112 research outputs found

    Structural-Functional Characterization and Physiological Significance of Ferredoxin-NADP+ Reductase from Xanthomonas axonopodis pv. citri

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    Xanthomonas axonopodis pv. citri is a phytopathogen bacterium that causes severe citrus canker disease. Similar to other phytopathogens, after infection by this bacterium, plants trigger a defense mechanism that produces reactive oxygen species. Ferredoxin-NADP+ reductases (FNRs) are redox flavoenzymes that participate in several metabolic functions, including the response to reactive oxygen species. Xanthomonas axonopodis pv. citri has a gene (fpr) that encodes for a FNR (Xac-FNR) that belongs to the subclass I bacterial FNRs. The aim of this work was to search for the physiological role of this enzyme and to characterize its structural and functional properties. The functionality of Xac-FNR was tested by cross-complementation of a FNR knockout Escherichia coli strain, which exhibit high susceptibility to agents that produce an abnormal accumulation of •O2-. Xac-FNR was able to substitute for the FNR in E. coli in its antioxidant role. The expression of fpr in X. axonopodis pv. citri was assessed using semiquantitative RT-PCR and Western blot analysis. A 2.2-fold induction was observed in the presence of the superoxide-generating agents methyl viologen and 2,3-dimethoxy-1,4-naphthoquinone. Structural and functional studies showed that Xac-FNR displayed different functional features from other subclass I bacterial FNRs. Our analyses suggest that these differences may be due to the unusual carboxy-terminal region. We propose a further classification of subclass I bacterial FNRs, which is useful to determine the nature of their ferredoxin redox partners. Using sequence analysis, we identified a ferredoxin (XAC1762) as a potential substrate of Xac-FNR. The purified ferredoxin protein displayed the typical broad UV-visible spectrum of [4Fe-4S] clusters and was able to function as substrate of Xac-FNR in the cytochrome c reductase activity. Our results suggest that Xac-FNR is involved in the oxidative stress response of Xanthomonas axonopodis pv. citri and performs its biological function most likely through the interaction with ferredoxin XAC1762

    KatE from the bacterial plant pathogen ralstonia solanacearumis a monofunctional catalase controlled by HrpG that plays a major role in bacterial survival to hydrogen peroxide

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    Ralstonia solanacearum is the causative agent of bacterial wilt disease on a wide range of plant species. Besides the numerous bacterial activities required for host invasion, those involved in the adaptation to the plant environment are key for the success of infection. R. solanacearum ability to cope with the oxidative burst produced by the plant is likely one of the activities required to grow parasitically. Among the multiple reactive oxygen species (ROS)-scavenging enzymes predicted in the R. solanacearum GMI1000 genome, a single monofunctional catalase (KatE) and two KatG bifunctional catalases were identified. In this work, we show that these catalase activities are active in bacterial protein extracts and demonstrate by gene disruption and mutant complementation that the monofunctional catalase activity is encoded by katE. Different strategies were used to evaluate the role of KatE in bacterial physiology and during the infection process that causes bacterial wilt. We show that the activity of the enzyme is maximal during exponential growth in vitro and this growth-phase regulation occurs at the transcriptional level. Our studies also demonstrate that katE expression is transcriptionally activated by HrpG, a central regulator of R. solanacearum induced upon contact with the plant cells. In addition, we reveal that even though both KatE and KatG catalase activities are induced upon hydrogen peroxide treatment, KatE has a major effect on bacterial survival under oxidative stress conditions and especially in the adaptive response of R. solanacearum to this oxidant. The katE mutant strain also exhibited differences in the structural characteristics of the biofilms developed on an abiotic surface in comparison to wild-type cells, but not in the overall amount of biofilm production. The role of catalase KatE during the interaction with its host plant tomato is also studied, revealing that disruption of this gene has no effect on R. solanacearum virulence or bacterial growth in leave tissues, which suggests a minor role for this catalase in bacterial fitness in planta. Our work provides the first characterization of the R. solanacearum catalases and identifies KatE as a bona fide monofunctional catalase with an important role in bacterial protection against oxidative stress

    Red light delays programmed cell death in non-host interaction between Pseudomonas syringae pv tomato DC3000 and tobacco plants

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    Light modulates almost every aspect of plant physiology, including plant-pathogen interactions. Among these, the hypersensitive response (HR) of plants to pathogens is characterized by a rapid and localized programmed cell death (PCD), which is critical to restrict the spread of pathogens from the infection site. The aim of this work was to study the role of light in the interaction between Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 (Pto DC3000) and non-host tobacco plants. To this end, we examined the HR under different light treatments (white and red light) by using a range of well-established markers of PCD. The alterations found at the cellular level included: i) loss of membrane integrity and nuclei, ii) RuBisCo and DNA degradation, and iii) changes in nuclease profiles and accumulation of cysteine proteinases. Our results suggest that red light plays a role during the HR of tobacco plants to Pto DC3000 infection, delaying the PCD process.Fil: Moyano, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Lopez Fernandez, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Carrau, Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Nannini, Julian Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Petrocelli, Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Orellano, Elena Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Maldonado, Sara Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentin

    A plant natriuretic peptide-like molecule of the pathogen Xanthomonas axonopodis pv. citri causes rapid changes in the proteome of its citrus host

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    <p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Plant natriuretic peptides (PNPs) belong to a novel class of peptidic signaling molecules that share some structural similarity to the N-terminal domain of expansins and affect physiological processes such as water and ion homeostasis at nano-molar concentrations. The citrus pathogen Xanthomonas axonopodis pv. citri possesses a PNP-like peptide (XacPNP) uniquely present in this bacteria. Previously we observed that the expression of <it>XacPNP </it>is induced upon infection and that lesions produced in leaves infected with a XacPNP deletion mutant were more necrotic and lead to earlier bacterial cell death, suggesting that the plant-like bacterial PNP enables the plant pathogen to modify host responses in order to create conditions favorable to its own survival.</p> <p>Results</p> <p>Here we measured chlorophyll fluorescence parameters and water potential of citrus leaves infiltrated with recombinant purified XacPNP and demonstrate that the peptide improves the physiological conditions of the tissue. Importantly, the proteomic analysis revealed that these responses are mirrored by rapid changes in the host proteome that include the up-regulation of Rubisco activase, ATP synthase CF1 α subunit, maturase K, and α- and β-tubulin.</p> <p>Conclusions</p> <p>We demonstrate that XacPNP induces changes in host photosynthesis at the level of protein expression and in photosynthetic efficiency in particular. Our findings suggest that the biotrophic pathogen can use the plant-like hormone to modulate the host cellular environment and in particular host metabolism and that such modulations weaken host defence.</p

    The LOV Protein of Xanthomonas citri subsp. citri Plays a Significant Role in the Counteraction of Plant Immune Responses during Citrus Canker

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    Pathogens interaction with a host plant starts a set of immune responses that result in complex changes in gene expression and plant physiology. Light is an important modulator of plant defense response and recent studies have evidenced the novel influence of this environmental stimulus in the virulence of several bacterial pathogens. Xanthomonas citri subsp. citri is the bacterium responsible for citrus canker disease, which affects most citrus cultivars. The ability of this bacterium to colonize host plants is influenced by bacterial blue-light sensing through a LOV-domain protein and disease symptoms are considerably altered upon deletion of this protein. In this work we aimed to unravel the role of this photoreceptor during the bacterial counteraction of plant immune responses leading to citrus canker development. We performed a transcriptomic analysis in Citrus sinensis leaves inoculated with the wild type X. citri subsp. citri and with a mutant strain lacking the LOV protein by a cDNA microarray and evaluated the differentially regulated genes corresponding to specific biological processes. A down-regulation of photosynthesis-related genes (together with a corresponding decrease in photosynthesis rates) was observed upon bacterial infection, this effect being more pronounced in plants infected with the lov-mutant bacterial strain. Infection with this strain was also accompanied with the up-regulation of several secondary metabolism- and defense response-related genes. Moreover, we found that relevant plant physiological alterations triggered by pathogen attack such as cell wall fortification and tissue disruption were amplified during the lov-mutant strain infection. These results suggest the participation of the LOV-domain protein from X. citri subsp. citri in the bacterial counteraction of host plant defense response, contributing in this way to disease development.Fil: Kraiselburd, Ivana. Consejo Nacional de Invest.cientif.y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnol.conicet - Rosario. Instituto de Biologia Molecular y Celular de Rosario;Fil: Daurelio, Lucas Damian. Consejo Nacional de Invest.cientif.y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnol.conicet - Rosario. Instituto de Biologia Molecular y Celular de Rosario;Fil: Tondo, Maria Laura. Consejo Nacional de Invest.cientif.y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnol.conicet - Rosario. Instituto de Biologia Molecular y Celular de Rosario;Fil: Merelo, Paz. INSTITUT VALENCIÀ D'INVESTIGACIONS AGRÀRIES (IVIA);Fil: Cortadi, Adriana Amalia. Consejo Nacional de Invest.cientif.y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnol.conicet - Rosario. Instituto de Biologia Molecular y Celular de Rosario;Fil: Talón, Manuel. INSTITUT VALENCIÀ D'INVESTIGACIONS AGRÀRIES (IVIA);Fil: Tadeo, Francisco R.. INSTITUT VALENCIÀ D'INVESTIGACIONS AGRÀRIES (IVIA);Fil: Orellano, Elena Graciela. Consejo Nacional de Invest.cientif.y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnol.conicet - Rosario. Instituto de Biologia Molecular y Celular de Rosario

    Light modulates important physiological features of Ralstonia pseudosolanacearum during the colonization of tomato plants

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    Ralstonia pseudosolanacearum GMI1000 (Rpso GMI1000) is a soil-borne vascular phytopathogen that infects host plants through the root system causing wilting disease in a wide range of agro-economic interest crops, producing economical losses. Several features contribute to the full bacterial virulence. In this work we study the participation of light, an important environmental factor, in the regulation of the physiological attributes and infectivity of Rpso GMI1000. In silico analysis of the Rpso genome revealed the presence of a Rsp0254 gene, which encodes a putative blue light LOV-type photoreceptor. We constructed a mutant strain of Rpso lacking the LOV protein and found that the loss of this protein and light, influenced characteristics involved in the pathogenicity process such as motility, adhesion and the biofilms development, which allows the successful host plant colonization, rendering bacterial wilt. This protein could be involved in the adaptive responses to environmental changes. We demonstrated that light sensing and the LOV protein, would be used as a location signal in the host plant, to regulate the expression of several virulence factors, in a time and tissue dependent way. Consequently, bacteria could use an external signal and Rpsolov gene to know their location within plant tissue during the colonization process.Fil: Tano, María Josefina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Ripa, Maria Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Tondo, Maria Laura. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; ArgentinaFil: Carrau, Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Petrocelli, Silvana. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; ArgentinaFil: Rodriguez, María Victoria. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; ArgentinaFil: Ferreira, Virginia. Universidad de la República. Facultad de Química; UruguayFil: Siri, María Inés. Universidad de la República. Facultad de Química; UruguayFil: Piskulic, Laura. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas; ArgentinaFil: Orellano, Elena Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentin

    Evaluación curricular e implementación de un plan de mejora orientado hacia el alcance de la calidad educativa en una IE pública del departamento del Atlántico

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    La presente investigación es cualitativa y está enmarcada en el campo de la investigación educativa con un diseño de estudio de caso, se profundizó en la evaluación y análisis del currículo de una institución educativa pública del departamento del Atlántico a través del Modelo CIPP con el objetivo de identificar áreas a fortalecer conducentes al diseño e implementación de un Plan de mejoramiento orientado al rediseño curricular. La evaluación realizada mediante este modelo permitió valorar cada uno de los componentes del currículo, lo que requirió la utilización de técnicas como grupo focal, entrevista, observación, encuesta, análisis documental. Los datos obtenidos fueron analizados y triangulados aportando información relevante en relación con las debilidades y necesidades que adolece el currículo, logrando obtener información útil que determinaron oportunidades de mejora. Los resultados hallados por la investigación indican que el currículo no es pertinente porque no hay coherencia entre éste y las condiciones sociales y necesidades del entorno de los estudiantes. Este trabajo de profundización aporta al conocimiento en investigación evaluativa en lo referente a evaluación curricular e implementación de planes de mejora como herramienta que le permite a las IE alcanzar las metas y la calidad educativa

    Actividad tripanocida y antibacteriana de extractos de Alvaradoa subovata Cronquist

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    En el presente trabajo se estudió la actividad antioxidante, antibacteriana y tripanocida de extractos de Alvaradoa subovata. La mayor actividad depuradora de  radicales libres se observó en el extracto etanólico de corteza (CI50 = 4.7 ± 0.18 µg/mL). El extracto en diclorometano de  madera inhibió el crecimiento de la  bacteria fitopatógena Xanthomona axonopodis con una CIM = 100 µg/mL. El mismo extracto mostró inhibición del crecimiento de Trypanosoma cruzi (CI50 =  0.063 ± 0.003 mg/mL). Una fracción de este extracto (100 ug/mL), cuyo componente mayoritario es emodina, inhibió en un 60% el crecimiento del parásito.  Los compuestos mayoritarios detectados en el extracto de madera fueron antraquinonas, entre las cuales se identificaron emodina y crisofanol, y la cumarina  escopoletina. Estos tres compuestos podrían servir como marcadores analíticos del extracto. Los resultados de este trabajo muestran que los extractos de A.  subovata constituyen una fuente de compuestos bioactivos con potencial como antiparasitarios y plaguicidas

    Aportes en la elucidación de la respuesta promovida por Gluconacetobacter diazotrophicus como biocontrolador de Ralstonia solanacearum GMI1000

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    Gluconacetobacter diazotrophicus (Gd) es una bacteria endófita promotora del crecimiento vegetal (PGPBEs). La asociación planta-PGPBE beneficia a la planta hospedadora mediante la fitoestimulación, biofertilización y protección contra patógenos. Ralstonia solanacearum (Rso) es la bacteria responsable de la marchitez bacteriana en tomate, y causa enormes pérdidas económicas. El objetivo de este trabajo fue estudiar la acción de Gd PAL5 como agente de biocontrol evaluando los mecanismos antagónicos de esta bacteria durante el estrés biótico producido por Rso GMI1000. La motilidad bacteriana es de importancia en el proceso de colonización de la planta por parte del endófito, por eso se ensayaron las motilidades tipo swimming, swarmming y twiching en placas de Petri con medio LGI-P con concentraciones diferentes de agar y se observó la migración de las bacterias y la morfología de los bordes de las colonias. Los ensayos de biocontrol se realizaron mediante estudios in vivo e in vitro. Plantas de Arabidopsis thaliana Col0 se inocularon con 10^6 UFC/mL de Gd, luego de 3 semanas, se inocularon por raíz con 10^6 UFC/mL de Rso. Luego de 12 días: I- Las plantas se esterilizaron superficialmente y extractos de los distintos órganos se sembraron en medios selectivos para cada bacteria. II- Se tomaron muestras a distintos días post inoculación con Gd y Rso, se fijaron en FAA, cortaron y tiñeron con safranina-fast green y azul de toluidina (1%). III- Se cuantificó colorimétricamente el contenido de clorofila a y clorofila b en hojas de plantas sometidas a distintos tratamientos. Además, se buscaron posibles compuestos antimicrobianos mediante experimentos in vitro ensayando la actividad antibacteriana de fracciones de cultivo de la bacteria endófita (medio extracelular, contenido celular y cultivo bacteriano), con la técnica de superposición con soft agar. Bajo las condiciones ensayadas Gd presentó motilidad tipo swarming, que le permite una migración rápida y coordinada, que junto a la producción de exopolisacáridos juegan un rol sustancial en la interacción con la planta. Los ensayos de biocontrol in vivo muestran: a) estructuras anatómicas del tallo más conservadas en plantas con Gd evidenciándose aumento de xilema, mayor lignificación y mayor cantidad de tejido esclerosado entre los haces vasculares; b) técnicas histoanatómicas y los resultados de recuentos bacterianos revelaron mayor proliferación del fitopatógeno en plantas no tratadas con Gd; c) A su vez, se observó una concentración menor de pigmentos en plantas no inoculadas con Gd. En los ensayos in vitro se evidenció actividad antagonista de la fracción celular del cultivo de Gd contra Rso. Los resultados del presente trabajo muestran que Gd coloniza las plantas de A. thaliana ejerciendo un rol protector frente a Rso.Fil: Srebot, Maria Sol. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Botánica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rodriguez, María Victoria. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Botánica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ansaldi, Nazarena. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Botánica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Tano, María Josefina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Carrau, Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Fernandez, Armando Eduardo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Botánica; ArgentinaFil: Martinez, María Laura. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Botánica; ArgentinaFil: Cortadi, Adriana Amalia. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Botánica; ArgentinaFil: Orellano, Elena Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaXV Congreso Argentino de Microbiología; V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos: V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos y XIV Congreso Argentino de Microbiología GeneralCiudad de Buenos AiresArgentinaSociedad Argentina de Microbiología Genera

    The Monofunctional Catalase KatE of Xanthomonas axonopodis pv. citri Is Required for Full Virulence in Citrus Plants

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    BACKGROUND: Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac) is an obligate aerobic phytopathogen constantly exposed to hydrogen peroxide produced by normal aerobic respiration and by the plant defense response during plant-pathogen interactions. Four putative catalase genes have been identified in silico in the Xac genome, designated as katE, catB, srpA (monofunctional catalases) and katG (bifunctional catalase). METHODOLOGY/PRINCIPAL FINDINGS: Xac catalase activity was analyzed using native gel electrophoresis and semi-quantitative RT-PCR. We demonstrated that the catalase activity pattern was regulated in different growth stages displaying the highest levels during the stationary phase. KatE was the most active catalase in this phase of growth. At this stage cells were more resistant to hydrogen peroxide as was determined by the analysis of CFU after the exposition to different H(2)O(2) concentrations. In addition, Xac exhibited an adaptive response to hydrogen peroxide, displaying higher levels of catalase activity and H(2)O(2) resistance after treatment with sub-lethal concentrations of the oxidant. In the plant-like medium XVM2 the expression of KatE was strongly induced and in this medium Xac was more resistant to H(2)O(2). A XackatE mutant strain was constructed by insertional mutagenesis. We observed that catalase induction in stationary phase was lost meanwhile the adaptive response to peroxide was maintained in this mutant. Finally, the XackatE strain was assayed in planta during host plant interaction rendering a less aggressive phenotype with a minor canker formation. CONCLUSIONS: Our results confirmed that in contrast to other Xanthomonas species, Xac catalase-specific activity is induced during the stationary phase of growth in parallel with the bacterial resistance to peroxide challenge. Moreover, Xac catalases expression pattern is modified in response to any stimuli associated with the plant or the microenvironment it provides. The catalase KatE has been shown to have an important function for the colonization and survival of the bacterium in the citrus plant during the pathogenic process. Our work provides the first genetic evidence to support a monofunctional catalase as a virulence factor in Xac
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