Study of human Argonaute 1 cap-independent translation

Tese de mestrado Bioquímica, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2019A expressão génica é um processo a partir do qual a informação genética contida no ácido desoxirribonucleico (DNA, do inglês deoxyribonucleic acid) é descodificada em proteínas que serão usadas pelos sistemas biológicos, para a sua sobrevivência, manutenção ou desenvolvimento. Esta é dividida em várias etapas, sendo que tudo se inicia no núcleo com a transcrição da informação contida no DNA em moléculas de ácido ribonucleico mensageiro (mRNA, do inglês messenger ribonucleic acid). À medida que vão sendo sintetizadas, as moléculas de mRNA sofrem um processamento, em que serão introduzidas modificações que serão importantes para estabilidade do transcrito e para as etapas a jusante. Entre estas modificações estão a introdução da estrutura cap m7G na extremidade 5´ do transcrito, a poliadenilaçao da extremidade 3´ e o splicing do mRNA. Uma vez processado, o mRNA maduro será transportado do núcleo para o citoplasma, onde será traduzido para proteína. Em condições normais, o mRNA de eucariotas é traduzido de uma forma canónica, em que inicialmente é necessário que exista o reconhecimento da estrutura cap na extremidade 5´ do transcrito. Desta forma, a tradução inicia-se com o recrutamento da subunidade ribossomal 40S e de fatores de iniciação (eIF, do inglês eukaryotic initiation factor) para a extremidade 5´ do mRNA, sendo que será este complexo, pela ação do eIF4E que reconhecerá o cap. Uma vez ligados, a subunidade ribossomal inicia o scan da região 5´ não codificante (UTR, do inglês untranslated region) até encontrar um codão de iniciação em contexto favorável. De seguida, dar-se-á a síntese da proteína que, terminada, a tradução será utilizada para o funcionamento celular. Contudo durante alguns processos energeticamente dispendiosos para a célula, como a mitose, ou em condições de stress, como a hipoxia, a tradução canónica é afetada. Isto ocorre porque muitas vezes estes estímulos provocam a inibição do reconhecimento da estrutura cap, comprometendo assim a iniciação da tradução. No entanto, existem mRNAs eucariotas cuja expressão não é comprometida aquando destes eventos, sendo que estes transcritos normalmente codificam para proteínas fundamentais para a célula ou de resposta a stress. Desta forma em condições de inibição da tradução canónica, existem proteínas cuja síntese não é afetada, sendo mantida por mecanismos alternativos. Entre estes estão incluídos aqueles em que ocorre o recrutamento ribossomal para o mRNA sem que haja o reconhecimento do cap e/ou scan da 5´UTR. Nestes casos, o recrutamento ribossomal ocorre através de estruturas secundárias presentes na 5´UTR do mRNA, que interagem com o ribossoma, e com o auxílio ou não de fatores proteicos, posicionam este junto do codão de iniciação. Em eucariotas já foram descritos vários mRNAs cuja tradução é mantida em condições de inibição da tradução canónica, sendo os mecanismos alternativos ativados por vários tipos de stress como a hipoxia, a limitação de nutrientes ou a apoptose. Assim, os mecanismos alternativos de iniciação da tradução têm um papel importante para a manutenção da homeostasia celular durante situações de stress. Em sentido contrário estes também podem ter um papel negativo, nomeadamente na promoção do processo de tumorigénese. Geralmente os ambientes tumorais apresentam hipoxia e limitação de nutrientes, que são condições que inibem a tradução canónica e promovem mecanismos alternativos de síntese proteica. Deste modo, as células cancerígenas têm uma vantagem, pois podem manter a síntese de vários oncogenes de uma maneira não-canónica. No nosso trabalho, colocou-se a hipótese de que as proteínas Argonaute, mais propriamente a AGO1 (do inglês human Argonaute RNA-induced silencing complex catalytic component 1) poderiam ser traduzidas por mecanismos não-canónicos em condições de inibição da iniciação da tradução dependente do reconhecimento do cap. Estas proteínas estão envolvidas na síntese dos miRNAs e no silenciamento génico, que por sua vez participam na resposta a alguns stresses e na manutenção do funcionamento celular. Assim, devido à sua importância propôs-se que a síntese da AGO1 possa ser mantida durante condições de stress celular por um mecanismo não-canónico. Resultados anteriores obtidos no nosso laboratório utilizando um vetor bicistrónico, demonstraram que a sequência correspondente à 5´UTR do mRNA da AGO1 é capaz de mediar a tradução independente da estrutura cap de um gene repórter. Também se verificou que esta atividade da 5´UTR da AGO1 é mantida tanto em condições normais, como em condições de stress celular que inibem a tradução canónica, como o stress do reticulo endoplasmático ou a hipoxia. Assim o propósito deste trabalho foi prosseguir nesta linha de investigação, continuando a estudar a tradução independente da estrutura cap mediada pela 5´UTR da AGO1. Desta forma, o primeiro objetivo foi reforçar os resultados obtidos anteriormente, pretendendo-se mostrar que a 5´UTR da AGO1 medeia um mecanismo de iniciação de tradução alternativo, num vetor bicistrónico diferente do utilizado anteriormente. Para isso o sistema bicistrónico utilizado contem dois genes repórteres, um correspondente à proteína fluorescente verde (EGFP, do inglês enhanced green fluorescent protein) e outro correspondente a uma proteína fluorescente vermelha (mCherry). A característica deste sistema é que no primeiro cistrão está a sequência da EGFP, que é traduzida de uma forma dependente da estrutura cap, ou seja, tradução canónica, enquanto que no segundo cistrão está a sequência do mCherry, que a ser traduzida, será duma forma independente da estrutura cap. Entre os dois cistrões está clonado um hairpin, de modo a prevenir a reiniciação da tradução. Tendo isto em mente, a estratégia foi clonar a sequencia correspondente à 5´UTR da AGO1 a montante do mCherry e verificar se esta conseguia potenciar a iniciação da tradução independente da estrutura cap. Nesta tese apresentamos a estratégia de clonagem desenvolvida para obter este constructo, ainda que sem sucesso aquando do término dos trabalhos. Contudo apresentamos algumas possíveis soluções para completar estas clonagens. Outro objetivo desta tese foi avaliar como varia a expressão das proteínas Argonaute, mais propriamente da AGO1 endógena, durante um stress que inibe a tradução canónica. A abordagem experimental foi tratar células HCT116 (linha celular derivada de cancro colorretal) com tapsigargina, que é uma droga que induz o stress do reticulo endoplasmático e, por consequência, a inibição da tradução canónica. Posteriormente foram analisados os efeitos do tratamento com esta droga nos níveis de mRNA das quatro Argonautes (AGO1, AGO2, AGO3 e AGO4), no nível de proteína do pool total de AGOs e no nível de proteína de AGO1. Os resultados obtidos demonstram que o tratamento com a tapsigargina induz uma diminuição nos níveis de mRNA da AGO1 e AGO2 para 54% e 62%, respetivamente. Um resultado que nós acreditamos ser uma consequência indireta da inibição da tradução induzida pela droga. Isto é, ao bloquear-se um processo tão determinante como a tradução, poderão ser afetados indiretamente outros processos celulares. Neste caso, parece indicar que a inibição da tradução canónica afeta a disponibilidade de dois transcritos, o da AGO1 e o da AGO2. Adicionalmente, verificou-se que o tratamento com esta droga afeta a quantidade total de proteínas Argonaute, uma vez que se observa a diminuição do pool de AGOs. Neste caso este resultado dever-se-á ao facto do tratamento com a tapsigargina induzir a diminuição dos níveis de mRNA da AGO1 e AGO2, fazendo com que haja menos transcrito disponível para a síntese destas proteínas. Com a expectável diminuição da quantidade de proteína AGO1 e AGO2, a consequência é a diminuição do pool de todas as AGOs. Finalmente, verificamos que o tratamento com a tapsigargina provoca a diminuição dos níveis proteicos de AGO1 endógena. De certa forma, este é um resultado inconclusivo para o estudo da tradução não-canónico desta proteína durante condições de stress. No entanto, pensamos que este resultado se deve principalmente a dois fatores. Um tem a ver com facto de o tratamento com a droga fazer diminuir o mRNA da AGO1, havendo por isso menos transcrito disponível para a tradução, o que poderá levar a uma menor síntese de proteína, mesmo que de uma forma alternativa. O outro fator está relacionado com a possibilidade de que o mecanismo de tradução não-canónico não ser tão eficiente como a via canónica, o que explica o decréscimo observado. Assim, em experiências futuras será importante testar outros tipos de stresses que inibam a tradução canónica, mas que não provoquem alterações na quantidade de mRNA e testar outras linhas celulares. Para além disso dever-se-á testar alguns stresses, que induzam maior atividade da 5´UTR da AGO1, em termos de síntese proteica. Por fim, o terceiro objetivo deste trabalho foi tentar prever quais as características estruturais que fazem com que a 5´UTR da AGO1 consiga promover um mecanismo não-canónico de iniciação da tradução. Desta forma tentar-se-ia aproximar a estrutura secundária adotada por esta região. Para isso fez-se uma análise in silico à sequência correspondente à 5´UTR da AGO1. Verificou-se que esta tem um comprimento de 213 nucleótidos, apresenta uma upstream ORF (do inglês open reading frame) e tem uma percentagem de guaninas/citosinas correspondente a 72.3%. Especialmente devido a este último fator a 5´UTR da AGO1 tem tendência a organizar-se numa estrutura secundária estável, que possui quatro stem loops. Como perspetiva futura, temos como objetivo validar experimentalmente esta previsão estrutural, através de dicroísmo circular. Posteriormente, fizemos uma análise delecional in silico, de modo a prever a dinâmica estrutural e verificar se havia alguma sequência/estrutura mínima necessária para manter a conformação espacial da 5´UTR da AGO1 estável. Para isso removeu-se, sequencialmente nucleótidos da 5´UTR da AGO1, tanto no sentido 5´ para 3´ como no sentido 3´ para 5´, e verificou-se qual o impacto que isso teria na estrutura da região comparativamente à estrutura com todo o comprimento. Pela nossa análise verificou-se que quando é removido o stem loop I ou o stem loop IV, a estrutura não parece alterar-se muito em relação à original, indicado que a conformação se mantém estável quando ocorrem pequenas deleções. Para complementar esta análise in silico, pretende-se no futuro validar experimentalmente estas previsões. Isto é verificar se a estrutura real adotada pela 5´UTR da AGO1 é semelhante à prevista computacionalmente, e analisar quais os efeitos de deleções na atividade desta sequência para mediar um mecanismo de tradução não-canónico, utilizando um vetor bicistrónico. Uma vez concluídas todas estas linhas de investigação pretender-se-á perceber de que forma é que o mecanismo de tradução alternativa de AGO1 pode estar envolvido no processo de tumorigénese.Translation of mRNA into protein is one of the most important and costly processes of the cell, since it supports and regulates several cellular events. Under normal conditions, translation initiation takes place through the canonical mechanism, in which first occurs the recognition of the cap structure at the 5'end of the transcript, followed by the scan of the 5'UTR (untranslated region) until the identification of the initiation codon in a favourable context. However, during high energy cost cell events, such as mitosis, or during some stresses such as hypoxia, mechanisms are activated that decrease canonical translation. Thus, under conditions of inhibition of canonical translation, there are proteins whose synthesis is not affected and is maintained by alternative mechanisms. These include those in which ribosomal recruitment occurs without cap recognition and/or 5'UTR scanning. In these cases, ribosomal recruitment occurs through secondary structures present in mRNA 5'UTR, which interact with the 40S ribosomal subunit, and with or without the help of initiation factors, position it near to the initiation codon. Therefore, it was hypothesized that Argonaute proteins, more properly AGO1 (human Argonaute RNA-induced silencing complex catalytic component 1) could be translated by non-canonical mechanisms due to its importance in the biogenesis of the microRNAs and in the gene silencing. Previous results obtained in our laboratory using a bicistronic system, demonstrated that AGO1 5'UTR is able to mediate cap-independent translation of a reporter gene, even under stress conditions that inhibit canonical translation. Thus, the purpose of this work was to complete this research project, continuing to study the cap-independent translation mediated by the 5'UTR of AGO1. In this way, the first objective was to reinforce the previously obtained results. For this it was intended to show that the AGO1 5´UTR can mediate an alternative initiation mechanism in a bicistronic vector different from the one previously used. For this, the proposed bicistronic system contains two reporter genes, one corresponding to enhanced green fluorescent protein (EGFP) and another corresponding to a red fluorescent protein (mCherry). The characteristic of this system is that in the first cistron is the sequence of EGFP, which is translated by the canonical mechanism. The second cistron is the mCherry sequence that can only be translated in cap-independent manner. With this in mind, the strategy was to clone the sequence corresponding to AGO1 5´UTR, upstream of the mCherry and to verify if it was able to potentiate cap-independent translation of this fluorophore. In this thesis we present the cloning strategy developed to obtain this construct, although we were not able to complete this task. However, we present some possible solutions to complete these clonings. Other objective was to evaluate how the expression of Argonaute proteins, more properly the endogenous AGO1, varies during endoplasmic reticulum stress, which inhibits the canonical translation. For this purpose, we treated HCT116 cells (colorectal cancer-derived cell line) with thapsigargin, which is a drug that induces the stress of the endoplasmic reticulum and, consequently, the inhibition of the canonical translation. Our results demonstrated that treatment with the drug induces a decrease in the AGO1 and AGO2 mRNA levels, a decrease in the total protein amount of Argonautes (AGO1, AGO2, AGO3 and AGO4) and a decrease in the AGO1 protein. In a way, this is an inconclusive result for the study of non-canonical translation of this protein during stress conditions. However, we think that this result is mainly due to two factors. One has to do with the fact that the treatment with the drug decreases the AGO1 mRNA level, thus having less transcript available for translation, which may lead to less protein synthesis, albeit in an alternative way. The other factor is related to the possibility that the non-canonical translation mechanism is not as efficient in as the canonical way, which explains the observed decrease. Thus, in future experiments it will be important to test other stresses that inhibit canonical translation, but that do not induce changes in the amount of mRNA and test this experiment in other cell lines. Finally, we aim to predict what structural features make the AGO1 5´UTR succeed in promoting a non-canonical translation initiation mechanism and thus try to estimate the secondary structure adopted by this sequence. For this we submited AGO1 5'UTR sequence to an in silico analysis. Among other characteristics, we found that it has a percentage of guanines/cytosines of 72.3% and it is organized into a stable secondary structure, which has four stem loops. As a future perspective, we aim to experimentally validate this structural prediction through circular dichroism. Next was performed an in silico deletion analysis in which nucleotides were removed from the sequence in order to predict the structural dynamics and to check if there was any minimal sequence/structure required to maintain stable the spatial conformation of AGO1 5'UTR. By our analysis it was verified that when stem loop I or stem loop IV is removed, the structure does not seem to change much in relation to the original, indicating that the conformation remains stable when small deletions occur. To complement this in silico deletion analysis it is intended in the future to validate experimentally, in a bicistronic vector, the effect of this deletions. We believe that once these research lines have been completed, we will better understand the relevance of alternative translation mechanisms in the maintenance of synthesis of several proteins, including AGO1, during stress situations, and even during the tumorigenesis process

Práticas de educação em saúde de estudantes de enfermagem e de outros cursos de ensino superior

As práticas de Educação em Saúde são influenciadas pela abordagem que cada profissional adota, uma vez que implicam um diferente relacionamento com o utente, moldando a forma como se desenvolvem. Objetivo: caracterizar as práticas de Educação em Saúde dos estudantes de três cursos de enfermagem e de outros quatro cursos de ensino superior ligados ao sector da saúde (Medicina) e ao setor da educação (Professores do Ensino Básico, Educadores de Infância e de Serviço Social). Metodología: Estudo descritivo-correlacional e transversal, de abordagem quantitativa, onde participaram 709 estudantes (62,6% do universo), dos 1º e 4º anos, que preencheram um questionário desenvolvido e validado para o efeito. Resultados: Apenas 40,9% dos estudantes assinalaram terem realizado experiência prática durante o curso, principalmente os do 4º ano. A maior parte faz Educação em Saúde “Muitas vezes” (41,7%), especialmente “Saúde Infantil” (23,1%). Estudantes com conceito “Abrangente” de Promoção da Saúde desenvolvem esta atividade com maior frequência do que os de conceito “Reducionista” ou “Misto”. Os estudantes dos três cursos de Enfermagem praticam Educação em Saúde com mais frequência e em áreas mais diversificadas do que os colegas dos outros cursos. As caraterísticas das práticas de Educação em Saúde parecem ser influenciadas pelas variáveis Curso, Ano e Tipo de conceito de Promoção da Saúde. Os resultados obtidos poderão contribuir para melhorar o desempenho docente e as práticas de Educação em Saúde.Practices in Health Education are influenced by the approach that each professional adopts, since they imply a different relationship with the user, shaping the way the approaches develop. Objective: To characterize the Health Education practices of students from three nursing courses and four other higher education courses related to health sector (Medicine) and education (Basic Education Teachers, Childhood Educators and Social Services). Methodology: A descriptive-correlational and cross-sectional study with a quantitative approach, where 709 students participated (62.6 % of the universe), of the 1st and 4th years, who completed a questionnaire developed and validated for this purpose. Results: Only 40.9 % of students indicated they had conducted practical experience during the course, especially the 4th year students. Most of them develop Health Education "Often" (41.7 %), especially "Child Health" (23.1 %). Students with "Broad" concept of Health Promotion developed this activity more frequently than the concept "Reductionist" or "Mixed". Students of the three nursing courses practiced Health Education more often and in more diverse areas than their colleagues from other courses.Las prácticas de educación para la salud están influenciadas por el enfoque profesional que cada uno adopta, lo que implica una relación diferente con el usuario, de acuerdo a la cómo se desarrollan. Objetivo: caracterizar las prácticas de Educación para la Salud de los estudiantes en tres cursos de enfermería y cuatro cursos de la educación superior vinculados al sector de la salud (medicina) y sector de la educación (maestros, educadores niños y servicios sociales). Metodología: Estudio descriptivo-correlaciónale y transversal con un enfoque cuantitativo, que involucró a 709 estudiantes del 1º y del 4º años, que diligenciaron un cuestionario ,el cual fue validado. Resultados: Sólo el 40,9% de los estudiantes informa haber tenido experiencia práctica durante el curso, sobre todo los de 4º año. La mayoría reporta que realiza acciones de Educación para la Salud “Muchas veces” (41,7%), especialmente “Salud Infantil” (23,1%). Los estudiantes manejan un concepto “Global” de la Promoción de la Salud, realizan prácticas de Educación en Salud con mayor frecuencia de los que tienen un concepto “Reduccionista” o “Mixto”. Los estudiantes de enfermería desarrollan esta actividad con más frecuencia y en áreas más diversas que los de otros cursos. Las características de la práctica de la Educación para la salud parecen estar influidos por variables Curso, Año y Tipo de concepto de Promoción de la Salud. Los resultados obtenidos contribuyen a mejorar el desempeño de los docentes y las prácticas de la Educación para la Salud. Palabras clave: Educación en Salud; Estudiantes; Educación en Enfermería; Educación Superior.CIEC - Centro de Investigação em Estudos da Criança, UM (UI 317 da FCT

Preparação e caraterização de elétrodos de óxido níquel para eletrolisadores alcalinos de produção de hidrogénio

O hidrogénio tem vindo a demonstrar ser a energia alternativa aos combustíveis fósseis e a ganhar terreno a nível mundial, existindo ainda algum caminho a percorrer para que esta energia seja a energia de futuro. Este tipo de energia alternativa pode ser obtida através da eletrólise da água, uma vez que esta é abundante e com o recurso a energias renováveis como auxílio ao eletrolisador para a produção de hidrogénio. O trabalho desenvolvido, tem como objetivo a preparação e caraterização de elétrodos modificados por oxi-hidróxido de níquel (NiOOH) para eletrolisadores alcalinos. Tem ainda como objetivo a utilização de um substrato adequado para utilizar como cátodo num eletrolisador alcalino pela alteração da sua superfície, permitindo um melhor desempenho nas reações químicas que aí ocorrem. Os processos de preparação utilizados visam contribuir para aumentar a eficiência do elétrodo. As técnicas usadas para a fabricação dos elétrodos, baseiam-se em deposições anódicas e tratamentos térmicos para alteração da superfície do substrato do aço inoxidável AISI 304. A determinação da porosidade dos revestimentos de NiOOH obtidos por processos eletroquímicos sobre o substrato metálico, permitiram comparar e concluir sobre o melhor método a utilizar para deposição do níquel. Os elétrodos porosos de níquel foram desenvolvidos com vista a aumentar a área de contacto entre elétrodo/eletrólito e a funcionar como catalisador, i.e., aumentar a velocidade da reação do processo, permitindo uma maior produção de gás na eletrólise. Os resultados obtidos na produção de hidrogénio, indicam uma eficiência do elétrodo modificado por NiOOH, aumentando a velocidade do processo eletroquímico entre o elétrodo e eletrólito. A análise dos resultados experimentais e dos voltogramas obtidos em solução aquosa de KHO permitiu concluir que o elétrodo de aço inox revestido com NiOOH apresenta menor potencial para o desprendimento do hidrogénio, podendo-se considerar este material promissor para se usar como cátodo em eletrolisadores alcalinos. Neste trabalho é apresentado a proposta de construção que deveria ser de um eletrolisador, alimentado pela corrente elétrica produzida por um aerogerador e/ou painel fotovoltaico em que o hidrogénio produzido poderá ser fornecido a uma célula de combustível para produção de energia elétrica. O produto final do eletrolisador, hidrogénio, será o substituto dos combustíveis fósseis, e ao usar energias renováveis, neste processo, estamos a reduzir o impacto ambiental, e o processo poderia ser classificado como eco sustentável.Hydrogen has been showing to be the alternative energy to fossil fuels and gaining ground on a worldwide basis but there is still a long way to go until this energy becomes “the energy of the future”. This kind of alternative energy can be obtained through the electrolysis of water, since this is abundant, as well as renewable energies resources may be used as aid in electrolisers in the production of hydrogen. All the work developed aims to prepare and characterize electrodes modified by nickel oxy-hydroxyde for alkaline electrolysers. It Also aims the identification of an adequate substract as a cathode in an alkaline electrolysers through surface modification permits a better performance in the chemical reactions which occur at the surface. The preparation processes used aim to contribute to the increase of efficiency of the electrode. The techniques used for the fabrication of electrodes was based in anodic deposition and heat treatment of the AISI 304 stainless stell used as substract surface. The determination of the porosity in NiOOH cover layer obtained by electrochemical processes on the metallic substract allowed to compare and conclude on which is the best method to the nickel deposition is. The results obtained indicate an increase on the H2 production efficiency on the NiOOH modified electrode, increasing the velocity of the eletrochimical process between the electrode and the electroactive species. The analysis of the experimental results and the voltammograms obtained in KHO aqueous solution allowed to conclude that the NiOOH modified stainless steel electrode shows a lower potential for the hydrogen release, therefore it can be considered a promising material to use as cathode in alkaline electrolysers. This work presents a proposal to build what should be an electrolyser, powered by the electric current produce by a photovoltaic panel and/or wind turbine where the hydrogen produced can be used as fuel cell for the production of electric power. The final product, hydrogen, will be the substitute for the fossil fuels and, through the use of renewable energies, in the process, reducing environmental impacts, and the process could be classified as eco-sustainable

Características e motivações dos empresários : o caso dos fundadores de pequenos negócios na cidade da Guarda

Dissertação apresentada à Universidade da Beira Interior para obtenção do Grau de Mestre.O objectivo geral deste estudo é apresentar uma análise empírica das características e motivações dos empresários. Esta investigação foi baseada num questionário administrado por entrevista presencial a 83 fundadores de pequenos negócios comerciais localizados na cidade da Guarda (Portugal). Após verificação, foram seleccionados 80 questionários para análise dos resultados. Na primeira parte foi feita uma análise descritiva das características das empresas e do negócio. Na segunda parte foi elaborada uma descrição e análise das características pessoais, actividade profissional e das motivações do fundador para iniciar o seu negócio (análise factorial), sendo identificados cinco factores motivacionais. Na terceira parte, foram determinadas as diferenças entre os fundadores de Pequenas-Empresas Comerciais (PECs) e os fundadores de Micro-Empresas Comerciais (MECs), relativamente às características pessoais, actividade profissional e dos factores motivacionais (análise da variância dos factores motivacionais). Os resultados obtidos permitiram concluir que existem algumas diferenças nas características pessoais e actividade profissional dos fundadores. Os fundadores de PECs dão maior importância ao Factor 1 - Necessidade de Realização

Relação entre atividade física, prática desportiva e adesão ao padrão alimentar mediterrânico em adolescentes

Os comportamentos alimentares e a prática de atividade física são particularmente importantes na qualidade de vida e na promoção da saúde dos indivíduos. Essa importância é ampliada quando considerados em crianças e jovens, não só porque há tendência de comportamentos menos saudáveis se prolongarem pela vida adulta, mas também porque são comportamentos passíveis de mudança. Assim, neste estudo pretende-se conhecer os comportamentos alimentares, de atividade física e de prática desportiva de adolescentes, verificar como variam com diversos parâmetros desses adolescentes (idade, sexo e outros), e analisar a forma como estes comportamentos se interrelacionam. A amostra é constituída por 195 adolescentes, que frequentam o 9º, 11º e 12º ano de escolaridade num agrupamento de escolas do norte de Portugal. Os instrumentos utilizados são uma adaptação portuguesa do Baecke Questionnaire of Habitual Physical Activity e o Questionário do Índice KIDMED. Da análise dos resultados verificou-se que o tipo de prática desportiva varia em função do sexo, ano de escolaridade, percurso escolar e meio socioeconómico dos adolescentes. Também a atividade física em contexto escolar varia com o sexo, t(186)=2.82, p= .005. Constatou-se ainda que cerca de metade dos adolescentes apresentavam uma boa adesão ao padrão de dieta mediterrânica, e que essa adesão varia de acordo com o tipo de curso que frequentam, ϰ2(1)=6.00, p= .02. Por fim, encontrou-se uma relação fraca mas significativa entre a atividade física no tempo de lazer e o grau de adesão ao padrão de dieta mediterrânica, r=.21, p= .003. Estes são dados preliminares de um estudo mais amplo que se encontra em fase de análise, mas que já evidencia uma clara associação entre atividade física e alimentação dos adolescentes.CIEC - Centro de Investigação em Estudos da Criança, UM (UI 317 da FCT

Modelo explicativo sobre a intenção empreendedora

O objectivo deste estudo é o de investigar a intenção empreendedora. Tendo em conta a revisão bibliográfica, foi desenvolvido um modelo sobre as características pessoais dos empresários, fundamentado na teoria sobre o entrepreneurship. O modelo de investigação inclui os seguintes elementos: antecedentes pessoais, conhecimentos empresariais, motivações empreendedoras, auto-eficácia empreendedora e envolvente institucional. No capítulo sobre as conclusões deste estudo são apresentadas as implicações teóricas e práticas, assim como as limitações e sugestões para futuras investigações.The aim of this study was to investigate the entrepreneurial intention. Based on the literature review, a theoretical model relating entrepreneur’s personal characteristics studied from entrepreneurship approach has been developed. The research model included constructs from each theoretical model: personal background, entrepreneurial knowledge, entrepreneurial motivations, entrepreneurial selfefficacy and institutional environment. Hypotheses were developed along the respective constructs required. Theoretical and practical contributions along with directions for future research and limitations to the study were presented in conclusion chapter

Análise da sobrevida de doentes insuficientes renais crónicos terminais ao longo de 8 anos com base no Índice de Charlson

Introdução: A Insuficiência Renal Crónica, uma das epidemias do século XXI, tem como uma das principais causas de desenvolvimento a Hipertensão Arterial e a Diabetes Mellitus, sendo que a Doença Renal Terminal constitui o seu fator terminal, afetando significativamente a sobrevida dos doentes. De entre as principais etiologias da Insuficiência Renal Crónica, a Diabetes Mellitus é aquela que mais afeta a sobrevida dos doentes em Terapêutica de Substituição Renal. Com este trabalho viso determinar o índice de Charlson nos doentes do Hospital Amato Lusitano e verificar qual o seu impacto na sobrevida dos doentes. Material e Métodos: Efetuou-se uma recolha dos dados dos pacientes internados, aquando do início de diálise, através da consulta dos processos clínicos hospitalares. Foram selecionados, aleatoriamente, 100 doentes que iniciaram a diálise no Hospital Amanto Lusitano desde 2003. Registaram-se as seguintes variáveis: a idade, o género, a etiologia da Insuficiência Renal Crónica, o tipo de diálise, as comorbilidades [Neoplasias, Doença Hepática Crónica, Cardiopatia, Vasculopatia, Acidente Vascular Cerebral e Diabetes], o acesso vascular inicial, a existência ou ausência de Fístula Arteriovenosa, data de início de diálise, tempo em consulta de nefrologia, a clearance de creatinina, o motivo do início de diálise, o status, a causa de morte, bem como a data de morte ou de descontinuação da diálise. Foi utilizada a escala do Índice de Charlson para medir a sobrevida dos doentes hemodialisados, agrupando os doentes em 3 grupos: grupo 1 (entre 1-6), grupo 2 (entre 7-9) e grupo 3 (entre 10-16). Foram utilizados os programas informáticos: Microsoft Acess 2007, Microsft Excel 2007, Microsoft Word 2007 e IBM SPPS Statistics 19. Resultados: Dos 100 doentes estudados: 35,7% são diabéticos, 61% têm idade inferior a 75 anos, enquanto os restantes 39% têm idade superior a 75 anos. No que diz respeito ao género, 73% são homens e 27% são mulheres. De acordo com os dados, 47% dos 100 pacientes morreram. Os doentes com índice Charlson apresentam uma sobrevida, aos 5 anos, de 84,1%; os doentes do grupo 2 de 44,3%; enquanto os pacientes do grupo 3 apresentam uma taxa de sobrevida de 25% (p=0.0001). Os diabéticos do grupo 1 apresentam taxa de sobrevida, aos 5 anos, de 100%; os do grupo 2 superior a 70%; e os do grupo 3 inferior a 20% (p=0.0001). Os doentes do grupo 1, que tiveram consulta de nefrologia prévia ao início da Terapêutica de Substituição Renal, apresentam taxa de sobrevida, aos 5 anos, superior a 80%; os do grupo 2 superior a 40%; e os do grupo 3 inferior a 40%, (p=0.012). Discussão: Conclui-se que os doentes que apresentam índices de Charlson mais elevados apresentavam taxas de sobrevidas inferiores. As comorbilidades 5 e 6 são as mais diferenciadoras de sobrevida e, os doentes diabéticos, apresentam sobrevidas bastante inferiores em relação ao resto da população. Os pacientes que tiveram tempo de seguimento prévio, apresentam taxas de sobrevida superiores. No que respeita aos doentes diabéticos, o índice de Charlson tem um impacto discriminativo superior na sobrevida, comparativamente com a restante população. Conclusão: Na realização deste trabalho consegui validar na nossa população a utilização do índice de Charlson como método para avaliar a sobrevida dos doentes em Terapêutica de Substituição Renal, tendo os doentes dos diferentes grupos (1,2 e 3), diferenciadas taxas de sobrevida.Introduction: The Chronic’s Renal Insuffiency, one of the infectious diseases of the XXI century, has as its main cause of development the Hypertension and the Mellitus Diabetes, being the terminal factor the Terminal Renal Disease that affects, importantly, the tax of life of the patients. From all of the main etiologies of the Chronic’s Renal Insuffiency, the Mellitus Diabetes it’s the one that affects, in a larger scale, the patients’ tax of life when they are in the Therapy for Renal Replacement. With this work I intend to determinate the Charlson’s index at the “Hospital Amato Lusitano’s” patients, as well as verify the impact of the index of the patients’ tax of life. Material and Methods: It was made a database research of the patients that were interned when the dialysis was initiated, through the lookup of the hospital’s clinical processes. There were selected, randomly, one hundred patients which initiated the dialysis at the “Hospital Amanto Lusitano” since 2003. There were registered the following variables: age, kind, the etiology of the Chronic’s Renal Insuffiency, diseases [Neoplastys, Chronic’s Hepatic disease, Cardiopathy, Vasculopathy, Cerebrovascular Accident and Diabetes], the initial vascular attack, the existence or not of Arteriovenous Fistula, the date of the beginning of the dialysis, the time that the patient spent at nephrology’s appointments, the clearance of the creatinine, the motive of the beginning of the dialysis, the status, the cause of dead, as well as the time of dead or the discontinuation of the dialysis. It was used the scale of Charlson’s index in order to measure the tax of life of haemodialysis’ patients, grouping them in three different groups: group number 1 (between 1 and 6), group number 2 (between 7 and 9) and group number 3 (between 10 and 16). There were used these programs: Microsoft Access 2007, Microsoft Excel 2007, Microsoft Word 2007 and IBM SPPS Statistics 19. Results: From the one hundred patients that were studied: 35,7% are diabetics, 61% have less than 75 years old, and the rest 39% have more than 75 years old. In relation to the kind, 73% of the patients are male and 27% are female. In order with the databases, 47% of one hundred patients died. The patients of the group number 1, when it comes to five years of databases’ study, presents a tax of life of 84,1%; the patients of the group number 2 presents a tax of life of 44,3%; and those who make part of the group number 3, presents a tax of life of 25% (p=0.0001). The diabetics’ patients of the group number 1, when it comes to five years of databases’ study, presents a tax of life of 100%; the diabetics’ patients of the group number 2 presents a tax of life superior than 70%; those from the group number 3 presents a tax of life inferior than 20% (p=0.0001). The patients of the group number 1, which had a previous Nephrology’s appointment at the beginning of the Therapy for Renal Replacement, presents a tax of life, when it comes to five years of databases’ study, superior than 80%; the patients of the group number 2 presents a tax of life superior than 40%; and those of the group number 3, presents a tax of life inferior than 40% (p=0.012). Discussion: In conclusion, the patients, who presents a Charlson’s index most elevated, presented, as well, inferior taxes of life. The diseases 5 and 6 are more differentiable of the taxes of life and the diabetics’ patients presents taxes of life most inferiors in relation to the rest of the population. Those patients who had previous monitoring, presents taxes of life superiors. In relation to the diabetics’ patients, the Charlson’s index has a superior discriminative impact at the tax of life, comparatively with the rest of the population. Conclusion: With the execution of this work I was able to validate, at our population, the usability of the Charlson’s index as a method to evaluate the patients’ tax of life in Therapy for Renal Replacement, and the patients of the three different groups (1, 2 and 3), have different taxes of life

Recovery of phosphates as struvite from urine-diverting toilets: optimization of pH, Mg:PO4 ratio and contact time to improve precipitation yield and crystal morphology

Phosphate (P) recovery from urban wastewaters is an effective strategy to address environmental protection and resource conservation, aiming at an effective circular economy. Off-grid wastewater treatment systems like urine-diverting toilets (UDT) can contribute to source separation towards nutrient recovery, namely phosphorus recovery. Effectiveness of P precipitation requires a processbased knowledge regarding pH, Mg:PO4, contact time and their interactions in P recovery and crystal morphology. Several studies failed to see the process as a whole and how factors influence both morphology and P recovery for UDT hydrolysed urine. This study addressed the above-mentioned factors and their interactions, and results showed that pH and Mg:PO4 ratio are the key factors for struvite precipitation, whereas contact time is relevant for crystal growth. The recommended set of factors proposed (pH 8.5, Mg:PO4 ratio of 1.2:1 and 30 minutes contact time) not only promotes a high precipitation yield – 99% of P with co-precipitation of at least 21% of ammonium (NH4 þ) – but also leads to larger crystals with lower water solubility (10% less crystals dissolved in water after 3 days). The obtained outcome facilitates the downstream process and leads to a more efficient slow-release fertiliser, as less P is wasted to receiving waters by leaching, minimising eutrophication processesinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio

Práticas de educação em saúde de estudantes de enfermagem e de outros cursos de ensino superior*

* Baseado na Tese de Doutoramento com o título Promoção da saúde: concepções, valores e práticas de estudantes de enfermagem e de outros cursos do ensino superior, Universidade do Minho: Braga, 2008.As práticas de Educação em Saúde são influenciadas pela abordagem que cada profissional adota, uma vez que implicam um diferente relacionamento com o utente, moldando a forma como se desenvolvem.Objetivo: Caracterizar as práticas de Educação em Saúde dos estudantes de três cursos de enfermagem e de outros quatro cursos de ensino superior ligados ao sector da saúde (Medicina) e ao setor da educação (Professores do Ensino Básico, Educadores de Infância e de Serviço Social).Metodologia: Estudo descritivo-correlacional e transversal, de abordagem quantitativa, onde participaram 709 estudantes (62,6% do universo), dos 1º e 4º anos, que preencheram um questionário desenvolvido e validado para o efeito.Resultados: Apenas 40,9% dos estudantes assinalaram terem realizado experiência prática durante o curso, principalmente os do 4º ano. A maior parte faz Educação em Saúde Muitas vezes (41,7%), especialmente Saúde infantil (23,1%). Estudantes com conceito Abrangente de Promoção da Saúde desenvolvem esta atividade com maior frequência do que os deconceito Reducionista ou Misto. Os estudantes dos três cursos de enfermagem praticam educação em saúde com mais frequência e em áreas mais diversificadas do que os colegas dos outros cursos.As caraterísticas das práticas de educação em saúde parecem ser influenciadas pelas variáveis Curso, Ano e Tipo de conceito de Promoção da Saúde. Os resultados obtidos poderão contribuir para melhorar o desempenho docente e as práticas de Educação em Saúde