37 research outputs found

    Las habilidades sociales en Educaci贸n Infantil. Plan de intervenci贸n para la mejora de la comunicaci贸n oral

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    En este trabajo se expone la necesidad de trabajar las habilidades sociales y la comunicaci贸n verbal en el aula de Educaci贸n Infantil. La escuela, es uno de los primeros agentes socializadores, es por eso que nuestra tarea como docentes es dar a nuestros alumnos las herramientas necesarias para desenvolverse en la sociedad actual.Para ello, se ha llevado a cabo un Plan Intervenci贸n compuesto por actividades dirigidas a desarrollar las habilidades comunicativas del alumnado, con la intenci贸n de mejorar al m谩ximo sus posibilidades expresivas.Grado en Educaci贸n Infanti

    Novel liquid starter cultures for malolactic fermentation in wine

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    La fermentaci贸n malol谩ctica es fundamental para la calidad del vino, especialmente en el vino tinto. Se trata de la transformaci贸n del 谩cido L-m谩lico procedente de las uvas, de un gusto fuerte y 谩spero, en 谩cido L-l谩ctico, de gusto m谩s agradable, liber谩ndose adem谩s CO2. Esta fermentaci贸n puede ser una poderosa herramienta en la elaboraci贸n del vino, no solo por reducir su acidez, sino tambi茅n por influir positivamente en el aroma y perfil sensorial del vino. Esta fermentaci贸n es llevada a cabo por bacterias l谩cticas, pero no siempre se realiza en el momento oportuno ni en las condiciones 贸ptimas, ya que son muchos los factores que influyen en su crecimiento y desarrollo. Una de las estrategias utilizadas para controlar la fermentaci贸n de forma adecuada, consiste en la inducci贸n de 茅sta con la inoculaci贸n de bacterias l谩cticas seleccionadas, principalmente con cepas de Oenococcus oeni. En la actualidad, muchos de los cultivos iniciadores malol谩cticos de bacterias l谩cticas disponibles en el mercado presentan problemas de implantaci贸n debido a las diferentes condiciones de elaboraci贸n y caracter铆sticas intr铆nsecas de los vinos. Las bodegas reclaman nuevos cultivos iniciadores m谩s f谩ciles de usar y con una mayor eficacia. Y adem谩s, con mayor frecuencia, cultivos obtenidos a partir de cepas propias y diferenciales de la bodega. La necesidad de obtener m谩s informaci贸n sobre la fermentaci贸n malol谩ctica, sobre O. oeni y sobre c贸mo mejorar los cultivos iniciadores, llev贸 a desarrollar esta investigaci贸n, resultado de un acuerdo entre la Universidad de Valencia y Agrovin S.A. En esta tesis doctoral se ha evaluado la posibilidad de emplear cultivos iniciadores l铆quidos de O. oeni inoculados directamente en vino y se han ampliado los conocimientos sobre la fermentaci贸n malol谩ctica y O. oeni. Objetivos El objetivo general de esta tesis doctoral ha sido seleccionar cepas de O. oeni y evaluar la efectividad del empleo de cultivos iniciadores l铆quidos en la inducci贸n de la fermentaci贸n malol谩ctica. Para llevar a cabo este objetivo general, se han planteado los siguientes objetivos espec铆ficos: Seleccionar una cepa de O. oeni de la colecci贸n Enolab, con el fin de elegir aquella capaz de resistir y crecer en un amplio rango de valores de pH, en elevados niveles de etanol, e incapaz de formar aminas bi贸genas. Dise帽ar un medio de cultivo l铆quido favorable para el crecimiento de O. oeni que permita la producci贸n de altos niveles de biomasa, y al mismo tiempo una adaptaci贸n a las condiciones del vino. Llevar a cabo el escalado del proceso de producci贸n para la obtenci贸n de niveles industriales de biomasa de O. oeni utilizando el medio de cultivo dise帽ado. Reducir el contenido de histamina presente en los vinos de una bodega mediante la selecci贸n e inoculaci贸n de una cepa aut贸ctona de O. oeni cultivada en el medio de cultivo l铆quido dise帽ado previamente. Optimizar los procesos de conservaci贸n e inoculaci贸n de cultivos iniciadores, con el fin de mantener una adecuada actividad malol谩ctica y viabilidad celular en vino. Desarrollar m茅todos alternativos de inoculaci贸n de cultivos iniciadores malol谩cticos en vino con el fin de mejorar la adaptaci贸n a las condiciones del vino, coinmovilizando O. oeni con Saccharomyces cerevisiae. Metodolog铆a y resultados Selecci贸n de una cepa de O. oeni como cultivo iniciador malol谩ctico Se realiz贸 un proceso de selecci贸n entre 40 cepas de O. oeni pertenecientes a la colecci贸n Enolab. Este proceso se llev贸 a cabo siguiendo diversos criterios para elegir las mejores desde el punto de vista de actividad malol谩ctica, como son, capacidad para crecer y desarrollar la fermentaci贸n malol谩ctica en un amplio rango de pHs, alto grado alcoh贸lico y ausencia de capacidad de sintetizar aminas bi贸genas. Las cepas de O. oeni se cultivaron en MLO con 3 valores de pHs diferentes (3,2, 3,5 y 3,8). Las 12 cepas de O. oeni con mayor crecimiento en los 3 pHs fueron cultivadas en MLO con concentraciones de 9 % y 11 % de etanol (v:v). Los resultados obtenidos mostraron que todas las cepas analizadas fueron capaces de desarrollarse con 9 % de etanol (v:v). Sin embargo, la adici贸n de una concentraci贸n mayor de etanol (11 % v:v), mostr贸 diferencias en el comportamiento entre las distintas cepas de O. oeni. Las cepas que presentaron un mayor crecimiento poblacional con un nivel de etanol del 11 % (v:v) fueron E4061, E5003 y E3874. Se analiz贸 la actividad malol谩ctica de estas 3 cepas a diferentes niveles de pH, mediante un sistema de microplaca y azul de bromofenol. La cepa E5003 mostr贸 los mejores resultados, consumiendo el 谩cido m谩lico en los niveles de pH m谩s bajos. Con el objetivo de estudiar la formaci贸n de aminas bi贸genas por parte de las 3 cepas seleccionadas, se llev贸 a cabo el an谩lisis mediante cromatograf铆a l铆quida de alta resoluci贸n. Para ello, se inocul贸 el medio de cultivo MDB-mod con 2x107 ufc/mL de estas cepas por separado. Tras 15 d铆as, se analiz贸 el contenido en histamina, tiramina, cadaverina y putrescina. Ninguna de las cepas seleccionadas fue capaz de sintetizar bajo estas condiciones las aminas analizadas. Tras inocular una concentraci贸n final de 1x106 ufc/mL de las 3 cepas seleccionadas en vino tinto por separado, se observ贸 que la cepa E5003 manten铆a la mejor viabilidad celular y consum铆a el 谩cido m谩lico m谩s r谩pidamente, en 15 d铆as, por lo que fue elegida como cultivo iniciador malol谩ctico. Dise帽o de un medio de cultivo l铆quido para la producci贸n del cultivo iniciador malol谩ctico Tras la selecci贸n de la cepa de O. oeni, se dise帽贸 un medio de cultivo adecuado para el cultivo de las bacterias y producci贸n de biomasa. Los medios de laboratorio suelen producir unas cantidades elevadas de biomasa, pero con una baja o nula capacidad de adaptaci贸n de estas c茅lulas al vino. Con el fin de mejorar estas limitaciones, se dise帽贸 un medio de cultivo que preadaptase las bacterias a un medio hostil como es el vino, pero teniendo en cuenta las condiciones 贸ptimas de crecimiento de la bacteria para conseguir los m谩ximos niveles de biomasa y con una 贸ptima actividad metab贸lica y viabilidad tras su inoculaci贸n en vino. Por ello, se analizaron 27 medios de cultivo, con diferentes pHs, niveles de etanol y concentraci贸n de az煤cares. El medio de cultivo optimizado (OMP) era el que conten铆a mosto blanco comercial diluido 1/6, 4 % (v:v) de etanol y pH 3,8. Una vez seleccionada la cepa de O. oeni y dise帽ado un medio de cultivo apropiado, se realiz贸 el escalado del proceso para la obtenci贸n de biomasa suficiente para probar su viabilidad como cultivo iniciador malol谩ctico en grandes vol煤menes de vino. Se efectu贸 un escalado partiendo de un cultivo de 50 mL con una concentraci贸n celular de 1x109 ufc/mL. Este cultivo se inocul贸 en 500 mL de medio OMP y se incub贸 hasta llegar a una poblaci贸n final de 1x109 ufc/mL. Una vez conseguida esta biomasa, se inocul贸 en 8 L de dicho medio de cultivo, obteni茅ndose el cultivo iniciador l铆quido para ser inoculado en vino. Durante todo el proceso de escalado, se llevaron a cabo controles de contaminaci贸n de los medios de cultivo y cultivos obtenidos. Los resultados revelaron una correcta esterilidad del medio de cultivo y un buen desarrollo de la poblaci贸n de las bacterias producidas. La biomasa conseguida tras el proceso de producci贸n fue elevada, obteni茅ndose una poblaci贸n de la cepa seleccionada de O. oeni de 1,3x109 ufc/mL en 6 d铆as en el fermentador de 8 L. Con el fin de estudiar la actividad malol谩ctica del cultivo iniciador, se procedi贸 a la inoculaci贸n de vino tinto. Se inocul贸 el vino con el cultivo procedente del fermentador de 8 L en proporciones de 1/10 y 1/100 y 1/1000 y se midieron las concentraciones de 谩cido m谩lico y l谩ctico a lo largo del tiempo mediante cromatograf铆a l铆quida. En todos los casos, se consumi贸 todo el 谩cido m谩lico presente en el vino tras 6 d铆as de incubaci贸n. Se realiz贸 el 煤ltimo paso de escalado del proceso a nivel industrial en Agrovin S.A. All铆, se elaboraron 80 L de biomasa bacteriana para su utilizaci贸n como cultivo iniciador malol谩ctico l铆quido, obteni茅ndose 1x109 ufc/mL en 6 d铆as en este 煤ltimo paso. Tras el 茅xito de estos ensayos, la cepa E5003 cultivada en OMP se comercializa como cultivo iniciador malol谩ctico l铆quido con excelentes resultados en bodega. La aplicaci贸n de este cultivo iniciador malol谩ctico es mucho m谩s f谩cil que la de los habituales cultivos iniciadores liofilizados ya que no necesita rehidrataci贸n, ni aclimataci贸n y las c茅lulas est谩n activas, realizando la fermentaci贸n malol谩ctica r谩pidamente. Dise帽o de un cultivo iniciador malol谩ctico para una bodega Frente a la problem谩tica planteada por una bodega de la Denominaci贸n de Origen Ribera del Duero, con elevados niveles de histamina en sus vinos, se plante贸 dise帽ar una estrategia para disminuir dicha concentraci贸n y obtener productos m谩s saludables y con menos barreras para su comercializaci贸n y venta. Se buscaron los microorganismos responsables de la s铆ntesis de histamina en los vinos y se seleccion贸 una cepa aut贸ctona de O. oeni no productora de histamina para su utilizaci贸n como cultivo iniciador malol谩ctico propio. Para el aislamiento de la microbiota aut贸ctona, se tomaron muestras de 13 dep贸sitos, antes y despu茅s de la fermentaci贸n malol谩ctica, y se sembraron en medio MLO y MRS s贸lido. Se identificaron 8 perfiles de bandas tras la tipificaci贸n mediante la t茅cnica molecular de RAPD-PCR, que correspondieron a 8 cepas diferentes de O. oeni. De las 8 cepas, 3 de ellas fueron capaces de producir histamina en medio MDB-mod. De las cepas no productoras, se seleccion贸 la cepa de O. oeni V6B1 para constituir cultivo iniciador malol谩ctico propio para la bodega, ya que adem谩s de no producir histamina en MDB-mod estaba presente en los dep贸sitos con el m铆nimo contenido de esta amina. En la siguiente vendimia, se realiz贸 la producci贸n de biomasa de la cepa seleccionada (V6B1) en el medio OMP siguiendo el escalado descrito anteriormente. Se produjeron 24 L de cultivo iniciador malol谩ctico para la inoculaci贸n un dep贸sito de 200 HL en la bodega. La cin茅tica de crecimiento fue similar a la previamente descrita para la cepa E5003, alcanz谩ndose una concentraci贸n de 1x109 ufc/mL. Tras la inoculaci贸n del dep贸sito, se analiz贸 la viabilidad del cultivo iniciador, la concentraci贸n de histamina y la degradaci贸n de 谩cido m谩lico durante el proceso de vinificaci贸n, compar谩ndose con un dep贸sito no inoculado en la misma bodega. En ambos dep贸sitos se llev贸 a cabo la fermentaci贸n malol谩ctica, pero en el dep贸sito inoculado acab贸 antes. En ambos casos, durante la fermentaci贸n malol谩ctica, los niveles poblacionales de O. oeni llegaron a 1x107 ufc/mL. Tras la fermentaci贸n descendieron, pero aun as铆 las poblaciones superaban 1x105 ufc/mL al transferirse el vino a las barricas. En cuanto a la concentraci贸n de histamina, antes de la fermentaci贸n malol谩ctica no se detect贸 en ninguno de los 2 dep贸sitos. Tras la fermentaci贸n, se detect贸 5 veces menos histamina en el dep贸sito inoculado. Tras un a帽o de envejecimiento en barrica los niveles de histamina aumentaron en ambos dep贸sitos pero encontramos 3 veces menos histamina en el dep贸sito inoculado que en el no inoculado. Estos resultados mostraron el 茅xito de la utilizaci贸n de cultivos aut贸ctonos malol谩cticos l铆quidos para la disminuci贸n del contenido de histamina. Esta metodolog铆a innovadora permite la disminuci贸n de aminas bi贸genas en el vino final, manteniendo la microbiota propia y por tanto conservando la personalidad del vino. Conservaci贸n de O. oeni Conservaci贸n del cultivo iniciador malol谩ctico l铆quido Tras la selecci贸n de la cepa de O. oeni E5003 y el dise帽o del medio de cultivo OMP para el cultivo iniciador malol谩ctico, se estudiaron diferentes m茅todos para su conservaci贸n. Se compar贸 la conservaci贸n a temperatura de 4 潞C y a -20 潞C, con la liofilizaci贸n. Tras la aplicaci贸n de estas metodolog铆as se analiz贸 la viabilidad de los cultivos a lo largo del tiempo. Mediante la liofilizaci贸n se observ贸 una gran p茅rdida de viabilidad inmediata debido al propio proceso de liofilizaci贸n, pero posteriormente, la viabilidad se estabiliz贸 y se mantuvo en el tiempo. Este m茅todo de conservaci贸n por tanto, ser铆a el adecuado para la conservaci贸n del cultivo durante un largo periodo de tiempo. La congelaci贸n a -20 潞C fue la metodolog铆a m谩s adecuada para el mantenimiento del cultivo l铆quido durante 30 d铆as, ya que durante este tiempo present贸 los resultados m谩s altos de viabilidad celular, manteni茅ndose en 7,19x108 ufc/mL. La conservaci贸n mediante refrigeraci贸n a 4 潞C result贸 la mejor opci贸n para tiempos de conservaci贸n de entre 2 y 4 meses ya que present贸 la mejor viabilidad, manteni茅ndose en 2,56x107 ufc/mL tras 124 d铆as. Conservaci贸n de O. oeni en l铆as Con la intenci贸n de evaluar su idoneidad como alternativa a los cultivos l铆quidos refrigerados, se estudi贸 la conservaci贸n de cultivos de O. oeni en l铆as procedentes de vino tinto. Este sistema permitir铆a adaptar las bacterias a las condiciones del vino a la vez que conservarlas durante un largo periodo de tiempo. Con estos objetivos se inocul贸 la cepa E5003 de O. oeni en tres l铆as diferentes procedentes de la vinificaci贸n de Tempranillo. Se analiz贸 la viabilidad de las bacterias mediante este m茅todo de conservaci贸n y la actividad malol谩ctica de las bacterias tras su inoculaci贸n en vino. Los resultados mostraron que la viabilidad de O. oeni a lo largo del tiempo depend铆a del tipo de l铆as, obteni茅ndose una mejor respuesta en las l铆as con alto contenido en polisac谩ridos. Coinmovilizaci贸n de S. cerevisiae y O. oeni en material celul贸sico y almid贸n La inmovilizaci贸n de cultivos iniciadores proporciona numerosas ventajas en comparaci贸n con la utilizaci贸n de c茅lulas libres, ya que el soporte de inmovilizaci贸n act煤a como un agente de protecci贸n contra los efectos fisicoqu铆micos de vino. La inoculaci贸n de una elevada concentraci贸n de bacterias que permite estos sistemas, proporciona tiempos de fermentaci贸n m谩s cortos, la eliminaci贸n de la fase de crecimiento y procesos de fermentaci贸n en continuo. Del mismo modo, permite una f谩cil recuperaci贸n, regeneraci贸n y reutilizaci贸n del producto. Para este estudio, se utilizaron las cepas de S.cerevisiae AXAZ-1 aislada de uva en Grecia y la cepa de O. oeni E5003. Los resultados obtenidos mediante microscop铆a electr贸nica manifestaron el logro de la coinmovilizaci贸n. Con el fin de comprobar su efectividad en vino, se inocularon 0,3 g y 0,03 g de coinmovilizado en 50 mL de vino y se analiz贸 mediante cromatograf铆a l铆quida el contenido en azucares, 谩cido m谩lico y 谩cido l谩ctico a lo largo del tiempo. Estas fermentaciones se compararon con la inoculaci贸n simultanea de c茅lulas libres de S. cerevisiae AXAZ-1 y O. oeni E5003 en concentraciones de 106 ufc/mL y 107 ufc/mL. Las fermentaciones alcoh贸lica y malol谩ctica se desarrollaron de forma paralela, consumi茅ndose el 谩cido m谩lico en 5 d铆as y los az煤cares en 5-6 d铆as, al inocular 0,3 g de coinmovilizado o 107 ufc/ml de c茅lulas libres, reduciendo de este modo considerablemente el tiempo habitual del proceso de vinificaci贸n y permitiendo una r谩pida estabilizaci贸n del vino. Al inocular 0,03 g de coinmovilizado en 50 mL de mosto tinto la fermentaci贸n alcoh贸lica y malol谩ctica tambi茅n se desarrollaron paralelamente, consumi茅ndose el 谩cido m谩lico y los azucares en 8 d铆as. Sin embargo al inocular simult谩neamente c茅lulas libres de S. cerevisiae y O. oeni en una concentraci贸n de 106 ufc/mL, la fermentaci贸n alcoh贸lica tuvo lugar en 8 d铆as pero el 谩cido m谩lico no fue consumido, de modo que a concentraciones de 106 ufc/mL la coinmovilizaci贸n es m谩s eficaz que la inoculaci贸n simultanea de ambos microorganismos. Conclusiones 1. La cepa de O. oeni E5003 ha sido elegida como cultivo iniciador malol谩ctico, ya que es capaz de crecer en un amplio rango de pH, en medios con niveles elevados de etanol, no produce aminas bi贸genas, y presenta la mejor actividad malol谩ctica y viabilidad celular tras su inoculaci贸n en vino. 2. El m茅todo de cuantificaci贸n de aminas bi贸genas mediante cromatograf铆a l铆quida empleado hasta el momento ha sido optimizado utilizando una nueva tecnolog铆a de columnas de cromatograf铆a de n煤cleo duro m谩s r谩pida y barata. 3. El ensayo basado en microplacas usando azul de bromofenol, como indicador de pH, ha permitido la selecci贸n de cepas malol谩cticas en 24 horas, en t茅rminos de degradaci贸n de 谩cido m谩lico. 4. Un nuevo medio de cultivo (OMP) para la obtenci贸n de elevadas cantidades de biomasa de O. oeni E5003 ha sido dise帽ado. La composici贸n del medio de cultivo proporciona niveles poblacionales de 1x109 ufc/mL y permite la adaptaci贸n de las bacterias a las condiciones del vino. 5. Se ha escalado el proceso de producci贸n de biomasa de O. oeni utilizando 80 L del medio OMP. El tiempo total de producci贸n son 22 d铆as y la poblaci贸n bacteriana alcanza niveles de 1x109 ufc/mL. 6. Una cepa aut贸ctona de O. oeni (V6B1) de una bodega ha sido seleccionada para ser empleada como cultivo iniciador malol谩ctico propio, por su alta efectividad malol谩ctica y su incapacidad para producir histamina. El uso del cultivo iniciador malol谩ctico l铆quido permite reducir 3 veces el contenido en histamina en un vino final comparado con un vino no inoculado en la bodega. 7. El m茅todo de conservaci贸n m谩s adecuado del cultivo iniciador malol谩ctico de O. oeni E5003 depende del tiempo de almacenamiento del mismo. La liofilizaci贸n permite la conservaci贸n del cultivo largos periodos de tiempo, mientras que la congelaci贸n a -20 潞C es 贸ptima para la conservaci贸n durante 1 mes. La refrigeraci贸n a 4 潞C es adecuada para periodos de almacenamiento de hasta 4 meses. 8. El cultivo iniciador malol谩ctico liofilizado presenta mejores resultados de actividad malol谩ctica y viabilidad en vino al ser rehidratado con una soluci贸n de fructosa, arginina y acido m谩lico, que al ser rehidratado con NaCl. 9. Un m茅todo de conservaci贸n alternativo de cultivos iniciadores malol谩cticos consiste en la conservaci贸n en l铆as de vino tinto. La mejor viabilidad celular se obtiene con l铆as que poseen un mayor contenido en polisac谩ridos. 10. El cultivo iniciador generado mediante la coinmovilizaci贸n de S. cerevisiae y O. oeni en material celul贸sico y almid贸n permite una fermentaci贸n alcoh贸lica y malol谩ctica en vino simult谩neas, reduci茅ndose el tiempo de vinificaci贸n considerablemente

    Temporal dispersal patterns of Phaeomoniella chlamydospora, causal agent of Petri disease and esca, in vineyards

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    [EN] Although the fungus Phaeomoniella chlamydospora is the most commonly detected causal agent of Petri disease and esca, two important fungal grapevine trunk diseases, little is known about the dispersal patterns of P. chlamydospora inoculum. In this work, we studied the dispersal of P. chlamydospora airborne inoculum from 2016 to 2018 in two viticultural areas of eastern (Ontinyent) and northern (Logro帽o) Spain. The vineyards were monitored weekly from November to April using microscope slide traps, and P. chlamydospora was detected and quantified by a specific real-time quantitative (qPCR) method set up in this work. The method was found to be sensitive, and a good correlation was observed between numbers of P. chlamydospora conidia (counted by microscope) and DNA copy numbers (quantified by qPCR). We consistently detected DNA of P. chlamydospora at both locations and in all seasons but in different quantities. In most cases, DNA was first detected in the last half of November, and most of the DNA was detected from December to early April. When rain was used as a predictor of P. chlamydospora DNA detection in traps, false-negative detections were observed, but these involved only 4% of the total. The dispersal pattern of P. chlamydospora DNA over time was best described (R2 = 0.765 and concordance correlation coefficient = 0.870) by a Gompertz equation, with time expressed as hydrothermal time (a physiological time accounting for the effects of temperature and rain). This equation could be used to predict periods with a high risk of dispersal of P. chlamydosporaFinancial support for carrying out this research was provided by transnational funding bodies, being partners of the H2020 ERA-net project, CORE Organic Cofund, and the Cofund from the European Commission (PCI2018-093015/Project BIOVINE). Part of the research was funded by CAR (Government of La Rioja, Spain), project number R-03-16. C. Berlanas was supported by the FPI-INIA program from the INIA. D. Gramaje was supported by the Ramon y Cajal program, Spanish Government (RYC-2017-23098). Financial support for C. Berlanas during her 1-month stay at Universitat Polit`ecnica de Val`encia was provided by the Viticulture Research Network RedVitis (AGL2015-70931-REDT)Gonz谩lez-Dom铆nguez, E.; Berlanas, C.; Gramaje, D.; Armengol Fort铆, J.; Rossi, V.; Berbegal Martinez, M. (2020). Temporal dispersal patterns of Phaeomoniella chlamydospora, causal agent of Petri disease and esca, in vineyards. Plant Disease. 110(6):1216-1225. https://doi.org/10.1094/PHYTO-10-19-0400-RS12161225110

    Selection of indigenous yeast strains for the production of sparkling wines from native Apulian grape varieties

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    Abstract We report the first polyphasic characterization of native Saccharomyces cerevisiae in order to select candidate strains for the design of starter cultures tailored for Apulian sparkling wines obtained from local grape variety. In addition, it is the first survey in our region that propose the selection of autochthonous starter cultures for sparkling wine i) including a preliminary tailored genotypic and technological screening, and ii) monitoring analytical contribution during secondary fermentation in terms of volatile compounds (VOCs). Furthermore, we exploit the potential contribute of autochthonous cultures throughout the productive chain, including the possible improvement of base wine. One representative strain from each cluster was characterized i) for tolerance to abiotic and biotic stressors peculiar of sparkling wine fermentation, ii) for the performances in base wine production, and iii) for the aptitudes to promote in-bottle secondary fermentation in white and rose sparkling wines, both obtained from Apulian grape varieties. Genetic characterization led to group 164 S. cerevisiae in 16 genetic clusters based on interdelta profiles. Stress tolerance assays shown a certain correlation with fermentative attitude. Our evidences demonstrated a different fermentative behavior and release of VOCs of the different strains in association with primary and secondary fermentations and as function of wine and rose sparkling wine. Furthermore, performances in white/rose sparkling wines have been found to be strain-dependent characters. Overall, we propose different strains as biotechnological resources suitable to improve the quality of regional sparkling wines and to provide a driver of innovation/segmentation in the market

    Use of autochthonous yeasts and bacteria in order to control Brettanomyces bruxellensis in wine

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    Biocontrol strategies for the limitation of undesired microbial developments in foods and beverages represent a keystone toward the goal of more sustainable food systems. Brettanomyces bruxellensis is a wine spoilage microorganism that produces several compounds that are detrimental for the organoleptic quality of the wine, including some classes of volatile phenols. To control the proliferation of this yeast, sulfur dioxide is commonly employed, but the efficiency of this compound depends on the B. bruxellensis strain; and it is subject to wine composition and may induce the entrance in a viable, but nonculturable state of yeasts. Moreover, it can also elicit allergic reactions in humans. In recent years, biological alternatives to sulfur dioxide such as the use of yeasts and lactic acid bacteria starter cultures as biocontrol agents are being investigated. The controlled inoculation of starter cultures allows secure, fast and complete alcoholic and malolactic fermentations, limiting the residual nutrients that B. bruxellensis utilizes to survive and grow in wine. The current study is focused on the assessment of the effect of autochthonous yeasts and bacterial strains from the Apulia Region on the development of B. bruxellensis in wine, in terms of both growth and volatile phenols' production. The investigation evidences the positive role of indigenous mixed cultures in the control of this spoilage yeast, either co-inoculating different strains of Saccharomyces cerevisiae, S. cerevisiae/non-Saccharomyces or co-inoculating S. cerevisiae/Oenococcus oeni. Our findings expand the existing knowledge of the application of protechnological microbial diversity and of non-Saccharomyces as a biocontrol agent in oenology. We report a further demonstration of the interest in selecting indigenous strains as a strategic tool for winemakers interested in the improvement of regional wines

    La Orientaci贸n acad茅mico-profesional en la Educaci贸n Secundaria: una revisi贸n de los modelos actuales

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    La orientaci贸n acad茅mico-profesional es uno de los 谩mbitos desde donde se interviene desde la orientaci贸n educativa. En consonancia con la legislaci贸n actual, tiene un gran peso en la educaci贸n secundaria, sin embargo, no suele desarrollarse de forma integrada y en consonancia >con las exigencias socio-pol铆ticas y econ贸micas. Desde los modelos m谩s actuales se proponen estrategias que pretenden dotar al alumnado de competencias para abordar estas exigencias, por lo que resulta de gran inter茅s estimar si las actuales intervenciones en este 谩mbito est谩n en consonancia con estos modelos y de qu茅 forma se trabajan los contenidos en los centros escolares. La finalidad de este trabajo es comprender en qu茅 momento se encuentra la orientaci贸n acad茅mico-profesional en la etapa de educaci贸n secundaria. Para ello se realiza una revisi贸n sistem谩tica de las investigaciones sobre orientaci贸n-acad茅mico profesional en el 谩mbito de la educaci贸n secundaria desde el a帽o 2017 a 2022. Se identifican 39 art铆culos en total y el an谩lisis se centra en identificar los aportes e implicaciones de los nuevos modelos a la pr谩ctica orientadora para identificar aplicaciones efectivas reales. De las conclusiones se extrae que los modelos cognitivos-conductuales tienen predominancia en la intervenci贸n, mientras que los socioconstructivistas tienen una influencia mayor en la investigaci贸n, aunque siguen teniendo una presencia d茅bil. Es por ello que se podr铆a considerar necesario realizar m谩s estudios sobre la eficacia de la utilizaci贸n de t茅cnicas de intervenci贸n basadas en estos modelos. Palabras clave: orientaci贸n acad茅mico-profesional, revisi贸n sistem谩tica, t茅cnicas >narrativas, socioconstructivismo<br /

    Immobilisation of yeasts on oak chips or cellulose powder for use in bottle-fermented sparkling wine

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    [EN] Sparkling wine production comprises two successive fermentations performed by Sacharomyces cerevisiae strains. This research aimed to: develop yeast immobilisation processes on two wine-compatible supports; study the effects of yeast type (IOC 18-2007 and 55A) and the immobilisation support type (oak chips and cellulose powder) on the fermentation kinetics, the deposition rate of lees and the volatile composition of the finished sparkling wine; compare the fermentation parameters of the wines inoculated with immobilised or non-immobilised cells. Proper immobilisation of yeast on oak chips and cellulose powder was demonstrated by electron microscopy. Total sugar consumption occurred in under 60 days in all bottles, regardless of the strain used and the way they were inoculated in wine. Deposition of lees was 3-fold faster in the bottles containing immobilised cells than in those with free cells; no addition of adjuvants was necessary. The analysis of the volatile compounds of the finished sparkling wines showed significant differences in the formation of esters, acids, alcohols, aldehydes and lactones according to the yeast and the immobilisation support used. Oak chips were the more appropriate support for yeast immobilisation. No significant differences in the sensorial analysis of the sparkling wines produced by the different strategies were found.This work was supported by the "Programa Valoritxa i Transfereix" 2013 (Ref: UV-CPI13274-159983) of the Universitat de Valencia, Valencia, Spain. This institution has not intervened in the collection, analysis and interpretation of the data, nor in the report writing or the decision to publish the manuscript.Berbegal, C.; Polo, L.; Garc铆a Esparza, MJ.; Lizama Abad, V.; Ferrer, S.; Pardo, I. (2019). Immobilisation of yeasts on oak chips or cellulose powder for use in bottle-fermented sparkling wine. Food Microbiology. 78:25-37. https://doi.org/10.1016/j.fm.2018.09.016S25377

    Isolation and characterisation of autochthonous Saccharomyces cerevisiae from 'Pago' Merlot wines of Utiel-Requena (Spain) origin

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    Background and Aims: To achieve both the control of the undesirable yeasts and the improvement of the characteristics of Merlot 'Pago' wines, Saccharomyces cerevisiae yeast diversity was investigated in a spontaneous 'Pago' Merlot fermentation from the Utiel-Requena region (Spain). Isolates of S. cerevisiae were characterised by a holistic procedure using the same Merlot grape must from which they were isolated. Methods and Results: Yeasts were identified by internal transcribed spacer analysis and typed by HinfI mDNA restriction analysis. Growth and metabolic characteristics of the isolates were determined by laboratory-scale (50鈥塋) fermentations of Merlot must and the composition of the polyphenolic and the volatile compounds and the sensory attributes of the wines were determined. Twelve S. cerevisiae strains were isolated and characterised. Strains 2E, 4A, 7A and 7F had better growth characteristics. Strains 9C and 7F produced wines of good intensity and colour quality, marked intensity and aroma quality, fruity character and better overall quality. Strain 9C displayed poor growth. Conclusions: Strain 7F combined good growth characteristics and produced Merlot wines with the best colour, aroma and flavour characteristics during microvinifications. Significance of the Study: Characterisation of S. cerevisiae made entirely in Merlot grape must allowed the influence of yeast strains on the final characteristics of commercial-scale Merlot 'Pago' wines to be more accurately deduced

    Technological properties of Lactobacillus plantarum strains isolated from grape must fermentation

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    Malolactic fermentation (MLF) is a secondary fermentation in wine that usually takes place during or at the end of alcoholic fermentation. Lactobacillus plantarum is able to conduct MLF (particularly under high pH conditions and in co-inoculation with yeasts), and some strains are commercially used as MLF starter cultures. Recent evidences suggest a further use of selected L. plantarum strains for the pre-alcoholic acidification of grape must. In this study, we have carried out an integrated (molecular, technological, and biotechnological) characterization of L. plantarum strains isolated from Apulian wines in order to combine the two protechnological features (MLF performances and must acidification aptitudes). Several parameters such as sugar, pH and ethanol tolerance, resistance to lyophilisation and behaviour in grape must were evaluated. Moreover, the expression of stress gene markers was investigated and was linked to the ability of L. plantarum strains to grow and perform MLF. Co-inoculation of Saccharomyces cerevisiae and L. plantarum in grape must improves the bacterial adaptation to harsh conditions of wine and reduced total fermentation time. For the first time, we applied a polyphasic approach for the characterization of L. plantarum in reason of the MLF performances. The proposed procedure can be generalized as a standard method for the selection of bacterial resources for the design of MLF starter cultures tailored for high pH must

    The Fungal and Bacterial Rhizosphere Microbiome Associated With Grapevine Rootstock Genotypes in Mature and Young Vineyards

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    The microbiota colonizing the rhizosphere and the endorhizosphere contribute to plant growth, productivity, carbon sequestration, and phytoremediation. Several studies suggested that different plants types and even genotypes of the same plant species harbor partially different microbiomes. Here, we characterize the rhizosphere bacterial and fungal microbiota across five grapevine rootstock genotypes cultivated in the same soil at two vineyards and sampling dates over 2 years by 16S rRNA gene and ITS high-throughput amplicon sequencing. In addition, we use quantitative PCR (qPCR) approach to measure the relative abundance and dynamic changes of fungal pathogens associated with black-foot disease. The objectives were to (1) unravel the effects of rootstock genotype on microbial communities in the rhizosphere of grapevine and (2) to compare the relative abundances of sequence reads and DNA amount of black-foot disease pathogens. Host genetic control of the microbiome was evident in the rhizosphere of the mature vineyard. Microbiome composition also shifted as year of sampling, and fungal diversity varied with sampling moments. Linear discriminant analysis identified specific bacterial (i.e., Bacillus) and fungal (i.e., Glomus) taxa associated with grapevine rootstocks. Host genotype did not predict any summary metrics of rhizosphere 伪- and 尾-diversity in the young vineyard. Regarding black-foot associated pathogens, a significant correlation between sequencing reads and qPCR was observed. In conclusion, grapevine rootstock genotypes in the mature vineyard were associated with different rhizosphere microbiomes. The latter could also have been affected by age of the vineyard, soil properties or field management practices. A more comprehensive study is needed to decipher the cause of the rootstock microbiome selection and the mechanisms by which grapevines are able to shape their associated microbial community. Understanding the vast diversity of bacteria and fungi in the rhizosphere and the interactions between microbiota and grapevine will facilitate the development of future strategies for grapevine protection
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