Programmed DNA damage as a new tool to regulate gene activation

Tese de mestrado em Biologia Molecular e Genética, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, em 2018Sendo considerada a unidade básica da vida, a célula constitui o nível mais baixo de organização a que o organismo pode ser reduzido mantendo as características da vida. Os organismos multicelulares, tal como os conhecemos, são constituídos por diferentes tipos de células que comunicam entre si de forma a assegurar o normal funcionamento dos mesmos. Esta extensa e complexa rede de conexões, quando devidamente regulada, garante a manutenção da homeostasia necessária para a sobrevivência dos organismos. Toda esta organização funcional é ditada pela informação que se encontra codificada na longa molécula de 2 metros que se encontra confinada ao núcleo da célula eucariótica, o DNA. No entanto, para que a célula tenha acesso a essa informação, várias maquinarias moleculares trabalham em conjunto no sentido de copiar e traduzir a informação presente na molécula de DNA para uma “linguagem” percetível à célula. Este processo é definido de expressão génica. A expressão génica é um processo complexo e altamente regulado que define a identidade das diferentes células e tecidos que constituem o organismo. Sendo constituída por uma sequência ordenada de eventos, a expressão génica consiste, maioritariamente, em duas etapas principais: a transcrição, onde a informação codificada na molécula de DNA é transferida para a molécula de RNA, ou mais especificamente para o RNA mensageiro no caso de genes que codificam proteínas; e a tradução, etapa na qual a informação presente no RNA mensageiro é traduzida para uma sequência de aminoácidos dando origem às proteínas. Para o início da transcrição diversas proteínas regulatórias, nomeadamente fatores de transcrição, têm de ser sequencialmente recrutadas, juntamente com a RNA polimerase (do tipo II, no caso da transcrição de genes codificadores de proteínas), para o promotor do gene alvo. O recrutamento destes componentes, que está dependente da existência de sequências de reconhecimento específicas presentes na região promotora do gene, permite a formação de um complexo de pré-iniciação funcional, sendo este essencial para o início da transcrição. No entanto, alguns constrangimentos estruturais podem impedir a formação do referido complexo. Como referido anteriormente, o DNA é uma molécula bastante longa que, nas células eucarióticas, se encontra empacotada dentro de um pequeno compartimento, o núcleo. De forma a acomodar-se dentro deste, evitando a formação de nós ou emaranhados, várias proteínas, designadas de histonas, interagem com a molécula de DNA, compactando-a sob a forma de cromatina. Dependendo dos diferentes graus de compactação que pode assumir, a cromatina é um importante fator de regulação de vários processos biológicos que requerem acesso ao DNA, tais como a replicação, a reparação do DNA e a transcrição. Por exemplo, durante a transcrição, o reconhecimento, por parte dos fatores de transcrição, das suas sequências específicas de ligação presentes no DNA pode ser impedido pela estrutura compacta da cromatina. Sendo assim, e de forma a facilitar a acessibilidade de diversos fatores ao DNA, as células desenvolveram algumas estratégias que permitem a remodelação da estrutura da cromatina, nomeadamente através de modificações pós-traducionais de histonas e da atividade de complexos remodeladores de cromatina. Desta forma, o controlo da estrutura dinâmica da cromatina permite a montagem do complexo de pré-iniciação que, na ausência de outras adversidades, leva à transcrição produtiva do gene alvo. Como é possível perceber, a expressão génica é um processo vital à vida, sendo que qualquer perturbação à coordenada cascata de eventos que a constituem pode resultar em consequências devastadoras. Danos no DNA são um dos fatores responsáveis pela alteração da expressão dos genes afetados. Durante o seu período de vida, o genoma de uma célula é sujeito a vários tipos de dano. Na realidade, acredita-se que, por dia, uma célula sofra milhares de lesões que desafiam a integridade do genoma, sendo que a capacidade da mesma em detetar e reparar o dano formado no DNA torna-se crucial para a manutenção das suas funções normais e para a supressão de eventos mutagénicos que podem originar cancro. Diversos fatores endógenos e exógenos originam vários tipos de danos no DNA, o que, consequentemente, levou as células a desenvolveram diversos mecanismos de reparação especializados para lidar com esses tipos distintos de danos no DNA. O processo de reparação do DNA envolve um amplo conjunto de eventos integrados nos quais diversas proteínas, denominadas proteínas reparadoras, sentem, sinalizam e reparam o dano no sentido de proteger a célula e, consequentemente, o organismo de qualquer ameaça que pode advir. Danos no DNA podem interferir de diversas maneiras com a transcrição génica. Enquanto que, danos localizados nas cadeias transcritas dos genes que estão a ser expressos podem resultar na obstrução da elongação da RNA polimerase, danos localizados nas regiões promotoras podem alterar e/ou impedir o recrutamento de diversos fatores de transcrição. No seu conjunto, todas estas alterações resultam na inibição da transcrição, sendo esta um dos impactos mais frequentemente associado à interação entre danos no DNA e transcrição. No entanto, esta visão de que a indução de danos no DNA apenas resulta em consequências negativas para a transcrição tem sido contrariada nos últimos anos. Evidências crescentes têm reportado que a indução fisiológica de quebras na molécula de DNA pode resultar na ativação da transcrição de vários genes. Na verdade, vários autores demonstraram que a indução dos programas transcricionais de genes dependentes de estímulos envolve a formação de danos no DNA, nomeadamente quebras da dupla cadeia de DNA (um dos danos mais letais para a células), sendo estes aparentemente necessários para a eficiente ativação transcricional desses genes. Os mecanismos através dos quais a introdução de uma quebra na molécula de DNA medeia a ativação da transcrição ainda não são completamente conhecidos; no entanto, algumas evidências revelam que essa mesma ativação possa resultar da resolução de restrições topológicas que impeçam a RNA polimerase de iniciar o processo de elongação ou então, da remodelação da estrutura da cromatina que se verifica após o dano, e durante a consequente reparação, e que consequentemente pode criar um ambiente permissivo para a transcrição. Tendo em conta a emergente interação que se verifica ente danos no DNA e transcrição, o presente projeto tem como objetivo investigar se a introdução programada de uma quebra na cadeia dupla de DNA no promotor de um gene regula a sua ativação. Para isso, foram selecionados três genes diferentes, sendo estes o CDKN2A, GSTP1 e o RASSF1. Os genes CDKN2A e GSTP1 são genes supressores de tumor que se encontram epigeneticamente silenciados, através da hiper-metilação do seu promotor, no cancro colorretal e no carcinoma hepatocelular, respetivamente, enquanto que o gene RASSF1, mais precisamente a sua isoforma C, considerada um oncogene, encontra-se expresso no carcinoma hepatocelular. Para o estudo do impacto da introdução de uma quebra no DNA na transcrição dos genes selecionados, linhas celulares do cancro colorretal e do carcinoma hepatocelular, HCT116 e HepG2, respetivamente, foram infetadas com lentivírus portadores do sistema CRISPR/Cas9, com RNAs guias que têm como alvo a região promotora de cada gene. Os resultados obtidos demonstraram que a introdução de uma quebra no promotor dos genes supressores de tumor, nomeadamente no promotor da isoforma do gene CDKN2A, p14ARF, e no promotor do gene GSTP1, leva à reativação da sua transcrição, o que é consistente com o papel positivo dos danos no DNA na transcrição, como foi reportado em diversos estudos. Por outro lado, danos no DNA na região promotora da isoforma C do gene RASSF1 resulta numa evidente diminuição da sua transcrição. Resultados semelhantes foram previamente reportados em um estudo recente realizado no nosso laboratório. Em conjunto, estes resultados demonstram que a indução de uma quebra no promotor de um gene ativamente transcrito ou de um gene silenciado apresenta consequências distintas no processo de transcrição. De facto, os dados revelam que o impacto do dano no DNA na transcrição depende do status transcricional da região alvo. O entendimento da organização estrutural da cromatina associada à região promotora, antes e depois do dano, bem como dos componentes moleculares envolvidos na resposta ao dano poderá ajudar a clarificar a razão desta variabilidade.Multicellular organisms are composed of different tissues and cells that interact with each other in a coordinated and synchronized way in order to maintain homeostasis. The identities of the different cells and consequently of the tissues that comprise them are determined by the tightly temporal and spatial control of the transcriptional programs that enable accurate gene expression. In fact, the proportion of genes expressed at a given time defines cell fate and function. Gene transcription in eukaryotes is a complex and layered process accomplished by the interaction of regulatory factors with specific sequences present in the control regions of genes. The coordinated cascade of events involved in this process can be affected, at least transiently, by DNA damage. For instance, transcription repression has been recognized as a major outcome of DNA damage. Nonetheless, this view has been challenged over the last years by studies suggesting that DNA damage can promote gene expression activation. Several studies reported that activation of stimulus-dependent gene expression involves the formation of DNA damage, which in turn seems to be sufficient for transcription initiation. In this project, we aim to investigate whether the programmed introduction of a DNA double strand break (DSB) in the promoter of a gene regulates its activation. For that, we selected three different genes, namely CDKN2A, GSTP1 and RASSF1. CDKN2A and GSTP1 are tumour suppressor genes epigenetically silenced by promoter hypermethylation in colorectal cancer and hepatocellular carcinoma, respectively. RASSF1, namely its oncogenic isoform C, is expressed in hepatocellular carcinoma. The induction of a locus-specific DSB was accomplished by using the CRISPR/Cas9 system with guide RNAs directed to the promoter region of the genes. The results demonstrated that the introduction of a DSB in the promoter of the tumour suppressor genes, namely in CDKN2A and in GSTP1 leads to transcription activation. On the other hand, the induction of a DSB in the C isoform promoter region of the RASSF1 gene results in a clear decrease in its transcription. Altogether, these results demonstrate that a DSB in the promoter of an actively transcribed gene or of a silenced gene displays different outcomes. These data reveal that the impact of DNA damage in transcription depends on the transcriptional status of the target region

Quando ver é tão penoso como sentir: Diferenças na percepção e nas estratégias de coping de testemunhas e vítimas de bullying no local de trabalho

Com este trabalho propomo-nos estudar as diferenças de percepção entre vítimas e testemunhas de bullying no local de trabalho, que estratégias de Coping adoptam em consequência da forma como observam e encaram o perpetuar deste fenómeno no tempo, porque motivos o consentem e que justificações encontram para a sua prática, considerando o contexto cénico e a influência social que os seus superiores, pares, familiares e amigos exercem. Pretendemos, também, analisar as alterações sentidas na forma de encarar o trabalho e a aprendizagem que realizaram em função deste processo. Para a recolha de dados deste estudo utilizámos a metodologia qualitativa recorremos à análise de narrativas e recolhemos 10 entrevistas, cujos resultados foram interpretados segundo a metodologia dos estudos estruturais de Labov (1972). As estratégias de coping utilizadas pelas vítimas oscilaram entre a passividade, enfrentamento do perpetrador, tentativa de compreensão da situação e abandono da organização. As estratégias de coping utilizadas pelas testemunhas, foram o apoio moral e ostracização da vítima e incentivo do perpetrador. A vítima pouco ou nada pode fazer para resolver favoravelmente o Bullying. Independentemente dos mecanismos de Coping que adoptar, os resultados serão predominantemente negativos. As testemunhas sentem stress e insatisfação no trabalho, com repercussões na sua auto-estima, sistema nervoso e saúde em geral. O desejo de abandonar a organização para não se tornarem a próxima vítima, a frustração e revolta silenciosa por nada poderem fazer para ajudar as vítimas foram sentimentos narrados.In this thesis we intend to study the differences of perception between victims and witnesses of workplace bullying, the coping strategies adopted by them, evaluating how they experience and deal with this phenomenon on a continual basis. In addition, we propose to study why they consent it and which reasons they found for justifying it’s existence, taking into consideration the specifics of working environment and the social influence of senior management, colleagues, family and friends. Furthermore, we intend to analyse the changes felt in the way of facing the job and what they learned with this bullying process. Study data was generated using a qualitative methodology, together with a narrative analysis. A total of 10 interviews with individuals were done, the results of which were interpreted using Labov’s methodology of structural studies (1972). Victims’ coping strategies varied between being passive, confronting the bully, or trying to understand ‘why’ and leaving the organization. The coping strategies used by the witnesses were ranged from moral support to total ostracising of the victim and to even encouraging the bully. The victim often can do nothing to resolve the situation regardless of which “Coping Strategy” they adopted and thus the outcome was invariably negative. Witnesses feel stress and dissatisfaction often with repercussions for their own self esteem and well being. Feelings of anger, frustration and the desire to avoid “becoming the next victim” or “they could do nothing to help” were often expressed by witnesses who also chose to leave the organisation

Materialidade em auditoria e as expectativas dos utentes das demonstrações financeiras

Mestrado em Contabilidade, Fiscalidade e Finanças EmpresariaisO presente estudo, pretende analisar se o julgamento do conceito de materialidade entre os auditores e os utilizadores das demonstrações financeiras é similar e, se as características destes dois grupos influenciam o seu julgamento. Baseado em dados obtidos através de um inquérito junto dos auditores e analistas de crédito, os resultados do nosso estudo sugerem que o nível médio da materialidade indicada pelos analistas de crédito é claramente superior ao manifestado pelos ROC's. Esta situação tem reflexos na auditoria porque quanto menor for a materialidade mais prova terá que o auditor recolher para suportar a sua opinião. Consequentemente ao ser mais minucioso, o auditor consegue reforçar a sua imagem de agente de credibilização da informação financeira e mitigar alguns problemas de agência. No entanto é de realçar que os auditores das Big 4 definiram a materialidade a níveis bastante inferiores aos das restantes SROC's. No que concerne à dimensão qualitativa da materialidade, existe uma discordância entre os dois grupos sobre a relevância de uma distorção que causaria uma redução nos resultados futuros. Constatando-se que foram os auditores a demonstrarem uma menor sensibilidade, o que reflecte uma menor preocupação para factos que afectam a rendibilidade do negócio. De acordo com as normas de auditoria, ISA 315, essas situações devem ser objecto de conhecimento na fase de planeamento de auditoria. Este resultado, pode levar ao surgimento de algumas dúvidas sobre se o relatório do auditor de facto vai ao encontro de todas as necessidades e interesses dos seus utilizadores. Por último, os resultados obtidos evidenciam, salvo raras excepções, que não existe uma relação de dependência entre a consideração da materialidade de determinada distorção e as características dos inquiridos, como a idade, sexo e experiência profissional.This study aims to analyze whether the judgment of the concept of materiality between auditors and users of financial statements is similar and, if the characteristics of these two groups influence the judgment. Based on data obtained from a survey, our study suggests that the average level of materiality indicated by Portuguese credit analysts is clearly higher than expressed by the Portuguese auditors. This situation has an impact on the audit because with lower materiality, more evidence the auditor will need to gather to support his/her opinion. Therefore being more thorough, the auditor can enhance its image as an agent of credibility of financial reporting and mitigate some agency problems. Additionally, the materiality as defined by the Big 4 is much lower compared to other audit firms. Regarding the qualitative aspects of materiality, there is a disagreement between the two groups about the relevance of a misstatement that would cause a reduction in future earnings. Auditors showed a lower sensitivity. In accordance with ISA 315 such situations must be knowledge in the planning stage of audit. This result may create some doubt about whether the auditor's report meets all the needs and interests of its users. Finally, the results show, with few exceptions, there is no dependency relationship between the consideration of the materiality of a particular misstatement and the characteristics of respondents, such as age, gender and work experience

Family history of hypertension: Impact on blood pressure, anthropometric measurements and physical activity level in schoolchildren

Background: A family history of arterial hypertension (AH), combined with environmental risk factors, is directly related to the development of AH. Objective: To evaluate the frequency of AH, anthropometric indicators and level of physical activity and their association with a family history (FH) of AH in school children. Methods: Cross-sectional study with 118 students, aged between 11 and 17 years, of both sexes. Waist circumference (WC), weight, height, level of physical activity and FH of HA were collected. Body mass index z score (BMI-z) and waist-to-height ratio (WHtR) were calculated. Binary logistic regression model was used to verify the chance risk, with significance p <0.05. Results: Of the 118 parents who answered the questionnaire, 34.7% had a positive FH of AH. Girls with a positive FH had higher means of WC (p= 0,004), BMI (p=0,020), and systolic blood pressure (SBP) (p=0,006) than boys, and a higher risk of being overweight (OR=4,48; 95%CI:1,55–12,94), and having elevated WHtR (OR=5.98; 95%CI:1.66–21.47) and SBP (OR=3,07; 95%CI:1,03–9,13) than girls without a FH, but they practice more vigorours moderate physical activity (MVPA) (p=0,039). On the other hand, no differences in these parameters were observed between boys with and without a FM of AH. Conclusions: Overweight and a FH of hypertension were associated with an increased risk for AH in girls. This was not observed among boys, perhaps due to more active lifestyle.FCT -Fundação para a Ciência e a Tecnologia(UIDB/00317/2020

Comparação do perfil de estilo de vida e a prática de atividade física entre meninas e meninos

The aim of this study was to compare lifestyle profile and physical activity between girls and boys. A total of 336 students 11 to 17 years old participated in the study (51.5% female). Height, body mass, sexual maturation and z-score body mass index (BMI-z) were assessed. The level of physical activity (PA) was determined through the International Physical Activity Questionnaire (IPAQ). Lifestyle was assessed using the Individual Lifestyle Profile questionnaire (PEVI), computing the total scores from five components and considering the following cutoff points: >30 points = favorable PEVI; and ≤30 points = unfavorable PEVI. Results showed 35.1% of the students were considered overweight, 74.78% did not comply with the recommendations for physical activity and 31.5% presented unfa-vorable PEVI. There was a difference between boys and girls in moderate to vigorous physical activity (MVPA) (p = 0.048). Boys presented better lifestyle (p = 0.06) and had, on average, more light PA (p < 0.01), moderate PA (p < 0.01), vigorous PA (p < 0.01) and MVPA (p < 0.01) than girls. Girls with favorable PEVI had higher average levels of light PA than those with unfavorable PEVI (p < 0.001). It was concluded that boys are more active during the week when compared to girls. However, they also present fewer concerns with preventive behaviors and relationships. Light PA was higher in girls with a favorable lifestyle profile.O objetivo deste estudo foi comparar o perfil de estilo de vida e a prática de atividade física entre meninas e meninos. Participaram do estudo 336 escolares, de 11 a 17 anos de de idade (51,5% sexo feminino). Foram avaliados a estatura, massa corporal, maturação sexual e índice de massa corporal escore z (IMC-z). O nível de atividade física (AF) foi analisado pelo International Physical Activity Questionnaire (IPAQ). O estilo de vida foi avaliado por meio do questionário Perfil do Estilo de Vida Individual (PEVI), analisando o total de escores dos cinco componentes, considerando-se como pontos de corte: >30 pontos = PEVI favorável e ≤30 pontos = PEVI desfavorável. Observou-se que 35,1% dos escolares foram considerados acima do peso, 74,78% não cumprem as recomendações de atividade física e 31,5% apresentaram PEVI desfavorável. Exis tiu diferença entre meninos e meninas para a prática de atividade física moderada e vigorosa (AFMV) (p = 0,048). Os meninos apresentaram melhor estilo de vida (p = 0,06) e praticam em média mais AF leve (p < 0,01), AF moderada (p < 0,01), AF vigorosa (p < 0,01) e AFMV (p < 0,01) do que meninas. Enquanto as meninas com PEVI favorável praticam em média mais AF leve do que aquelas com PEVI desfavorável (p < 0,001). Concluiu-se que meninos praticam mais AF na semana em relação às meninas, entretanto possuem menor preocupação com comportamentos preventivos e relacionamentos. A prática de AF leve foi maior em meninas com perfil de estilo de vida favorável.Portuguese national funds through the FCT (Foundation for Science and Technology) within the framework of the CIEC (Research Center for Child Studies of the University of Minho) project under the reference UIDB/00317/202

Aspectos clínicos e diagnósticos da microsporidiose intestinal em pacientes com infecção pelo HIV e diarréia crônica, no Rio de Janeiro, Brasil

The objectives of this study were to determine both the prevalence of microsporidial intestinal infection and the clinical outcome of the disease in a cohort of 40 HIV-infected patients presenting with chronic diarrhea in Rio de Janeiro, Brazil. Each patient, after clinical evaluation, had stools and intestinal fragments examined for viral, bacterial and parasitic pathogens. Microsporidia were found in 11 patients (27.5%) either in stools or in duodenal or ileal biopsies. Microsporidial spores were found more frequently in stools than in biopsy fragments. Samples examined using transmission electron microscopy (n=3) or polymerase chain reaction (n=6) confirmed Enterocytozoon bieneusi as the causative agent. Microsporidia were the only potential enteric pathogens found in 5 of the 11 patients. Other pathogens were also detected in the intestinal tract of 21 patients, but diarrhea remained unexplained in 8. We concluded that microsporidial infection is frequently found in HIV infected persons in Rio de Janeiro, and it seems to be a marker of advanced stage of AIDS.Os objetivos deste estudo foram determinar a prevalência e o prognóstico clínico da infecção por microsporídios em uma coorte de 40 pacientes com infecção pelo HIV e diarréia crônica na cidade do Rio de Janeiro, Brasil. Cada paciente teve suas fezes e fragmentos de intestino examinados para a pesquisa de CMV, bactérias e parasitos. A prevalência de microsporidiose foi de 27,5% (n=11). Esporos de microsporídios foram encontrados com maior frequência no exame direto das fezes do que em biópsias de intestino delgado. A microscopia eletrônica de transmissão e a reação de polimerase em cadeia (PCR) identificaram Enterocytozoon bieneusi, respectivamente, em 3 e 6 amostras examinadas, confirmando a espécie como único agente causal. Nenhum outro microrganismo patogênico, além dos microsporídios, foi detectada em 5 dos pacientes com diarréia. Outros parasitos foram encontrados no trato digestivo de 21 pacientes, enquanto que em 8 a etiologia da diarréia não foi definida. Concluímos que a infecção por microsporídios pode ser freqüentemente encontrada em indivíduos infectados pelo HIV no Rio de Janeiro

Yield of aromatics from naphthenics upon catalytic cracking

Cis- e trans decalina foram submetidas à reação com catalisadores de craqueamento, para estudar a formação de aromáticos numa fração particular de produtos líquidos do processo de craqueamento catalítico fluido (FCC). Um reator batelada em leito fluidizado, CREC, foi usado a 673 e 723 K com tempos de contato entre 3 e 15 s. Cis-decalina foi muito mais reativa. Apesar de diferenças induzidas e medidas na acessibilidade dos catalisadores, seus perfis de atividade foram similares, sugerindo que restrições difusionais não prevalecem. Os produtos foram hidrocarbonetos C1-C12, enquanto o coque foi muito baixo. Reações de isomerização, craqueamento, transferência de hidrogênio, abertura/contração de anel e alquilação ocorreram, e produtos das várias reações foram observados em tempos de reação muito baixos. Naftênicos bicíclicos C10 e aromáticos alquil-substituídos C7-C11 ou nafteno-aromáticos foram os produtos mais importantes. Um mecanismo de reação com três rotas iniciais (isomerização, abertura de anel e reações de transferência de hidrogênio) foi proposto. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: Cis- and trans-decalin were reacted over cracking catalysts to study the formation of aromatics in a particular fraction of the liquid products obtained in the fluid catalytic cracking process (FCC). A batch, fluidized bed CREC riser simulator reactor was used at 673 and 723 K and contact times varied from 3 to 15 s. Cis-decalin was much more reactive. Despite differences induced and measured in their accessibility indices, the catalysts led to similar activity profiles, suggesting that diffusion restrictions do not prevail. Products were C1-C12 hydrocarbons while coke was very low. Isomerization, cracking, hydrogen transfer, ring opening, ring contraction and alkylation reactions occurred and products from the various reactions were observed at very short reaction times. Bicyclic C10 naphthenics and alkyl-substituted C7-C11 aromatics or naphtheno-aromatics were the most important products. A reaction mechanism with three initial routes (isomerization, ring opening and direct hydrogen transfer reactions) was proposed

Infective endocarditis in adult patients with congenital heart disease

Background: Congenital Heart Disease (CHD) predisposes to Infective Endocarditis (IE), but data about characterization and prognosis of IE in CHD patients is scarce. Methods: The ESC-EORP-EURO-ENDO study is a prospective international study in IE patients (n = 3111). In this pre-specified analysis, adult CHD patients (n = 365, 11.7%) are described and compared with patients without CHD (n = 2746) in terms of baseline characteristics and mortality. Results: CHD patients (73% men, age 44.8 ± 16.6 years) were younger and had fewer comorbidities. Of the CHD patients, 14% had a dental procedure before hospitalization versus 7% in non-CHD patients (p < 0.001) and more often had positive blood cultures for Streptococcus viridans (16.4% vs 8.8%, p < 0.001). As in non-CHD patients, IE most often affected the left-sided valves. For CHD patients, in-hospital mortality was 9.0% vs 18.1% in non-CHD patients (p < 0.001), and also, during the entire follow-up of 700 days, survival was more favorable (log-rank p < 0.0001), even after adjustment for age, gender and major comorbidities (Hazard Ratio (HR) 0.68; 95%CI 0.50–0.92). Within the CHD population, multivariable Cox regression revealed the following effects (HR and [95% CI]) on mortality: fistula (HR 6.97 [3.36–14.47]), cerebral embolus (HR 4.64 [2.08–10.35]), renal insufficiency (HR 3.44 [1.48–8.02]), Staphylococcus aureus as causative agent (HR 2.06 [1.11–3.81]) and failure to undertake surgery when indicated (HR 5.93 [3.15–11.18]). Conclusions: CHD patients with IE have a better outcome in terms of all-cause mortality. The observed high incidence of dental procedures prior to IE warrants further studies about the current use, need and efficacy of antibiotic prophylaxis in CHD patients

Combined evaluation of sexually transmitted infections in HIV-infected pregnant women and infant HIV transmission

Background Sexually transmitted infections (STIs) including Chlamydia trachomatis (CT), Neisseria gonorrhoeae (NG), Treponema pallidum (TP), and cytomegalovirus (CMV) may lead to adverse pregnancy and infant outcomes. The role of combined maternal STIs in HIV mother-to-child transmission (MTCT) was evaluated in mother-infant pairs from NICHD HPTN 040. Methodology Urine samples from HIV-infected pregnant women during labor were tested by polymerase chain reaction (PCR) for CT, NG, and CMV. Infant HIV infection was determined by serial HIV DNA PCR testing. Maternal syphilis was tested by VDRL and confirmatory treponemal antibodies. Results A total of 899 mother-infant pairs were evaluated. Over 30% had at least one of the following infections (TP, CT, NG, and/or CMV) detected at the time of delivery. High rates of TP (8.7%), CT (17.8%), NG (4%), and CMV (6.3%) were observed. HIV MTCT was 9.1% (n = 82 infants). HIV MTCT was 12.5%, 10.3%, 11.1%, and 26.3% among infants born to women with CT, TP, NG or CMV respectively. Forty-two percent of HIV-infected infants were born to women with at least one of these 4 infections. Women with these infections were nearly twice as likely to have an HIV-infected infant (aOR 1.9, 95% CI 1.1-3.0), particularly those with 2 STIs (aOR 3.4, 95% CI 1.5-7.7). Individually, maternal CMV (aOR 4.4 1.5-13.0) and infant congenital CMV (OR 4.1, 95% CI 2.2-7.8) but not other STIs (TP, CT, or NG) were associated with an increased risk of HIV MTCT. Conclusion HIV-infected pregnant women identified during labor are at high risk for STIs. Co-infection with STIs including CMV nearly doubles HIV MTCT risk. CMV infection appears to confer the largest risk of HIV MTCT.NICHD (NICHD)(Brazilian AIDS Prevention Trials International Network), NIAID/ NIHNational Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID)Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health and Human Development (NICHD)National Institute of Mental Health (NIMH)Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. (BIPI)GlaxoSmithKline, on behalf of ViiV HealthcareCepheid for the testing of CTNG in a prior HPTNUCLA Children's Discovery and Innovation Institute (CDI) through the Harry Winston Fellowship AwardUCLA AIDS InstituteUCLA Center for AIDS Research (CFAR) NIH/ NIAIDUCLA Pediatric AIDS Coalition, and WestatNIH/NICHDDavid Geffen UCLA Sch Med, Los Angeles, CA 90095 USAWestat Corp, Rockville, MD USAFundacao Oswaldo Cruz FIOCRUZ, Rio De Janeiro, RJ, BrazilUS Dept State, Off Global AIDS Coordinator, Washington, DC 20520 USAElizabeth Glaser Pediat AIDS Fdn, Washington, DC USAHosp Geral Nova Iguacu, Nova Iguacu, RJ, BrazilHosp Fed Servidores Estado, Rio De Janeiro, RJ, BrazilUniv Witwatersrand, SAMRC & Perinatal HIV Res Unit, Johannesburg, South AfricaStellenbosch Univ, Tygerberg Hosp, Cape Town, South AfricaHosp Conceicao, Porto Alegre, RS, BrazilHosp Femina, Porto Alegre, RS, BrazilIrmandade Santa Casa Misericordia Porto Alegre, Porto Alegre, RS, BrazilUniv Fed Minas Gerais, Belo Horizonte, MG, BrazilUniv Sao Paulo, Ribeirao Preto Med Sch, Sao Paulo, BrazilFdn Maternal & Infant Hlth FUNDASAMIN, Buenos Aires, DF, ArgentinaUniv Fed Sao Paulo, Escola Paulista Med, Sao Paulo, SP, BrazilEunice Kennedy Shriver Natl Inst Child Hlth & Hum, NIH, Bethesda, MD USAUCLA, Fielding Sch Publ Hlth, Los Angeles, CA USAUCSD Sch Med, La Jolla, CA USAUC Davis Sch Med, Davis, CA USABoston Univ, Sch Med, Boston, MA 02118 USAUniv Fed Sao Paulo, Escola Paulista Med, Sao Paulo, SP, BrazilNICHD (NICHD): HHSN267200800001C, N01-HD-8-0001Brazilian AIDS Prevention Trials International Network: NIAID/ NIH [U01 AI047986National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID): U01 AI068632, UM1AI068632, UM1AI068616, UM1AI106716NIMH: AI068632NG in a prior HPTN :040UCLA Center for AIDS Research (CFAR) NIH/ NIAID: AI02869, AI28697NIH/NICHD: HHSN275201300003CWeb of Scienc