Plant extracts: isolation, characterization, encapsulation in lipid nanosystems and cytotoxicity in AGS cells

Dissertação de mestrado em Bioquímica AplicadaPlants contain essential products for the maintenance of the cell (lipids, proteins, carbohydrates and nucleic acids) and by-products that come from several biosynthetic pathways. These by-products are named phytochemicals and include phenols, glycosides, alkaloids and terpenoids. Phytochemicals possess interesting potential biological activities, however, some are extremely unstable, which could be a handicap in potential application of these plant extracts. In this work, Phytolacca americana L., Tagete patula L., Cotoneaster horizontalis Decne, Rosmarinus officinalis L. and Aloe barbadensis Miller were chosen for extraction and characterisation of their phytochemicals and also to evaluate their anticancer potential using non-encapsulated and lipid encapsulated extracts. Various spectroscopic and chromatographic techniques have been used for extract composition analysis, namely 1H- and 13C-NMR, HPLC-DAD, HRMS, IR, UV-Vis. Saponins, terpenes, phenolics, carotenoids and anthraquinone type compounds are amongst the phytochemicals present in the extracts. In the case of rosemary, it was possible to isolate and fully identify a single compound, verbenone. All the extracts/fractions from these species have shown toxicity against human adenocarcinoma stomach cells and only the toxicity of extract (after hydrolysis) from pokeweed and verbenone are related to processes leading to cell necrosis. The encapsulation of extract obtained before hydrolysis from pokeweed and of one fraction collected from French marigold have shown high efficiencies up to 98%; however the encapsulation of extract obtained from pokeweed after hydrolysis, has shown a lower efficiency. Overall, the results obtained are interesting and encouraging for further studies.As plantas contêm produtos essenciais para a manutenção da célula (lípidos, proteínas, carboidratos e ácidos nucleicos) e subprodutos que vêm de várias vias biossintéticas. Esses subprodutos são denominados fitoquímicos e incluem fenóis, glicosídeos, alcaloides e terpenoides. Os fitoquímicos possuem interessantes atividades biológicas; no entanto, alguns são extremamente instáveis, o que poderia ser uma desvantagem na potencial aplicação destes extratos vegetais. Neste trabalho, Phytolacca americana L., Tagete patula L., Cotoneaster horizontalis Decne, Rosmarinus officinalis L. e Aloe barbadensis Miller foram escolhidas para a extração e caracterização dos seus fitoquímicos e também para avaliar o seu potencial anticancerígeno utilizando extratos encapsulados e não encapsulados. Diversas técnicas espectroscópicas e cromatográficas foram utilizadas para a determinação da composição do extrato, principalmente RMN de 1H e 13C, HPLC-DAD, HRMS, IV, UV-Vis. Saponinas, terpenos, compostos fenólicos, carotenoides e antraquinonas estão entre os fitoquímicos presentes nos extratos. No caso do alecrim, foi possível isolar e identificar completamente um único composto, a verbenona. Todos os extratos/frações destas espécies mostraram toxicidade contra células de adenocarcinoma do estômago humano e apenas a toxicidade do extrato (após hidrólise) da uva-de cão e a verbenona estão relacionadas a processos que levam à necrose celular. O encapsulamento do extrato obtido antes da hidrólise da uva-de-cão e de uma fração obtida do cravo da França apresentaram elevedas eficiências com valores até 98%; no entanto, o encapsulamento do extrato obtido da uva-de-cão após hidrólise, mostrou uma baixa eficiência. No geral, os resultados obtidos são interessantes e encorajadores para estudos futuros.Thanks are due to Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT-Portugal) and FEDER through the project PTDC/ASP-AGR/30154/201

QR code: uma nova forma de consumo e estratégia de marketing?

Diariamente o Marketing conhece novos horizontes, uma vez que o crescimento tecnológico é constante, de modo a fazer face às diferentes e incessantes necessidades dos consumidores, sendo por isso necessário criar novas estratégias, ferramentas e meios de actuação. A actual e crescente tendência dos dispositivos móveis, como é o exemplo dos smartphones, começa a influenciar e modificar, em parte, alguns dos hábitos de consumo e, como tal, o Marketing móvel começou intensificar as suas estratégias através das SMS, MMS, GPS, códigos Qr, entre outros. Nesta dissertação daremos especial atenção ao código Qr, que se trata de um tipo de mobile tag 2D, tendo em conta as suas características, utilidades, suportes utilizados, vantagens e desvantagens inerentes. As originais utilidades dadas aos códigos Qr por determinadas empresas e marcas, capta a atenção para o código que consegue ligar o mundo offline com o mundo online de uma forma eficaz desde que as premissas necessárias existam. Apurou-se, através deste estudo, que a utilização dos códigos de resposta rápida depende essencialmente do valor que estes acrescentam ao consumidor, da disponibilidade de rede wireless, do risco e confiança que transmitem. Concluiu-se também que os hábitos de consumo e de utilização das diversas tecnologias não mudaram totalmente, alguns apenas se adaptaram às novas oportunidades.Everyday Marketing knows new horizons because of the constant technologic growth, being able to face the different consumer’s necessities. Consequently these facts encourage the creation of new strategies, tools and means of action. The nowadays risen of mobile devices trends - a good example are the smartphones- is influencing and modifying some consumption habits which has made Mobile Marketing started to intensify their strategies through SMS, MMS, GPS and also Qr Codes. In this dissertation will be given special attention to Qr Code defined as a type of 2D mobile tag. It will be also analyzed his utilities, characteristics, advantages, disadvantages and used supports. Brands and enterprises have been focus their attention in Qr Code original utilities, establishing a link between the offline world and the online world. This study allowed concluding that the using of Quick Response code depends essentially on the value that it adds to consumer’s life; wireless web availability risk and trust that these codes transmit. Nevertheless, it was also concluded the consumption habits and vary technology have not changed totally; some of them just have made some adjustments according to new opportunities

Interleukin-15 and phytohaemagglutinin: a combination to study human CD8+T cell differentiation in vitro

Estudos prévios realizados no nosso laboratório avaliando a influência da IL-15 na expansão e diferenciação antigénio-independente de células humanas T CD8+, demonstraram que esta citocina é capaz de induzir a expressão de novo de recetores natural killer (NKR) em linfócitos T CD8+CD56- purificados, após 12 dias de cultura. Células T CD8+ NK-like induzidas pela IL-15 apresentavam um fenótipo regulatório (efetor/memória) e a expressão aumentada de NKR estava intrinsecamente relacionada com aquisição de CD56. O principal objetivo deste trabalho foi estabelecer condições de cultura ideais de modo a manter culturas de longo prazo de linfócitos T CD8+ e estudar caraterísticas fenotípicas destas células T CD8+ diferenciadas. Para esse fim, linfócitos T CD8+ foram isolados a partir de PBMC de dadores de sangue saudáveis por purificação magnética, e cultivados na presença contínua de IL-15 em combinação com estímulos via TCR através do mitogénio específico para células T, fitohemaglutinina (PHA). A expressão do marcador prototípico de NK, CD56, foi avaliada por citometria de fluxo semanalmente, em combinação com parâmetros de crescimento celular e sobrevivência. Através da combinação de IL-15 e PHA conseguimos manter em cultura linfócitos T CD8+ por longos períodos de tempo (até 90 dias). Durante este período, as células T CD8+ adquiriram morfologia grande e granular, e uma fração destas células, sobretudo blastos, expressaram o marcador prototípico de células NKT, CD56. Particularmente, o estabelecimento de culturas a longo prazo de células T CD8+ diferenciadas só foi possível quando a IL-15 foi combinada cada duas semanas com o estímulo da PHA. Estes resultados sugerem o estabelecimento de linfócitos T CD8+ altamente diferenciados em resultado da combinação de sinais TCR-dependentes e TCRindependentes

Clinical, Cytological, Histopathological and Immunohistochemical Features of a T-Zone Lymphoma in a Mixed-Breed Dog

Background: Non-Hodgkin lymphoma are a group of lymphoid neoplasms originated from the proliferation of precursors or mature, T, B and/ or NK lymphocytes. T-Zone lymphoma (TZL) is characterized as an indolent lymphoma due to its slow progression and poor chemotherapy´s response. Dogs affected by this neoplasm may live for many years without clinical signs and are often underdiagnosed. The aim of the present article is report a TZL case in a nine-year old male mixed breed dog, submitted to clinical follow-up and chemotherapy. Case: A nine-year old male mixed-breed dog was presented due to the observation of an increased left mandibular lymph node. The previous cytological examination was suggestive of reactive hyperplasia and histopathological examination, by incisional biopsy, compatible with lymphocytic low-grade lymphoma. Physical examination revealed enlarged and firm left mandibular lymph node and adequate physical condition.A cytological examination was performed in the mandibular and  both popliteal lymph nodes and revealed many small lymphocytes with hyperchromatic chromatin, rarely evident nucleolus and whose cytoplasm often projected in the form of a “hind-mirror” or “comet tail”, compatible with lymphocytic lymphoma (low grade) and suggestive of TZL, in the both lymph nodes. The histopathological and immunohistochemical examination, of the mandibular lymph node, were chosen to confirm the diagnosis. At histopathology it was observed 40% of the sample contained a monotonous cell population, composed by small lymphocytes, with some presenting “hand-mirror” morphology. Two mitotic figures were evidenced per field of high magnification (40x), inferring a low-grade disease. Immunohistochemical analysis revealed neoplastic proliferation with immunolabeling of CD3 lymphocytes and positivity for Ki-67, but negative for CD20, CD79a, CD45, MUM-1 and PAX-5. Although there is no consensus about requirements and treatment´s efficacy, it has been chosen to treat the dog with chlorambucil, because of the elevated Ki-67 value (48%). The patient obtained a free-progression interval higher than 820 days, from the earlier investigations of lymphadenopathy, with excellent quality of life and no side effects related to the use of chlorambucil. Discussion: Although TZL is a common subtype of lymphoproliferative disease in dog, it is still underdiagnosed. The TZL diagnosis can be suggested by cytology, from the disclosures in neoplastic cells of a cytoplasmic projections, recognized as a “hand-mirror” or “comet tail”, corroborated with the present case, however the histopathology is confirmatory. Immunohistochemistry in which the neoplasm cells showed a positive immunolabeling for CD3 and negative for CD79a, CD20, CD45, MUM1 and PAX5, as evidenced in this report, confirming the T-cell origin. According to the literature, lymphomas composed by small clear cells and cytoplasm projecting by cytology, immunolabeling CD3 and CD25 positive and CD45 negative are, together, findings that confirmed TZL. The biological behaviour of indolent lymphoma is still largely unknown, however the prognosis of dogs, with indolent lymphoma of T or B cells, seems to be favourable.  Studies showed different days of median overall survival, such as 760 days and 4.4 years. In the present case, the dog showed 820 days, confirming the good prognosis and an indolent behavoiur. Aggressive chemotherapy protocols are not necessary for such cases and the treatment with chlorambucil, without the association of prednisolone, has been well tolerated by the patient, which showed no side effects until the moment

Porque jamais existiu uma Idade Média e temas afins. Um livro para quem gosta de Filosofia

LivroTodos os temas deste livro relacionam-se, de certa forma, aos questionamentos sobre a “não existência” da Idade Média. É isso mesmo. A partir da discussão sobre a necessidade de uma nova cronologia para nossa história, e a partir de reflexões principalmente sobre os períodos patrístico (notadamente Agostinho) e escolástico, foram apresentados aos alunos diversos assuntos que, não obstante relacionados ao nosso dia-a-dia (trivial ou não), têm algo a ver com esses períodos. A estereotipia Idade Média igual a “astenia cultural”, “domínio irrestrito da Igreja”, ou “fanatismo religioso” vem retrocedendo. A Idade Média concebida como Idade das Trevas - um desses desvios históricos cuja anomalia o distanciamento torna cada vez mais patente – lentamente perde força. À lenda negra dos renascentistas e iluministas contrapõe-se a lenda rosa dos românticos: a Idade Média representaria não a derrocada (barbárie), mas o auge da civilização ocidental, em que se teriam realçados os valores espirituais. Todavia, nem negra, nem rosa, podemos ir mais além: não teria existido período mediano algum, de 1000 anos (a Idade Média), ou um hiato entre a civilização da Roma antiga e a nova Europa civilizada. Não se trata apenas de uma questão terminológica (a expressão “Idade Média” já seria em si mesma preconceituosa e arbitrária) e, portanto, de criticar uma cronologia hoje obsoleta, que divide a História Ocidental, a partir de uma visão eurocêntrica, em três períodos presos a uma camisa-de-força conceitual

Prehospital interventions to reduce discomfort caused by immobilization in adult trauma victims: a scoping review protocol

Objective: The objective of this review is to identify the level of discomfort caused by immobilization as reported by trauma victims, and to map all the interventions in the prehospital context where they have been implemented and evaluated in order to reduce discomfort in adult victims of trauma. Introduction: Immobilization is a cause of discomfort for trauma victims, which has important implications for the deterioration of vital signs and quality of life. However, discomfort caused by immobilization remains an underexplored topic by the scientific community. Inclusion criteria: This scoping review will consider studies of adult victims of trauma, aged 18 years or over, in prehospital emergency care. Studies that focus on interventions designed to reduce immobilization discomfort, implemented and evaluated by health professionals, of any form, duration, frequency, and dose will be considered. Methods: An initial search of PubMed and CINAHL will be undertaken, followed by a second search for published and unpublished studies without time restrictions, in major health care–related electronic databases. Studies in English, French, Spanish, and Portuguese will be included. Data extraction will be performed independently by 2 reviewers in a tabular format and will include details about the level of discomfort, interventions, populations, study methods, and outcomes of interest. A narrative synthesis will accompany the results and will describe how they relate to the review objectives.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Soroprevalência do vírus da imunodeficiência felina e do vírus da leucemia felina em gatos domésticos de Fortaleza, Ceará

Feline Immunodeficiency Virus (FIV) and Feline Leukemia Virus (FeLV) are important etiologic agents of immunosuppressive diseases in felines. The objective of the present study was to determine the prevalence of these retroviruses in domestic cats in Fortaleza, Ceará and the epidemiological factors associated with these infections. Between 2015 and 2016, 138 blood samples were collected and tested for FIV and FeLV by the enzyme immunoadsorption assay (ELISA). Parameters such as breed, gender, age, reproductive status, multi-cat environment, outdoor access and clinical manifestations were evaluated. The results showed that 12.32% were positive for FIV, 5.80% for FeLV and 1.45% for co-infection (FIV/FeLV). FIV+ animals were mostly mixed breed, neutered male adult cats, with indoor lifestyle and living in a multi-cat household. The most common clinical manifestation observed was disorders of the oral cavity. Factors found to increase the risk for FeLV seropositivity include mixed breed, young, spayed female cats, indoor lifestyle living in a multi-cat household were the most common epidemiological factors observed. The most common clinical manifestation was anorexia and apathy. The prevalence of these viruses were relatively high, compared with other region of Brazil. This study demonstrated that mixed breed, castrated, multi-cat environment and indoor lifestyle animals are of greater relevance for FIV and FeLV infection diseases. Factors related to cat demographics and health such as age, sex and type of household are important predictors for seropositive status to FeLV or FIV in Fortaleza. High prevalence of FeLV or FIV observed in our study is of concern, in view of the immunosuppressive potential of the two pathogens.O Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) e o Vírus da Leucemia Felina (FeLV) são importantes agentes etiológicos de doenças imunossupressoras em felinos. O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência desses retrovírus em gatos domésticos em Fortaleza, Ceará e os fatores epidemiológicos associados a essas infecções. Entre 2015 e 2016, foram coletadas 138 amostras de sangue e testadas para FIV e FeLV pelo ensaio de imunoadsorção enzimática (ELISA). Parâmetros como raça, gênero, idade, estado reprodutivo, ambiente com vários gatos, acesso ao ar livre e manifestações clínicas foram avaliados. Os resultados mostraram que 12,32% foram positivos para o FIV, 5,80% para o FeLV e 1,45% para a co-infecção (FIV/FeLV). Os animais FIV+ eram na sua maioria gatos machos castrados, adultos, de raça mista, com estilo de vida dentro de casa e vivendo em um ambiente com vários gatos. A manifestação clínica mais comum observada foi distúrbios da cavidade oral. Os fatores encontrados que aumentam o risco de soropositividade para FeLV incluem gatas fêmeas castradas, jovens, de raça mista, com estilo de vida dentro de casa e vivendo em um ambiente com vários gatos, foram os fatores epidemiológicos mais comuns observados. A manifestação clínica mais comum foi anorexia e apatia. A prevalência desses vírus foi relativamente alta em comparação com outras regiões do Brasil. Este estudo demonstrou que os animais de raça mista, castrados, vivendo em um ambiente com vários gatos e estilo de vida dentro de casa são de maior relevância para as doenças infecciosas por FIV e FeLV. Fatores relacionados à demografia e à saúde do gato, como idade, sexo e tipo de domicílio, são importantes preditores do estado soropositivo para FeLV ou FIV em Fortaleza. A alta prevalência de FeLV ou FIV observada em nosso estudo é preocupante, tendo em vista o potencial imunossupressor dos dois patógenos

Ciência de dados aplicada à biotecnologia marinha: avaliação do potencial biotecnológico das espécies bentônicas de Arraial do Cabo (RJ, Brasil)

Several marine living beings have unknown substances that can be used in many areas of science. Biotechnology, more specifically marine biotechnology, is an emerging field with promising achievements in different areas (biochemistry, genetics, genomics, aquaculture, bioenergy, among others), as it plays an important role in the discovery and sustainable use of these substances. In this context, the present study aimed to validate a Web Scraping search algorithm developed by Menezes (2019) to search, based on the literature, benthic marine species from the rocky shores of Arraial do Cabo with relevant biotechnological potential in areas of application of marine biotechnology. According to the algorithm, of the 922 species that were best ranked for presenting the largest number of works and that stood out in relation to their biotechnological potential were: Rachycentron canadum (Fish), Amphibalanus amphitrite (Crustaceous), Ulva fasciata (Macroalgae), Asparagopsis taxiformis (Macroalgae), Bugula neritina (Bryozoan), and Palythoa caribaeorum (Cnidarian). Of the evaluated and selected works (n=257), the groups Macroalgae, Cnidarians, Poriferans, and Echinoderms, presented a greater variety of biotechnological potential, respectively. Regarding the classification of biotechnological potential, Biogenetics, Natural Products for Medicine, and Aquaculture were the most studied areas of marine biotechnology. The results showed that the methodology used reduced the time of the bibliographic search linked to the biotechnology of each species listed in the catalog, proving to be useful in data from places of great biodiversity and little knowledge about the species.Diversos seres vivos marinhos possuem substâncias desconhecidas que podem ser utilizadas em muitas áreas como da ciência. A biotecnologia, mais especificamente a biotecnologia marinha é um campo emergente e com realizações promissoras nas áreas de bioquímica, genética, genômica, aquicultura, bioenergia e em outros. Neste contexto, o presente estudo teve como objetivo validar um algoritmo de busca do tipo Web Scraping desenvolvida por Menezes (2019) para buscar, com base na literatura, espécies dos costões rochosos de Arraial do Cabo relevantes em áreas de aplicação da biotecnologia marinha. De acordo com o algoritmo, das 922 espécies as mais bem classificadas por apresentarem maior número de trabalhos e que se destacaram em relação ao potencial biotecnológico foram: Rachycentron canadum (Peixe), Amphibalanus amphitrite (Crustáceo), Ulva fasciata (Macroalga), Asparagopsis taxiformis (Macroalga), Bugula neritina (Briozoário) e Palythoa caribaeorum (Cnidário). Dos trabalhos avaliados e selecionados (n=257), os grupos Macroalgas, Cnidários, Poríferos e Equinodermos, apresentaram maior variedade do potencial biotecnológico, respectivamente. Com relação à classificação do potencial biotecnológico, biogenética, produtos naturais para medicina e aquicultura foram as áreas da Biotecnologia Marinha mais estudadas. Os resultados mostraram que a metodologia utilizada reduziu o tempo da busca bibliográfica ligada a biotecnologia de cada espécie listada no catálogo, mostrando ser útil em dados oriundos de locais de grande biodiversidade e pouco conhecimento sobre as espécies