BMyb and response of prostatic epithelial cells to testosterone levels variations

Orientador: Hernandes Faustino de CarvalhoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Neste trabalho definimos a expressão e localização de fatores de transcrição que agem no controle de genes diferencialmente expressos na próstata ventral de ratos na ausência do andrógeno. Na primeira etapa, utilizamos análises de microarranjos de DNA, bioinformática e identificamos genes com função de reguladores da transcrição: EVI1 (Mecom), NFY, ELK1, GATA2, MYBL1, MYBL2 (BMYB), e membros da família NF?B que foram validados por imunofluorescência e qRT-PCR (Rosa-Ribeiro, Nishan, et al., 2014). Na segunda etapa, procuramos caracterizamos Bmyb na próstata ventral de ratos após a castração e também BMYB e em linhagens celulares humanas. Vimos que a expressão de Bmyb teve um aumento de cinco vezes no conteúdo relativo de RNAm e presença da sua forma ativa (fosfo-T487-BMYB) no núcleo das células epiteliais de próstata ventral de ratos três dias após a castração. Identificamos que as células LNCaP (células epiteliais de câncer de próstata humanas) expressam BMYB e as escolhemos para testar como o estímulo androgênico modula a expressão, ativação e interação de BMYB com o genoma/cromatina. Células LNCaP foram tratadas com R1881 (andrógeno sintético) 1 nM ou veículo (DMSO) por 6, 12 e 24 horas. Observou-se que o tratamento com R1881 por 12 horas resultou em diminuição da expressão de BMYB (qRT-PCR), e também em redução da forma fosforilada em T487 (Western Blotting), embora tenha o conteúdo aumentado ao longo do ciclo celular e acúmulo acentuado durante a mitose (imunofluorescência). Dupla marcação por imunofluorescência revelou que a ativação de AR por R1881 resulta em seu acúmulo no núcleo promove exclusão de fosfo-T487-BMYB. Para investigar aspectos da interação entre BMYB com cromatina de células LNCaP, submetemos o grupo de 12h tratado com R1881 e o grupo controle a técnica de ChIP-seq. As regiões de ligação de BMYB (picos) identificadas apresentaram características distintas e similares entre os dois grupos experimentais. Como imaginado, o motivo de ligação para BMYB foi encontrado enriquecido nas duas condições, porém, no grupo controle foi localizado também uma seqüência não-canônica para BMYB. Além dos motivos para BMYB, foram encontrados motivos de ligação enriquecidos para SMAD2, STAT5, STAT6 e ZFX nos dois grupos enquanto NKX2.5 e ZNF711 exclusivamente nos grupos controle e R1881, respectivamente. A presença dos motivos para BMYB nos picos, possui uma distribuição que respeita a "lei de potência" mostrando que picos com mais motivos de ligação são regiões bastante grandes e localizadas próximas ao TSS dos genes mais próximo sugerindo a formação de "campos de atividade". Considerando somente a região próxima ao TSS, há uma frequência maior de picos no grupo R1881. Com relação presença de BMYB nos cromossomos, ele tem uma distribuição similar nos dois grupos e preferencia pela região centromérica. Os genes com TSS mais próximo aos picos de BMYB, são em sua maioria "genes codificadores de proteínas" nos dois grupos. Já a respeito das regiões no genoma a localização de picos é preferencialmente em regiões "intergênicas" com exclusividade de regiões para R1881 em regiões "5¿UTR", "3¿UTR" e "Exon" dos genes. As ontologias que esses genes configuram (10 vs 55, para controle e R1881, respectivamente) são distintas para as duas condições experimentais e se referem a funções variadas considerando "biological process". Além disto, comparando os genes encontrados pelo ChIP-seq com transcriptomas da literatura, encontramos que 5% dos genes são os mesmos pelas duas abordagens e que genes como KLK3, KLK2, TMSRPS22 e NKX2.5 relacionados a biologia da próstata, estão presentes no grupo R1881. Em conclusão, os resultados obtidos são inéditos e demonstram que BMYB executa funções compatíveis com a regulação diferencial da estrutura da cromatina em diversas escalas, nos estados androgênico e hipoandrogênicoAbstract: In this work we have defined the expression and localization of transcription factors related to control of differentially expressed genes by rat ventral prostate under androgen deprivation. In the first part, using DNA microarray, bioinformatics we have identified genes with annotated function in transcription regulation: EVI1 (Mecom), NFY, ELK1, GATA2, MYBL1, MYBL2, and NF?B member family wich were validated through immunofluorescence and qRT-PCR (Rosa-Ribeiro, Nishan, et al., 2014). In the second part, we characterize Bmyb in the rat ventral prostate after castration and BMYB in prostate human cell lines. We observed that expression of Bmyb has had a five-fold increase in mRNA content and the presence of its active form (phospho-T487-BMYB) in the epithelial cell nuclei in the rat ventral prostate three days after castration. We identified that LNCaP cells (isolated from human prostate cancer epithelial cell) express BMYB and chose theses cells to test the effects of androgen stimulation on BMYB activation and interaction with the genome/chromatin. LNCaP cells were incubated with either 1 nM R1881 (a synthetic androgen) or the vehicle (DMSO) for 6, 12 or 24 hours. Treatment with R1881 for 12 hours resulted in decreased expression of BMYB (qRT-PCR), reduced content of phospho-T487-BMYB (Western Blotting), although we have shown that the content of this phosphorylated form increases along of cellular cycle and accumulates in mitotic cells (immunofluorescence). Double immunofluorescence revealed that AR activation for R1881, accumulates AR in the nucleus by R1881 and excludes phospho-T487-BMYB. To investigate aspects of BMYB interaction with the chromatin in LNCaP cells, submitted the 12h control and treated with R1881 groups to ChIP-seq. The binding regions of BMYB (peaks) identified by ChIP-seq showed distinct and similar aspects between the two experimental groups. How expected, the BMYB binding motif was found enriched in both groups, however, in the control group was also localized the non-canonical sequence to BMYB. Besides BMYB motifs, it was found enrichment motif to SMAD2, STAT5, STAT6 and ZNFX in both groups, while NKX2.5 and ZNF11 were found in control and R1881 groups, respectively. The presence of BMYB motif through the peaks, has a distribution that respect the "power law" showing that peaks with high BMYB motif concentration are huge regions near to TSS suggesting a formation of "activity fields". Analyzing regions near TSS, there is a high frequency of peaks in R1881 group. Despite of BMYB chromosome distribution, its has similar distribution in both groups and preferably centromeric occupation. The genes with closest TSS of BMYB peaks, are mostly "protein coding" in both groups. While in gene regions there is a preferential binding to "intergenic" region with exclusive regions to R1881 in "5¿UTR", "3¿UTR" and "Exon" of genes. The ontologies (10 vs 55, for the control and R1881, respectively) are distinct for each experimental condition and refer to different functions considering to transcriptomes from literature, was found that 5% of genes are the same; and gene like: KLK3, KLK2, TMPRSS22 and NKX2.5, strongly related to prostate biology, were found in R1881 group. In conclusion, the results are novel and demonstrate that BMYB patterns of genome occupation are compatible with its function in determining different chromatin structures in different scales in the androgenic and hypoandrogenic environmentsDoutoradoBiologia CelularDoutora em Biologia Celular e Estrutural2012/07512-4FAPES

Avaliação da fadiga e da qualidade de vida de pacientes com câncer colorretal em quimioterapia

Objetivo: Avaliar a fadiga e a qualidade de vida relacionada à saúde de pacientes com câncer colorretal em quimioterapia.Método:estudo descritivo, realizado com 69 pacientes entre janeiro a setembro/2019, em um hospital público de Minas Gerais. Instrumentos utilizados: questionário sociodemográfico e clínico, Quality of Life Questionnaire-Core30 e Escala de Fadiga de Piper, analisados segundo medidas de frequência, média e desvio padrão pelo softwarePSPP.Resultados: A maioria era mulheres, acima de 60 anos, casadas, aposentadas, donas de casa, com médio nível de escolaridade. Os escores de estado geral de saúde, das funções social, física, emocional e desempenho de papel foram considerados satisfatórios (médias 50-70), da função cognitiva foi boa (média>70); sintomas mais prevalentes foram perda de apetite, fadiga, dor e insônia. Quanto à fadiga, todas as dimensões tiveram média <4, considerado fadiga leve.Conclusão: A qualidade de vida apresentou escores satisfatórios e a fadiga foi classificada como leve nos pacientes em quimioterapia. Palavras-chave: Neoplasias colorretais. Qualidade de vida. Fadiga. Tratamentofarmacológico

Análise do processo argumentativo em uma unidade didática abordando a temática alimentos no ensino médio de química

A argumentação no ensino de ciências têm sido um tema relevante e objeto de estudo de várias pesquisas nos últimos anos. Assim, este trabalho constitui uma análise reflexiva sobre os componentes dos argumentos apresentados por alunos brasileiros do segundo ano do ensino médio dequímica em uma sequência de aulas planejadas para o desenvolvimento de conceitos relacionados à termoquímica, tendo como temática os alimentos. Os resultados mostram que a unidade contribuiu para o desenvolvimento de bons argumentos pelos alunos, os quais continham os elementos CDJ, além de outros argumentos mais completos contendo os elementos oposição e qualificador modal. Também foi possível observar que a mediação do professor pode ter influenciado, de certa forma, a qualidade dos argumentos dos alunos

Deteção remota aplicada à rega dos espaços verdes urbanos

A nova cultura da água visa a conservação dos recursos naturais e o aumento do rendimento produtivo da água nos espaços verdes públicos e privados. Estes espaços assumem uma relevância no bem-estar e na qualidade de vida das populações urbanas. No entanto, o aumento da área verde em climas mediterrâneos estará inevitavelmente associado ao aumento do consumo em água. A rega surge com a finalidade de fazer face às necessidades hídricas das plantas em função das caraterísticas climáticas da região. Esta situação é mais relevante quando a escolha das plantas não recai sobre as autóctones e a água para a rega tem origem na rede de distribuição de água potável. Nos últimos anos, alguns municípios em Portugal têm vindo a implementar a instalação de dois tipos distintos de contadores de água: consumo doméstico e rega. Assim, garante-se água para rega com tarifário de menor custo, visto não incluir tratamento de água residual. Desde 2012, que a vila de São Brás de Alportel implementou este sistema de rega para os jardins privados. O presente trabalho tem como objetivos o estudo da evolução dos consumos de água na rega dos espaços verdes privados que aderiram a este sistema e a monitorização da rega nos espaços verdes públicos, para uma gestão sustentável da água. A monitorização será realizada pela avaliação da qualidade dos espaços verdes através da deteção remota, integrada com a informação dos dados climáticos e dos consumos de água.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Sistema Integrado de Informação e Conhecimento: Relatório

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Mercado de trabalho: implementação de um material de apoio para técnicos recém-formados: Job market: implementation of support material for newly qualified technicians

Neste artigo, foi proposto a implementação de um material de apoio para ingressantes no mercado de trabalho, visando auxiliar a dificuldade dos trabalhadores nos quesitos de experiência e habilidades profissionais. Utilizou- se de pesquisa exploratória bibliográfica e de campo, onde os dados foram mediante questões qualitativas e quantitativas, dessa forma, realizou-se um estudo com os jovens técnicos recém-formados no ensino médio integrado aos Cursos Técnicos em Administração de Empresas, Informática para Internet e Marketing (anos de 2016, 2017 e 2018) da Escola Técnica Padre Carlos Leôncio da Silva. (ETEC Lorena - SP). Foram obtidos resultados que apontaram a carência dos jovens em seus conhecimentos para confecção de um currículo e em seu comportamento mediante as exigências do mercado de trabalho, juntamente com a falta de experiência e a qualificação profissional. Com os resultados obtidos no presente estudo, observou-se a necessidade de assessoria para os trabalhadores, ou seja, a elaboração de um material de apoio composto por técnicas organizacionais e de gestão de pessoas, empregando os atuais e eficientes conceitos administrativos e tecnológicos que atendam essa demanda

Imersão e vivência da teoria à prática na construção civil: um relato de experiência associada a um abrigo para cães

Nas últimas décadas verificou-se um aumento significativo no número de animais domésticos abandonados, principalmente cães. Dessa forma, as organizações não governamentais possuem um papel fundamental na proteção dos animais nessa situação. Para isso, além de trabalho voluntário, é necessário que as instituições possuam espaços adequados para acolher esses animais. Assim, foi desenvolvido o presente projeto de extensão com o intuito de construir uma nova baia para os cães no Abrigo Independente Paraíso de Cães da cidade de Catalão-GO. O desenvolvimento do projeto contou com as etapas de planejamento, levantamento de dados e arrecadação de materiais para enfim efetivar a execução da obra. Assim, obteve-se resultados satisfatórios, tanto para o Abrigo, quanto para os participantes do projeto, que puderam aplicar os conhecimentos adquiridos no decorrer do curso de graduação em Engenharia Civil, bem como exercitar a cidadania. Ademais, pelo projeto, foi possível estreitar os laços entre a Universidade e a comunidade catalana, desempenhando um papel importante na melhoria de vida dos animais abandonados da cidade

INGESTÃO DO FRUTO DO TUCUMÃ-DO-AMAZONAS (Astrocaryum aculeatum G. Mey) PROMOVE MODULAÇÃO DOS NÍVEIS DE COLESTEROL PLASMÁTICO EM RATOS

Entre as espécies de palmeiras existentes na região amazônica, destaca-se o tucumã-do-amazonas (Astrocaryum aculeatum G. Mey), um fruto que apresenta um alto teor de lipídeos, dos quais 60 a 80% são ácidos graxos insaturados, entre eles os ômegas 3, 6 e 9. Além disso, o fruto apresenta fitoquímicos como os flavonoides e carotenoides. Deste modo, visando observar as atividades biológicas dos compostos presentes no fruto, foram selecionados 14 ratos Wistar machos adultos divididos em grupo controle (CO), que recebeu água e grupo tucumã-do-amazonas (TU), que recebeu a polpa do tucumã-do-amazonas na concentração de 200mg/mL. Em ambos a administração foi feita por entubação gástrica durante um período de 30 dias. Após, foi realizada a coleta de sangue da aorta abdominal para as análises bioquímicas, nas quais determinou-se por quites enzimáticos-colorimétricos os níveis plasmáticos de colesterol total, triglicerídeos e glicemia. Os dados obtidos foram analisados pelo teste t de Student. Os resultados mostraram que o colesterol total do grupo TU (45,64±4,11) apresentou uma redução significativa em relação ao grupo CO (62,7±7,86) (p<0,05), o que pode estar relacionado aos fitoquímicos e ácidos graxos insaturados presentes no fruto. No entanto, para os níveis de glicose e triglicerídeos não foram detectadas alterações significativas entre os grupos experimentais. Desse modo, conclui-se que os compostos bioativos presentes na polpa do Tucumã-do-Amazonas possuem efeitos funcionais e podem auxiliar na redução de risco de doenças cardiovasculares, de modo que seu consumo pode contribuir para a promoção da saúde na população amazônica de modo sustentáve

INGESTÃO DO FRUTO DO TUCUMÃ-DO-AMAZONAS (Astrocaryum aculeatum G. Mey) PROMOVE MODULAÇÃO DOS NÍVEIS DE COLESTEROL PLASMÁTICO EM RATOS

Entre as espécies de palmeiras existentes na região amazônica, destaca-se o tucumã-do-amazonas (Astrocaryum aculeatum G. Mey), um fruto que apresenta um alto teor de lipídeos, dos quais 60 a 80% são ácidos graxos insaturados, entre eles os ômegas 3, 6 e 9. Além disso, o fruto apresenta fitoquímicos como os flavonoides e carotenoides. Deste modo, visando observar as atividades biológicas dos compostos presentes no fruto, foram selecionados 14 ratos Wistar machos adultos divididos em grupo controle (CO), que recebeu água e grupo tucumã-do-amazonas (TU), que recebeu a polpa do tucumã-do-amazonas na concentração de 200mg/mL. Em ambos a administração foi feita por entubação gástrica durante um período de 30 dias. Após, foi realizada a coleta de sangue da aorta abdominal para as análises bioquímicas, nas quais determinou-se por quites enzimáticos-colorimétricos os níveis plasmáticos de colesterol total, triglicerídeos e glicemia. Os dados obtidos foram analisados pelo teste t de Student. Os resultados mostraram que o colesterol total do grupo TU (45,64±4,11) apresentou uma redução significativa em relação ao grupo CO (62,7±7,86) (p<0,05), o que pode estar relacionado aos fitoquímicos e ácidos graxos insaturados presentes no fruto. No entanto, para os níveis de glicose e triglicerídeos não foram detectadas alterações significativas entre os grupos experimentais. Desse modo, conclui-se que os compostos bioativos presentes na polpa do Tucumã-do-Amazonas possuem efeitos funcionais e podem auxiliar na redução de risco de doenças cardiovasculares, de modo que seu consumo pode contribuir para a promoção da saúde na população amazônica de modo sustentáve