Determinações Mineralógicas e Petrofísicas em Carbonatos da Bacia São José do Itaboraí, Rio de Janeiro, Brasil

A Bacia São José do Itaboraí é uma depressão elíptica fechada encravada em rochas do embasamento cristalino, sendo sua origem associada ao desenvolvimento do Sistema de Rifte continental do sudeste do Brasil. A bacia foi preenchida principalmente por sedimentos carbonáticos e calcário travertino é a fácies predominante. Estudos mineralógicos através de microscopia de luz transmitida, difração de raios X e MEV/EDS e determinações de porosidade e permeabilidade foram efetuadas no travertino e nas fácies subordinadas brecha carbonática e grainstone oolítico, com o propósito de avaliar o sistema de porosidade de rochas carbonáticas. As investigações nessas três litofácies apontaram densidades entre 2,66 e 2,70 g/cm3 e taxas baixas a muito baixas de porosidade e permeabilidade, menor que 2,5% e 0,2 milidarcys, respectivamente. As principais causas para valores tão baixos residem na forte cimentação das rochas aliada à recristalização de cristais de calcita, à alteração de silicatos e ao preenchimento de poros por minerais diagenéticos. Este trabalho mostra que o fluxo de fluidos em rochas reservatório pode ser mais bem compreendido ao serem usados métodos de determinação mineralógica combinados com petrofísica

Abnormal Hedgehog Pathway In Myelodysplastic Syndrome And Its Impact On Patients' Outcome

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The neglected terminators: Rho family GAPs in neutrophils

Background: GTPase-activating proteins (GAPs) accelerate the rate of hydrolysis of GTP bound to small GTPases, thereby limiting the prevalence and concentration of the active, GTP-bound form of these proteins. The large number of potential GAPs acting on members of the Rho family of small GTPases raises the question of specificity or redundancy. Results: In this review, we summarize experimental data obtained on the role of Rho family GAPs in neutrophils, highlight cases where more than one GAP is involved in a physiological function and show examples that GAPs can be involved not only in termination but also in initiation of cellular processes. We demonstrate that the expression-level regulation of GAPs may also occur in short-living cells such as neutrophils. Finally, we provide insight into the existence and structure of molecular complexes in which Rho family GAPs are involved. Conclusion: GAPs play more complex and varied roles than being simple terminators of cellular processes. © 2018 Stichting European Society for Clinical Investigation Journal Foundatio

Hematopoietic stem cells self-renew : the role of the Hedgehog pathway in myelodysplastic syndrome and Arhgap21 in hematopoiesis

Orientador: Sara Teresinha Olalla SaadTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: A hematopoiese, processo pelo qual a célula-tronco hematopoiética (CTH) dá origem a todas as células do sangue, é regulada através do seu contato com diversos tipos celulares que compõem o estroma da medula óssea, mantendo o balanço entre autorrenovação e diferenciação das CTHs, processos também regulados por vias de sinalização como a via Hedgehog e proteínas reguladoras de citoesqueleto como RhoGTPases. Sendo assim, os objetivos gerais do trabalho foram investigar a via Hedgehog na medula óssea de pacientes com síndromes mielodisplásica (SMD) e a função da ARHGAP21 na autorrenovação das CTH. Através de imunohistoquímica de bióspias de medula óssea de pacientes com SMD em comparação com anemia megaloblástica (usada como controle) observamos o aumento de células marcadas para os ligantes Sonic e Dessert Hedgehog e células positivas para c-Kit nas amostras de SMD. Em seguida, analisamos a expressão gênica dos membros da via Hedgehog em células totais de medula óssea de pacientes SMD e doadores normais. Não houve diferença na expressão de Patched (PTCH) em SMD em comparação com doadores saudáveis, porém quando as amostras são classificadas de acordo com a WHO 2008, observamos aumento significativo de PTCH nos pacientes com 5% de blastos na medula óssea (AREB-1 e 2). Observamos aumento de 7 vezes na expressão de SMO no grupo de SMD e de 14 vezes no grupo AREB-1 e 2 em comparação com doadores normais. Análises de sobrevida de Cox demonstraram que o aumento na expressão de SMO e a redução na expressão de PTCH são fatores independentes na sobrevida global dos pacientes com SMD. Além disso, confirmamos o aumento da ativação da via Hedgehog em células CD34+ de pacientes com SMD através do aumento da expressão dos alvos da via: GLI1, BMI1 e Nanog. Nossos dados indicam que a via Hedgehog está desregulada na medula óssea dos pacientes com SMD e o possível envolvimento dessa via na progressão da doença. Através do modelo murino Arhgap21+/- estudamos a importância dessa proteína na hematopoiese normal e observamos que esses animais apresentam redução nas diferenciações eritroide e megacariocítica juntamente com aumento da mobilização mielóide. Observamos ainda o aumento na frequência das CTHs de curta e longa duração na medula óssea dos heterozigotos. Esse aumento foi responsável pela maior recuperação no número de neutrófilos após indução de estresse hematopoiético nos animais Arhgap21+/-. Durante o transplante seriado de células de medula óssea observamos menor reconstituição após 4 semanas, juntamente com menor reconstituição a longo prazo nos animais que receberam células dos heterozigotos, sugerindo menor autorrenovação das CTHs nas células com redução da Arhgap21. O nicho medular dos animais Arhgap21+/- demonstrou redução no suporte inicial da hematopoiese o que foi relacionado à maior produção de ROS após irradição subletal dos heterozigotos. Juntos, esses resultados indicam que a ARHGAP21 tem importante papel na hematopoiese normal, pois participa de processos como a diferenciação, mobilização e autorrenovação das CTHsAbstract: Hematopoiesis is a process by which hematopoietic stem cell (HSC) gives rise to all blood cells and it is regulated by HSC contact with different cell types that compose the bone marrow stroma and maintain the balance between HSC self-renewal and differentiation, processes that are also regulated by signaling pathways such as the Hedgehog and regulatory proteins of the cytoskeleton as RhoGTPases. The overall aims of this work were to investigate the Hedgehog pathway in myelodysplastic syndrome (MDS) bone marrow and the ARHGAP21 role in hematopoiesis. Immunohistochemistry assays revealed that MDS bone marrow biopsies showed increased Sonic and Dessert Hedgehog together with c-kit positive stained cells compared to megaloblastic anemia (used as control).We also analyzed gene expression of the Hedgehog pathway members in total cells from MDS bone marrow and healthy donors. There was no difference in Patched (PTCH) expression in MDS compared to healthy donors, however, when MDS samples were classified according to WHO 2008, we observed a significant increase in PTCH1 expression in MDS patients 5% bone marrow blast (RAEB-1 and RAEB-2) compared to controls. We also observed 7-fold increase of SMO transcripts in the MDS group and 14-fold increase in RAEB-1 and RAEB-2. Cox survival analyses showed that increased SMO and decreased PTCH expression were considered as independent factors influencing the survival of these patients. We also confirmed the enhanced Hedgehog activation in CD34+ cells from MDS patients through increased expression of the pathway targets: GLI1, BMI1 and Nanog. Together, our data indicate that the Hedgehog pathway is deregulated in MDS bone marrow and the possible role of that pathway in disease progression. Arhgap21+/- murine model study showed the importance of this protein in normal hematopoiesis as these animals showed alterations in erythroid and megakariocyte differentiation along with increased myeloid mobilization. We also observed increased short and long term HSC frequency in the heterozygous bone marrow. This increase was responsible for enhanced neutrophil reconstitution during induced hematopoietic stress in Arhgap21+/-. Serial bone marrow transplantation assay showed lower chimerism in peripheral blood 4 weeks after the transplant together with lower long term reconstitution in animals who received Arhgap21+/- bone marrow, indicating decreased HSC self-renew from heterozygous cells. Bone marrow niche of Arhgap21+/- animals showed a reduction in initial support hematopoiesis and this result was correlated with the increased ROS production from Arhgap21+/- bone marrow after sublethally irradiation. Taken together, our data indicate that ARHGAP21 has an important role in hematopoiesis regulating process such as differentiation, mobilization and self-renewal of HSCDoutoradoBiologia Estrutural, Celular, Molecular e do DesenvolvimentoDoutora em Fisiopatologia Médic

Hematopoietic defects in response to reduced Arhgap21

Arhgap21 is a member of the Rho GTPase activating protein (RhoGAP) family, which function as negative regulators of Rho GTPases. Arhgap21 has been implicated in adhesion and migration of cancer cells. However, the role of Arhgap21 has never been investigated in hematopoietic cells. Herein, we evaluated functional aspects of hematopoietic stem and progenitor cells (HSPC) using a haploinsufficient (Arhgap21(+/-)) mouse. Our results show that Arhgap21(+/-) mice have an increased frequency of phenotypic HSC, impaired ability to form progenitor colonies in vitro and decreased hematopoietic engraftment in vivo, along with a decrease in LSK cell frequency during serial bone marrow transplantation. Arhgap21(+/-) hematopoietic progenitor cells have impaired adhesion and enhanced mobilization of immature LSK and myeloid progenitors. Arhgap21(+/-) mice also exhibit reduced erythroid commitment and differentiation, which was recapitulated in human primary cells, in which knockdown of ARHGAP21 in CMP and MEP resulted in decreased erythroid commitment. Finally, we observed enhanced RhoC activity in the bone marrow cells of Arhgap21(+/-) mice, indicating that Arhgap21 functions in hematopoiesis may be at least partially mediated by RhoC inactivation. (c) 2017 The Authors. Published by Elsevier B.V.FAPESPCNPq (INCT-Sangue)National Institutes of HealthYale Cooperative Center of Excellence in HematologyUniv Campinas UNICAMP, Inst Nacl Ciencia & Tecnol Sangue, Hematol & Blood Transfus Ctr, Hemoctr, Campinas, SP, BrazilUniv Fed Sao Paulo, Dept Biol Sci, Diadema, BrazilUniv Campinas UNICAMP, Fac Med Sci, CIPOI, Oncohematol Child Res Ctr, Campinas, SP, BrazilYale Sch Med, Dept Lab Med, New Haven, CT USAXavier-Ferrucio, JulianaYale Sch Med, Yale Stem Cell Ctr, New Haven, CT USAUniv Fed Sao Paulo, Dept Biol Sci, Diadema, BrazilFAPESP: 2009/08908-6FAPESP: 2010/50682-2FAPESP: 2011/51959-0National Institutes of Health: DK086267National Institutes of Health: DK094934Yale Cooperative Center of Excellence in Hematology: 1U54DK106857Web of Scienc