Splicing mutations: making sense with antisense therapy

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Molecular e Genética). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2012Galactose-1-phosphate uridylyltransferase (GALT) transfers a UMP group from UDP-glucose to Gal1P in the second step of the Leloir pathway for galactose metabolism. Pathogenic mutations in the GALT gene cause deficient or absent activity of the enzyme and result in Classical Galactosemia. Mutational analysis of 27 Portuguese patients confirmed Q188R as the prevalent molecular defect (≈60%), and revealed the intronic variation c.820+13a>g (IVS8+13a>g) as the second most frequent mutation, accounting for 12.5% of the mutant alleles. In silico analysis revealed that the presence of the c.820+13a>g variation activates a cryptic splicing donor site and seems to create a strong ESE motif for the binding of the SRSF1 protein. A minigene-based approach was used to analyze the effects of this presumptive pre-mRNA splicing mutation. The pSPL3 vector containing either the genomic wild-type or mutant fragments was transfected into COS-7 and Hek293 cell lines. 24h after transfection, RNA was purified and amplified by RT-PCR. Direct sequencing analysis of the reaction products clearly showed that c.820+13a>g favors the next GT dinucleotide (c.820+14_15) to be used as a new 5’ splice donor site, leading to the inclusion of the first 13 nucleotides of intron 8 in the coding sequence, thus inducing a frameshift which generates a premature stop codon 17 amino acids downstream (p.D274fsX291). Additionally, in vivo studies demonstrated that, contrarily to the control individuals, a homozygous patient for c.820+13a>g mutation only presented alternative transcripts with the inclusion of the first 13 nucleotides of intron 8. Accordingly, c.820+13a>g may be considered indeed a disease-causing mutation, being the first intronic variation in the GALT gene whose molecular mechanism was elucidated. In order to revert this alternative splicing, an antisense oligonucleotide approach was attempted, using a LNA (locked nucleic acid) that was cotransfected with the minigenes in COS-7 and Hek293 cells; however, this preliminary experience was not effective, so new alternatives will be developed.A galactose-1-fosfato uridililtransferase (GALT) é a enzima responsável pelo segundo passo da via de Leloir, a principal via catabólica da galactose no organismo humano. A GALT transfere um grupo UMP da UDP-glucose para a galactose-1-fosfato (Gal1P), libertando glucose-1-fosfato (Glc1P) e formando UDP-galactose. Uma ausente ou deficiente actividade de GALT é causadora de Galactosémia Clássica (GC). A GC é uma doença metabólica rara que apresenta prevalência diversa de acordo com as diferentes populações, afecta cerca de 1 em cada 47 mil nados vivos nas populações caucasianas europeias e está associada a mutações no gene GALT. O gene GALT situa-se na região 13 do braço curto do cromossoma 9, cobre cerca de 4 kb de DNA genómico e organiza-se em 11 exões. Este gene codifica uma proteína de 379 aminoácidos com uma massa molecular de 43 kDa. A enzima activa é um homodímero com uma massa molecular total de 88 kDa. Até à data, foram já descritas mais de 200 variações no gene GALT. Embora a maioria sejam mutações pontuais do tipo missense, também foram detectadas mutações nonsense, alterações silenciosas, assim como deleções e mutações de splicing. Algumas destas variações são comuns, mas a maioria são raras e desconhece-se a sua importância funcional. As mais citadas são Q188R, K285N, S135L e N314D, sendo as duas primeiras as mais frequentes na população europeia. Estudos mutacionais em 27 doentes Portugueses confirmaram que a mutação Q188R é a prevalente (≈60%), e revelaram que a variação intrónica c.820+13a>g (IVS8+13a>g) é a segunda mais frequente, estando presente em cerca de 12,5% dos alelos mutados. Nas situações em que a conversão da Gal1P em Glc1P está comprometida, ocorre uma acumulação excessiva de galactose e de Gal1P, causando toxicidade no organismo. Actualmente, o único tratamento disponível consiste na restrição dietética de galactose, o qual diminui drasticamente a mortalidade neonatal por galactosémia. A longo prazo, apesar de salvar muitas vidas, esta terapia revela-se contudo insuficiente. Portanto, o desenvolvimento de novas terapias torna-se essencial. Os objectivos do presente estudo foram a elucidação do mecanismo patogénico subjacente à mutação c.820+13a>g, a confirmação do seu efeito in vivo e, por fim, a tentativa da sua correção através de terapia com oligonucleótidos antisense. Primeiramente, procedeu-se a um estudo in silico para prever a patogenicidade da mutação. O resultado revelou que a presença desta variação parece activar um sítio críptico (c.820+14_15) dador de splicing. Contudo, ao analisar a sequência mutada, este sítio críptico não foi reconhecido pelo programa NNSPLICE, mas apresentou uma pontuação de 0,70 no programa NetGene2. Por outro lado, aquando da análise da sequência mutada, este 5’GT críptico foi reconhecido pelos dois programas mencionados, apresentando uma pontuação de 0,95 e 0,93, respectivamente. Estas pontuações revelaram-se superiores às obtidas pelo sítio de splicing natural, o qual foi pontuado, na sequência mutada, com apenas 0,64 e 0,82 pelos programas NNSPLICE e NetGene2, respectivamente. Adicionalmente, na sequência mutada verificou-se o fortalecimento do motivo ESE (exonic splicing enhancer) para a ligação do factor de splicing SRSF1 (CCCAGGT, posições 9-15 do intrão 8). Com efeito, o ESE contendo o nucleótido mutado revelou uma pontuação de 3,906278 enquanto que a presença do nucleótido normal conferia apenas a pontuação de 1,986666, valor muito próximo do limiar do programa (1,956). Para a caracterização do mecanismo molecular subjacente a esta potencial mutação de splicing, recorreu-se à utilização da tecnologia dos minigenes. Para tal, os fragmentos genómicos de interesse, correspondentes à sequência génica normal e mutada do gene GALT, foram clonados no vector de splicing pSPL3 e designados pSPL3.wt e pSPL3.mut, respectivamente. De seguida, procedeu-se à sua transfeção em duas linhas celulares eucariotas, COS-7 e Hek293. 24 horas após transfeção, extraiu-se o RNA total celular que foi utilizado para amplificação por RT-PCR das sequências transcritas in vitro. A análise em gel de agarose do perfil transcricional das duas linhas celulares demonstrou a existência de splicings alternativos, quer nas células transfectadas com o pSPL3.wt quer com o pSPL3.mut. A sequenciação de alguns destes fragmentos revelou que, tal como previsto in silico, a mutação favorece a utilização do 5’GT críptico que se localiza nos nucleótidos imediatamente a seguir, causando um splicing alternativo. Em ambas as linhas celulares transfectadas com pSPL3.mut, mas não nas transfectadas com pSPL3.wt, ocorre a inclusão dos primeiros 13 nucleótidos do intrão 8 nos transcritos. Esta inclusão na sequência codificante leva à mudança do quadro de leitura e à criação de um codão stop prematuro 18 aminoácidos a jusante (D274fsX291). Paralelamente, estudos in vivo desmonstraram que, contrariamente ao esperado, os transcritos alternativos contendo um codão stop prematuro não sofreram NMD (nonsense mediated decay). De facto, a análise dos transcritos de um doente homozigótico para a mutação c.820+13a>g revelou, tal como nos indivíduos controlo, a presença de dois transcritos. Nos indivíduos controlo, o fragmento maior com 378pb corresponde a uma reação de splicing em que são utilizados os sítios naturais de splicing e, como tal, inclui o fim do exão 7, exão 8, exão 9 e início do exão 10; o fragmento menor com 294pb corresponde a um evento de splicing alternativo que leva à não inclusão do exão 9 na sequência final do mRNA. A análise do doente revelou o mesmo padrão de transcrição, diferindo os fragmentos observados na presença adicional dos 13 primeiros nucleótidos do intrão 8. Tendo em conta os resultados obtidos, foi possível concluir que o splicing alternativo do exão 9 não é causado pela mutação c.820+13a>g, uma vez que também ocorre nos indivíduos controlo. Desta forma, confirmou-se que a mutação c.820+13a>g (IVS8+13a>g) é de facto causadora de doença, sendo a primeira variação intrónica no gene GALT cujo mecanismo molecular foi elucidado. De seguida, e com o intuito de reverter o splicing alternativo causado pela mutação, procedeu-se a uma tentativa da sua correção utilizando oligonucleótidos antisense. Para tal, e tendo em conta a proximidade da mutação ao sítio de splicing natural, selecionou-se a utilização de um LNA (locked nuclei acid). Após cotransfeção dos minigenes e do IVS8-LNA nas linhas celulares COS-7 e Hek293, isolou-se o RNA total celular e procedeu-se à respectiva amplificação por RT-PCR. Os padrões de splicing alternativo observados em ambas as linhas celulares foram semelhantes, quer em células não-tratadas, quer em células tratadas. Adicionalmente, a sequenciação de alguns dos fragmentos obtidos revelou a presença dos 13 primeiros nucleótidos do intrão 8 tanto nas células transfectadas com pSPL3.mut como nas células cotransfectadas com pSPL3.mut e IVS8-LNA. Assim, esta experiência preliminar revelou que o tratamento não foi eficaz na correção do splicing alternativo, realçando a necessidade de melhorar a presente metodologia ou de procurar outras alternativas terapêuticas

Ecology of the common octopus "Octopus vulgaris" (Cuvier, 1797) in the Atlantic Iberian coast : life cycle strategies under different oceanographic regimes

Tese de doutoramento, Biologia (Biologia Marinha e Aquacultura), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2015Octopus vulgaris is one of the most important fishery resources in the coastal area of the Atlantic Iberian basin. One to two years lifespan, terminal semelparity with numerous eggs and the absence of generation overlap are the reasons for high variability in the species abundance between years strongly connected with environmental conditions. The overall aim of this thesis is to identify which factors, physical, environmental and biologic influencing the Octopus vulgaris life cycle. First of all, we look at the reproductive season of the species in the northwest and south Portuguese coasts and conclude that spawning depends on the local oceanographic regime but also partially on the nutritional quality of the food. The study was followed by an analysis of the local factors that influence abundance in the nursery of Ría de Vigo (Southwest Galicia). Here, the newly-hatched paralarvae concentrate in shallow waters and protected areas under the influence of the Cies islands and feed on the meso-zooplanktonic community that supply these paralarvae with the adequate nutritional requirements balanced to protein but also rich in n-3HUFA fatty acids essential for growth and survival at this stage. After settlement, the physical and environmental characteristics of the feeding grounds are essential for recruitment success. Here we identified five areas of pre-recruit aggregation along the Portuguese Coast. Finally, the age and growth were determined for juveniles of the Northwest Portuguese coast. Age estimates are fundamental tools to chronologically follow the effect of the environmental factors through the life cycle. Here, ageing methodologies using the stylets as age recorders were improved to achieve precision and accuracy in ageing estimates in this species. The results and conclusions of the thesis present important data to incorporate in the future ecosystem approach models for the assessment and management of the octopus fisheries in the Portuguese coast.Octopus vulgaris é um dos recursos marinhos mais capturados na área costeira da costa Ibérica Atlântica. A longevidade de um a dois anos, semelparidade com descendência numerosa e ausência de sobreposição de gerações faz com que a abundância da espécie varie muito de um ano para o outro em função de condições ambientais. O objetivo geral desta tese é identificar quais os fatores físicos, ambientais e biológicos que condicionam o ciclo de vida das populações de O. vulgaris da costa continental portuguesa. Para desenvolver esta tese observámos, numa primeira fase, a época reprodutiva das duas populações da costa noroeste e sul portuguesas concluindo que esta depende do regime oceanográfico local mas também é parcialmente influenciada pela disponibilidade nutricional no momento. De seguida, analisaram-se os fatores locais que fazem com que a Ría de Vigo (Galiza) seja área de berçário importante para esta espécie. Aqui as paralarvas recém-eclodidas concentram-se em águas pouco profundas do interior da ria junto às Ilhas Cies, onde se alimentam da comunidade de meso-zooplâncton que lhes fornece o equilíbrio nutricional adequado de proteínas e lípidos e o suficiente em ácidos gordos poliinsaturados da família n-3 de que necessitam para a fase de crescimento exponencial que ocorre até ao assentamento. Após o assentamento, as características físicas e ambientais e locais são essenciais para o sucesso do recrutamento à pesca. Com este trabalho, identificaram-se e caracterizaram-se cinco áreas de agregação de juvenis ao longo da costa Portuguesa. Finalmente, foram abordados a idade e o crescimento. A estimação da idade é uma ferramenta essencial para acompanhar cronologicamente o efeito dos fatores ambientais ao longo do ciclo de vida. Neste trabalho foram desenvolvidas metodologias que permitiram melhorar a precisão e a exatidão das estimativas diretas da idade dos polvos a partir da deposição de anéis de crescimento na concha vestigial. Os resultados e conclusões obtidos ao longo deste documento oferecem dados fundamentais para os modelos de abordagem ecossistémica que serão usados na futura avaliação e gestão efetiva do polvo-comum na costa continental portuguesa

Natural Hazards in Sao Vicente (Cabo Verde)

São Vicente island (República de Cabo Verde) lies within the Sahelian zone and faces a number of natural hazards, of which the most significant ones are erosion and gully formation, desertification and flash flooding hazards. Based on examples, we set out to examine the main factors involved in the development of these natural hazards from a regional point of view, while simultaneously assessing the importance of anthropic action as a structural factor. The investigation of Lazareto’s gullies (located to the west of Mindelo) aimed to determine the main factors of the gullies formation. It also sought to demonstrate that the gullies’ formation is a reliable indicator of the high rates of erosion on a regional scale. The approach to the desertification hazards was based on farmers’ perception related to the evolution of agricultural production, strategies to mitigate drought and desertification issues, consequences and future prospects based on a set of interviews conducted in Ribeira da Vinha. Finally, the intense rainfall event that occurred on August 26, 2008 was analysed to identify the main vulnerability factors of the city in light of the flash flood hazard

Exploring the crosstalk between mesenchymal stem cells and endothelial cells in bone tissue engineering

Tese de programa doutoral. Engenharia Biomédica. Universidade do Porto. Faculdade de Engenharia. 201

O ensino, a avaliação e a investigação sobre a integração do “sistema de cores” como estímulo à aprendizagem em TIC

Este documento faz parte da unidade curricular Práticas de Ensino Supervisionada e Relatório I e II (PESR), conclusiva do grau de Mestre em Ensino de Informática, da Faculdade de Ciências Sociais, da Universidade Católica Portuguesa, que integra outras componentes, nomeadamente, uma dimensão teórica acentuada no primeiro ano e uma dimensão mais prática e de investigação no 2º ano. Neste trabalho apresentamos uma apreciação de todo o trabalho realizado neste domínio, de forma integral mas sistematizada, sendo que, para isso, foi importante perceber as diferentes dimensões que compõem a formação docente neste curso, atendendo que se trata de uma profissionalização onde é preciso desenvolver diferentes saberes de forma integrada e representativos do conhecimento e das práticas relevantes associados à investigação como parte do processo de empowerment profissional. Assim sendo consta de um apontamento teórico em torno da formação e prática docente e de uma pequena investigação sobre “o sistema de cores” como motivação à aprendizagem dos alunos

Influência no Compromisso Organizacional

Resumo Esta dissertação consiste numa análise da relação entre as diferentes dimensões da justiça organizacional e as diferentes dimensões do compromisso organizacional. O principal objetivo é compreender se a perceção que os colaboradores têm relativamente à justiça organizacional tem efeito/influência no compromisso que têm com a organização onde trabalham. Para além disso, tentou perceber-se se o clima organizacional teria efeito moderador na relação destas variáveis. Fizeram parte da amostra 55 participantes de ambos os sexos, com idades compreendidas entre os 22 e 56 anos. Foi usada uma metodologia quantitativa (questionários), cuja análise permitiu chegar aos resultados pretendidos. Os resultados mostram ser divergentes: relativamente ao compromisso afetivo, este é afetado negativamente pelas duas dimensões da justiça organizacional; o compromisso normativo é afetado positivamente apenas pela justiça procedimental; e o compromisso calculativo é afetado positivamente pela justiça distributiva. O clima organizacional demonstrou ter efeito moderador apenas na relação entre a perceção de justiça distributiva e procedimental com o compromisso organizacional normativo. Deste modo terminou-se com a análise das variáveis sociodemográficas, cujos resultados mostraram que o departamento onde os colaboradores trabalham, as habilitações literárias e as horas que passam na organização têm influência na relação das variáveis em estudo.Abstract This thesis is an analysis of the relationship between the different dimensions of organizational justice and the different dimensions of organizational commitment. The main objective is to understand the perceptions that employees have regarding organizational justice has effect/influence the appointment have with the organization they work for. In addition, if it is attempted to realize the organizational environment would moderating effect on the relationship between these variables. The sample included 55 participants of both sexes , aged between 22 and 56 years. A quantitative methodology (questionnaires), whose analysis has lead to the desired outcomes was used. The results show that it is divergent: relation to affective commitment, this is negatively affected by two dimensions of organizational justice; normative commitment is positively affected only by procedural justice; and calculative commitment is positively affected by distributive justice. The organizational climate has demonstrated only moderating effect on the relationship between perceptions of distributive and procedural justice to the normative organizational commitment. Thus ended with the analysis of sociodemographic variables, the results showed that the department where employees work, the qualifications and the hours they spend in the organization influence the relationships of the variables under study

Prática de ensino supervisionada em Educação Pré-Escolar

O presente relatório pretende ilustrar a prática de ensino supervisionada desenvolvida no âmbito do Curso de Mestrado em Educação Pré-escolar, numa instituição particular de solidariedade social, com um grupo de crianças de quatro anos de idade. Considerando a importância que no processo de ensino-aprendizagem assumem as estratégias educativas adotadas, acentuamos a reflexão sobre as mesmas, no quadro de diálogo e aproximação entre pessoas e contextos. Neste sentido, aprofundamos saberes acerca dos processos de aprendizagem e desenvolvimento das crianças, bem como sobre as linhas de ação a ter em conta para promover o diálogo e a cooperação com membros da comunidade local, em ordem à valorização dos saberes de todos para a enriquecimento sociocultural do grupo. Salientam-se perspetivas de aprendizagem e desenvolvimento de matriz socio construtivista, enquanto suporte de construção colaborativa do processo educativo. Tomando em consideração as linhas de orientação do projeto curricular da instituição tivemos como principal objetivo aprofundar o conhecimento sobre as estratégias que melhor poderiam ajudar as crianças a compreenderem as atividades e tradições locais. Do ponto de vista metodológico recorremos à observação participante, como técnica principal de recolha de dados, obtidos através de notas de campo e registos fotográficos, bem como à análise de documentos disponibilizados pela instituição. Procedemos à descrição e análise de um conjunto de quatro experiências de ensino-aprendizagem promovidas no decurso da prática educativa. Os resultados apontam para a valorização dos contributos dos recursos humanos e institucionais locais na construção cultural e identitária das crianças.This report is intended to illustrate the supervised teaching practice developed within the Master Course in Preschool Education, in a private charitable organization, with a group of children four years of age. Considering the importance of the teaching process as educational strategies adopted, in this report, we emphasize the reflection as a framework for dialogue and rapprochement between people and contexts. In order to know more about the processes of learning, development of children and on the lines of action to be taken into account to promote dialogue and cooperation with local community members, working for the recovery of all of knowledge for the socio-cultural enrichment of the group. We emphasize perspectives of learning and development as a socioconstrutivste matrix, while building collaborative support of the educational process. Taking into account the guidelines of curriculum design of the institutions, we had as main objective to further knowledge about strategies that best could better help children to understand the activities and local traditions. From the methodological point of view we participant observation, as main technique of collecting data, obtained through field notes and photographic records, as well as analysis of documents provided by the institution. We proceed to the description and analysis of a set of four teaching-learning experiences promoted, earning us particular reflection the educational strategies that we use. The results point to the appreciation of the contributions of human and institutional resources in the local cultural and identity construction of children

Turismo académico: um estudo sobre os estudantes Erasmus na Universidade de Aveiro

Mestrado em Gestão e Planeamento em TurismoEste trabalho tem como principais objetivos analisar o conceito de turismo académico, que, inserido dentro da esfera do turismo educacional, diz respeito aos estudantes que se deslocam para um país estrangeiro, por um tempo inferior a um ano, com o intuito de realizar um período de estudos reconhecido academicamente. Assim, o Programa Erasmus surge como foco natural deste estudo, sendo analisado tanto ao nível europeu, como a nível nacional. Em relação ao trabalho empírico realizou-se um estudo com o objetivo de conhecer o perfil dos estudantes Erasmus na Universidade de Aveiro, para saber de que forma utilizam os recursos turísticos ao longo da sua estadia, se recomendam o destino e se regressam. Para tal, foi aplicado um inquérito por questionário a estudantes que realizaram o seu período de mobilidade Erasmus na Universidade de Aveiro entre 2006 e 2012. Concluiuse que estes estudantes sentem-se, na sua grande maioria, satisfeitos e recomendam a Universidade de Aveiro como destino Erasmus. Da amostra estudada, 48,9% já voltou a Portugal após terminado o programa. A perceção e experiência positivas sentidas pelos estudantes Erasmus é naturalmente enriquecedora para a Universidade de Aveiro, permitindo a captação crescente de estudantes internacionais, tendo consequentemente uma importância económica e cultural de grande impacte na cidade, por extravasamento natural do seu campus.This work has as main objectives to analyze the concept of academic tourism, which, within the concept of educational travel, concerns the students who go to a foreign country, for a period lower than a year, with the aim of having a period of studies officially recognized. For this reason, the Erasmus Program is the main focus of this study, being analyzed on the European level and on the national level. Empirically, it was made a study with the objective of knowing the profile of Erasmus students in Aveiro, mainly in the matter of how they use tourist resources during their mobility, if they recommend the destination and if they return to Portugal. To achieve this goal, it was applied a questionnaire to former students that did their Erasmus Program in the University of Aveiro between 2006 and 2012. It was concluded that these students feel very satisfied with their experience and they recommend the University of Aveiro as an Erasmus destination. Also, 48.9% of the respondents had already returned to Portugal after the end of their mobility. The positive perception and experience felt by the former Erasmus students is naturally enriching also for the University of Aveiro, allowing a growing attraction of international students, which consequently have an important economic and cultural impact in the city

A geografia do envelhecimento da população: oferta e procura de estruturas residenciais para idososo caso do concelho de Beja

O envelhecimento é um tema que tem vindo a alcançar singular interesse, particularmente, a partir da segunda metade do século XX, e esta mudança é consequência do fenómeno do envelhecimento que tem vindo a acentuar-se nos países desenvolvidos, e que já se nota em alguns países em desenvolvimento. O envelhecimento reveste-se de primordial relevância tanto no atual contexto de senescência das sociedades ocidentais, com particular incidência nas regiões economicamente menos dinâmicas como é o caso do interior de Portugal. De acordo com Maria João Valente Rosa (2012) apesar de o envelhecimento populacional poder ser entendido como uma história de sucesso, frequentemente é percebido como uma enorme ameaça ao futuro da sociedade em que vivemos. Neste contexto, muitos dos idosos conseguem adaptar-se à velhice e a toda esta problemática, como mais uma fase na vida, independentemente das suas limitações físicas. Mas existem outros em que a situação é o inverso e têm alterações de tal ordem que necessitam de internamento em lares. Face a este cenário, é pertinente refletir/discutir o envelhecimento e as mudanças sociais que acompanham este processo. A presente investigação debruçou-se sobre a oferta e a procura de estruturas residenciais para idosos no concelho de Beja, tendo sido aplicados questionários a idosos institucionalizados em quatro instituições diferentes nas freguesias urbanas de Salvador, Santiago Maior e São João Batista. No entanto, também tivemos em consideração os idosos que vivem em meio rural, na freguesia mais envelhecida do concelho de Beja (Quintos), e aqui também foram aplicados questionários. Podemos considerar este trabalho um estudo exploratório, no qual iremos estabelecer a comparação entre estes dois grupos de idosos. Com este estudo pretendemos entender as características do envelhecimento no concelho de Beja, as condições em que este ocorre, a perceção que os idosos têm acerca das estruturas residenciais para os acolher, e estabelecer uma comparação com a visão dos idosos que vivem nas suas próprias casas, em meio rural.Abstract: Aging is a topic that has achieved singular interest, particularly from the second half of the twentieth century, and this change is a consequence of the aging phenomenon that has become more pronounced in developed countries, and already observed in some developing nations. Aging is of paramount importance in both the current context of senescence of Western societies, with particular focus on economically less dynamic regions as is the case in the interior of Portugal. According to Maria João Valente Rosa (2012) although the population aging can be seen as a success story, it is often perceived as a major threat to the future of the society in which we live. In this context, many of the elderly can adapt to old age and to all the problems related to it and face it as another stage in life, regardless of their physical limitations. However, there are others whose situation is the reverse and they go through changes that require hospitalization in nursing homes. Considering this situation, it is pertinent to reflect / discuss aging and social changes which accompany this process. This research focused on the supply and demand of residential structures for the elderly in the municipality of Beja. In order to reach the goals, the fieldwork included the application of questionnaires to institutionalized elderly in four different institutions in the urban parishes of Salvador, Santiago Maior and S. João Batista. However, the elderly living in rural areas were also considered relevant for the research, and questionnaires were also applied in the most aged parish of the municipality of Beja (Quintos). This can be considered an exploratory study in which a comparison between these two groups of elderly people will be established. With this study we intend to understand the characteristics of aging among the residents in the municipality of Beja, analyzing the conditions under which this occurs, the perception that older people have about the residential structures to accommodate them, and establishing a comparison with the situation of the elderly living in their own homes in a rural setting.Résumé: Le vieillissement est un sujet fortement étudié, en particulier depuis la seconde moitié du XIXe siècle, ce qui prouve l’action de ce phénomène, de plus en plus accentué dans les pays développés, et qui se vérifie aussi dans les pays en développement. Actuellement, le vieillissement a un impact très important sur le plan de la sénescence des sociétés occidentales, notamment dans les régions économiquement défavorisées, telles que l’intérieur de Portugal. Selon Maria João Valente Rosa (2012), le vieillissement de la population peut être compris comme une histoire de succès, cependant, il est fréquemment conçu comme une menace à l’avenir de notre société. De cette façon, la plupart des personnes âgées tend à s’adapter aux modifications provoquées par ce processus, comme s’il s’agissait d’une phase différente, indépendamment des défaillances et limites corporelles. Toutefois, il y a des personnes âgées qui envisagent ce processus d’une manière négative. C’est pourquoi, dans ces cas, il faut garantir l’accueil en institutions spécialisées. Il est donc fondamentale de discuter et comprendre ce phénomène biologique. Cette étude est fondée sur l’offre et la recherche d’hébergements dirigées aux personnes âgées qui vivent près de Beja, en partant des questionnaires appliqués à des gens résidents en quatre foyers-logements (Salvador, Santiago Maior, São João Batista et Quintos). On peut considérer ce travail comme une recherche exploratoire, au fil de laquelle on essayera d’établir une comparaison entre les personnes âgées résidant dans des foyers situés à Beja et les personnes âgées résidant dans le foyer situé au milieu rural. En somme, on veut comprendre les caractéristiques du vieillissement dans la région de Beja, en ce qui concerne les conditions dans lesquelles il se déroule, la perception des personnes âgées quant aux foyers-logements, en comparant la vision des gens qui vivent chez eux-mêmes au milieu rural

A reabilitação respiratória para doentes com doença pulmonar obstrutiva crónica

RESUMO - CONTEXTO: A doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC) é uma doença de elevada prevalência a nível nacional e internacional, mas encontra-se presentemente subdiagnosticada e inadequadamente tratada. A reabilitação respiratória (RR), embora seja uma intervenção-padrão no tratamento da DPOC, é ainda pouco conhecida pelos profissionais e pelos doentes. Em Portugal existem doze instituições com programas de RR, mas terão os médicos de família conhecimento dos mesmos e do tratamento definido pelas guidelines para o doente com DPOC? Terão estes programas capacidade para dar resposta a todos os doentes que beneficiariam de RR? OBJECTIVOS: perceber como participam os doentes com DPOC em RR actualmente em Portugal; conhecer as percepções dos profissionais de saúde acerca da intervenção; identificar os factores que condicionam a acessibilidade do doente com DPOC a RR. MÉTODOS: desenvolvimento e aplicação de dois questionários: a coordenadores de USF – no sentido de avaliar o conhecimento, comportamentos e percepções dos médicos de família (MF) relativamente ao tratamento e gestão do doente com DPOC – e aos responsáveis pelos programas de RR – no sentido de avaliar a capacidade instalada de cada programa de RR, dificuldades de resposta e de participação de doentes com DPOC no mesmo. RESULTADOS: Poucos MF estiverem presentes em actividades de formação sobre a DPOC e parece existir um baixo nível de conhecimento dos MF acerca da RR, em geral, o que se verificou estar correlacionado (p=,000) com a baixa referenciação de doentes com DPOC para RR (9%). A oferta de RR é considerada pela maior parte dos profissionais (MF e responsáveis) como Insuficiente ou Muito insuficiente e o número de doentes com DPOC com recurso a RR anualmente nas instituições participantes é, na maior parte, reduzido (<80). Existe, além disso, um conjunto de importantes determinantes estruturais, associados ao profissional e ao doente que constituem barreiras à referenciação e participação dos doentes em RR. CONCLUSÕES: Verifica-se uma diferença significativa entre o número de doentes com DPOC registados nos cuidados de saúde primários (CSP) e o número de doentes com recurso a RR anualmente e apenas uma pequena percentagem de doentes com DPOC que beneficiariam da participação em RR está, actualmente, a ter acesso a esta intervenção em Portugal, o que pode ser justificado por diversos aspectos, como o grau de conhecimento do médico, dificuldades económicas do doente, entre outros.ABSTRACT - BACKGROUND: chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a nationally and internationally highly prevalent disease, but it is currently underdiagnosed and inadequately treated. Although pulmonary rehabilitation (PR) is a standard treatment for COPD, it is still largely unrecognised by both health care professionals and patients. In Portugal there are twelve institutions with PR programmes, but are family doctors aware of these programmes and of the guidelines for the treatment of the COPD patient? Do these programmes have the necessary capacity to respond to all patients who might benefit from PR? OBJECTIVES: to understand how COPD patients are presently participating in PR in Portugal; to know the perceptions of health professionals about PR; to identify the determinant factors of COPD patients’ accessibility to PR. METHODS: development and application of two questionnaires: to the coordinators of Family Health Care Units – looking to assess the knowledge, behavior and perceptions of primary care physicians regarding the treatment and management of the COPD patient – and to the PR programmes’ coordinators – in order to assess the programmes’ capacity and response, as well as the participation of COPD patients in each. RESULTS: few family doctors attended training sessions on COPD and there seems to be a low level of knowledge about PR in general, which is correlated (p=,000) with the also low referral of COPD patients to PR (9%). The supply of PR is considered by most participating health professionals (both family doctors and PR coordinators) as either Insufficient or Very insufficient and the number of COPD patients who annually participate in PR in responding institutions is, overall, rather low (<80). Moreover, there is an important set of structural, patient and physician-related determinants which hinder the referral to and participation of COPD patients in PR. CONCLUSIONS: there is a significant difference between the number of COPD patients in primary care registers and the number of patients participating in PR annually. Only a small percentage of COPD patients who would benefit from PR is presently having access to this intervention in Portugal, which might be explained by different factors, such as the knowledge of physicians with regards to PR, patients’ economic difficulties, among others