Untersuchungen zur Funktion von Tocopherolen in Arabidopsis thaliana

Um zu klären, ob Tocopherole in Höheren Pflanzen eine Schutzfunktion für das D1-Protein im Photosystem II haben, wurde die tocopheroldefiziente vte1-Mutante von Arabidopsis thaliana charakterisiert. Es konnte gezeigt werden, dass der Beitrag von Tocopherolen an der Entgiftung von 1O2 in Höheren Pflanzen bei Starklicht wichtig ist und eine Schutzfunktion für das D1-Protein besteht. Außerdem wurde gezeigt, dass Tocopherole die Regeneration der D1-Proteinmenge während einer Erholungsphase nach Starklichtexposition beeinflussen. Starklichtversuche mit Lincomycin zeigten auf, dass Tocopherole für den Abbau und die Neusynthese des D1-Proteins wichtig sind. Eine Fettsäureanalyse ergab, dass in den Membranen der vte1-Mutante der Anteil von 16:3 und 18:3 Fettsäuren verringert ist. Es ist daher anzunehmen, dass die Membranfluidität der vte1-Mutante geringer ist als im Wildtyp, wovon der effiziente Ablauf des D1-Protein-turnovers und damit die Reparatur des Photosystems II abhängig sein kann

Automatisierte Messdatenauswertung am Motorprüfstand in Python

In diesem Dokument ist ein Skript vorgestellt, welches Messdaten in Python aus verschiedenen Messsystemen eines Motorprüfstands automatisiert zusammenfasst, erforderliche motorische Berechnungen durchführt und Diagramme ausgewählter Kennwerte zeichnet.:1. Problemstellung 2. Datenverarbeitung im Auswerteskript 2.1. Import der Messdaten 2.2. Benennung der Messdaten zur Datenüberprüfung 3. Verarbeitung und Berechnung 4. Diagrammerstellung zur Auswertung 5. Fazit Literatu

Towards elucidating carnosic acid biosynthesis in Lamiaceae: Functional characterization of the three first steps of the pathway in Salvia fruticosa and Rosmarinus officinalis

Carnosic acid (CA) is a phenolic diterpene with anti-tumour, anti-diabetic, antibacterial and neuroprotective properties that is produced by a number of species from several genera of the Lamiaceae family, including Salvia fruticosa (Cretan sage) and Rosmarinus officinalis (Rosemary). To elucidate CA biosynthesis, glandular trichome transcriptome data of S. fruticosa were mined for terpene synthase genes. Two putative diterpene synthase genes, namely SfCPSand SfKSL, showing similarities to copalyl diphosphate synthase and kaurene synthase-like genes, respectively, were isolated and functionally characterized. Recombinant expression in Escherichia coli followed by in vitro enzyme activity assays confirmed that SfCPS is a copalyl diphosphate synthase. Coupling of SfCPS with SfKSL, both in vitro and in yeast, resulted in the synthesis miltiradiene, as confirmed by 1D and 2D NMR analyses (1H, 13C, DEPT, COSY H-H, HMQC and HMBC). Coupled transient in vivo assays of SfCPS and SfKSL in Nicotiana benthamiana further confirmed production of miltiradiene in planta. To elucidate the subsequent biosynthetic step, RNA-Seq data of S. fruticosa and R. officinalis were searched for cytochrome P450 (CYP) encoding genes potentially involved in the synthesis of the first phenolic compound in the CA pathway, ferruginol. Three candidate genes were selected, SfFS, RoFS1 and RoFS2. Using yeast and N. benthamiana expression systems, all three where confirmed to be coding for ferruginol synthases, thus revealing the enzymatic activities responsible for the first three steps leading to CA in two Lamiaceae genera

Automatisierte Messdatenauswertung am Motorprüfstand in Python

In diesem Dokument ist ein Skript vorgestellt, welches Messdaten in Python aus verschiedenen Messsystemen eines Motorprüfstands automatisiert zusammenfasst, erforderliche motorische Berechnungen durchführt und Diagramme ausgewählter Kennwerte zeichnet.:1. Problemstellung 2. Datenverarbeitung im Auswerteskript 2.1. Import der Messdaten 2.2. Benennung der Messdaten zur Datenüberprüfung 3. Verarbeitung und Berechnung 4. Diagrammerstellung zur Auswertung 5. Fazit Literatu

Automatisierte Messdatenauswertung am Motorprüfstand in Python

In diesem Dokument ist ein Skript vorgestellt, welches Messdaten in Python aus verschiedenen Messsystemen eines Motorprüfstands automatisiert zusammenfasst, erforderliche motorische Berechnungen durchführt und Diagramme ausgewählter Kennwerte zeichnet.:1. Problemstellung 2. Datenverarbeitung im Auswerteskript 2.1. Import der Messdaten 2.2. Benennung der Messdaten zur Datenüberprüfung 3. Verarbeitung und Berechnung 4. Diagrammerstellung zur Auswertung 5. Fazit Literatu

A library of synthetic transcription activator-like effector-activated promoters for coordinated orthogonal gene expression in plants

A library of synthetic promoters containing the binding site of a single designer transcription activator-like effector (dTALE) was constructed. The promoters contain a constant sequence, consisting of an 18-base long dTALE-binding site and a TATA box, flanked by degenerate sequences of 49 bases downstream and 19 bases upstream. Forty-three of these promoters were sequenced and tested in transient assays in Nicotiana benthamiana using a GUS reporter gene. The strength of expression of the promoters ranged from around 5% to almost 100% of the viral 35S promoter activity. We then demonstrated the utility of these promoters for metabolic engineering by transiently expressing three genes for the production of a plant diterpenoid in N. benthamiana. The simplicity of the promoter structure shows great promise for the development of genetic circuits, with wide potential applications in plant synthetic biology and metabolic engineering

Highly selective visible light-induced Ti–O bond splitting in an ansa-titanocene dihydroxido complex

Irradiation of a substituted ansa-titanocene(IV) dihydroxido complex with visible light induces Ti–O bond dissociation. In contrast to previous studies on structurally similar unbridged complexes, no side reactions are observed and formation of the Ti(III) species is highly selective. The formation of OH radicals was proved using a biradicaloid species

Characterization of two genes for the biosynthesis of abietane-type diterpenes in rosemary (<i>Rosmarinus officinalis</i>) glandular trichomes

Rosemary (Rosmarinus officinalis) produces the phenolic diterpenes carnosic acid and carnosol, which, in addition to their general antioxidant activities, have recently been suggested as potential ingredients for the prevention and treatment of neurodegenerative diseases. Little is known about the biosynthesis of these diterpenes. Here we show that the biosynthesis of phenolic diterpenes in rosemary predominantly takes place in the glandular trichomes of young leaves, and used this feature to identify the first committed steps. Thus, a copalyl diphosphate synthase (RoCPS1) and two kaurene synthase-like (RoKSL1 and RoKSL2) encoding genes were identified and characterized. Expression in yeast (Saccharomyces cerevisiae) and Nicotiana benthamiana demonstrate that RoCPS1 converts geranylgeranyl diphosphate (GGDP) to copalyl diphosphate (CDP) of normal stereochemistry and that both RoKSL1 and RoKSL2 use normal CDP to produce an abietane diterpene. Comparison to the already characterized diterpene synthase from Salvia miltiorrhiza (SmKSL) demonstrates that the product of RoKSL1 and RoKSL2 is miltiradiene. Expression analysis supports a major contributing role for RoKSL2. Like SmKSL and the sclareol synthase from Salvia sclarea, RoKSL1/2 are diterpene synthases of the TPS-e group which have lost the internal gamma-domain. Furthermore, phylogenetic analysis indicates that RoKSL1 and RoKSL2 belong to a distinct group of KSL enzymes involved in specialized metabolism which most likely emerged before the dicot-monocot split.This work was supported by E.U. Grant agreement KBBE-227448 for the TERPMED project (http://www.terpmed.eu). Ric C. H. de Vos acknowledges the Netherlands Metabolomics Centre, which is part of the Netherlands Genomics Initiative/Netherlands Organization for Scientific Research, for additional funding.Peer reviewe