Aspects of molecular ecology of carnivore viruses : sapovirus and coronavirus

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaCurrent knowledge on the epidemiology of many pathogens of wild animals is limited and little is known about their genetic diversity, geographic and host species range, and their potential to spread between wild, domestic and human species. This thesis, developed at the Leibniz Institute for Zoo and Wildlife Research, includes two studies that seek to contribute to increase the knowledge in this field. The first study aimed to test the hypothesis that consecutive outbreaks of Sapovirus (SaV) infection in spotted hyenas (Crocuta crocuta), detected by a previous study on this species in the Serengeti National Park, resulted from the emergence of antigenically different strains of the virus. Virus RNA was extracted from faecal samples obtained from three infected hyenas and amplified using conventional RT-PCR methods, with the aim of sequencing a fragment of the virus genome known to be important in determining the antigenic type of SaV strains. Although a diverse set of primer pairs were tried, only a partial sequence of the targeted gene was obtained from one sample, thus it was not possible to determine if the outbreaks of SaV infection among spotted hyenas in the Serengeti were caused by distinct antigenic strains. The second study targeted aminopeptidase N (APN), a protein known to work as the host cell receptor for a great number of alphacoronaviruses (α-CoVs). In vitro studies have demonstrated that canine and feline APNs can facilitate the entry of α-CoVs from different species into these carnivore’s cells. This work aimed to investigate the phylogenetic relation between APN from different carnivore species. A particular focus was given to the region known to interact with α-CoVs during cell entry, with the purpose to better understand the possibility of α-CoVs from particular host species successful extending their range of hosts. The detection of isoforms of APN was also sought. The amplification and sequencing of nine tissue samples of wild carnivores was performed using conventional RT-PCR and molecular cloning methods, followed by the phylogenetic analysis of the results. Seven partial sequences of APN were obtained and their phylogenetic relation corresponded to that of their animals of origin. However, the analysis of the specific region where the virus attaches revealed that the species from the families Hyaenidae and Herpestidae (suborder Feliformia) were phylogenetically more similar to the species from Caniformia suborder rather than those from Feliformia suborder. This suggests that α-CoVs that infect the species in these two families might extend their host range to species in Caniformia rather than Feliformia suborder. The results obtained complement the already existing information on both Sapovirus and APN.RESUMO - Aspetos da ecologia molecular de vírus de carnívoros: Sapovirus e Coronavirus - O conhecimento atual sobre a epidemiologia de muitos agentes patogénicos em animais selvagens é limitado e pouco se sabe sobre a sua diversidade genética, a sua extensão geográfica e de espécies hospedeiras, e o seu potencial de propagação entre espécies selvagens, domésticas e humana. Esta tese, desenvolvida no Leibniz Institute for Zoo and Wildlife Research, inclui dois estudos que procuram contribuir para o aumento do conhecimento nesta área. O primeiro estudo procurou testar a hipótese de que surtos consecutivos de infeção por Sapovirus (SaV) em hienas-malhadas (Crocuta crocuta), detetados por um estudo prévio nesta espécie no Parque Nacional do Serengeti, resultaram da emergência de estirpes antigenicamente diferentes do vírus. O RNA do vírus foi extraído de amostras fecais obtidas de três hienas infetadas e amplificado usando métodos convencionais de RT-PCR, com o objetivo de sequenciar um fragmento do genoma viral que se sabe ser importante para a determinação do tipo antigénico das estirpes de SaV. Apesar de terem sido experimentados vários conjuntos de primers, apenas foi obtida uma sequência parcial do gene-alvo de uma amostra, pelo que não foi possível determinar se os surtos de infeção por SaV entre as hienas-malhadas no Serengeti foram causados por estirpes antigenicamente distintas. O segundo estudo visou a aminopeptidase N (APN), uma proteína conhecida como recetor celular para um grande número de alfa-coronavirus (α-CoVs). Estudos in vitro demonstraram que as APNs canina e felina conseguem facilitar a entrada de α-CoVs de diferentes espécies nas células destes carnívoros. Este trabalho teve por objetivo investigar a relação filogenética entre a APN de diferentes espécies de carnívoros. Uma atenção particular foi dada à região que se sabe interagir com os α-CoVs durante a sua entrada na célula, com o propósito de melhor compreender a possibilidade de α-CoVs de uma espécie hospedeira particular alargarem com sucesso o seu leque de hospedeiros. Procurou-se também a presença de isoformas da APN. A amplificação e sequenciação de nove amostras de tecidos de carnívoros selvagens foram realizadas usando métodos convencionais de RT-PCR e métodos de clonagem molecular, seguidos da análise filogenética dos resultados. Sete sequências parciais da APN foram obtidas e a sua relação filogenética correspondeu à dos seus animais de origem. No entanto, a análise da região específica onde o vírus adere revelou que as espécies das famílias Hyaenidae e Herpestidae (subordem Feliformia) eram filogeneticamente mais semelhantes a espécies da subordem Caniformia do que da subordem Feliformia. Isto sugere que α-CoVs que infetem espécies desta duas famílias possam estender a sua variedade de hospedeiros a espécies da subordem Caniformia em vez da subordem Feliformia. Os resultados obtidos complementam a informação já existente acerca do SaV e do APN.N/

Entre linhas nômades

Entre linhas nômade

Adaptabilidade de carreira e auto-eficácia na transição ao trabalho: estudo longitudinal com estudantes finalistas do ensino profissional

O impacto do contexto de trabalho no desenvolvimento vocacional tem vindo a ser estudado, há vários anos, no domínio da Psicologia Vocacional. Autores como Mark Savickas, Super e Vondraceck, reconhecem-no como um fator importante para o desenvolvimento vocacional do indivíduo, sobretudo pelos desafios que o exercício de determinada atividade profissional pode vir a colocar. Neste contexto, a experiência de estágio pode ter um efeito significativo na adaptabilidade de carreira e em outros contrutos a esta associados, sobretudo por se tratar de um contruto que traduz a competência de cada um para lidar com os desafios, obstáculos e transições inerentes à aprendizagem em contexto real de trabalho. A presente investigação, através de um estudo longitudinal com 119 alunos do ensino profissional, tem como objectivo avaliar os níveis de adaptabilidade ao longo do ano lectivo, bem como o impacto deste construto na auto-eficácia e na empregabilidade percebida, no final do ano letivo. Tem ainda como objectivo avaliar o impacto da qualidade da experiência de estágio nas diferenças eventualmente observadas nos níveis de adaptabilidade dos estudantes. Os resultados obtidos vão ao encontro da literatura, destacando a estabilidade dos níveis de adaptabilidade ao longo do ano, reforçando ainda, o papel deste construto na qualidade de preditor do sentimento de competência na transição para o mundo do trabalho. As limitações do estudo e as futuras linhas de investigação serão também apresentadas

A cultura política crítica como possibilidade de emancipação humana : notas sobre os movimentos sociais

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Educação, Programa de Pós-Graduação em Educação Modalidade Profissional, 2020.A partir de uma breve contextualização do panorama político contemporâneo, que experimenta crescentes movimentos de cunho conservador, este ensaio teórico-analítico busca analisar o processo de formação da cultura política crítica dos Movimentos Sociais − Movimento dos Trabalhadores Rurais sem Terra (MST), Movimento Feminista (MF) e Movimento Negro (MN) − e seus impactos na sociedade. Para tal, realiza um contexto histórico do par Movimento Social e processo de formação crítica, sem esquecer da existência de Movimentos Sociais reacionários. O ensaio consetaneamente aborda as relações entre leitura da realidade, luta, resistência, igualdade de gênero e racismo a respeito das minorias políticas – chave importante de análise da sociedade contemporânea. Nesse contexto, a presente pesquisa emprega a abordagem teórico- metodológica de levantamento documental e bibliográfico, que apresenta o processo de formação dos Movimentos Sociais, submetendo-os a um exercício crítico-interpretativo gadameriano, por meio do qual se tensiona a prática formativa das minorias políticas a partir da noção de Bildung. O método selecionado foi a bricolagem, no qual o ato interpretativo desvela sentidos e significados expressos pelos sujeitos institucionais envolvidos na pesquisa. Os achados resultantes desse ensaio apontam que a cultura política crítica desenvolvida pelos Movimentos Sociais contribuem, sobremodo, para a emancipação humana, especialmente das minorias políticas, com fins de resisitir à manutenção do status quo e ao controle social do pensamento crítico e autocrítico, tecido a partir do não interesse em instigar à cultura política crítica, e, concomitantemente, a apresentação de novas formas de luta.Governo do Distrito Federal (GDF).From a brief contextualization of the contemporary political panorama, which experiences growing conservative movements, this theoretical-analytical essay seeks to analyze the formation process of the critical political culture of the Social Movements − Movement of Landless Rural Workers, Feminist Movement and Black Movement − and their impacts on society. To this end, it performs a historical context of the Social Movement pair and a critical formation process, without forgetting the existence of reactionary Social Movements. The essay consetaneously addresses the relationships between reading reality, struggle, resistance, gender equality and racism regarding political minorities − an important key for the analysis of contemporary society. In this context, the present research uses the theoretical-methodological approach of documentary and bibliographic survey, which presents the formation process of Social Movements, submitting them to a Gadamerian critical-interpretative exercise, through which the formative practice of minorities is strained. politics from the notion of Bildung. The method selected was bricolage, in which the interpretative act reveals meanings expressed by the institutional subjects involved in the research. The findings resulting from this essay point out that the critical political culture developed by the Social Movements contributes, in a major way, to human emancipation, especially of political minorities, with the purpose of resisting the maintenance of the status quo and the social control of critical and self-critical thinking, woven into from the lack of interest in instigating critical political culture, and, at the same time, the presentation of new forms of struggle

Efeito citotóxico do sulforafano em células de osteossarcoma humano

Mestrado em Biologia AplicadaO osteossarcoma é o tipo mais comum de tumor maligno do osso. Esta doença apresenta uma elevada incidência em crianças e adolescentes. Adicionalmente, metástases, ocorrendo principalmente nos pulmões, afectam uma percentagem considerável dos pacientes com osteossarcoma. Os tratamentos actuais incluem ressecção cirúrgica, quimioterapia e radioterapia, mas os pacientes com osteossarcoma apresentam uma baixa capacidade de resposta a estas opções de tratamento. Assim, é urgente desenvolver novas abordagens de tratamento. O sulforafano é um fitocomposto que exibe actividade quimiopreventiva e quimioterápica. Numerosos estudos têm demonstrado que o sulforafano modula muitos eventos associados ao cancro, como susceptibilidade a agentes carcinogénicos, ciclo celular, apoptose, angiogénese e metastização. Apesar de bem caracterizados em diversos tumores, os efeitos do sulforafano são ainda insuficientemente conhecidos no osteossarcoma, assim como o mecanismo de acção subjacente. O objectivo desta dissertação foi avaliar os potenciais efeitos citostático e apoptótico do sulforafano e revelar o mecanismo de acção por trás destes efeitos. Para isso, a linha celular de osteossarcoma humano MG-63 foi exposta a sulforafano (no intervalo de 0 a 20 μM) durante 24 e 48 h. Parâmetros como confluência, morfologia celular, viabilidade celular, ciclo celular, clastogenicidade, apoptose, actividade específica de caspases e expressão de genes associados ao ciclo celular foram analisados após o tratamento com sulforafano. As culturas expostas ao sulforafano apresentaram uma diminuição da confluência, acompanhada de alterações na morfologia celular. O sulforafano também induziu uma diminuição da viabilidade celular dependente da dose e do tempo de exposição que pode ser explicada pelo aumento de células apoptóticas e por citostaticidade com bloqueio na fase G2/M. Este bloqueio do ciclo celular foi mediado por Chk2, pela sub-expressão de CDC25C e, provavelmente, pela sub-expressão de CCNB1, assim como de CDK2. Um efeito clastogénico foi também detectado após 48 h de tratamento com sulforafano. Estes dados sugerem que o sulforafano deve ser considerado um candidato a agente quimioterápico no tratamento de osteossarcoma, embora sejam necessários mais estudos para lançar luz sobre vias de sinalização moduladas pelo sulforafano, assim como sobre a possível citotoxicidade deste fitocomposto em osteoblastos normais.Osteosarcoma is the most common type of malignant bone tumor. This disease shows high incidence in children and adolescents. Additionally, metastases occurring mainly at the lungs affect a considerable percentage of osteosarcoma patients. Current treatments include surgical resection, chemotherapy, and radiotherapy, but osteosarcoma patients show poor responsiveness to these treatment options. Thus, it is urgent to develop novel treatment approaches. Sulforaphane is a phytochemical that displays chemopreventive and chemotherapeutic activity. Many studies have been shown that sulforaphane modulates many cancer-related events, as susceptibility to carcinogenic agents, cell cycle, apoptosis, angiogenesis, and metastasis. Although well characterized in several tumors, the effects of sulforaphane are still poorly understood in osteosarcoma, as well as the underlying mechanism of action. The aim of this dissertation was to evaluate the potential cytostatic and apoptotic effects of sulforaphane and to unveil the mechanism of action behind these effects. In order to do that, the human osteosarcoma cell line MG-63 was exposed to sulforaphane (in the 0 to 20 μM range) for 24 and 48 h. Parameters as confluence, cell morphology, cell viability, cell cycle, clastogenicity, apoptosis, caspase specific activity, and expression of cell cycle-related genes were analyzed after sulforaphane treatment. Cultures exposed to sulforaphane showed a decrease in confluence, accompanied by alterations in cell morphology. Sulforaphane also induced a dose- and time-dependent impairment of cell viability, which can be explained by an increase of apoptotic cells and cytostaticity with G2/M phase arrest. This cell cycle blockage was mediated by Chk2 and CDC25C downregulation, and probably CCNB1 as well as CDK2 downregulation. A clastogenic effect was also detected after 48 h of sulforaphane treatment. These data suggest that sulforaphane should be considered as a chemotherapeutic agent candidate in osteosarcoma treatment, although more studies are needed to shed insight on signaling pathways modulated by sulforaphane, as well as the possible cytotoxicity of this phytochemical on normal osteoblasts

Bibliografia portuguesa: 1701-1705: tipógrafos e impressos no fundo da BNP: contributo para um catálogo

Este trabalho inicia-se com o panorama da tipografia portuguesa no período 1701- 1705, destacando os tipógrafos da época e as respectivas obras impressas. O segundo capítulo trata da organização dos dados recolhidos por secções: locais de impressão, oficinas tipográficas, língua, formato e proveniência. Neste capítulo confronta-se, ainda, as obras descritas por Barbosa Machado e as obras que não existem na Biblioteca Nacional de Portugal. Por fim, introduziram-se os dados no sistema de informação Horizon e elaborou-se um catálogo.Abstract: This work begins with an overview of the portuguese typography during 1701-1705, highlighting the printers, as well as their printed works. The second chapter deals with the organization of the data collected by sections: imprint locations, printing works, language, format and provenance. This chapter also compares the works described by Barbosa Machado and the works that do not exist in the National Library of Portugal. Finally, we introduced the data in Horizon information system and elaborated a catalogue

A VERDADE SEM REPRESENTAÇÃO

Há na cena filosófica uma exclusão da aparência, pois a verdade é um conceito fundamental para a filosofia. No cenário contemporâneo tal conceito é posto em questionamento como valor filosófico.  É Nietzsche quem faz uma reversão do valor da verdade como essência, como representação universal, com ele a verdade tem ligações com a vida e suas avaliações. O texto elabora algumas notas sobre essa questão, destacando o conceito de verdade e pontuando motivações que levam o temor ao ficcional.   PALAVRAS-CHAVE: Verdade; Nietzsche; Ficcional.     ABSTRACT There is, in the philosophical scenario, an exclusion of the appearance, because the truth is a fundamental concept in philosophy. In the contemporary world, the approach of such concept as philosophical value is questioned. Nietzsche is the one who reverses the value of the truth as an essence, as a universal representation, the truth for him is linked to life and its evaluations. The text elaborates some notes about this question, highlighting the concept of truth and pointing out motives that take fear to fiction.   KEYWORDS: Truth; Nietzsche; Fiction.        RESUMEN Existe la escena filosófica una exclusión de la apariencia, porque la verdad es un concepto fundamental para la filosofía. En el entorno contemporáneo tal concepto se pone en cuestión como un valor filosófico. Es Nietzsche que es una reversión del valor de la verdad como esencia y como una representación universal, con la que en realidad tiene lazos con la vida y sus evaluaciones. El texto desarrolla algunas notas sobre este tema, destacando el concepto de verdad y puntuando las motivaciones que conducen al temor de ficción.   PALABRAS CLAVE: Verdad; Nietzsche; Ficticio

Formação de um painel sensorial para avaliação de produtos à base de tomate

Mestrado em Engenharia Alimentar - Processamento de Alimentos / Instituto Superior de AgronomiaNos últimos anos, a área de análise sensorial tem recebido um crescente destaque, sendo considerada um instrumento vital no controlo de qualidade e no desenvolvimento de novos produtos. O presente trabalho focou-se na constituição de um painel sensorial para a análise de produtos à base de tomate na empresa Italagro, de forma a participar nas actividades de controlo de qualidade e desenvolvimento e inovação. A formação do painel passou por quatro fases principais: recrutamento, selecção, treino e selecção final dos provadores. Cada fase incluiu provas específicas para medir a acuidade sensorial dos provadores, sendo que na fase de treino foi também elaborada uma ficha de perfil quantitativo-descritivo com os atributos mais relevantes na análise dos produtos em questão. No final do treino, qualificaram-se 16 indivíduos que demonstraram coerência nas suas respostas na última etapa de selecção (provas cegas de duas amostras diferentes em triplicado) e revelaram ser um grupo homogéneo. O painel, formado por estes 16 provadores, avaliou sensorialmente seis amostras de concentrado de tomate obtidas por diferentes processos de trituração (trituração a quente e a frio), variedades de tomate e tempos de armazenamento (0, 1 e 2 anos), de modo a averiguar a influência destes parâmetros nas características sensoriais do produto. Através da Análise em Componentes Principais e da Classificação Hierárquica dos resultados sensoriais foi possível concluir que o tipo de trituração (quente ou frio) é o parâmetro que mais influencia as características sensoriais do produto finalN/

Estudos sobre as privatizações no Brasil na década de 1990

The study will discuss the context of Privatizations in the 1990s, under the governments of Fernando Collor de Melo, Itamar Franco and Fernando Henrique Cardoso. The discussion introduces classical authors who had an idea of Minimum State and greater economic freedom of the market, such as Adam Smith and J. Stuart Mill. The economic theory of social welfare, with the application of Keynesian ideas, followed by the welfare state, were fundamental for the recovery of the economy of some countries such as the United States, France, and European countries. The idea of the intervening state was of paramount importance to the process of creation and development of Brazilian industrialization. Aiming at the implementation and development of industrialization, and reducing dependence on imports, the Brazilian state-owned companies were created, developing sectors such as steel, ores, electric. The Citizen Constitution of 1988 protected the Brazilian subsoil, protecting the strategic sectors of the economy, but the law failed to block the proliferation of neoliberalism, widespread in the Washington Consensus. The privatizations were carried out with great force in the Fernando Henrique Cardoso Government, aiming at controlling the external debt and implementing the Real Plan. The discussion was held with the main companies of the privatized strategic sectors during the study period.O estudo vai discutir o contexto das Privatizações na década de 1990, nos governos de Fernando Collor de Melo, Itamar Franco e Fernando Henrique Cardoso. A discussão faz uma introdução de autores clássicos, que possuíam uma ideia de Estado Mínimo e maior liberdade econômica de mercado, como Adam Smith, e J. Stuart Mill. A teoria econômica de bem-estarestar social, com a aplicação das ideias keynesianas, seguido do Welfare State, foram fundamentais para a recuperação da economia de alguns países como o Estados Unidos, França, e países europeus. A ideia do Estado interventor, foi de suma importância para o processo de criação e desenvolvimento da industrialização brasileira. Visando a implantação e desenvolvimento da industrialização, e redução da dependência das importações, foram criadas as Estatais brasileiras, desenvolvendo setores como a siderurgia, minérios, elétrico. A Constituição Cidadã de 1988 deu proteção ao subsolo brasileiro, protegendo os setores estratégicos da economia, no entanto a lei não conseguiu barrar a proliferação do neoliberalismo, disseminado no Consenso de Washington. As privatizações foram realizadas com grande força no Governo de Fernando Henrique Cardoso, visando o controle da dívida externa, e implantação do Plano Real. A discussão foi realizada com as principais empresas dos setores estratégicos privatizadas no período estudado