Determination of the Plasma Protein Binding of New Psychoactive Substances

1 Summary Introduction Only free drugs can cause pharmacological effects and can be metabolized and excreted but the binding to plasma proteins is usually only studied for therapeutic drugs. However, for prediction of drug-drug interaction or estimation of metabolic stability this parameter is of importance. Thus, this study aims to develop an easy and quick procedure to determine the plasma protein binding of drugs of abuse, particularly of new psychoactive substances. Methods The degree of plasma protein binding was determined using ultrafiltration and liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) analysis of the unbound fraction. Millipore Centrifree two-chambered devices with a semipermeable membrane were used for ultrafiltration. An Agilent MSD was used for MS analysis after separation by reversed phase LC. Sample preparation after centrifugation consisted of dilution and protein precipitation using acetonitrile. Codeine was added as an internal standard for all analytes. Chromatographic separation was achieved using a gradient elution of ammonium formate buffer and acetonitrile. Determination of PPB was then carried out by analysis of at least six replicates at analyte concentration of 5 μM prior and after ultrafiltration. Linear calibration curves using concentration levels from 1-5 μM were prepared in plasma and ultrafiltrate and processed as described above. Results Plasma protein binding has successfully been determined for 15 NPS representing four different classes (synthetic cathinones, synthetic cannabinoids, research chemicals and herbal drugs). Values reached from 67% for benzedrone to >99% for WIN 55,212-2. Due to the importance of the free and bound ratio of drugs in human blood, this method can serve as a fast and reliable technique for determination of their plasma protein binding in forensic and clinical toxicology.2 Zusammenfassung Einleitung: Nur der ungebundene Anteil eines Stoffes ist pharmakologisch wirksam und kann im Körper metabolisiert und ausgeschieden werden. In der Literatur existieren grundsätzlich vorwiegend Daten über die Plasmaproteinbindung für Arzneistoffe. Dabei ist die Plasmaproteinbindung gerade zur Beurteilung der metabolischen Stabilität eines Stoffes und dessen Wechselwirkungen mit anderen Substanzen essentiell. Die vorliegende Arbeit dient folglich der Entwicklung eines einfachen und schnellen Verfahrens zur Bestimmung der Plasmaproteinbindung von Missbrauchsdrogen, insbesondere von neuen psychoaktiven Substanzen. Methodik: Das Ausmaß an Plasmaproteinbindung wurde mithilfe von Ultrafiltration und Flüssig-Chromatographie mit Massenspektrometrie-Kopplung der ungebundenen Fraktion ermittelt. Alle Experimente wurden unter Verwendung von Millipore Centrifree zwei-Kammer-Ultrafiltrationseinheiten mit semipermeabler Membran und einem Agilent MSD zur massenspektrometrischen Analyse nach erfolgter Stofftrennung durch Umkehrphasen-Flüssig-Chromatographie durchgeführt. Nach Zentrifugation erfolgte die Probenaufbereitung durch Proteinfällung mit Azetonitril. Als interner Standard für alle Analyten wurde Codein benutzt. Die chromatographische Auftrennung wurde durch Gradientenelution mit Ammoniumformatpuffer und Azetonitril erreicht. Die Bestimmung der Plasmaproteinbindung gelang durch Analyse von sechs gleichen Proben vor und nach Ultrafiltration mit einer Ausgangskonzentration jedes Analyten von 5 μM. Lineare Kalibrationsgeraden im Konzentrationsbereich von 1-5 μM wurden in Humanplasma und Ultrafiltrat erstellt. Das weitere Vorgehen war wie oben beschrieben. Ergebnisse: Die Plasmaproteinbindung wurde erfolgreich für 15 neue psychoaktive Substanzen aus vier verschiedenen Drogenklassen ermittelt. Vertreten sind synthetische Cathinone, synthetische Cannabinoide, Research Chemicals und Herbal Drugs. Die ermittelten Werte erstrecken sich von 67% für Benzedrone bis >99% für WIN 55,212-2. Aufgrund der klinischen Relevanz des Plasmaprotein- bindungsverhaltens von Missbrauchsbrogen, kann die vorliegende Arbeit für diesen Zweck als einfach realisierbares und sicheres Verfahren in der forensischen und klinischen Toxikologie dienen

Análise da facticidade da norma constitucional brasileira contemporânea à luz da teoria de Jürgen Habermas: comparação do conceito com exemplos constitucionais contemporâneos

Este texto tem por finalidade a tentativa de transpor a teoria desenvolvida por Jürgen Habermas à realidade fática da Constituição Federal Brasileira de 1988. A investigação circunda a validade e facticidade das normas constitucionais em relação ao povo Brasileiro; bem como observar se há crises, hoje, à luz dos exemplos que serão analisados, na relação da norma constitucional com o que ela pretendeu e pretende abarcar com suas disposições. Outro ponto a ser analisado é a estrutura do Poder Constituinte Reformador, e como que esse mecanismo de alteração das estruturas constitucionais pode demonstrar ou não um enfraquecimento do intuito original que o constituinte em 1988 queria assegurar com as diversas garantias constitucionais adicionadas ao corpo normativo. Em primeiro momento serão propostos alguns conceitos de soberania e legitimidade – a partir do conceito clássico dos pensadores iluministas, e Hannah Arendt – e a própria teoria de Jürgen Habermas que demonstra a facticidade e validade do Direito e Democracia. Em momento posterior, serão analisados históricos constitucionais brasileiros e essa relação do conceito de Habermas, bem como por fim, exemplos contemporâneos da dinâmica dessa relação entre norma constitucional e representação (validade e facticidade), e os mecanismos do Poder Reformador Constituinte para alterar o corpo constitucional. A metodologia de pesquisa adotada foi a dogmática e instrumental e se relaciona com a transposição de teorias para análise de casos – a partir do acervo bibliográfico relatado, bem como dos casos encontrados e eleitos para aqui ter espaço

Characterization of a ballistic supermirror neutron guide

We describe the beam characteristics of the first ballistic supermirror neutron guide H113 that feeds the neutron user facility for particle physics PF1B of the Institute Laue-Langevin, Grenoble (ILL). At present, the neutron capture flux density of H113 at its 20x6cm2 exit window is 1.35x10^10/cm^2/s, and will soon be raised to above 2x10^10/cm^2/s. Beam divergence is no larger than beam divergence from a conventional Ni coated guide. A model is developed that permits rapid calculation of beam profiles and absolute event rates from such a beam. We propose a procedure that permits inter-comparability of the main features of beams emitted from ballistic or conventional neutron guides.Comment: 15 pages, 11 figures, to be submitted to Nuclear Instruments and Methods

Organisationsformen schulischen Lernens im Sonderpädagogischen Schwerpunkt emotionale und soziale Entwicklung im Landkreis Leipzig (L-Of-esE)

Ziel des Projekts war die Entwicklung eines Konzepts schulischen Lernens von Schüler:innen mit dem sonderpädagogischen Schwerpunkt Emotionale und soziale Entwicklung für die spezifischen Anforderungen des Landkreises Leipzig. Es wurde gemeinsam mit den handelnden Fachkräften ein Konzept entwickelt, das die Anforderungen des Schulnetzplans erfüllt und den Bedürfnissen der einzelnen Akteur:innen gerecht wird

SPHERES, J\"ulich's High-Flux Neutron Backscattering Spectrometer at FRM II

SPHERES (SPectrometer with High Energy RESolution) is a third-generation neutron backscattering spectrometer, located at the 20 MW German neutron source FRM II and operated by the Juelich Centre for Neutron Science. It offers an energy resolution (fwhm) better than 0.65 micro-eV, a dynamic range of +-31 micro-eV, and a signal-to-noise ratio of up to 1750:1.Comment: 12 pages, 7 figures, 2 tables. Supplemental material consists of 3 pages, 2 figures, 2 table