Sustainable stormwater treatment : the example of Uppsala: problems, future and strategies

Examensarbetet behandlar behovet av en mer holistisk dagvattenhantering. Det synliggörs dels genom klimatförändringens effekter vilket innebär tätare och kraftigare nederbörd. Dels genom förtätningspolitiken och exploatering i städer som resulterar i fler hårdgjorda ytor och försvårar omhändertagandet av dagvatten. I dagsläget är rörbundna ledningar under marknivå normen inom merparten av Sveriges kommuner. De är emellertid inte konstruerade för att klara av de utmaningar som ställs. Konsekvenser kan bli översvämningar och utsläpp av föroreningar i yt- och grundvatten. Klimatförändring i kombination med urbanisering ökar således behovet av ytterligare fokus på dagvattenfrågorna. Den huvudsakliga metoden som har använts i dokumentgranskningen är kvalitativ innehållsanalys av utvalda dokument beträffande Uppsalas dagvattenhantering. Syftet med examensarbetet är att undersöka hur Uppsala kommun förhåller sig till problematiken kring dagvattenhantering i urban miljö. Arbetets resultat behandlar framtidsmål och strategier för att nå målen som Uppsala kommun arbetar med vad gäller dagvattenfrågor. Den kvalitativa innehållsanalysen i litteraturöversikten och resultatet analyseras med hjälp av omställningsteorin utarbetad av Wihlborg et al (2019). Litteraturöversikten visar på att blågröna dagvattenlösningar anses vara mer hållbart ur ett långsiktigt perspektiv i jämförelse med de konventionella, rörbundna ledningarna. Genom lokalt omhändertagande, rening och fördröjning så utjämnas, reduceras och renas dagvattnet. Det minskar risken för att föroreningar avleds tillsammans med dagvatten till mottagande vattenområde och jämnar ut vattenflödet. Resultatet visar på att Uppsala kommun strävar efter hållbar dagvattenhantering genom blågröna lösningar. Det finns emellertid hinder som påverkar omställningen, däribland otydlig lagstiftning och kommunens begränsningar i att kunna ställa krav på privata fastighetsägare.This master thesis examines the need for a more holistic stormwater approach. Contributing factors are the impact of climate change, which leads to denser and heavier precipitation. The densification policy and urban development result in more hard surfaces, which reduces the possibility of natural infiltration and disposal of stormwater. At present, pipe-bound solutions below ground level are the norm in most of Sweden's municipalities. However, they are not designed to meet the demands of climate change in combination with urbanisation. Consequences can be urban flooding and emissions of pollutants into receiving waterbody. The main method used in the document review is a qualitative content analysis of selected documents regarding Uppsala's stormwater management. The purpose is to investigate how Uppsala Municipality relates to the problems of stormwater management in urban environments. The results deal with future goals and strategies for achieving the goals that the municipality of Uppsala works with regarding stormwater issues. The qualitative content analysis in the literature review and results are analysed using the transition theory on blue-green stormwater solutions developed by Wihlborg et al. (2019). The literature review shows that blue-green solutions are considered to be more sustainable from a long-term perspective compared to conventional, pipe-bound solutions. Local retention and cleaning reduce the risk of contamination being diverted along with stormwater to the receiving waterbody. It also reduces water flow. Blue-green planning is often combined with conventional methods, which means a reduced risk of exceeding the pipeline's capacity, which in turn reduces the risk of flooding. The result shows that Uppsala Municipality strives for sustainable stormwater management through blue-green solutions. However, barriers are affecting the implementation, including unclear legislation and the municipality's limitations in being able to make demands on private property owners

SMAJ-tautia aiheuttavan mutaation korjaus potilaan lihaksen kantasoluissa CRISPR-Cas9 geenieditointitekniikalla

Vuonna 2011 Suomesta löydettiin uusi perinnöllinen sairaus, jonka todettiin olevan lähtöisin Pohjois-Karjalan alueelta ja siten osa suomalaista tautiperimää. Taudin nimi on Jokela tyypin spinaalinen lihasatrofia (Spinal Muscular Atrophy of Jokela Type = SMAJ) ja sitä sairastaa yhteensä arviolta 200–400 potilasta. SMAJ on autosomaalisesti vallitseva, alempien liikehermosolujen rappeumasairaus, jonka aiheuttaa pistemutaatio c.197G>T geenissä CHCHD10 ja yhden aminohapon vaihtuminen p.G66V vastaavassa proteiinissa. CHCHD10 on saman nimisestä geenistä tuotettu proteiini, jota esiintyy mitokondrioiden ulko- ja sisäkalvon välissä. Sen tarkkaa toimintaa ei tunneta, eikä miten mutaatio siihen vaikuttaa. Taudin aiheuttavan mekanismin selvittäminen on kuitenkin olennaisen tärkeää, jotta mahdollisia hoitoja ja diagnostisia testejä on mahdollista kehittää. Tutkielman tavoite on korjata tämä mutaatio heterotsygootin SMAJ-potilaan myoblasteissa (lihassolun esiaste) käyttämällä CRISPR-Cas9 geenieditointi teknologiaa. Korjaamalla mutaatio, voidaan luoda solulinja, joka on muuten täysin identtinen potilaan solujen kanssa, mutta mutaatio geenissä CHCHD10 on korjattu vastaamaan normaalia. Vertailemalla tätä solulinjaa potilaan soluihin, voidaan selvittää ainoastaan mutaatiosta johtuvat erot soluissa. Tutkielmassa pyritään selvittämään taudin aiheuttavan mutaation vaikutuksia ihmisen lihassoluissa. Myoblasti-solujen CRISPR-Cas9 geenieditointi ei ole yleistä, sillä usein vastaavan kaltaisia tutkimuksia tehdään indusoiduilla kantasoluilla, joista kohdekudoksen soluja on helppo erilaistaa. Nyt käytettävissä oli kuitenkin potilaan tutkimuskäyttöön luovuttamia lihaksen kantasoluja ja oli mielenkiintoista tutkia mitokondriaalisen CHCHD10 proteiinin aiheuttamaa tautia mitokondriorikkaissa lihassoluissa. CRISPR-Cas9 ribonukleproteiinikompleksia (RNP) ja sitä vastaavaa korjaustemplaattia käytettiin mutaation korjaamisessa. RNP-kompleksi transfektoitiin soluihin elektroporaation avulla, jota ennen elektroporaatio-olosuhteet optimoitiin lihassoluille edullisiksi. Elektroporoitujen solulinjojen geenieditoinnin onnistuminen arvioitiin sekä restriktioentsyymianalyysin, että Synthego ICE CRISPR internettyökalun avulla. Klonaaliset solulinjat luotiin fluoresenssiavusteisella solun lajittelu teknologialla (FACS) ja manuaalisesti poimimalla kolonioita solu maljoilta. Kloonien genotyypit selvitettiin Sanger sekvensoimalla ja arvioitiin off-target geenieditoinnin varalta. Yksi korjattu solulinja saatiin valmistettua ja geenieditointiprosessin optimisaatio myoblasti-soluille onnistui. Tuotetun isogeenisen solulinjan avulla voidaan tulevaisuudessa tutkia CHCHD10:n proteiini- ja mRNA-tasojen eroja verrattuna potilassolulinjaan, ja näin saada arvokasta informaatiota sairauden vaikutuksista lihassoluissa. Tulevaisuuden tehtäviin lukeutuu myös mutaation vaikutuksien hermolihasliitokseen tutkiminen indusoiduista kantasoluista erikoistettujen hermosolujen avulla. Yhteissolukulttuurit mahdollistavat editoitujen myoblastien, sekä hermosolujen kasvattamisen ja hermolihasliitoksen tutkimisen in vitro. Hermolihasliitos on tärkeä yhdistäjä alempien liikehermosolujen ja luustolihasten välissä ja mutaation vaikutuksen tutkiminen voisi valaista SMAJ-tautimekanismia entisestään.Spinal muscular atrophy of Jokela type (SMAJ) is an autosomal dominant motor-neuron disease caused by a missense mutation c.197G>T, p.G66V in the gene CHCHD10. Coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain-containing protein 10 (CHCHD10) is a nuclear-encoded mitochondrial protein located in the intermembrane space (IMS) of mitochondria with an unknown exact function and disease-causing mechanism. In this project, the overarching aim was to correct a heterozygous SMAJ-causing mutation in patient myoblast cells with CRISPR-Cas9 genome editing. The goal was to create a genetically identical, isogenic, cell line to study only the effects of the mutation on cellular phenotype in vitro. Human myoblast cells isolated from patient biopsies provide the most pertinent experimental model to study neuromuscular atrophy-associated mutations in their natural genomic environment. More specific aims included genome editing optimization with myoblast cells, since it is not as widely conducted as with some other cell types, such as iPSCs. CRISPR-Cas9 ribonucleoprotein (RNP) complex and associated donor template were used to induce homology-directed repair (HDR) in the genome of patient-derived myoblast cells and correct the mutation. After optimization of electroporation conditions for myoblast cells, guide RNAs were designed and transfected into patient myoblasts. Clonal cell lines were made by utilizing techniques such as fluorescence adjusted cell sorting (FACS) and manual colony picking. The success and precision of genome editing were analyzed by Sanger sequencing, comparing the performance of the different guide RNAs with restriction enzyme analysis and Synthego ICE CRISPR web tool, and screening regions of potential off-target genome editing. A genome-edited myoblast cell line with the CHCHD10 c.197G>T mutation corrected, was successfully generated to provide an isogenic control for the patient myoblast cell line. Optimization of myoblast electroporation was successful and conditions used proved to be effective. Clonal cell line creation proved to be challenging with myoblast cells and work is still needed to improve the viability of single-cell clones after FACS. Nevertheless, the advances taken here regarding myoblast genome editing with CRISPR-Cas9 offer a fertile avenue for future research of myoblasts genome manipulation, myogenic disorders, and the role of CHCHD10 in skeletal muscle and SMAJ. Comparing the CHCHD10 protein level and mRNA expression between patient cells, corrected myoblasts, and differentiated myotubes is an area of future research. Future work also includes measuring the mitochondrial integrated stress response in both cell lines and co-culturing myotubes and iPSC derived motor neurons to study the effects of p.G66V on neuromuscular junction (NMJ) formation

Raduga experiment: Multizonal photographing the Earth from the Soyuz-22 spacecraft

The main results of the scientific research and 'Raduga' experiment are reported. Technical parameters are presented for the MKF-6 camera and the MSP-4 projector. Characteristics of the obtained materials and certain results of their processing are reported

Causas de la economía informal en el cantón Riobamba, 2018/Causes of the informal economy in the canton Riobamba, 2018

La presente investigación explica las causas que generan la economía informal en el cantón Riobamba, debido al incremento de este sector económico en el espacio geográfico de estudio. El objetivo de la investigación es explicar las causas que conllevan al incremento de este sector en la economía informal puesto que debe ser una preocupación de las autoridades locales. El desarrollo de la investigación se sustenta en el Enfoque Cuantitativo, en el nivel Explicativo, en los tipos observacional, retrospectivo y longitudinal, el método es inductivo, la técnica, fue un cuestionario estructurado y la muestra fue aplicada a 367 individuos por conveniencia de los investigadores. Los resultados de la investigación identifican como causas del incremento de la Economía Informal en el cantón, las siguientes: la carga impositiva en el cumplimiento de las regulaciones legales, sanitarias y laborales, los permisos municipales exigidos, las restricciones en el mercado laboral, la inmigración interna y externa. Es menester dejar indicado que el presente artículo, se presenta en el contexto del Proyecto denominado Desarrollo Emprendedor para la economía informal del cantón Riobamba. The present investigation explains the causes that generate the informal economy in the canton Riobamba, due to the increase of this economic sector in the geographical space of study. The objective of the investigation is to explain the causes that lead to the increase of this sector in the informal economy since it must be a concern of the local authorities. The development of the research is based on the Quantitative Approach, on the Explanatory level, on the observational, retrospective and longitudinal types, the method is inductive, the technique was a structured questionnaire and the sample was applied to 367 individuals for the convenience of the researchers The results of the investigation identify as causes of the increase of the Informal Economy in the canton, the following: the tax burden in compliance with legal, health and labor regulations, the required municipal permits, restrictions in the labor market, immigration internal and external. It is necessary to indicate that this article is presented in the context of the Project called Entrepreneurial Development for the informal economy of the Riobamba canton. Palabras clave: economía informal, carga impositiva, regulaciones legales. Keywords: informal economy, tax burden, legal regulations