in patients with infective endocarditis who are rejected for surgical intervention

AIM: To evaluate the effect of the type of surgical indication on mortality in infective endocarditis (IE) patients who are rejected for surgery. METHODS AND RESULTS: From January 2008 to December 2016, 2714 patients with definite left-sided IE were attended in the participating hospitals. One thousand six hundred and fifty-three patients (60.9%) presented surgical indications. Five hundred and thirty-eight patients (32.5%) presented surgical indications but received medical treatment alone. The indications for surgery in these patients were uncontrolled infection (366 patients, 68%), heart failure (168 patients, 31.3%) and prevention of embolism (148 patients, 27.6%). One hundred and thirty patients (24.2%) presented more than one indication. The mortality during hospital admission was 60% (323 patients). The in-hospital mortality of patients whose indication for surgery was heart failure, uncontrolled infection or risk of embolism was 75.6%, 61.4% and 54.7%, respectively (p?<?0.001). Surgical indications due to heart failure (OR: 3.24; CI 95%: 1.99-5.9) or uncontrolled infection (OR: 1.83; CI 95%: 1.04-3.18) were independently associated with a fatal outcome during hospital admission. Mortality during the first year was 75.4%. The mortality during the first year in patients whose indication for surgery was heart failure, uncontrolled infection or risk of embolism was 85.9%, 76.7% and 72.7%, respectively (p?=?0.016). Surgical indication due to heart failure (OR: 3.03; CI 95%: 1.53-5.98) were independently associated with fatal outcome during the first year. CONCLUSIONS: The type of surgical indication is associated with mortality in IE patients who are rejected for surgical intervention

SARS-CoV-2 RNAemia is associated with severe chronic underlying diseases but not with nasopharyngeal viral load

Supported by Plan Nacional de I + D + i 2013–2016 and Instituto de Salud Carlos III, Subdirección General de Redes y Centros de Investigación Cooperativa, Ministerio de Economía, Industria y Competitividad, Spanish Network for Research in Infectious Diseases (REIPI, RD16/0016/0001, RD16/0016/0005, RD16/0016/0007, RD16/0016/0009, RD16/0016/0010, R D16/0016/0013) cofinanced by European Development Regional Fund “A way to achieve Europe”, Operative program Intelligent Growth 2014–2020. JSC and EC received grants from the Instituto de Salud Carlos III, Ministerio de Ciencia e Innovación, Proyectos de Investigación sobre el SARSCoV-2 y la enfermedad COVID-19 ( COV20/00580 ; COV20/00370 ). J.S.C. is a researcher belonging to the program “Nicolás Monardes” (C-0059–2018), Servicio Andaluz de Salud, Junta de Andalucía, Spain

Treatment with tocilizumab or corticosteroids for COVID-19 patients with hyperinflammatory state: a multicentre cohort study (SAM-COVID-19)

Objectives: The objective of this study was to estimate the association between tocilizumab or corticosteroids and the risk of intubation or death in patients with coronavirus disease 19 (COVID-19) with a hyperinflammatory state according to clinical and laboratory parameters. Methods: A cohort study was performed in 60 Spanish hospitals including 778 patients with COVID-19 and clinical and laboratory data indicative of a hyperinflammatory state. Treatment was mainly with tocilizumab, an intermediate-high dose of corticosteroids (IHDC), a pulse dose of corticosteroids (PDC), combination therapy, or no treatment. Primary outcome was intubation or death; follow-up was 21 days. Propensity score-adjusted estimations using Cox regression (logistic regression if needed) were calculated. Propensity scores were used as confounders, matching variables and for the inverse probability of treatment weights (IPTWs). Results: In all, 88, 117, 78 and 151 patients treated with tocilizumab, IHDC, PDC, and combination therapy, respectively, were compared with 344 untreated patients. The primary endpoint occurred in 10 (11.4%), 27 (23.1%), 12 (15.4%), 40 (25.6%) and 69 (21.1%), respectively. The IPTW-based hazard ratios (odds ratio for combination therapy) for the primary endpoint were 0.32 (95%CI 0.22-0.47; p < 0.001) for tocilizumab, 0.82 (0.71-1.30; p 0.82) for IHDC, 0.61 (0.43-0.86; p 0.006) for PDC, and 1.17 (0.86-1.58; p 0.30) for combination therapy. Other applications of the propensity score provided similar results, but were not significant for PDC. Tocilizumab was also associated with lower hazard of death alone in IPTW analysis (0.07; 0.02-0.17; p < 0.001). Conclusions: Tocilizumab might be useful in COVID-19 patients with a hyperinflammatory state and should be prioritized for randomized trials in this situatio

Conocimiento de los estudiantes de enfermería sobre el riesgo y manejo del paciente picado por garrapatas

Las garrapatas son artrópodos hematófagos, parásitos de mamíferos, aves y reptiles. Estos parásitos han cobrado gran importancia médica debido a que son vectores, hospedadores intermediarios y reservorios de distintos agentes infecciosos causantes de un variado espectro de enfermedades en nuestro medio. La mejor forma de prevenir la aparición de estas enfermedades es evitar las picaduras y, para ello, es necesario tener, al menos, un conocimiento mínimo de estos artrópodos, especialmente de cómo prevenir su picadura y, en caso de producirse, de cómo retirarlos correctamente. Debido a que los profesionales de enfermería pueden estar directamente implicados en la retirada de las garrapatas en un paciente y también pueden ser un medio de información/formación muy útil para la comunidad, el objetivo de este trabajo preliminar y de carácter fundamentalmente divulgativo/orientativo fue identificar los conocimientos que poseen los estudiantes de enfermería de la Universidad de La Rioja sobre las garrapatas y, especialmente, sobre el manejo de los pacientes picados por ellas. Para ello se han realizado un total de 50 encuestas de 11 preguntas relacionadas con conocimientos sobre las garrapatas, enfermedades que transmiten y actuación tras la picaduras. Como conclusión general se puede destacar que hay grandes deficiencias acerca de los conocimientos sobre las garrapatas y su importancia sanitaria entre los estudiantes de enfermería.Ticks are obligate hematophagous arthropods, parasites of mammals, birds and reptiles. These arthropods have great medical importance because they are intermediate hosts, vectors and reservoirs of different infectious agents responsible for a wide variety of diseases in our medium. The best method to prevent these diseases is to avoid tick bites and for thus it is necessary, at least, to have some knowledge of these arthropods, especially to know how to prevent their bites or how to remove correctly ticks in case of a bite. Due to nurses could be directly implicated in removing the arthropod in case of tick bite and they could also play an important role giving information on this topic, the aim of this preliminary work, with informative character, was to identify the knowledge of nursing students of the University of La Rioja on ticks and especially on the management of patients bitten by these arthropods. To carry out the study a total of 50 surveys, with 11 questions about ticks, tick-borne diseases and how to act after a tick bite, were made. As main conclusion of this work can be noticed that nursing students showed deficiencies about ticks and their clinical significance