Expression of a novel thermostable CGTase of Archaeal origin

Dissertação de mest., Engenharia Biológica, Faculdade de Engenharia de Recursos Naturais, Universidade do Algarve, 2008The present work is referent to the optimization of the expression and production of a novel thermostable enzyme, CGTase (cyclodextrin glucanotransferase), from Archaeal origin. The origin of this gene is an important point because it is a group that is unusual to have CGTase activity. Some of the Archaeal organisms are known as thermophiles. The enzymes of thermophiles are characterized by extreme stability and activity, large potential in industries like food and chemical industries and chemical synthesis. Also in biotechnological processes the increased reaction temperatures leads to reduction of viscosity, higher reaction rates and also reduced risk of contaminations. CGTase is a thermostable enzyme and is a member of the α- amylase superfamily. It is used to produce cyclodextrins that are used in pharmaceutical industries, it is an extracellular enzyme and degrades large starch molecules that can be used by the organism. Four different strains were used to express this gene, where two of them were used to try to control the problem at the transcriptional or at the translational level. After comparison between codons from Escherichia coli, codons from the gene (CGTase) and codons from pRARE (plasmid with rare codons), a mutation was introduced in those with less percentage of codons in E.coli and one of the rare codons in the sequence showed better expression. The sequence of the mutation revealed that the construct was not under the control of the T7 promoter, having relatively lower constitutive expression of the gene, not being significantly affected with the optimizations when they were effectuated. Future work could be to put the gene of interest in the right direction (turning the gene), using the appropriate restriction enzymes and again try the right expression with BL21 Star (DE3)

Atividade física, ansiedade e gravidez

Introdução: A gravidez e a prática da atividade física (AF) são temas ainda pouco abordados na nossa sociedade. Muitas mulheres sofrem de ansiedade no período pré-natal e não conhecem os benefícios que a prática da AF tem sobre a mesma. Estudos demonstram que a AF está associada à diminuição da ansiedade, contudo poucos avaliam este efeito na gravidez. Objetivo(s): Os objetivos deste estudo foram classificar o nível de AF das grávidas; avaliar os sintomas de ansiedade e analisar a associação entre os níveis de ansiedade e a AF das gestantes. Métodos: Trata-se de um estudo longitudinal prospetivo, realizado numa amostra de 56 grávidas com idades entre os 18 e os 37 anos (29,14 ±4,641 anos). As participantes foram avaliadas em dois momentos, T1 (10-12 semanas gestacionais) e T2 (20-22 semanas gestacionais), tendo sido mensurada a AF com acelerómetros GTX3 e a ansiedade com a escala de Zung. Resultados: A média da AF leve e moderada não apresentou diferenças entre os dois momentos de avaliação; contudo, verificou-se uma tendência para a AF leve diminuir do primeiro para o segundo trimestre (1283,88 ± 530,37 vs 1098,16 ± 489,72 counts/min total semana; p=0,459) e a AF moderada aumentar (2470,62 ± 404,50 vs 2528,55 ± 493,05 counts/min total semana; p=0,459). A maioria das grávidas não cumpriu as recomendações da ACSM nos dois momentos de avaliação (T1: 72,1% e T2: 73,2%) (p=0,06). Não se verificaram diferenças no estado de ansiedade das grávidas de T1 para T2. 10,7% das grávidas apresentaram ansiedade em T1 e 7,1% em T2 (p=0,063). Cumprir ou não as recomendações da ACSM não esteve associado ao estado de ansiedade. Conclusão: Neste estudo verificámos que a maioria das gravidas não cumpre as recomendações da AF segundo ACSM, os níveis de ansiedade não diferiram ao longo da gravidez, verificámos ainda que o cumprimento das recomendações da AF não está associado aos níveis de ansiedade.Background: The pregnancy and the practice of physical activity (PA) are themes which are not approached in our society. Many women suffer from anxiety in the prenatal period and not know the benefits of the practice of PA have about the same. Studies show that physical activity is associated with decreased anxiety, however few assess this effect on pregnancy. Aim(s): The purpose of this study was to classify the level of PA pregnant, evaluate symptoms of anxiety and analyze the association between levels of anxiety and PA of pregnant women. Methods: This is a prospective longitudinal study with a sample of 56 pregnant women aged between 18 and 37 years 29,14 ±4,641 years). Participants were assessed at two time points T1 (10-12 gestational weeks ) and T2 (20-22 gestational weeks) and were measured PA with accelerometers GTX3 and anxiety with the Zung scale. Results: The mean of light and moderate PA showed no differences between the two time points however there was a trend to decrease light PA from the first to the second quarter (1283,88 ± 530,37 vs 1098,16 ± 489,72 counts/min total week; p=0,459) and moderate PA increase (2470.62 ± 404.50 vs 2528.55 ± 493.05 counts/min total week, p = 0.459). Most pregnant women do not fulfill the recommendations of the ACSM in the two time points (T1: 72,1% e T2: 73,2%) (p = 0.06). 10.7% of pregnant women reported anxiety in T1 and 7.1 % in T2 (p = 0.063). Comply or not the recommendations of the ACSM were not associated with state anxiety. Conclusion: This study found that the majority of pregnant does not meet the recommendations of the PA second ACSM , anxiety levels did not differ throughout pregnancy, found yet that compliance with the recommendations of PA is not associated with levels of anxiety

The impact of creativity at work on work-nonwork enrichment: the mediating role of meaningfulness at work

The objective of this study was to understand the relationship between creativity and work-nonwork enrichment, having meaningfulness at work as a mediator. Most literature focus on the precedents of creativity, instead of its consequences, and since it can have major impact on the individual that performs it, it is a relevant topic to understand. We also decided to study the work-nonwork dynamic since most studies are related to work-family. Since people are having children later in life or not having them at all, we consider important to be more inclusive in our study. To access our hypothesis, we presented a questionnaire to 164 employees of one consultancy company. We discovered that creative behaviors at work can contribute to enrich the private life of the employee. Additionally, we also found out that meaningfulness at work mediates this relationship.O objetivo deste estudo foi compreender a relação entre a criatividade no trabalho e o enriquecimento da vida privada que o trabalho possibilita, tendo o significado do trabalho como mediador. A maioria das publicações foca-se nos antecedentes da criatividade, em vez das suas consequências. Uma vez que esta pode ter um grande impacto no indivíduo que a realiza, é um tópico de extrema importância. Neste estudo participaram 164 trabalhadores de uma empresa de consultoria. Os resultados sugerem que os comportamentos criativos no trabalho podem contribuir para enriquecer a vida privada do trabalhador e que esta relação é mediada pelo significado que os trabalhadores atribuem ao seu trabalho. Os resultados são discutidos tendo em conta os seus contributos teóricos e empíricos, bem como as suas limitações e as possíveis investigações futuras

N-acetyl-d-glucosamine Delivery From Gels and 3D Printed Matrices: a Comparative Study

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2020, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.Contexto: Na última década tem-se visto um aumento exponencial da impressão a 3 dimensões (3D), principalmente com finalidade terapêutica, esperando-se que venha a atingir ainda maior importância com a personalização de medicamentos e produtos de saúde. De forma similar, o precursor do ácido hialurónico, N-acetil-D-Glucosamina (GlcNAc), tem sido amplamente estudado em diversas áreas devido, maioritariamente, à sua eficácia nos tratamentos de osteoartrite e artrite reumatóide, e à sua ação hidratante e elastificante quando usada topicamente. Estes exemplos, fazem com que esta substância seja usada como modelo para o desenvolvimento de novas formulações, nomeadamente recorrendo à impressão 3D. Método: Este estudo teve como objetivo testar a libertação de GlcNAc a partir de discos poliméricos produzidos por impressão 3D, o qual poderia funcionar como alternativa ao uso de geles para aplicação tópica. Filamentos de álcool polivinílico (PVA) foram usados na impressão 3D dos discos. Preparam-se 6 formulações de gel diferentes, sendo que em cada uma foram utilizados vários espessantes. Posteriormente, uma alíquota de cada formulação foi colocada no seu respetivo disco. Finalmente, foram efetuados estudos in vitro e in vivo de libertação e permeação de GlcNAc quer para os geles, quer para os discos de PVA impressos em 3D e incorporados nos geles. Resultados: Os espessantes carbómero e hidroxietilcelulose foram considerados mais adequados. No entanto, as formulações finais (discos contendo GlcNAc) não libertaram nem permearam a substância modelo quando comparados com os geles que apresentaram resultados positivos no estudo in vitro. Para além disto, o estudo in vivo foi interrompido quando ficou claro que a substância GlcNAc não estava a ser adequadamente quantificada em ambas as amostras. Conclusão: Os discos de PVA impressos em 3D contendo GlcNAc não provaram ser uma eficaz alternativa às formulações tradicionais de aplicação tópica. No entanto, a discussão cientifica e a prossecução de mais estudos permitirão melhorar os resultados obtidos.Purpose: The development of pharmacological applications via 3D printing is growing rapidly and it is expected to take over the dermopharmacy and cosmetic fields. Likewise, N-acetyl-D-Glucosamine (GlcNAc), a hyaluronic acid precursor, has been increasingly studied across a variety of research areas owing to its efficacy in osteoarthritis and rheumatoid arthritis treatments, and hydrating and elasticity increasing effects when used topically. These examples make this active substance highly stimulating for the search of alternative formulations, leading to the development of 3D printing in the cosmetics industry. Method: The aim of this study was to test the use of 3D printed matrices which could provide an alternative to the primal use of gels for topical application using GlcNAc as a model active substance. Polyvinyl alcohol (PVA) filaments were used for 3D printing the discs. 6 different gel formulations were prepared, each using a different thickener. Subsequently, a portion of each formulation was placed on its respective disc. Both gels and PVA 3D printed discs incorporated with the gels were analysed in terms of GlcNAc release and permeation in in vitro and in vivo studies. Results: Using carbomer and hydroxyethyl cellulose as the optimal thickeners, GlcNAc-loaded discs did not demonstrate an ability to release or permeate this substance, in comparison to gels that revealed positive results in the in vitro study. Furthermore, the in vivo study was stopped when it was clear that GlcNAc was not being adequately quantified from both samples. Conclusion: PVA 3D printed discs incorporated with GlcNAc have proven to be a poor alternative to using gels. This study provides possible explanations on these results and points that should be tackled to further understand and overcome them.Este trabalho foi desenvolvido com o patrocínio da University of the Arts London, London College of Fashion

A oxigenoterapia hiperbárica nas lesões neuro-músculoesqueléticas: um estudo retrospetivo

Projeto de Graduação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Licenciada em FisioterapiaObjetivo: Efetuar um levantamento de dados, através de uma análise retrospetiva, sobre a eficácia da Oxigenoterapia Hiperbárica (OTH) na reabilitação de sequelas neuro-músculoesqueléticas provocadas pela Doença de Descompressão (DD) e verificar quantos e que casos precisaram da fisioterapia. Metodologia: A amostra foi constituída por 140 indivíduos, com uma média de idades de 35,31 ± 9,49 anos, que tenham recebido tratamento de OTH em Portugal continental, nomeadamente nos serviços de medicina hiperbárica do Hospital Pedro Hispano (Matosinhos) e no centro médico subaquático de hiperbárica do Hospital das Forças Armadas (Lisboa) com o diagnóstico de DD. Resultados: Desta amostra, 129 (92,1%) dos indivíduos eram do género masculino e apenas 11 (7,9%) do género feminino. Do total, 111 (79,3%) pertenciam ao Hospital das Forças Armadas e 29 (20,7%) ao Hospital Pedro Hispano. A DD tipo 1 teve como resultado 60 (42%) de prevalência e o tipo 2 de 74 (52,9%) em 134 indivíduos, havendo 6 (4,3%) omissos. Apenas os diagnosticados com DD tipo 2, com comprometimento medular, 6 (8,1%) indivíduos realizaram fisioterapia. Conclusão: A OTH é o tratamento gold-standard para a DD e que a necessidade da fisioterapia, como tratamento complementar, revelou-se importante na DD tipo 2 com comprometimento medular.Objective: To conduct a data collection, through a retrospective analysis, on the efficacy of Hyperbaric Oxygen Therapy (HBO) in the rehabilitation of neuro-musculoskeletal sequelae caused by Decompression Disease (DD) and to verify how many and which cases required physiotherapy. Methodology: The sample consisted of 140 individuals, with a mean age of 35.31 ± 9.49 years, who had received HBO treatment in mainland Portugal, namely in the hyperbaric medicine services of Pedro Hispano Hospital (Matosinhos) and in the underwater hyperbaric medical center of the Armed Forces Hospital (Lisbon) with the diagnosis of DD. Results: Of this sample, 129 (92.1%) of the individuals were male and only 11 (7.9%) were female. Of the total, 111 (79.3%) belonged to the Armed Forces Hospital and 29 (20.7%) to the Pedro Hispano Hospital. Type 1 DD was prevalent in 60 (42%) and type 2 in 74 (52.9%) of 134 individuals, with 6 (4.3%) without information. Only 6 (8.1%) individuals underwent physiotherapy diagnosed with type 2 DD, all with spinal cord involvement. Conclusion: HBO is the gold standard treatment for DD and the need for physiotherapy, as a complementary treatment, has been shown to be important in type 2 DD with spinal cord involvement.N/

The Meta_Body Project

Meta_Body is a project first held in online virtual environment and in a “real life” art exhibition, and now carrying on in the metaverse creative flux. The project addresses two aspects — the constitution of virtual corporality and the shared creative process of avatar building, sharing, transformation and embodiment.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Tecnologias inovadoras para o processamento sequencial combinado visando a melhoria de pasteurização de ovo-produtos

A new approach combining non-thermal pre-treatments before a less intense thermal pasteurization (TP) was evaluated as an alternative to commercial egg products TP. Thus, this work aimed to evaluate the performance of pressure (50 – 400 MPa/5 – 20 min) and ultrasound (US, 50% amplitude/1 – 3 min) pre-treatments (singly and/or combined) before a shorter TP on egg products, versus commercial TP, to assess the effect on microorganisms’ inactivation (Salmonella Senftenberg 775/W and Listeria innocua) and egg quality properties. Initially, in egg white (EW), using moderate pressure (MP) followed by a shorter TP (MP-TP) allowed to reduce S. Senftenberg 775/W and Listeria innocua population up to 4.4 log₁₀ cycles, while a higher inactivation was obtained with commercial TP. Overall, the combined treatment resulted in better retention of EW properties than commercial TP. However, the meringues prepared with treated and non-treated EW showed similar global acceptability. On the other hand, for egg yolk (EY), the same inactivation level was attained with MP-TP and commercial TP, yet, in general, the combined treatment allowed obtaining EY with better quality properties. However, MP-TP treatment caused more pronounced changes in EY volatile profile, but the “Doce de ovos” prepared with this sample had a higher sensory acceptability. In liquid whole egg (LWE), the combined treatment and commercial TP achieved a similar lethal effect, with the MP-TP maintaining and/or improving some properties of pasteurized LWE. Still, the egg tart prepared based on the treated and non-treated LWEs obtained similar sensory acceptability. Posteriorly, the combination of MP and US pre-treatments with a subsequent shorter TP (MP-US-TP), applied in LWE, reached a safety level against S. Senftenberg 775/W similar to that of commercial TP. Although, the latter retained better the quality properties of raw LWE. Therefore, the results indicated that the reduction of TP intensity when applied in combination with a MP pre-treatment could be an alternative to commercial egg products TP, offering a similar safety level against S. Senftenberg 775/W, and also to maintain and/or improve egg quality properties.Uma nova abordagem combinando pré-tratamentos não térmicos seguidos de uma pasteurização térmica (PT) menos intensa foi avaliada como uma alternativa à PT comercial de ovo-produtos. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de pré-tratamentos de pressão (50 – 400 MPa/5 – 20 min) e ultrassom (US, 50% amplitude/1 – 3 min) (isoladamente e/ou combinados) antes de uma PT mais curta, na inativação de microrganismos (Salmonella Senftenberg 775/W e Listeria innocua) e nas propriedades de qualidade dos ovo-produtos, versus PT comercial. Em clara de ovo (CO), a utilização de pressão moderada (PM) seguida de uma PT mais curta (PM-PT) inativou cerca de 4,4 ciclos log₁₀ de S. Senftenberg 775/W e L. innocua, mas a PT comercial causou uma maior inativação. No geral, o tratamento combinado reteve melhor as propriedades de qualidade da CO do que a PT comercial. Porém, os merengues preparados com as amostras tratadas e não tratadas obtiveram a mesma aceitabilidade. Para a gema de ovo (GO), obteve-se o mesmo nível de inativação utilizando PM-PT e TP comercial, mas em geral, o tratamento combinado permitiu obter uma GO com melhores propriedades de qualidade. No entanto, o PM-PT causou alterações mais pronunciadas no perfil volátil da GO, mas o doce de ovos preparado com esta amostra apresentou maior aceitabilidade sensorial. Em ovo inteiro líquido (OIL), o tratamento combinado e a PT comercial alcançaram um efeito letal equivalente, todavia o tratamento de PM-PT manteve ou melhorou algumas das propriedades de qualidade do OIL pasteurizado. Além disso, as tartes de ovo preparadas com as amostras tratadas e não tratadas obtiveram aceitabilidade sensorial semelhante. Posteriormente, a combinação de pré-tratamentos de PM e US com uma PT mais curta (PM-US-PT), aplicada em OIL, alcançou o mesmo nível de inativação que a PT comercial. Contudo, a PT comercial reteve melhor as propriedades de qualidade do OIL do que o tratamento de PM-US-PT. Assim, os resultados indicaram que a redução da intensidade da PT quando aplicada em combinação com um pré-tratamento de PM pode ser uma alternativa à PT comercial, alcançando um nível de segurança semelhante, mas mantendo e/ou melhorando as propriedades de qualidade dos ovo-produtos.Programa Doutoral em Ciência e Tecnologia Alimentar e Nutriçã

Meta_Body — A Project on Shared Avatar Creation

This paper will describe the ongoing Meta_Body project, first held in an online virtual environment and in a “real life” art exhibition, now carrying on in the metaverse creative flux. The focus will be on two aspects of this project — the constitution of virtual corpo- rality and the shared creative process of avatar building, sharing, transformation and embodiment. We will explore the metaphori- cal aspects of virtual corporality and embodiment and we will approach the possibility of a creative process as an aesthetical experience.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

BIOREMEDIATION OF AGRO-INDUSTRIAL EFFLUENTS MEDIATED BY MICROALGAE

Every year, large amounts of agro-industrial effluents are produced all over the world and its sustainable management is still a technological challenge. This thesis addresses the remediation of four agro-industrial effluents (aquaculture, cattle, swine, and poultry) and an industrial effluent (landfill leachate) by treatment with biomass ash and microalgae. The pre-treatment with biomass ash allowed the partial precipitation of total solids, reduction of the turbidity and microbial load of the effluents, resulting in a partially treated effluent and a precipitate rich in mineral and organic components. The aqueous effluents were treated in batch and semi-continuous modes with the microalgae Chlorella vulgaris (Cv), Auxenochlorella protothecoides (Ap), Tetradesmus obliquus (To), Isochrysis galbana (Ig), Microchloropsis salina (Ms), and Spirulina major (Sm). Maximum biomass yields were reached for microalgae Cv (193.6 to 879.8 mg L-1 day-1) and To (236.7 to 811.7 mg L-1 day-1) in agro-industrial effluents. The remediation of effluents allowed reaching discharge values mandatory by law for total nitrogen and total phosphorus, COD, BOD5, and total solids. The precipitate obtained in the pre-treatment of the effluents and the algal biomass showed positive effects as biostimulants for the germination of watercress (Nasturtium officinale) and wheat (Triticum aestivum) seeds. The microalgae biomass was characterised and evaluated as a food supplement for mussels (Mytilus edulis) for 45 days, with changes in the contents of lipids, carbohydrates, and ash of the mussels being observed. The torrefaction of algae biomass and its mixtures with lignocellulosic biomass made it possible to obtain biochars with potential for energy recovery, use as biostimulants for seed germination, or as adsorbents for cationic pigments. The work carried out allowed to demonstrate the feasibility of treating the studied effluents by chemical precipitation and bioremediation with microalgae and to suggest different ways of valuing the solid by-products generated.Anualmente, grandes quantidades de efluentes agroindustriais são produzidas em todo o mundo e a sua gestão sustentável constitui, ainda, um desafio tecnológico. Esta tese aborda a remediação de quatro efluentes agroindustriais (aquacultura, gado bovino, gado suíno e aviário) e um efluente industrial (lixiviado de aterro) por tratamento com cinzas de biomassa e microalgas. O pré-tratamento com cinzas de biomassa permitiu provocar uma precipitação parcial dos sólidos totais, reduzir a turvação e a carga microbiana dos efluentes, originando um efluente parcialmente tratado e um precipitado rico em componentes minerais e orgânicos. Os efluentes aquosos foram tratados em modos descontínuo e semi-contínuo com as microalgas Chlorella vulgaris (Cv), Auxenochlorella protothecoides (Ap), Tetradesmus obliquus (To), Isochrysis galbana (Ig), Microchloropsis salina (Ms) e Spirulina major (Sm). Foram atingidas produtividades máximas de biomassa para as microalgas Cv de 193,6 a 879,8 mg L-1 dia-1 e To de 236,7 a 811,7 mg L-1 dia-1 em efluentes agroindustriais. A remediação dos efluentes permitiu atingir valores de descarga obrigatórios por lei para azoto total, fósforo total, CQO, CBO5 e sólidos totais. O precipitado obtido no pré-tratamento dos efluentes e a biomassa algal apresentaram efeitos positivos como bioestimulantes da germinação de sementes de agrião (Nasturtium officinale) e de trigo (Triticum aestivum). A biomassa microalgal foi caracterizada e avaliada como suplemento alimentar de mexilhões (Mytilus edulis) durante 45 dias, tendo-se observado alterações nos teores de lípidos, hidratos de carbono e cinzas dos mexilhões. A torrefação de biomassa algal e das suas misturas com biomassa lenhocelulósica permitiu obter biocarvões com potencial para valorização energética, utilização como bioestimulantes na germinação de sementes ou adsorventes para pigmentos catiónicos. O trabalho realizado demonstrou a viabilidade do tratamento dos efluentes analisados por precipitação química e biorremediação com microalgas e sugerir diferentes vias de valorização dos subprodutos sólidos gerados