Effets de deux xénohormones, la génistéine et la vinclozoline, sur le développement et les fonctions exocrines et endocrines des glandes salivaires submandibulaires de rats Wistar Han (influence de la période d'exposition en fonction de l'âge et du sexe)

Les glandes salivaires sont des glandes mixtes : la salive (produit exocrine) estimpliquée dans le maintien de l homéostasie buccale alors que les secrétions endocrines (ex :facteurs de croissance) ont un rôle physiologique (gamétogénèse, ostéogenèse,hypertension ) Chez les mammifères, elles affichent un dimorphisme sexuel qui laisseentrevoir une sensibilité éventuelle à des xeno-hormones.Ce mémoire présente l action de la génistéine (phyto-oestrogène) et/ou de la vinclozoline(anti-androgène) sur la glande submandibulaire (SM) de rat lors d une exposition précoce viala mère (gestation-lactation) et lors d une exposition pendant la période de croissance (dusevrage à l âge adulte). Les glandes SM, prélevées au stade immature et jeune adulte, ont faitl objet d une analyse histologique et d une étude de marqueurs moléculaire des fonctionsendocrines et exocrines associées aux processus gustatifs. L exposition précoce ralenti ledéveloppement de la glande SM et augmente sélectivement la préférence au sucré des malesimmatures mais pas des adultes ; l analyse moléculaire révèle une action sélective sur lesfonctions exocrines corrélée à celle sur les préférences, ainsi qu une action sur les fonctionsendocrines (facteurs de croissances) qui s inverse avec l âge. L exposition à partir du sevrageperturbe seulement les mâles qui présentent des altérations des structures sécrétrices coupléesà des modifications d expression des récepteurs hormonaux et facteurs de croissance, maisaussi au taux sérique de l EGF.Cette étude identifie la glande submandibulaire comme cible de perturbateurs endocriniens etpose la question des conséquences physiologiques à termeThe salivary glands are mixed glands: saliva (exocrine product) is involved inmaintaining oral homeostasis whereas endocrine secretions (eg growth factors) have aphysiological role (gametogenesis, osteogenesis, hypertension ..). In mammals, they displaysexual dimorphism suggesting a possible susceptibility to xeno-hormones.This manuscript presents the action of genistein (phytoestrogen) and/or vinclozolin (antiandrogenic)on the submandibular gland (SM) rats when performing an early exposure via themother (pregnancy, lactation) or an exposure during the growth period (from weaning toadulthood). The SM glands, collected at immature and young adult ages, have been analyzedaccording histological aspect and expression of molecular markers of endocrine and exocrinefunctions associated with gustatory process. The early exposure disrupted the development ofthe SM gland and selectively increases the sweet preference in immature males but not inadults; molecular analysis reveals a selective action on exocrine functions related to the sweetpreferences and also an action on endocrine functions (growth factors) which reverses withage. Exposure from weaning disrupts only the male salivary glands with alterations insecretory structures coupled with changes in expression of both, sex-hormone receptors andgrowth factors, but also in serum EGF.This study identifies the submandibular gland as a target for endocrine disruptors and raisesthe question of the further physiological consequencesDIJON-BU Doc.électronique (212319901) / SudocSudocFranceF

Effets de la consommation d'Allium Sativum sur les fonctions testiculaires chez le rat adulte (mise en évidence d'une altération des fonctions Leydigiennes et Sertoliennes et d'une apoptose des cellules germinales)

Ces dernières décennies, nous avons assisté à un regain d intérêt pour les vertus thérapeutiques des plantes tant dans le grand public que dans les firmes pharmaceutiques qui sont à la recherche de nouvelles molécules actives. Il est souvent prêté aux plantes des propriétés de panacée d où la nécessité d études expérimentales solides et notamment dans le domaine de la fertilité masculine, rarement investiguée, qui pourrait pâtir d effets secondaires néfastes. Dans ce cadre, nous nous sommes intéressés aux effets de l ail, Allium sativum (As), qui est abondamment utilisée dans la cuisine méditerranéenne et dont l intérêt en thérapeutique a grandi ces dernières années grâce à ses effets hypolipémiants. Nous avons testé l influence de l ail cru à différentes doses (5, 10, 15 et 30%) sur les principaux paramètres biochimiques et moléculaires de la fertilité masculine. Dans la première partie de cette étude, nous avons montré que As modifie les paramètres biochimiques de la prostate et des vésicules séminales alors qu il n y a pas d effet sur l épididyme. Les effets sur les glandes annexes pourraient être liés à la diminution de la production de testostérone que nous observons chez les animaux traités. L effet de l ail est très probablement périphérique car les taux de LH (As à 10-30%) sont augmentés et l expression des enzymes de la stéroïdogenèse est inhibée (As 5-30%) dans les cellules de Leydig. Dans une seconde partie de notre travail, nous avons montré que l As provoque une apoptose accrue des spermatocytes I (stade pachytène) et des spermatides. L étude du profil apoptotique moléculaire, réalisée par la technique de western blotting, montre une augmentation de l expression des molécules proapoptotiques : caspase-3 activée et Smac/DIABLO et des molécules antiapoptotiques : cIAP1 et cIAP2. Toutefois, l action des c-IAPs est inhibée par Smac, permettant l action apoptotique de la caspase-3. Enfin, concernant les cellules de Sertoli, As provoque une diminution des taux circulants de FSH et de testostérone, deux hormones qui régulent les fonctions sertoliennes. L absence de modification de l expression de la protéine de structure tubuline b-3 suggère que le nombre de cellules de Sertoli ne serait pas affecté par le traitement par As. De plus, aucune apoptose n est détectée dans les cellules de Sertoli que se soit par la technique du TUNEL ou par l immunohistochimie de la caspase-3 activée. Toutefois, les fonctions sertoliennes seraient affectées par le traitement par As. Ainsi, les taux d AMH, dont la production est sous le double contrôle de la testostérone et de de la FSH et les taux de P27kip (sous le contrôle de la testostérone) diminuent dès la dose 10% suggérant une altération des fonctions sertoliennes. En revanche l expression de GATA4 augmente dès la dose 10% d As. Etant donné le rôle de GATA4 dans le contrôle de l expression de la protéine StAR, il est possible que ce facteur de transcription soit augmenté pour tenter de rétablir une production de testostérone normale à travers une communication paracrine, cellules de Sertoli-cellules de Leydig. En somme, au cours de ce travail nous avons identifié les effets de l ail cru sur les fonctions testiculaires et identifiés quelques uns de ses mécanismes d action cellulaires et moléculairesDuring these last decades, therapeutic effects of plants have taken attention of general public and of pharmaceutical firms looking for new active molecules. Numerous health benefits have been attributed to different plants such as garlic and serious experimentations are necessary to confirm them and also to investigate possible harmful secondary effects particularly to male fertility which was rarely studied. In this context we were interested by the effects of Allium sativum (As), or garlic, which is a frequently used plant in Mediterranean cooking with a growing therapeutic reputation due to its hypolipidaemic virtues. We tested the effects of different doses of crude garlic (5,10,15 and 30%) on various biochemical and molecular parameters of male fertility in adult rats. In the first part of the study, we showed that As modifies biochemical parameters of prostate and seminal vesicles without any effect on epididymis. Such consequences on accessory sexual glands could be linked to the decrease of testosterone production we observed after garlic treatment. Garlic effect was probably peripheral since LH serum levels (at 10-30% As) were increased and expression of enzymes implicated in steroid genesis was inhibited in Leydig cells. In the second part of this work, we showed that As induces an increased apoptosis of spermatocytes I (in pachytene stage) and of spermatids. Western blottings evidenced an increase in the expression of pro-apoptotic molecules active caspase-3 and Smac/DIABLO- and of anti-apoptotic molecules cIAP1 and cIAP2. Nevertheless, action of cIAPs was inhibited by Smac, so allowing caspase-3 apoptotic action on germ cells. Finally, As lead to a decrease in testosterone and FSH serum levels, these two hormones being known as regulators of Sertoli cell functions. As expression of Sertoli cell specific cytoskeleton tubulin-3 was not modified, it was argued that Sertoli cells number remained the same after garlic treatment as in control rats. Moreover, apoptosis was not detected in Sertoli cells using TUNEL technique and active caspase-3 immunodetection. But Sertoli cells functions may be affected by As treatment since some protein expressions were modified. AMH (whose production is controlled by testosterone and FSH) and p27kip (also controlled by testosterone) ARN levels were decreased at 10-30%As. On the other side, GATA4 expression was increased at 10-30%As. As GATA4 controls Star expression, it is possible that this transcription factor was increased in order to restore normal testosterone production by a paracrine interaction between Sertoli and Leydig cells. In conclusion, we identified adverse effects of crude garlic consumption on testis functions and evidenced some of its cellular and molecular mechanisms of actionLYON1-BU.Sciences (692662101) / SudocSudocFranceF

Adaptations de la cellule rénale en réponse au Cadmium (rôles du CFTR, de la polyubiquitination sur la Lysine 63 et de l'autophagie)

De nombreux pays sont confrontés aux problèmes causés par la pollution de l air et de l eau par des métaux lourds toxiques. Parmi ces polluants, le cadmium (Cd) est un des plus dangereux car il produit des effets toxiques et cancérogènes, à des doses extrêmement faibles. Chez l Homme, il pénètre par inhalation/ingestion et se concentre principalement dans le rein où il induit une insuffisance rénale mimant le syndrome de Fanconi. A fortes concentrations, il est clairement établi que le Cd induit la production de radicaux libres oxygénés ainsi que l apoptose ou la nécrose, cependant les mécanismes mis-en-jeu restent méconnus. Dans ce travail mené à la fois, in vivo et in vitro, mes objectifs ont été d identifier les cibles moléculaires du Cd ainsi que les stratégies de défense adoptées par les cellules de tubules contournés proximaux (TCP) pour survivre à un tel stress, en utilisant différentes approches cellulaires, moléculaires et biochimiques. Notre première étude réalisée sur des rats intoxiqués avec une faible dose du Cd (0.3 mg/Kg de poids corporel) nous a permis de mettre en évidence l accumulation irréversible du Cd dans les lysosomes avec pour conséquences, la formation des corps d inclusion protéiques spécifiquement au niveau des cellules de TCP suivie de l engagement de ces dernières dans les processus prolifératif et autophagique mais non apoptotique, contrairement à la littérature. Sur la base de ces résultats, nous avons proposé l accumulation des agrégats protéiques et des vésicules autophagiques comme biomarqueurs précoces d intoxication à des doses de Cd relevante de l environnement. Par la suite, grâce à des modèles cellulaires de TCP, nous avons montré que le Cd (i) active via les MAPK le canal CFTR, qui contrôle le niveau des ROS par l efflux des glutathion et entraîne une diminution du volume cellulaire, (ii) induit indépendamment d un stress oxydatif l accumulation massive des protéines poly-ubiquitinées sur la lysine 63, engageant un stress du réticulum et la mort des cellules. De façon intéressante, ces agrégats de protéines poly-ubiquitinées perturbent spécifiquement la dégradation autophagique ; un processus d homéostasie cellulaire important dans la suppression tumorale. Parmi les cibles moléculaires, le Cd induit l ubiquitination du facteur de transcription HIF-1a (hypoxiainducible factor 1) qu il piége dans le cytosol. En conclusion, notre étude représente une étape importante dans la compréhension du mécanisme d action des carcinogènes environnementaux : les capacités du Cd d induire de façon massive une polyubiquitination sur K63 et ainsi de lever la fonction suppresseur de tumeur de l autophagie pourrait en effet fournir le lien manquant entre l exposition à ce métal lourd et les effets toxiques et carcinogènes observés.NICE-BU Sciences (060882101) / SudocSudocFranceTunisiaFRT

Olea europaea L. leaf extract mitigates oxidative and histological damage in rat heart tissue exposed to combined noise and toluene: An experimental study

In many occupational settings, workers are frequently exposed to toluene and noise. However, the individual and combined effects of these exposures on the cardiovascular system have not been fully elucidated. Therefore, this study aimed to investigate the impact of simultaneous exposure to toluene and noise on the rat heart, while also evaluating the potential preventive effect of olive leaf extract (OLE). Forty-eight male Wistar rats were randomly assigned to eight groups (n = 6/group): control group (C), control group that received OLE (C + OLE), group exposed to noise (N), group exposed to noise and receiving OLE (N + OLE), group exposed to toluene (T), group exposed to toluene and receiving OLE (T + OLE), group co-exposed to noise and toluene (NT), and group co-exposed to noise and toluene and receiving OLE (NT + OLE). The rats in this study were subjected to simultaneous exposure to toluene and noise for a duration of six weeks, within a custom-built plexiglass chamber. Toluene was administered at a concentration of 300 ppm, while the noise level was set to 85 dB(A). The exposure chamber was equipped with a generation system, an exposure system, and a monitoring system, ensuring precise and accurate exposure conditions. After the six-week period, heart and blood samples were collected from the rats for subsequent analysis. Plasma levels of cholesterol (CHOL), triglycerides (TG), lactate dehydrogenase (LDH), and creatine kinase (CK) were measured, and histopathological investigation was conducted using HE staining. Additionally, superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities, as well as malondialdehyde (MDA) levels in heart tissue were measured. Our results showed that simultaneous exposure to noise and toluene altered CHOL, TG, LDH, and CK levels, and also caused an increase in lipid peroxidation levels and superoxide dismutase activity, along with a decrease in catalase activity in the heart. A significant alteration in the myocardium was also observed. However, treatment with OLE was found to modulate these oxidative and histological changes, ultimately correcting the deleterious effects induced by the combined exposure to noise and toluene. Therefore, our study suggests that OLE could be a potential preventive measure for individuals exposed to toluene and noise in industrial settings

Phytochemical profiling, antimicrobial, antibiofilm, insecticidal, and anti-leishmanial properties of aqueous extract from Juglans regia L. root bark: In vitro and in silico approaches

ABSTRACTThe Juglans regia root aqueous extract (JRRAE) phytochemical variability and the investigation of their antimicrobial, antibiofilm, insecticidal, and anti-leishmanial properties were studied. As a result, the JRRAE chemical profile revealed the presence of biomolecules using UV, HPLC, and FT-IR analysis. The investigations showed marked antibacterial activities, highlighted inhibited biofilm formation, induced lethality Leishmania amazonensis promastigotes (50%), and possess an insecticidal activity at 100 µg/ml. A molecular docking study was performed against S. aureus gyrase, S. aureus tyrosyl-tRNA synthetase, human peroxiredoxin 5, cyclooxygenase-2, and trypanothione reductase and confirmed that the activities are mainly due to coumarin, epicatechin, juglone, epicatechin, and epicatechin presence, respectively. The stability of these complexes is essentially related to the strong hydrogen bonds formed between the most active compounds and the binding site amino acids. The identified compounds were found to pass the absorption, distribution, metabolism, and excretion property as well as five Lipinski’s rules with good drug-likeness and pharmacokinetic behavior

Synthesis, crystal structures and biological activities of halogeno-(O-alkylphenylcarbamothioate)bis(triarylphosphine)copper(I) complexes

International audienceThe aim of this work was to synthesize and characterize a new series of copper(I) complexes with thiocarbamate ligands and to evaluate their biological activity. Treatment of CuX salts (X = Cl, Br, I) with O-alkyl N-phenylcarbamothioates in the presence of two equivalents of PAr3 (Ar = Ph, p-C6H4OMe) affords a series of mononuclear thione complexes [(Ar3P)2Cu{ROC(=S)N(H)Ph}X)] C1-C10. According to X-ray diffraction analyses, all complexes adopt a distorted tetrahedral geometry and feature intramolecular N-H···Hal bonding, giving rise to six-membered cycles. Like in the case of the literature-known chloro-compounds C1 and C2 (d(N-H···Cl) ∼ 2.29 Å), the bromo-derivatives exhibit C3-C6 strong N-H···Hal distances varying from 2.48 to 2.63 Å. This intramolecular bonding, which is weaker for the iodo complexes C7-C10 (∼ 2.75 Å), has also been studied by Hirshfeld surface analysis of C1, C3, C4 and C6. The crystal structure of two 1D-polymeric intermediates occurring during the synthesis of C7 and C9, namely [{Cu(μ2-I)2Cu}(μ2-L)2]n CP1 and CP2, has also been elucidated. The complexes display weak luminescence in solution centered on the triarylphosphine ligands. In contrast, in the solid state a high-energy band around 350-450 nm centered on the thioamidate and triarylphosphine ligands is observed, along with a second low energy band typical for MLCT/XLCT states around 450-550 nm. The screening of the biological activity of these complexes reveals the absence of any significant antibacterial capacity. However, the presence of an antioxidant activity with a maximum activity for complexes C3 and C4 has been evidenced using the colorimetric DDPH method. This has been probed in vivo on Wistar rats for the preservation of hepatocytes integrity after liver hypothermic conservation (4°C) for 24 hours in Krebs solution with normal cellular state by addition of [(Ph3P)2Cu{EtOC(=S)N(H)Ph}I] C8

A highly virulent variant of HIV-1 circulating in the Netherlands

We discovered a highly virulent variant of subtype-B HIV-1 in the Netherlands. One hundred nine individuals with this variant had a 0.54 to 0.74 log10 increase (i.e., a ~3.5-fold to 5.5-fold increase) in viral load compared with, and exhibited CD4 cell decline twice as fast as, 6604 individuals with other subtype-B strains. Without treatment, advanced HIV-CD4 cell counts below 350 cells per cubic millimeter, with long-term clinical consequences-is expected to be reached, on average, 9 months after diagnosis for individuals in their thirties with this variant. Age, sex, suspected mode of transmission, and place of birth for the aforementioned 109 individuals were typical for HIV-positive people in the Netherlands, which suggests that the increased virulence is attributable to the viral strain. Genetic sequence analysis suggests that this variant arose in the 1990s from de novo mutation, not recombination, with increased transmissibility and an unfamiliar molecular mechanism of virulence