Análises moleculares comparativas de estirpes de Herbaspirillum por PFGE, RAPD, RFLP e sequenciamento do gene que codifica o 16S rRNA

Orientadores: Prof. Emanuel Maltempi de Souza, Prof.ª Leda Satie ChubatsuTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Curso de Pós-Graduação em BioquímicaInclui referências: p. 83-105Resumo: Herbaspirillum são organismos diazotróficos endofíticos associados a importantes gramíneas. A análise por eletroforese em campo pulsado do DNA genômico da estirpe Z78 de H. seropedicae indicou a presença um único cromossoma com tamanho de aproximadamente 5700 Kb. Neste trabalho foram ainda conduzidas análise comparativa das estirpes Z78, M2, ZA69, ZA95, Z152 e Z67 de H. seropedicae e a estirpe M4 de H. rubrisubalbicans por eletroforese em campo pulsado (PFGE), polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição com endonucleases HindIII ou Dral (RFLP), polimorfismo de amplificação aleatória (RAPD), e sequenciamento parcial do o Gene que Codifica o rRNA 16S. Os resultados obtidos com PFGE mostraram que todas as estirpes de Herbaspirillum analisadas possuem genoma circular com tamanho variando de 5302 Kb para a estirpe ZA69 a 5783 Kb para as estirpes M2 e M4. Diferentes perfis de PFGE foram obtidos quando a enzima Swal foi utilizada para produzir macro fragmentos de restrição. Os resultados das análises dos quatro métodos utilizados permitiram a construção de dendrogramas de similaridade consistentes, agrupando as linhagens estudadas em três grupos distintos: grupo I inclui M2 e M4; grupo II, ZA69; e grupo III, ZA95, Z78, Z67, e Z152. O padrão de bandas resultante da amplificação aleatória (RAPD) do DNA genômico das várias estirpes apresentou um maior nível de variabilidade do que o obtido com os outros métodos: cada estirpe apresentou um único perfil eletroforético com cinco dos seis iniciadores utilizados. A estirpe M2 de H. seropedicae foi posicionada geneticamente muito próxima à estirpe M4 de H. rubrisubalbicans em todas as análises realizadas neste estudo. Os resultados obtidos por experimentos de hibridização sugeriram que as estirpes Z78, Z67, Z152 e ZA95 de H. Seropedicae, possuem 5 cópias do o Gene que Codifica o rRNA 16S e que as estirpes M2 e ZA69 de H. seropedicae e M4 de H. rubrisubalbicans possuem 4 cópias deste gene.Abstract: Herbaspirillum are endophytic diazotrophs associated with important agricultural crops. H. seropedicae strain Z78 was analysed by pulsed field gel electrophoresis, suggesting that its genome consists of one circular DNA molecule of approximately 5700 Kb. In this work we also compared six strains of H. seropedicae (Z78, M2, ZA69, ZA95, Z152 and Z67), and one strain of H. rubrisubalbicans (M4) using pulsed field gel electrophoresis (PFGE), restriction fragment length polymorphism (RFLP) using Hinólll or Dral restriction endonucleases, random amplified polymorphic DNA (RAPD), and partial sequence of 16S rRNA. Ali Herbaspirillum strains had circular chromosomes and their sizes varied from 5302Kb for strain ZA69 to 5783Kb for strains M2 e M4. Different PFGE profiles were obtained when the rare restriction endonuclease Swal was used to produce macrorestriction fragments. The analyses by the three methods produced consistent dendrograms of similarity allocating the strains studied in three distinct groups: group I consists of M2 and M4; group II, ZA69; and group III, ZA95, Z78, Z67 and Z152. The RAPD fingerprinting showed the highest variability, and each strain had a unique electrophoretic pattern with 5 of 6 primers used. H. seropedicae M2 was found genetically very close to H. rubrisubalbicans M4 by ali analyses. Hybridization experiments showed that the H. seropedicae strains Z78, Z67, Z152 and ZA95 have 5 copies of the 16S rRNA gene and H. seropedicae strains M2 and ZA69, and H. rubrisubalbicans M4 have 4 copies of this gene

Non-small cell lung cancer in never smokers: a clinical entity to be identified

OBJECTIVES: It has been recognized that patients with non-small cell lung cancer who are lifelong never-smokers constitute a distinct clinical entity. The aim of this study was to assess clinical risk factors for survival among neversmokers with non-small cell lung cancer. METHODS: All consecutive non-small cell lung cancer patients diagnosed (n = 285) between May 2005 and May 2009 were included. The clinical characteristics of never-smokers and ever-smokers (former and current) were compared using chi-squared or Student's t tests. Survival curves were calculated using the Kaplan-Meier method, and log-rank tests were used for survival comparisons. A Cox proportional hazards regression analysis was evaluated by adjusting for age (continuous variable), gender (female vs. male), smoking status (never- vs. ever-smoker), the Karnofsky Performance Status Scale (continuous variable), histological type (adenocarcinoma vs. non-adenocarcinoma), AJCC staging (early vs. advanced staging), and treatment (chemotherapy and/or radiotherapy vs. the best treatment support). RESULTS: Of the 285 non-small cell lung cancer patients, 56 patients were never-smokers. Univariate analyses indicated that the never-smoker patients were more likely to be female (68% vs. 32%) and have adenocarcinoma (70% vs. 51%). Overall median survival was 15.7 months (95% CI: 13.2 to 18.2). The never-smoker patients had a better survival rate than their counterpart, the ever-smokers. Never-smoker status, higher Karnofsky Performance Status, early staging, and treatment were independent and favorable prognostic factors for survival after adjusting for age, gender, and adenocarcinoma in multivariate analysis. CONCLUSIONS: Epidemiological differences exist between never- and ever-smokers with lung cancer. Overall survival among never-smokers was found to be higher and independent of gender and histological type

The potential use of melatonin for preventing cisplatin ototoxicity : an insight for a clinical approach

Cisplatin, one of the most effective and potent anticancer drugs, is used in the treatment of a wide variety of both pediatric and adult malignancies. However, the chemotherapeutic use of cisplatin is limited by its serious side effects, such as nephrotoxicity and ototoxicity. Ototoxicity produced by cisplatin is usually persistent, depending on the age of the patient, the cumulative number of doses, the number of chemotherapy cycles, the history of noise exposure, and deteriorating renal function. The mechanism of the ototoxicity caused by cisplatin is based on the generation of reactive oxygen species, which interfere with the antioxidant protection of the organ of Corti. Thus, protecting the cochlea with antioxidants ameliorates ototoxicity from cisplatin. In this context, melatonin appears as a therapeutic option for preventing the ototoxic effects of cisplatin, since the research in the last decade has proven its ability to be both a direct free radical scavenger and indirect antioxidant. In this sense, some of the evidence suggesting that melatonin is efficient for combating cisplatin-induced ototoxicity is summarized and discussed in this paper

Desastres no imaginário infantil: expressão gráfica e percepção dos danos no uso de um esquema classificatório de defesa civil

ResumoEste estudo teve como objetivo descrever e analisar sociologicamente os desenhos infantis feitos a partir dos desastres causados pelo furacão Katrina (nos EUA, em 2005) e pelo tsunami na Ásia (em 2004). Uma comparação é feita, tomando como base o recorte etário e a dimensão de gênero, com os elementos representados no desenho a fim identificar a existência de afinidades e/ou diferenças nas maneiras das crianças expressarem sua compreensão desses eventos. Os resultados mostram que, na dimensão etária, há quantidades comuns de elementos retratados, mas a natureza dos elementos registrados é diferente entre meninos e meninas. Palavras-chave: Desenhos infantis; Representações sociais; Desastres AbstractThis study aims at depicting and analyzing sociologically infant drawings made upon the theme of disasters caused by the hurricane Katrina (USA, 2005) and by the Tsunami in Asia (in 2004). A comparison is made, by the age and sex, with the elements represented in the drawing in order to identify the existence of affinities or differences in the ways of expressing their understanding of the events. The results show that, as to the age, there are common amounts of portrayed elements, but their very nature is differentiated between boys and girls. Keywords: Infant drawings; Social representation; Disasters 

Instrumentação endodontica mecanizada e suas evoluções - Revisão de literatura / Mechanized endodontic instrumentation and its evolutions - Literature review

A Endodontia é a área da odontologia responsável pelo estudo, pelo os sistemas de canais radiculares, tecidos periapicais e doenças que o podem atingir. Com o passar dos anos os tratamentos endodônticos vem sofrendo grandes mudanças, sendo por meio de uma nova abordagem técnica ou através de inovações tecnológicas dos instrumentos manuais ou sistemas mecanizados. Foi realizada uma pesquisa bibliográfica recorrendo à base de pesquisa Pubmed e Scielo e através da pesquisa bibliográfica foi realizada uma revisão de literatura sobre a evolução dos instrumentos endodônticos, o seu estudo se torna importante devido a grande variedade de sistemas disponíveis, visando facilitar o conhecimento dos sistemas, sendo assim, realizamos uma retrospectiva abordando os principais tipos de instrumentos criados durantes as últimas décadas. As mudanças mais relevantes foram feitas no processo de fabricação das limas, com tratamentos térmicos, gerando instrumentos mecanizados com propriedades termodinâmicas, estabilidade, sempre em busca de eficácia dos instrumentos, visando reduzir os riscos de fratura, expandindo os sistemas para o sucesso no tratamento

ORIENTAÇÃO PROFISSIONAL - PROJETO DE EXTENSÃO DO SERVIÇO DE ATENDIMENTO PSICOLÓGICO (SAP) DA UNOESC CHAPECÓ

A orientação profissional é uma atividade do psicólogo que visa contribuir para que os concluintes do ensino médio possam realizar uma escolha profissional mais consciente e madura fazendo com que cheguem na universidade com maior consciência sobre si, bem como sobre o curso que escolheram, diminuindo assim a probabilidade de troca de curso e também de trancamento. Sabe-se que a inserção do profissional psicólogo nessa área ainda é incipiente em nossa região, já que é um contexto relativamente novo, sugere-se a universidade a possibilidade de abertura de um espaço diferenciado de futura inserção profissional. Atividade esta que é de extrema relevância, pois amplia a visão do acadêmico de Psicologia para além das áreas ditas como tradicionais como a clínica, organizacional e escolar. Os objetivos do projeto foram: proporcionar aos acadêmicos a experiência de ser o facilitador no processo de orientação profissional;  apresentar aos acadêmicos a inserção do profissional psicólogo nesta área de atuação; e, construir com os acadêmicos e com os estudantes do ensino médio um processo facilitador da escolha profissional, focalizando aspectos pessoais e do mundo do trabalho. As orientações presenciais semanais, bem como as intervenções desenvolvidas pelas acadêmicas no Serviço de Atendimento Psicológico (SAP) ocorreram conforme o planejamento inicial do projeto. Os acadêmicos tiveram a oportunidade de realizar sessões individuais com jovens que procuraram o SAP em busca do processo de Orientação Profissional

RADIAÇÃO ULTRAVIOLETA NA QUALIDADE PÓS-COLHEITA DE FRUTOS DE LICHIA ‘BENGAL’

Objetivou-se avaliar a influência da radiação (UV-C) na conservação de lichias da cv. ‘Bengal’ frigoarmazenadas. Os frutos foram submetidos a exposição da luz ultravioleta em equipamento IRINOX (UV-C com λ=254 nm), acondicionados em bandeja de poliestireno expandido sem recobrimento e armazenados em câmara fria (5±0,5 ºC e 90±5 % de UR) por quinze dias. As análises foram realizadas a cada três dias e avaliados: perda de massa, atividade respiratória, pH, sólidos solúveis, acidez titulável, índice de maturação e ácido ascórbico. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial e os dados foram submetidos à análise de variância e regressão polinomial (p<0,05). A radiação UV não foi efetiva para diminuição de perda de massa. Os tratamentos de 20 e 30 minutos de exposição à radiação UV-C foram eficazes na manutenção da concentração de ácido ascórbico

The Free-Living Stage Growth Conditions of the Endophytic Fungus Serendipita indica May Regulate Its Potential as Plant Growth Promoting Microbe

Serendipita indica (former Piriformospora indica) is a non-obligate endophytic fungus and generally a plant growth and defence promoter with high potential to be used in agriculture. However, S. indica may switch from biotrophy to saprotrophy losing its plant growth promoting traits. Our aim was to understand if the free-living stage growth conditions (namely C availability) regulate S. indica’s phenotype, and its potential as plant-growth-promoting-microbe (PGPM). We grew S. indica in its free-living stage under increasing C availabilities (2–20 g L–1 of glucose or sucrose). We first characterised the effect of C availability during free-living stage growth on fungal phenotype: colonies growth and physiology (plasma membrane proton pumps, stable isotopic signatures, and potential extracellular decomposing enzymes). The effect of the C availability during the free-living stage of the PGPM was evaluated on wheat. We observed that C availability during the free-living stage regulated S. indica’s growth, ultrastructure and physiology, resulting in two distinct colony phenotypes: compact and explorer. The compact phenotype developed at low C, used peptone as the major C and N source, and displayed higher decomposing potential for C providing substrates; while the explorer phenotype developed at high C, used glucose and sucrose as major C sources and casein and yeast extract as major N sources, and displayed higher decomposing potential for N and P providing substrates. The C availability, or the C/N ratio, during the free-living stage left a legacy to the symbiosis stage, regulating S. indica’s potential to promote plant growth: wheat growth promotion by the explorer phenotype was ± 40% higher than that by the compact phenotype. Our study highlights the importance of considering microbial ecology in designing PGPM/biofertilizers. Further studies are needed to test the phenotypes under more extreme conditions, and to understand if the in vitro acquired characteristics persist under field conditions.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Functional Electrical Stimulation Improves Brain Perfusion In Cranial Trauma Patients.

Demonstrate brain perfusion changes due to neuronal activation after functional electrical stimulation (FES). It was studied 14 patients with hemiplegia who were submitted to a program with FES during fourteen weeks. Brain perfusion SPECT was performed before and after FES therapy. These patients were further separated into 2 groups according to the hemiplegia cause: cranial trauma and major vascular insults. All SPECT images were analyzed using SPM. There was a significant statistical difference between the two groups related to patient's ages and extent of hypoperfusion in the SPECT. Patients with cranial trauma had a reduction in the hypoperfused area and patients with major vascular insult had an increase in the hypoperfused area after FES therapy. FES therapy can result in brain perfusion improvement in patients with brain lesions due to cranial trauma but probably not in patients with major vascular insults with large infarct area.69682-