Ocorrência e Morfometria de pontes de miocárdio em cães

Foram estudados 30 corações de cães adultos, buscando-se evidenciar a ocorrência das pontes de miocárdio. Os corações foram fixados em solução de formol a 10% tamponada e em seguida dissecados. Pontes de miocárdio foram identificadas em 76,67% dos corações. No total, 32 pontes de miocárdio foram observadas, nas quais a frequência sobre o ramo direito (12,50%) diferiu do ramo esquerdo (87,50%) da artéria coronária. A largura média das pontes de miocárdio foi de 6,092mm. A análise histomorfológica revelou redução da luz arterial com mediana de 53,4% quando comparada ao segmento proximal à ponte de miocárdio

EVALUATION OF CANINE ROOT CANAL THERAPY USING PROTAPER® SYSTEM

Industry data for pet products has revealed that most Brazilian families have pets in their homes and that that humans give a large amount of attention to their pets. Oral diseases are among the most quickly perceived and treated of pet pathologies; and the most common of these is periodontal disease, which can affect the pulp and requires endodontic treatment. Recently, the evelopment of superelastic nickel-titanium alloys has revolutionized endodontic therapy, as the alloys have been used to develop novel rotary instruments. The goal of this study was to evaluate the efficiency of such rotary instruments in the ex vivo shaping of canine dental root canal therapy. The sample consisted of 40 canine incisors that had been extracted due to periodontal disease. The endodontic access procedure was performed, and the root canal was prepared using ProTaper® rotary instruments. Before and after shaping the canals, teeth were examined radiographically. The cervical, middle, and apical thirds were analyzed using the Image Lab® program. Results showed that the ProTaper® rotary instruments removed significant amounts of dentine (cervical third: T=-13.225, p<0.0001; middle third: W=410, p<0.000 1; apical third: W=410, p<0.0001). Regarding shaping of the canal, the apical third had expanded significantly, and there was a positive correlation between measurements in all analyzed thirds (cervical third: r=0.924; middle third: r=0.980; apical third: r=0.993.) This demonstrates an increase in the surface area of the channels in all three thirds. In this study, we conclude that the rotary instruments used were efficient in shaping root canals.Keywords: Endodontics, rotary instruments, root cana

Generation of synthetic lentiviral vector for ex vivo gene therapy

A terapia gênica consiste em introduzir uma sequência de nucleotídeos, codificante ou não-codificante, que tenha a capacidade de interferir na progressão de uma doença por ativação, inativação ou modulação da expressão de um gene alvo. Uma das rotas de transferência gênica é a ex vivo. Essa rota consiste em realizar a modificação gênica ex vivo de um tipo celular do organismo afetado, seguida do transplante celular no indivíduo para a correção do fenótipo. Dentre os vários vetores virais utilizados para transferência gênica, o sistema lentiviral é considerado um dos mais eficazes, visto que é capaz de manter altos níveis de expressão a longo prazo. Além disso, dentre os vetores virais que se integram no genoma, esse é considerado o mais seguro, tendo apresentado apenas um caso com relatado de efeito colateral sem reação adversa. Uma nova tecnologia utilizada para padronizar sistemas biológicos é a biologia sintética. Essa tecnologia pode ser utilizada como ferramenta para produzir e/ou otimizar sistemas de expressão para produção de proteínas de interesse terapêutico. O objetivo desse trabalho é gerar um vetor lentiviral sintético, para terapia gênica ex vivo, para reposição enzimática. Foram geradas quatro linhagens celulares humanas com produção transiente das proteínas terapêuticas Prot_Ctr e Prot_Mut sob controle dos promotores CMV e HeF1a. Para padronização do ensaio de transfecção, foram geradas duas linhagens celulares humanas que expressão da proteína fluorescente verde (GFP) sob controle dos mesmos promotores citados acima. Como controle negativo das linhagens produtoras da proteína terapêutica, foi gerada uma linhagem como vetor plasmidial vazio pLV_GTW_Mock. O nível de expressão do mRNA relativo às proteínas terapêuticas variou de 3.581,95 ± 1.322 a 10.377,18 ± 2.562 URE, não havendo diferenças significativas entre as linhagens produzidas (p > 0,05). O nível de produção da proteínas terapêuticas variou de 30,98 UI/mL a 241,1 UI/mL. A linhagem com maior produção dessa proteína foi a 293T/HeF1a_Prot_Mut, e essa diferença é significativa (p 0.05 ). The production level of therapeutic proteins ranged from 30.98 IU/mL to 241.1 IU/mL. The cell line with the highest production of the therapeutic protein was 93T/HeF1a_Prot_Mut+, and this difference is significant (p < 0.05 ). From the transfection of the plasmid containing the cDNA encoding the Prot_Mut and packing plasmid It was obtained lentiviral vector with the titer 1,68x107 pLV/mL. In conclusion, it is possible to generate a functional lentiviral vector carrying the Prot_Mut for use in ex vivo gene therapy. It is expected that the product of this research project generates a patent. To avoid breaking novelty, inventive activity and descriptive sufficiency, minimum requirements for patentability, the results were presented without mentioning the disease and the gene under stud

Investigation of the expression of indoleamine 2,3-dioxygenase and clinicopathological correlations in uveal melanoma

O melanoma uveal é o câncer intraocular primário mais comum, e corresponde a 85% de todos os melanomas oculares, e até 50% dos pacientes desenvolvem doença metastática. Uma vez detectada a doença metastática, a sobrevida média dos pacientes acometidos é de 6 meses, na ausência de tratamento. Atualmente, não existe um tratamento que aumente a sobrevida global de forma efetiva, devido à alta resistência às terapias. Um dos mecanismos de resistência tumoral ao tratamento seria o microambiente tumoral imunossupressor. Por isso, torna-se necessária a realização de novos estudos que evidenciem fatores com valor preditivo e possibilidades terapêuticas. A enzima indoleamina-2,3 dioxigenase (IDO1) é expressa por alguns tipos celulares e também por células tumorais. A hipótese é que a IDO1 seja regulada pelo melanoma uveal que fornece um mecanismo de imunossupressão que esteja relacionado a um pior prognóstico e resistência aos tratamentos convencionais. A expressão imuno-histoquímica de IDO1 foi avaliada em amostras parafinadas de melanomas uveais provenientes do Serviço de Patologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - USP e os achados foram correlacionados com as características morfológicas dos tumores e com a ocorrência de metástases/sobrevida dos pacientes. Os resultados obtidos no presente estudo indicam que a IDO1 é expressa apenas por células inflamatórias do microambiente tumoral em variados níveis. Foi observado que a alta densidade de células positivas para IDO1 no microambiente tumoral está associada ao desenvolvimento de metástases, mas não houve correlação com características morfológicas específicas da neoplasia. Esses resultados indicam que a IDO1 pode ser um dos mecanismos-chave para progressão tumoral e resistência às terapias.Uveal melanoma is the most common intraocular cancer, accounting for 85% of all ocular melanomas, and up to 50% of patients develop metastatic disease. Once metastatic disease is detected, the median overall survival of affected patients is 6 months in the absence of treatment. Currently, there is no effective treatment that increases overall survival, due to resistance to immunotherapies. One of the mechanisms of tumor resistance to treatment would be the immunosuppressive tumor microenvironment. Therefore, it is necessary to carry out new studies that relate those immunosupressive factors with predictive value and therapeutic possibilities. The enzyme indoleamine-2,3 dioxygenase (IDO1) is expressed by some cell types and also by tumor cells. The hypothesis is that IDO1 is regulated by uveal melanoma, which provides an immunosuppressive enviorment that is related to a worse prognosis and resistance to conventional immunotherapies. The expression of IDO1 was evaluated in samples of uveal melanomas from the Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto and from the collection of the Department of Pathology of the Faculty of Medicine of Ribeirão Preto, along with clinicopathological features. Therefore, histopathological and immunohistochemical evaluations were performed to characterize the expression of IDO1 in uveal melanomas. The results obtained in the present study suggest that IDO1 is expressed in different levels only by cells of the tumor microenvironment. It was observed that the high density of IDO1-positive cells in the tumor microenvironment is associated with the development of metastases, but not with other morphological characteristics of this neoplasm. These results indicate that IDO1 may be one of the key mechanisms for tumor progression and resistance to immunotherapies

Characterisation of microbial attack on archaeological bone

As part of an EU funded project to investigate the factors influencing bone preservation in the archaeological record, more than 250 bones from 41 archaeological sites in five countries spanning four climatic regions were studied for diagenetic alteration. Sites were selected to cover a range of environmental conditions and archaeological contexts. Microscopic and physical (mercury intrusion porosimetry) analyses of these bones revealed that the majority (68%) had suffered microbial attack. Furthermore, significant differences were found between animal and human bone in both the state of preservation and the type of microbial attack present. These differences in preservation might result from differences in early taphonomy of the bones. © 2003 Elsevier Science Ltd. All rights reserved