Técnicas avançadas de biologia molecular e transcritómica aplicadas a actinomycetes

Nowadays, the resistance to antibiotics is turning to be one of the biggest concerns of this century. It is risking our public health and might be, in the future, one of the deadliest health issues. Therefore, a solution is needed. Streptomyces is known as a genus that is responsible for many antibiotics. However, in the latest years, the number of antibiotics that reached the clinical use diminished, due to various reasons. The secondary metabolism is composed by a number of processes that, even though aren’t of extreme importance to the cell survival, can give it several advantages. Most of those advantages come as secondary metabolites, and some are known as antibiotics. On the other hand, phosphorus is one of the most important elements to any organism, and, therefore, a mechanism is needed to make sure that this element is regulated. One of the systems that does that depends on PhoR-PhoP. With the discovery of a new type of RNAs, the sRNAs (which have between 50 and 400 nucleotides) the investigation of new compounds with pharmaceutical and industrial importance may continue to go forward, since some of those molecules may function as regulators of the secondary metabolism and, therefore, be related to antibiotics. The aim of this work is to identify sRNAs that are implicated in the phosphate regulation, which is the main assimilation form of phosphorus. My objective in this study was to experience what was like to work in a laboratory, by learning some molecular biology and transcriptomic techniques, such as DNA introduction into cells and nucleic acid extraction, needed for this study.Hoje em dia, a resistência a antibióticos está a tornar-se numa das maiores preocupações do século. Esta problemática está a arriscar a nossa saúde pública e pode vir a tornar-se, no futuro, num dos problemas de saúde mais letais. Portanto, uma solução é necessária. Streptomyces é conhecido como o género que é responsável por imensos antibióticos. Porém, nestes últimos anos, o número de antibióticos que chegaram a uso clínico diminuiu, devido a várias razões. Metabolismo secundário é composto de vários processos que, ainda que não sejam fundamentais para a sobrevivência da célula, dão-lhe imensas vantagens. A maior parte destas vantagens originam-se a partir dos metabolitos secundários, alguns deles conhecidos como antibióticos. Por outro lado, fósforo é um dos elementos mais importantes para qualquer organismo e, por isso, necessita de um mecanismo que se assegure que ele está sempre regulado. Um destes sistemas depende de PhoR-PhoP. Com a descoberta de um novo tipo de RNAs, os sRNAs (que têm entre 50 a 400 nucleótidos), a investigação de novos compostos com importância farmacêutica e industrial pode continuar a avançar, dado que algumas destas moléculas podem funcionar como reguladoras do metabolismo secundário e, por isso, estar relacionadas com antibióticos. O objetivo deste trabalho é identificar sRNAs que estão implicados na regulação de fosfato, a principal forma de assimilação de fósforo. A minha função era experienciar o que era trabalhar num laboratório, ao aprender algumas técnicas de biologia molecular e transcritómica, como introdução de DNA em células e extração de ácidos nucleicos, necessárias para este projeto.Mestrado em Biologia Molecular e Celula

The effect of water inorganic matrix in ibuprofen adsorption onto activated carbon for water and wastewater treatment

Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Engenharia Química e BioquímicaIn this thesis the ibuprofen adsorption onto activated carbon F400 was studied. Some of the chemical and physical properties of the carbon were studied, with two different particle sizes and one functionalized carbon. Through model solutions of natural and wastewaters, the influence of the pH and ionic strength was studied, varying also the ratio of monovalent and divalent ions. The integrated analyses of the chemical and the textural characterization of the carbons as well as the kinetic and isotherm studies performed, using non-linear models for the parameters calculation and respective fittings of the experimental data allowed the following conclusions: i) the carbon particle size has a significant influence on the adsorption, being the limiting step the external mass transfer for the smaller granulometry, while for the larger granulometry the process was governed by the internal diffusion; ii) increasing the basicity of the carbon surface (functionalized carbon) it was possible to obtain better removal ratios, so the chemical surface is relevant in this process; iii) adsorption at acid pH is primarily governed by hydrophobic forces and the compound removal is favored; iv) when electrostatic forces govern the reaction (pH 6-8) the adsorption greatly depends on the ionic strength, being favored when the adsorbent/adsorbate interactions are repulsive and disfavored when the interactions are attactive; v) for saline waters with high pH it proved disadvantageous the use of carbon with higher basicity, possibly because the two effects cancel each other out the functionalization has only proven effective when the pH and the ionic strength varied inversely; vi) the ibuprofen adsorption did not varied when the only parameter changed was the type of ion, the ions used were the calcium (which confers hardness) and the potassium (conferring salinity). Therefore, only the ionic strength seems to influence the compound adsorption and not the nature of the ions

Influence of particle size on the ecotoxicity of low-density polyethylene microplastics, with and without adsorbed benzo-a-pyrene, in the clam Scrobicularia plana

Plastic was introduced massively into the world on the beginning of the 1950’s and has accumulated in terrestrial and marine environments since then. Its world-wide production almost reached 350 million tons in 2017. MPs became bioavailable to predatory filter feeding organisms and others at higher trophic levels. This study investigated the ecotoxicological effects in the gills and digestive gland of the clam Scrobicularia plana, exposed to different sizes of low density polyethylene (LDPE) microplastics with and without adsorbed benzo-a-pyrene (BaP), to evaluate the potential effect of different sizes on microplastics accumulation and of microplastics as a source of chemical contamination once ingested. S. plana was exposed to 1 mgL-1 of two different sizes of microplastics, 4-6μm and 20-25 μm, with and without BaP (at environmentally relevant concentrations) for 14 days. To determine the ecotoxicological effects a set of biomarkers were analysed: oxidative stress including the quantification of antioxidant enzymes activities (superoxide dismutase - SOD and catalase - CAT) and biotransformation enzyme activity (glutathione-S-transferases - GST), oxidative damage (lipid peroxidation - LPO), and neurotoxicity (acetylcholinesterase - AChE). The condition index was evaluated to assess the overall health status of the organism. To have a better impact perspective of these contaminants in this bivalve species an integrated biomarker response index (IBR) and a Health Index was applied. All sizes of microplastics were significantly accumulated in MPs exposed clams when compared to control and pre-exposure. In relation to antioxidant enzyme activities, SOD was noted a higher response in the gills for the bigger size of LDPE + BaP MPs. CAT activity is lower in the gills showing a decrease for smaller and bigger + BaP MPs. GST had a significant increase for the bigger size with BaP only on the 7th day. No significant differences either with size or time of exposure for the digestive gland. Oxidative damage was higher in the digestive gland for smaller virgin LDPE MPs with and without BaP. Neurotoxicity showed no inhibition responses during exposure time. Biomarkers alterations are apparently more related to the smaller size in gills and related to the virgin LDPE MPs in the digestive gland according to IBR results. As a final step a health index was performed demonstrating that the digestive gland was more affected by these microplastics.aumento de produção nas últimas décadas devido ao seu consumo excessivo, acumulando-se em zonas terrestres e marinhas. A sua produção mundial atingiu 350 milhões de toneladas em 2017, 64,4 milhões dos quais são produzidas na Europa, o segundo maior produtor de plástico (18,5 %). São imensos os impactos dos microplásticos no meio marinho e o zooplâncton é a primeira espécie-alvo tornando os microplásticos bio disponíveis para organismos filtradores e consequentemente organismos de níveis tróficos mais elevados. Este estudo teve como objetivo investigar os efeitos ecotoxicológicos nas brânquias e glândula digestiva da amêijoa Scrobicularia plana, quando expostas a diferentes tamanhos de microplásticos de baixa densidade (polietileno) com ou sem benzo-a-pireno adsorvido, com o intuito de avaliar o efeito potencial dos diferentes tamanhos de microplásticos acumulados na amêijoa e se esses microplásticos poderiam ser uma fonte de contaminação química, uma vez ingeridos. A S. plana foi exposta 1 mgL-1 de microplásticos de dois tamanhos diferentes, 4-6 μm e 20-25 μm, com e sem BaP, durante 14 dias. Para estudar esses efeitos, um conjunto de biomarcadores foram analisados, incluindo a quantificação da atividade das enzimas antioxidantes (superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase), de biotransformação (glutationa-Stransferases), dano oxidativo (peroxidação lipídica), neurotoxicidade (acetilcolinesterase) e quantificação de microplásticos nas amêijoas expostas. O índice integrado de resposta a biomarcadores (IBR) e o índice de saúde (HIS) foram utilizados para avaliar o nível de stress durante o tempo de exposição. Todos os diferentes tamanhos de microplásticos foram acumulados pelas amêijoas durante o tempo de exposição, com maior significância para micropartículas menores. Em relação à atividade das enzimas antioxidantes, a atividade da SOD demonstrou maior atividade nas brânquias para os tamanhos maiores quando o BaP estava presente. A GST demonstrou um aumento significativo para o tamanho maior com BaP apenas no 7º dia de exposição. Na glândula digestiva não demonstrou diferenças significativas. A atividade da CAT é menor nas brânquias demonstrando uma diminuição para ambos os tamanhos de MPs+BaP. O dano oxidativo aumentou em ambos os tecidos. No entanto, níveis mais elevados foram observados na glândula digestiva para microplásticos de menor tamanho. A neurotoxicidade não mostrou respostas de inibição durante o tempo de exposição. Aparentemente, as alterações dos biomarcadores estão mais relacionadas ao menor tamanho das brânquias e aos MPs virgens na glândula digestiva, de acordo com os resultados do IBR. HIS demonstrou um elevado e maior impacto na saúde da glândula digestiva durante todo o tempo de exposição

First advances in near fall detection and prediction when using a walker

Dissertação de mestrado integrado em Engenharia Biomédica (área de especialização em Eletrónica Médica)Falls are a major concern to society. Several injuries associated with falls need medical care, and in the worst-case scenario, a fall can lead to death. These consequences have a high cost for the population. In order to overcome these problems, a diversity of approaches for detection, prediction, and prevention of falls have been tackled. Walkers are often prescribed to subjects who present a higher risk of falling. Thus, it is essential to develop strategies to enhance the user's safety in an imminent danger situation. In this sense, this dissertation aims to develop a strategy to detect a near fall (NF) and its direction as well as the detection of incipient near fall (INF) while the subject uses a walker. Furthermore, it has the purpose of detecting two gait events, the heel strike (HS) and the toe-off (TO). The strategies established, in this work, were based on the data gathered through an inertial sensor placed on the lower trunk and force sensors placed on the insoles. Following data collection, the methodology adopted to identify the situations aforementioned was based on machine learning algorithms. In order to reach the model with best performance, many combinations of different classifiers were tested with three feature selection methods. Regarding the detection of NF, the results achieved presented a Matthews Correlation Coefficient (MCC) of 79.99% being possible to detect a NF 1.76±0.76s before its end. With the implementation of the post-processing algorithm, a large part of the false positives was eliminated being able to detect all NF 1.48±0.68s before its end. Concerning the models built to distinguish the direction of the NF, the best model presented accuracy of 58.97% being unable to reliably distinguish the three fall directions. The methodology followed, in this work, was unsuccessful to detect an INF. The best model presented MCC=23.87%, in this case. Lastly, with respect to the detection of HS and TO events the best model reached MCC=86.94%. With the application of the post-processing algorithm, part of misclassified samples was eliminated, however, a delay in the detection of the HS and TO events was introduced. With the post-processing it was possible to reach MCC=88.82%, not including the imposed delay.As quedas representam uma grande preocupação para a sociedade. Várias lesões associadas às quedas necessitam de cuidados médicos e, no pior dos casos, uma queda pode levar à morte. Estas consequências traduzem-se em custos elevados para a população. A fim de ultrapassar estes problemas, várias abordagens têm sido endereçadas para deteção, previsão e prevenção das quedas. Os andarilhos são muitas vezes prescritos a sujeitos que apresentam um risco de queda maior. Desta forma, é essencial desenvolver estratégias para aumentar a segurança do utilizador perante uma situação de perigo iminente. Neste sentido, esta dissertação visa desenvolver uma estratégia que permita a deteção de uma quase queda (NF) e a sua direção, assim como a deteção incipiente de uma NF (INF). Para além disso, tem o objetivo de detetar dois eventos de marcha, o heel strike (HS) e o toe-off (TO). As estratégias definidas, neste trabalho, basearam-se nos dados recolhidos através de um sensor inercial posicionado no tronco inferior e de sensores de força colocados nas palmilhas. Após a aquisição dos dados, a metodologia adotada para identificar as situações anteriormente referidas foi baseada em algoritmos de machine learning. Com o intuito de obter o modelo com melhor desempenho, várias combinações de diferentes classificadores foram testadas com três métodos de seleção de features. No que concerne à deteção da NF, os resultados alcançados apresentaram um Matthews Correlation Coefficient (MCC) de 79.99% sendo possível detetar uma NF 1.76±0.76s antes do seu final. Com a implementação do algoritmo de pós-processamento, grande parte dos falsos positivos foram eliminados, sendo possível detetar todas as NF 1.48±0.68s antes do seu final. Em relação aos modelos construídos para distinguir a direção da NF, o melhor modelo apresentou uma precisão (ACC) de 59.97%. A metodologia seguida neste trabalho não foi bem sucedida na deteção INF. O melhor modelo apresentou um MCC=23.87%. Relativamente à deteção dos eventos, HS e TO, o melhor modelo atingiu um MCC=86.94%. Com a aplicação do algoritmo de pós-processamento parte das amostras mal classificadas foram eliminadas, no entanto, foi introduzido um atraso na deteção do HS e do TO. Com o pós-processamento foi possível obter um MCC=88.82%, não incluindo o atraso imposto pelo pós-processamento

Helping scientists integrate and interact with biomedical data

Tese de mestrado, Bioinformática e Biologia Computacional , 2021, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasFor the past decades, the amount and complexity of biomedical data available have increased and far exceeded the human capacity to process it. To support this, knowledge graphs and ontologies have been increasingly used, allowing semantic integration of heterogeneous data within and across domains. However, the independent development of biomedical ontologies has created heterogeneity problems, with the design of ontologies with overlapping domains or significant differences. Automated ontology alignment techniques have been developed to tackle the semantic heterogeneity problem, by establishing meaningful correspondences between entities of two ontologies. However, their performance is limited, and the alignments they produce can contain erroneous, incoherent, or missing mappings. Therefore, manual validation of automated ontology alignments remains essential to ensure their quality. Given the complexity of the ontology matching process, is important to provide visualization and a user interface with the necessary features to support the exploration, validation, and edition of alignments. However, these aspects are often overlooked, as few alignment systems feature user interfaces enabling alignment visualization, fewer allow editing alignments, and fewer provide the functionalities needed to make the task seamless for users. This dissertation developed VOWLMap — an extension for the standalone web application, WebVOWL — for visualizing, editing, and validating biomedical ontology alignments. This work extended the Visual Notation for OWL Ontologies (VOWL), which defines a visual representation for most language constructs of OWL, to support graphical representations of alignments and restructured WebVOWL to load and visualize alignments. VOWLMap employs modularization techniques to facilitate the visualization of large alignments, while maintaining the context of each mapping, and offers a dynamic visualization that supports interaction mechanisms, including direct interaction with and editing of graph representations. A user study was conducted to evaluate the usability and performance of VOWLMap, having obtained positive feedback with an excellent score in a standard usability questionnaire

Dietary interventions to prevent childhood obesity: a literature review

Trabalho Complementar apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Licenciada em Ciências da NutriçãoIntrodução: A obesidade tem aumentando em todo o mundo, sendo as crianças em particular um motivo de preocupação para a saúde pública. A obesidade é uma doença multifatorial complexa. Acredita-se que o rápido aumento da obesidade infantil ao nível populacional possa ser decorrente de interações genes-ambiente, potencializadas por um ambiente obesogénico cada vez mais permissivo, incorporado num modelo contextual com diferentes níveis de determinantes. Sabe-se que a alimentação e outros hábitos são moldados nas etapas iniciais da vida e mantidos até a idade adulta. Portanto, várias intervenções, incluindo mudanças nos hábitos alimentares, foram feitas com a intenção de prevenir/reduzir a obesidade infantil. Sabe-se que a maioria delas tem falhado no combate à epidemia da obesidade. Objetivo: Este estudo tem como objetivo rever a literatura existente sobre intervenções alimentares para prevenção da obesidade infantil e avaliar a sua efetividade. Métodos: Realizou-se uma pesquisa bibliográfica usando o motor de busca PubMed Central®. Os termos usados para esta pesquisa foram “(pediatric obesity) OR (childhood obesity) AND (primary prevention) AND diet”. Somente artigos publicados nos últimos 10 anos, escritos em inglês e conduzidos em humanos foram incluídos. Nesta pesquisa, foram considerados 17 estudos. Outros artigos adicionais foram incluídos nesta tese (n=84), resultantes de uma pesquisa em snowball ou para contextualizar as intervenções alimentares para a prevenção da obesidade infantil, totalizando 101 referências. Resultados: A maioria dos estudos incluídos nesta revisão foram intervenções realizadas em contexto escolar, com algumas abordando toda a comunidade e incluindo algumas intervenções no setor alimentar (por exemplo, taxação de produtos com elevado teor de gordura/açúcar, sistema de rotulagem único) e através dos meios de comunicação de massa (por exemplo, restrições à publicidade para crianças) que direta ou indiretamente poderiam ajudar a combater a obesidade infantil. A maioria dos programas/intervenções realizados foca-se principalmente em abordagens educacionais baseadas no indivíduo, como sessões de educação nutricional/alimentar, aliadas à promoção de atividade física e estilos de vida para os estudantes, pais e funcionários da escola, e menos em mudanças ambientais que fomentem uma oferta de escolhas mais saudáveis. Apenas alguns ensaios clínicos focaram-se na capacitação e mudanças de macropolíticas, como a adaptação do ambiente escolar, servindo porções menores e aumentando a disponibilidade e acessibilidade de alimentos saudáveis e água nas escolas, e restringindo o acesso a máquinas de venda automática, por exemplo. No geral, a maioria dos estudos de intervenção não mostrou efeitos consistentes na alteração do índice de massa corporal das crianças; mostraram apenas pequenas reduções de peso, clinicamente irrelevantes ou nenhum efeito. Pouco se sabe sobre a sustentabilidade das intervenções ao longo do tempo. No entanto, outros resultados positivos, como a mudança de comportamento alimentar ou melhoria do desempenho de atividade física, foram descritos. Conclusões: A maioria das intervenções alimentares para combater a obesidade infantil foca-se principalmente em abordagens educacionais baseadas no indivíduo e menos em mudanças ambientais para oferecer escolhas comportamentais mais saudáveis. A maioria não conseguiu reduzir a obesidade infantil. A criação de ambientes que apoiem comportamentos saudáveis parece ser a melhor abordagem para mitigar o desafio que é a obesidade. Intervenções multidimensionais complexas, focadas nas mudanças ambientais e no fortalecimento de indivíduos e comunidades, incluindo a família, bem como mudanças de macropolíticas, terão o potencial de combater a obesidade infantil sem aumentar as desigualdades socioeconómicas.Background: Obesity has dramatically increased all over the world and children, in particular, are a cause of public health concern. Obesity is a complex, multifactorial disease. The fast increase of childhood obesity at the population level is believed to be due to gene-environment interactions, enhanced by an increasingly permissive obesogenic environment, embedded in a contextual model with different levels of determinants. It is well known that food and other habits are shaped at the earlier stages of life and maintained through adulthood. Therefore, various interventions, including dietary changes, have been made with the intent of preventing/reducing childhood obesity. Most of them are known to have failed in tackling the obesity epidemic. Purpose: This study aims to review the existing literature on dietary interventions for the prevention of childhood obesity and to assess their effectiveness. Methods: A literature search was conducted by using the PubMed Central®. The mesh terms used for this search were “(pediatric obesity) OR (childhood obesity) AND (primary prevention) AND diet”. Only articles published in the last 10 years, written in English and conducted in humans were included. From this search, 17 studies were retrieved. Additional papers (n=84) were included in this thesis from a snowball process or searched to put into context the dietary interventions for the prevention of childhood obesity, totaling 101 references. Results: The majority of studies included in this review were school-based interventions, with some addressing the whole community, and including some interventions in the food sector (e.g. taxation of high fat/sugar food products, front-of-pack labelling) and through mass media (e.g. restrictions on advertising for children) that directly or indirectly could help to manage childhood obesity. Most of the programs/interventions conducted focus mainly on person-based educational approaches, such as nutrition/diet education sessions, allied to the promotion of physical activity and lifestyles to students, parents and school staff, and less on environmental changes to offer healthier choices. Only some trials have focused on capacity building and macro-policy changes, such as adaptation of the built environment of the school, serving smaller portion sizes and increasing the availability and accessibility of healthy foods and water in schools, and restricting access to vending machines, for example. Overall, most of the intervention studies showed no consistent effects on changing the body mass index of children; they have only reported small weight reductions, clinically irrelevant or no effects at all. Little is known on the sustainability of interventions over time. However, other positive results, such as the change of dietary behaviors or physical activity performance have been described. Conclusions: Most dietary interventions to tackle childhood obesity focus mainly on person-based educational approaches and less on environmental changes to offer healthier behavioral choices. Most of them failed to reduce childhood obesity. The creation of environments supportive of healthier behaviors seems to be the best approach to mitigate the challenge that is obesity. Complex and multi-level interventions focused at environmental changes and the strengthening of individuals and communities, including family, as well as macro-policy changes will have the potential to tackle childhood obesity without increasing socioeconomic inequalities.N/

Variabilidade interobservador da classificação de Waldenström na doença de Perthes: estudo retrospetivo

Trabalho final de mestrado integrado em Medicina (Ortopedia), apresentado à Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra.Introdução: A doença de Perthes é uma patologia da anca que ocorre em crianças. Apresenta uma incidência anual que varia de 2 a 294 por 1.000.000 de crianças, com maior prevalência entre os 4 e os 12 anos de idade, sendo mais comum no sexo masculino. Consiste num evento isquémico transitório, total ou parcial, do núcleo de ossificação da epífise superior do fémur, numa anca em crescimento. Além da fase aguda de lesão óssea, a doença carateriza-se por todo o processo subsequente de reparação e remodelação. Uma das principais dificuldades na orientação de crianças com doença de Perthes decorre do caráter evolutivo da patologia. Os poucos consensos internacionais existentes na abordagem terapêutica da doença dependem da nossa capacidade em enquadrar os doentes em grupos homogéneos, de forma a uniformizar a comunicação médica bem como a tomada de decisão clínica e melhorar a qualidade da informação dada às famílias. O estadiamento obtido pela classificação de Waldenström, ao enquadrar a doença em quatro grupos correspondentes à respetiva fase de evolução, torna-se um instrumento particularmente útil na abordagem desta doença. Materiais e métodos: Estudo de coorte retrospetivo. Seleção dos doentes a partir da base de dados do CHUC, EPE- Hospital Pediátrico, com o código ICD-9 7321. Incluídos doentes a partir do ano 2007, tendo sido excluídos doentes com outras patologias inicialmente classificadas como Perthes. Revisão dos processos clínicos dos doentes com recolha dos dados demográficos e informação relativa ao exame radiográfico das ancas. Compilação e organização das imagens da bacia (face e incidência de Löwenstein) de forma aleatória, intercalada e anónima num ficheiro PDF. Classificação das mesmas por um painel de três ortopedistas e três internos de ortopedia. Considerada como classificação de Waldenström padronizada a modificação publicada no livro de texto Tachdjian (4ª edição) da classificação original de H. Waldenström publicada no artigo de 1922. Análise estatística dos dados de forma a estabelecer a variabilidade interobservador desta classificação. A revisão da literatura foi feita utilizando o pubmed. Resultados: As classificações apresentaram um kappa global médio de 0,392, considerado de grau razoável. Apesar de existirem diferenças entre internos e especialistas em ortopedia (0,330 vs 0,548), estas diferenças não foram consideradas estatisticamente significativas. Mesmo assim, os especialistas apresentaram resultados mais concordantes e fiáveis. Para os internos, o estadio de reossificação foi o que apresentou maior discordância; no caso dos especialistas, houve maior discordância no estadio de fragmentação, tendo-se obtido concordância total no estadio de remodelação. Conclusões: Os resultados do presente estudo sugerem que a classificação de Waldenström, baseada isoladamente em critérios radiográficos, não é uma ferramenta de elevada fiabilidade nem reprodutibilidade para a avaliação dos doentes com Perthes. Assim sendo, admite-se a possibilidade combinar dados do exame físico e da evolução radiográfica a este sistema de classificação, no sentido de melhorar estes parâmetros e tornar mais fiável a decisão clínica nesta patologia.INTRODUCTION: Perthes’ disease is a disorder of the hip in young children. The annual incidence of this disorder ranges from 2 to 294 per 1.000.000 children, with higher prevalence between 4-12 years, being more common in males. The disease consists in a total or partial, transient ischemic event of the ossific nucleus of the superior epiphysis of the femur, in a growing hip. Besides the acute phase of the bone lesion, the disease is characterized by all the subsequent process of repair and remodelling. One of the main difficulties treating children with Perthes’ disease lies on the evolving character of the pathology. The few existing international consensus about the therapeutic approach rely on our ability to divide the children into homogeneous groups, to uniformize the medical communication as well as the clinical decision and improve the quality of the information given to the families. The staging method obtained by the Waldenström criteria, dividing the disease into four different stages corresponding on their evolution phase, becomes a useful tool to approach this disease. MATERIALS AND METHODS: Retrospective cohort study. Selection of the patients according to the database from CHUC, EPE-Hospital Pediátrico (code: ICD-97321). Included patients from 2006. Excluded patients with other diseases that were initially diagnosed with Perthes’ disease. Revision of the radiological data of the children’s hips. Collection and ordering of the radiographs (anteroposterior and Löwenstein incidence), randomly and anonymously in a PDF file. Staging of the radiographs by a panel of 3 orthopaedic residents and 3 orthopaedic surgeons. Considered the Waldenström classification published in the Tachdjian (4th edition) modified from the original published in the 1922’s article. Statistical analysis of the data to establish inter-rater reliability of this staging system. The literature review was based on Pubmed. RESULTS: The mean kappa value was 0,392 (reasonable). Even though there was discrepancy among the classification of interns and specialists (k=0,330 vs k=0,548), the differences were not considered statistically relevant. Nevertheless, the specialists were more consistent and reliable. The reossification stage presented the most disagreement amid interns. Among specialists, the fragmentation stage was the most discordant and the residual stage presented total agreement. CONCLUSIONS: The results of the present study suggest that the Waldenström Classification, if considering radiographs alone, is not a reliable tool to evaluate patients with Perthes’ disease. Therefore, we consider the possibility of combining data from physical examination and x-ray sequences to improve the reliability of this classification system and the clinical decision of this disease in the future

Marketing persona formulation and content strategy analysis for PHC Software, SA

JEL Classification System: M15; M31The customer’s role has grown in importance through the years. In the current technological and information age, it is crucial for companies to understand the customer’s needs and motives, as well as ways to attract new customers (Derunova and Semenov, 2013). In this paper, the persona tool is created for each of the PHC Software SaaS Products, PHC Business FX, PHC Billing FX and the PHC POS FX. Personas are fictitious representations embodying behaviours, pain points, goals and characteristics of real customers or target audiences (Junior and Filgueiras, 2005) that can be used as a tool to better understand customers and from there develop strategies. After the analysis of the main target audiences for these products, this paper then, elaborates an analysis of the correspondent content marketing strategy. By analysing the current content and its communication channels, this paper aims to find gaps in the current strategy with the use of the persona’s tool and provide recommendations on how the company might minimize its distance to the customers and further improve its relationship.O papel do consumidor tem vindo a ganhar importância ao longo dos anos. No atual panorama tecnológico e informacional, compreender as atuais necessidades e motivações do consumidor, assim como, novas formas de atrair novos clientes é determinante para as empresas (Derunova e Semenov, 2013). Neste trabalho, a ferramenta ‘Persona’ é criada para cada um dos produtos SaaS da PHC Software: PHC Business FX, PHC Billing FX e o PHC POS FX. Personas são representações ficcionais que incorporam os comportamentos, adversidades, objetivos e características de consumidores reais ou públicos alvo (Junior e Filgueiras, 2005), que podem ser utilizados como uma ferramenta para melhor compreender os consumidores e a partir dai desenvolver estratégias. Após a análise do público-alvo destes produtos, é elaborada uma analise à correspondente estratégia de conteúdo da empresa. Ao analisar o conteúdo atual e os meios de comunicação utilizados, este trabalho tem por objetivo encontrar lacunas na atual estratégia, através do uso de personas, e fornecer recomendações de como a empresa poderá minimizar a distância e otimizar as relações para com os atuais consumidores e público-alvo