Utilização de PCR em tempo real para desenvolvimento de método qualitativo e quantitativo do vírus da hepatite B, em soro de pacientes crônicos no estado de Rondônia

Dissertação de mestrado apresentada ao curso de Biologia Experimental do Núcleo de Saúde da Universidade Federal de Rondônia para obtenção do título de Mestre.Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), dois bilhões de pessoas já foram infectadas pelo vírus da hepatite B (HBV) e destes 400 milhões se tornaram portadores crônicos. A quantificação deste virus é amplamente utilizada para o monitoramento do tratamento antiviral da infecção. Um sistema de quantificação da carga viral do HBV foi desenvolvido, através da metodologia de PCR em tempo real, utilizando o sistema TaqMan. Como alvo um produto de 109 pb correspondente a região pré-core foi clonado e diluido seriadamente para construção da curva padrão. O método foi validado pela comparação dos resultados de quantificação da PCR em tempo real de sete amostras, com os resultados do Centro de Genomas, onde houve uma correlação significativa (r = 0,95) entre os dois métodos. O ensaio mostrou ampla faixa dinâmica linear entre 2x10² e 2×10⁷ cópias/ml. Amostras negativas para HBV foram utilizadas como controle nas reações, indicando a alta especificidade do ensaio. Os coeficientes de variação dos ensaios intra e interexperimental foram de 1% para ambas, os quais indicaram reprodutibilidade notável. O ensaio padronizado é aplicado a todos os genótipos, porém um número maior de amostras devem ser comparadas para melhor validação do método. Esse ensaio pode ser aplicado no monitoramento de pacientes infectados pelo HBV na rotina de diagnostico dos laboratórios e na prática clínica. Além disso, o estudo possibilitou a identificação da distribuição dos genótipos do HBV em 35 amostras de pacientes HBsAg-positivos. Um fragmento de 1306bp que corresponde parcialmente aos genes de superfície e da polimerase foi amplificado purificado e seqüenciado. As seqüências foram alinhadas com seqüências referência obtidas no GenBank usando software Clustal X e, em seguida, editadas com software SE-AL. As análises filogenéticas foram conduzidas pela Cadeia de Markov Monte Carlo (MCMC) usando BEASTv.1.5.3. A distribuição dos subgenótipos foi A1 (37,1%), D3 (22,8%), F2a(20,0%), D4 (17,1%) e D2 (2,8%). Esses resultados representam a primeira caracterização genotípica do HBV no estado de Rondônia e são consistentes com outros estudos no Brasil, mostrando a presença de vários genótipos, refletindo a origem mista da população, envolvendo descendentes de nativos americanos, europeus e africanos

Expressão e purificação da proteína Corismato Sintaxe de Plasmodium falciparum a partir da otimização e síntese do gene para sistema procariótico.

Dissertação apresentada ao Programa de Pós- Graduação: Mestrado em Biologia Experimental (PGBIOEXP) da Fundação Universidade Federal de Rondônia (UNIR) como requisito final para a obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental. Orientador: Prof. Dr. Eduardo Rezende Honda.A malária é uma doença de grande importância epidemiológica em termos de morbidade e mortalidade no mundo. O índice de resistência às drogas antimaláricas vem aumentando gradativamente ao longo das últimas décadas. A descrição de vias metabólicas exclusivas de Plasmodium está abrindo perspectivas para desenvolvimento de novas drogas contra alvos moleculares bem definidos. A via do chiquimato é uma dessas vias metabólicas, e nesta está presente a enzima corismato sintase (CS) que catalisa a transformação de 5- enolpiruvil chiquimato 3-fosfato em corismato, último precursor comum na biossíntese de compostos aromáticos, presentes em bactérias, fungos, plantas, protozoários apicomplexa e ausente em mamíferos. A síntese e otimização do gene da proteína (PfCS) foi necessária para expressão em sistema procarioto. O produto gênico liofilizado foi inserido em vetor de clonagem PUC57 e vetor de expressão pGS21a. O plasmídeo foi transformado em células competentes TOP 10 F’, em seguida realizou-se miniprep e confirmação com enzimas de restrição Ncol e SalI. A retransformação foi realizada em células competentes BL 21 DE3 pLys e a indução foi com IPTG. A expressão foi confirmada por gel de SDSPAGE. A etapa de purificação foi realizada com Kit Qiagen 6x Histidina em coluna de Ni-NTA. A expressão foi obtida na forma de proteína recombinante de fusão com histidina, assumindo a forma de corpúsculos de inclusão, que foram desnaturadas com uréia 8M. Após purificação por coluna de afinidade obtivemos um nível aceitável de pureza. Estamos trabalhando para expressar essa proteína na forma solúvel e também em protocolos de renovelamento. Estudos in vitro englobando teste da atividade e inibição enzimática utilizando extratos vegetais encontrados na região Amazônica poderão identificar novos potenciais de fármacos para o tratamento da malária, inicialmente P. falciparum

Painful hip in children

Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de Diagnóstico por ImagemUNIFESP Setor de Reumatologia PediátricaUNIFESPUNIFESP, Depto. de Diagnóstico por ImagemUNIFESP, Setor de Reumatologia PediátricaUNIFESPSciEL

Characterization of Hepatitis B virus (HBV) genotypes in patients from Rondônia, Brazil

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Hepatitis B virus (HBV) can be classified into nine genotypes (A-I) defined by sequence divergence of more than 8% based on the complete genome. This study aims to identify the genotypic distribution of HBV in 40 HBsAg-positive patients from Rondônia, Brazil. A fragment of 1306 bp partially comprising surface and polymerase overlapping genes was amplified by PCR. Amplified DNA was purified and sequenced. Amplified DNA was purified and sequenced on an ABI PRISM^®377 Automatic Sequencer (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). The obtained sequences were aligned with reference sequences obtained from the GenBank using Clustal X software and then edited with Se-Al software. Phylogenetic analyses were conducted by the Markov Chain Monte Carlo (MCMC) approach using BEAST v.1.5.3.</p> <p>Results</p> <p>The subgenotypes distribution was A1 (37.1%), D3 (22.8%), F2a (20.0%), D4 (17.1%) and D2 (2.8%).</p> <p>Conclusions</p> <p>These results for the first HBV genotypic characterization in Rondônia state are consistent with other studies in Brazil, showing the presence of several HBV genotypes that reflects the mixed origin of the population, involving descendants from Native Americans, Europeans, and Africans.</p

Effects of Risperidone on Cytokine Profile in Drug-Naive First-Episode Psychosis

Background: There is robust evidence that schizophrenia is characterized by immune-inflammatory abnormalities, including variations on cytokine levels. the results of previous studies, however, are heterogeneous due to several confounding factors, such as the effects of antipsychotic drugs. Therefore, research on drug-naive first-episode psychosis (FEP) patients is essential to elucidate the role of immune processes in that disorder.Methods: the aim of this study is to compare cytokine levels (IL-2, IL-10, IL-4, IL-6, IFN-gamma, TNF-alpha, and IL-17) in drug-naive FEP patients both before and after treatment with risperidone for 10 weeks, and to investigate possible associations between cytokine levels and clinical responses to treatment and presence of depressive symptoms. It this study, we included 55 drug-naive FEP patients who had repeated measurements of cytokine levels and 57 healthy controls.Results: We found that FEP patients had significantly higher IL-6, IL-10 and TNF-alpha levels than healthy controls. After risperidone treatment, these three cytokines and additionally IL-4 decreased significantly. No significant difference was found between the post-treatment cytokine levels in FEP patients and in healthy controls, suggesting that these alterations in cytokine profiles are a state marker of FEP. No significant association was found between risperidone-induced changes in cytokines and the clinical response to treatment or the presence of depression. There was a significant inverse association between the risperidone-induced changes in IL-10 and the negative symptoms.Conclusions: in conclusion, our results show a specific cytokine profile in FEP patients (monocytic and regulatory T-cell activation) and suggest immunoregulatory effects of risperidone treatment, characterized by suppressant effects on monocytic, Th2, and T-regulatory functions.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Fundacao SafraFundacao ABADSJanssenEli LillyLundbeckNovartisRocheUniversidade Federal de São Paulo, Dept Psychiat, São Paulo, BrazilFac Ciencias Med Santa Casa São Paulo, Episode Psychosis Program 1, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Morphol & Genet, Div Genet, São Paulo, BrazilDeakin Univ, Dept Psychiat, Geelong, Vic 3217, AustraliaChulalongkorn Univ, Dept Psychiat, Bangkok, ThailandUniversidade Federal de São Paulo, Dept Psychiat, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Morphol & Genet, Div Genet, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

Evaluation of obstructive sleep apnea in non-cystic fibrosis bronchiectasis: A crosssectional study

The relationship between sleep disorders and bronchiectasis has not been well described. We hypothesize that, due to the irreversible dilatation of the bronchi, the presence of secretions, and airflow obstruction, patients with non-cystic fibrosis bronchiectasis may be predisposed to hypoxemia during sleep, or to symptoms that may lead to arousal. A cross-sectional observational study was performed involving 49 patients with a clinical diagnosis of non-cystic fibrosis bronchiectasis (NCFB). All patients underwent clinical evaluation, spirometry, and polysomnography, and were evaluated for the presence of excessive daytime sleepiness (EDS) and risk of obstructive sleep apnea (OSA). The mean age of the participants was 50.3 +/- 13.6 years51.1% of patients were male and had a mean body mass index of 23.8 +/- 3.4 kg/m(2). The mean total sleep time (TST) was 325.15 +/- 64.22 min with a slight reduction in sleep efficiency (84.01 +/- 29.2%). Regarding sleep stages, stage 1 sleep and REM sleep were abnormal. OSA was present in 40.82% of the patients. The mean arousal index was 5.6 +/- 2.9/h and snoring was observed in 71.43% of the patients. The oxygen desaturation index (ODI) was 14.35 +/- 15.36/h, mean minimum oxygen saturation (SpO(2) nadir) was 83.29 +/- 7.99%, and mean TST with an SpO(2) less than 90% was 30.21 +/- 60.48 min. EDS was exhibited by 53.06% of the patients and 55.1% were at high risk of developing OSA. The patients infected by Pseudomonas aeruginosa had higher apnea-hypopnea indices, ODI, and TST with SpO(2) < 90%, and lower values of SpO(2) nadir. Adult patients with clinically stable NCFB, especially those infected by Pseudomonas aeruginosa, display EDS and a high prevalence of OSA, associated with considerable oxygen desaturation during sleep.Nove de Julho University (Sao Paulo, Brazil)Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnologico (CNPq) [313053/2014-6]JJUEAPASSCAPESSanta Casa Sao Paulo Sch Med Sci, FCMSCSP, Masters Degree & PhD Program Surg Res, Sao Paulo, SP, BrazilNove de Julho Univ UNINOVE, Rehabil Sci Masters Degree & PhD Program, Sao Paulo, SP, BrazilUniv Fed Sao Paulo, Pulm Rehabil Ctr, UNIFESP, Sao Paulo, BrazilNatl Res Council Italy, Inst Biomed & Mol Immunol Alberto Monroy, Palermo, SI, ItalyUniv Ctr Anapolis UniEVANGELICA, Med Sch, Anapolis, Go, BrazilUniv Fed Sao Paulo, Pulm Rehabil Ctr, UNIFESP, Sao Paulo, BrazilCNPq: 313053/2014-6Web of Scienc

INTERVENÇÃO EDUCATIVA SOBRE TUBERCULOSE PARA AGENTES COMUNITÁRIOS DE SAÚDE EM UNIDADES DA ATENÇÃO PRIMÁRIA À SAÚDE EM UM MUNICÍPIO DA REGIÃO NORTE

Diante da necessidade de propor uma qualificação para transformação e aprimoramento dos Agentes Comunitários de Saúde (ACS), considera-se de fundamental importância a identificação do conhecimento desses atores, que representam um elo entre o serviço e a comunidade, em especial, na atenção à Tuberculose (TB). Assim, o presente estudo teve como objetivo desenvolver uma intervenção educativa sobre TB para ACS, de duas Unidades de Saúde da Família, no município de Porto Velho-RO. Trata-se de um estudo descritivo, com abordagem quantitativa. Os dados foram coletados entre março e abril de 2017, por meio de um questionário estruturado, e a análise através de estatística descritiva. A intervenção foi delineada, a partir das lacunas do conhecimento identificadas e realizada em encontros de quatro horas cada, com os mesmos conteúdos e metodologia. Verificou-se que os ACS possuíam um conhecimento restrito sobre as características gerais da TB, diagnóstico, tratamento, medidas de prevenção e vigilância dos casos. Tais achados permitem refletir sobre a importância dos processos formativos e de qualificações constantes que possibilitem o diálogo com os profissionais sobre o cenário em que suas atribuições são desempenhadas e as dificuldades vivenciadas, visando um planejamento coerente e participativo com os atores envolvidos. Palavras-chave: Tuberculose; Agentes Comunitários de Saúde; Atenção Primária à Saúde

Percepções e condutas de universitários frente ao ambiente / Perceptions and behaviors of college students towards the environment

A percepção ambiental e as condutas frente ao ambiente nutrem relações com experiências no campo educacional. O estudo objetivou avaliar percepções e autoreferências de condutas frente ao ambiente em estudantes universitários primeiranistas e de início de terceiro ano de um bacharelado interdisciplinar em ciência e tecnologia do mar. Participaram 162 estudantes universitários (87 primeiranistas e 75 terceiranistas), média de idade de 21,8 anos. Foram utilizados o Questionário de Condutas Face ao Meio Ambiente e o Questionário de Percepção Ambiental. Os dados foram coletados coletivamente e analisados por estatística descritiva. Resultados não foram discrepantes entre os estudantes do 1º ano e 3º ano quanto às autoreferências de comportamentos frente ao ambiente e de percepção ambiental. Primeiranistas apresentaram resultados mais favoráveis ao meio ambiente, com exceção a hábitos de consumo. A trajetória de pelo menos dois anos nesse curso não parece ter interferido nas percepções e condutas perante ao ambiente

Aki associated with macroscopic glomerular hematuria: Clinical and pathophysiologic consequences

Hematuria is a common finding in various glomerular diseases. This article reviews the clinical data on glomerular hematuria and kidney injury, as well as the pathophysiology of hematuria-associated renal damage. Although glomerular hematuria has been considered a clinical manifestation of glomerular diseases without real consequences on renal function and long-term prognosis, many studies performed have shown a relationship between macroscopic glomerular hematuria and AKI and have suggested that macroscopic hematuria-associated AKI is related to adverse long-term outcomes. Thus, up to 25% of patients with macroscopic hematuria– associated AKI do not recover baseline renal function. Oral anticoagulation has been associated with glomerular macrohematuria–related kidney injury. Several pathophysiologic mechanisms may account for the tubular injury found on renal biopsy specimens. Mechanical obstruction by red blood cell casts was thought to play a role. More recent evidence points to cytotoxic effects of oxidative stress induced by hemoglobin, heme, or iron released from red blood cells. These mechanisms of injury may be shared with hemoglobinuria or myoglobinuria-induced AKI. Heme oxygenase catalyzes the conversion of heme to biliverdin and is protective in animal models of heme toxicity. CD163, the recently identified scavenger receptor for extracellular hemoglobin, promotes the activation of anti-inflammatory pathways, opening the gates for novel therapeutic approachesThis work was supported by FIS (Programa Miguel Servet) to J.A.M.; ISCIII and FEDER funds CP04/00060, PS09/00447, Sociedad Espa~nola de Nefrologia, ISCIII-RETIC REDinREN/RD06/ 0016, Comunidad de Madrid/FRACM/S-BIO0283/2006, Programa Intensificación Actividad Investigadora (ISCIII/) to A.O.; FIS 10/ 02668 and AITER (Asociación para el Estudio y Tratamiento de las Enfermedades Renales) to E.G. and M.P.; and ISCIII-Redes RECAVA (RD06/0014/0035) and ISCIII funds PI10/00072 and Fundacion Lilly to J.E

INTELIGÊNCIA SUSTENTÁVEL: AGENDA 2030 PARA ACADÊMICOS DAS UNIVERSIDADES ESTADUAIS DO PARANÁ

Este relato de experiência apresenta o Inteligência Sustentável, curso online criado no formato MOOC (Massive Online Open Course) e tendo como público-alvo os acadêmicos das sete Universidades Estaduais do Paraná. O projeto promoveu a sua primeira oferta no ano de 2022. O texto apresenta a concepção da formação, o contexto da temática no Estado, as parcerias estabelecidas, os resultados obtidos e reflexões sobre a divulgação e engajamento dos participantes em relação à Agenda 2030. Outro viés é a relação da iniciativa com o ODS 4, no que diz respeito à educação inclusiva, que é impulsionada em iniciativas de educação aberta. Com a implementação deste projeto, busca-se fortalecer a conscientização sobre os desafios e objetivos da Agenda 2030, capacitando os estudantes para se tornarem agentes de mudança, preparados para enfrentar os problemas globais e contribuir para um futuro mais sustentável