Differential Proteome of Buccal Ganglion in Aplysia Induced by Heavy Metal

海兔(Aplysia)归属于腹足纲软体动物，它是开展分子神经生物学研究的经典模式之一。相对而言，海兔神经系统不仅简单且细胞分子尺寸大，而且适合于采用常规细胞生物学技术进行形态学与细胞生物学研究。近十几年来，在神经分子生物学研究领域中所获得部分突破性研究成果均取材于海兔或其它软体动物的中枢神经系统(centralnervoussystem,CNS)。深入开展海兔CNS功能蛋白质和神经多肽（neuropeptide，NP）结构与功能的研究可能有助于理解和阐明人及高等动物神经系统的活动规律和调控机制；例如：记忆形成、神经性生理调控和神经系统疾病起因等。本论文选用蓝斑背肛海兔（Notarcusleac...Aplysia is a kind of mollusk animal belonging to gastropod class. It is also one of the most important model creatures for molecular neuroscience research. The central nerve system (CNS) of Aplysia is relatively simple, and the size of its cell is relatively large, making it ideal for carrying out cytological and biochemical investigations. In recent 10 years, many outstanding achievements in neur...学位：理学硕士院系专业：生命科学学院生物化学与生物技术系_生物化学与分子生物学学号：20032608

双向电泳技术研究镉诱导后牙鲆肝的差异蛋白质组

采用改良的TCA/丙酮法直接提取牙鲆肝脏蛋白质组,并采用双向凝胶电泳技术予以分离.实验结果表明:经氯化镉诱导后,牙鲆肝表达出16个差异蛋白质(斑点),其中4个斑点上调,2个斑点下调,6个斑点消失,新增4个斑点;并且蛋白质斑点在凝胶上的分布表现出较高的重复性.一旦这些差异蛋白质点在双向凝胶电泳图谱上实现标准指纹化后,其图谱中的差异蛋白斑点分布规律可用于监测与评价流动水体中镉污染程度及危害性

优化分离与鉴定蓝斑背肛海兔口腔神经节蛋白质组

采用双向凝胶电泳技术优化分离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)蛋白质组,并获得约300个蛋白质斑点.用组合基质辅助激光解吸电离化飞行时间(MALD I-TOF)质谱技术和胶内酶解技术测定BG蛋白质组中的96个蛋白质斑点的肽指纹(Peptide m ass fin-gerprint,PMF)图谱.经数据库检索与比对后,发现96种蛋白质中仅有4种蛋白质可获得较高的匹配率,它们分别是微管蛋白(Tubu lin)、肌动蛋白(Actin)和两个1,5-二磷酸核酮糖-羧化酶/加氧酶(R ibu lose-1,5-b i-sphosphate carboxylase/oxygenase,R ibu lose),均属于神经细胞骨架蛋白质;同时还发现一种交配信号肽前体(Peptide m ating pheromone precursor).利用LOC trees软件和分类法对56种蛋白质进行亚细胞定位与分类

在镉盐胁迫下用蛋白质组学技术筛选与鉴定海兔亚口腔神经节的差异蛋白质

以蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)的口腔神经节(Buccal ganglion,BG)为研究对象,按BG形态对称性,解剖成亚BG(sub-BG,SBG),并分为左SBG和右SBG,简称为LSBG和RSBG.用双向凝胶电泳(2D-PAGE)技术优化分离LSBG和RSBG全蛋白质,并采用蛋白质组学和数据库比对技术筛选与鉴定差异蛋白质.实验结果表明,LSBG和RSBG之间的差异蛋白质主要由活性多肽的前体蛋白或降解后大片段多肽组成,它们对维持BG的生理功能起着重要的作用.在急性镉盐(10μg/mL)胁迫下,NLCS的LS-BG和RSBG表达了由镉盐诱导的差异蛋白质,并采用蛋白质组学技术分别分离、筛选和鉴定,其主要的差异蛋白质有下调的肌球蛋白、钙结合蛋白、上调的热休克蛋白和硫氧还蛋白.这些蛋白质可能与BG细胞抗镉毒性有关,部分差异蛋白质适合于监测镉盐污染且开展毒理学研究的蛋白指示物

提取与分离方法影响海兔口腔神经节蛋白质组的分离效果

选用丙酮沉淀法和直接裂解法分别提取离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)全蛋白质,发现采用直接裂解法所获得BG蛋白质种类多于丙酮沉淀法.在第一向等电聚焦电泳(IEF)中,分别选用pH为3.0~9.0,4.0~6.0和5.0~8.0的载体两性电解质,发现载体两性电解质pH范围为5.0~8.0时分离效果最好.使用Melanie 4 Trial软件统计BG蛋白质斑点数目约为290点,适于开展BG蛋白质组学研究

质谱技术在筛选肺癌血清差异多肽与蛋白质的应用

采用凝胶排阻层析(SEC)与MALD I-TOF质谱非在线联用技术研究男性血清中多肽与蛋白质的组成与分布.实验结果表明,分离介质Sephadex G-75比Sephadex G-50和Sephadex G-100更加适合血清多肽与蛋白质的预分离.男性血清经Sephadex G-75层析柱预分离和MALD I-TOF质谱分析后,可获得56个多肽与蛋白质的分子离子峰.差异比对实验表明,在正常人与患有肺癌疾病的男性血清中,正常男性血清存在着7种不同质荷比(m/z)的差异多肽与蛋白质,其m/z的比值分别为4 808,6 867,6 912,7 036,27 990,28 120,50 687;反之,在肺癌患者血清中发现差异的m/z值为6 139,6 544,8 417,8 480,11 109.这些差异多肽与蛋白质为临床诊断正常人和患有肺癌疾病患者的标记物提供一条途径

HPLC和MALDI-TOF质谱技术研究海兔口腔神经节多肽组分与分布

蓝斑背肛海兔中枢神经系统相比于其他海兔,缺少脏神经节.口腔神经节是蓝斑背肛海兔的主要神经节之一,它控制着口腔和其他附属器官的生理活动,其中多肽起着重要的作用.本文选用反相高效液相色谱和质谱非在线联用技术分析口腔神经节多肽组成与分布情况,发现口腔神经节含有丰富的神经活性多肽组分,以颊肽、肌肉调节素、心脏活性小肽、肌动蛋白片段和吸引素为主.经Paws软件和数据库检索分析后,发现部分多肽组成来自于前体蛋白的酶解产物,认为这些酶解产物与其他多肽一同参与执行口腔神经节各种不同的生理功能

茶多酚及茶多酚锗的组成、结构和抑制肺癌细胞生长速率的研究

采用有机合成法合成茶多酚-锗化合物.运用反相液相色谱技术初步分离茶多酚和茶多酚锗的酚类组成.选用基质辅助激光解吸电离化飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术分析茶多酚及茶多酚-锗的组成和结构.结果表明,茶多酚主要由儿茶素及酚类化合物组成,其中(-)表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、(-)表没食子儿茶素没食子棓酸甲酯(EGC-MG)和表三羟基黄烷-3-醇没食子酸酯(EZG)易与Ge4+反应且形成含锗的酚类化合物.茶多酚及茶多酚-锗化合物均有抑制肺癌细胞生长的能力,其抑制速率随着酚类化合物浓度增加而提高,但茶多酚锗抑制速率高于茶多酚近1倍

节杆菌P-1和红球菌J-5处理含PVA废水研究

本文用节杆菌P-1和红球菌J-5处理含聚乙烯醇(PVA)的废水,分别考察了PVA浓度、HRT(水力停留时间)、温度等对PVA去除效果的影响。结果表明,节杆菌P-1对低浓度PVA废水的处理效果分别比红球菌J-5、活性污泥高10%、40%,出水可达到排放标准;P-1和J-5的最适HRT分别为12、18h,最适温度均为25～30℃。同时还考察了连续流小试试验效果和高浓度PVA废水的处理工艺,结果显示,节杆菌P-1运行稳定性好,出水能够稳定达标排放;高浓度废水经J-5菌处理12h后用P-1菌处理12h,出水能达

一株PVA降解菌及其使用方法

本发明属于环保领域，针对目PVA废水处理中的问题，公开了一株PVA降解菌及其使用方法。本发明菌株为节杆菌属(Arthrobacter)经培养后能有效处PVA废水，具有运行效果好，运行稳定等优点