Фосфолипаза А2 яда гадюковых. Биохимические мишени для действия белка в кровяном русле человека. Часть 1 (обзор литературы)

Snake venoms have been fervently studied for decades for two reasons: 1) high death rate due to snake bites; 2) numerous components of snake venoms prove useful in medicine and treatment of diverse pathologies. Snake venom phospholipases A2 are among the most aggressive toxic proteins often playing the main role in immobilization and killing of snakebite victims. These enzymes catalyze the hydrolysis of glycerophospholipids to produce lysoglycerophospholipids and free fatty acids. But the diversity of phospholipase A2 effects is not limited to their catalytic action. In this review (Part 1), we describe the features of the structure and properties of Viperidae snake venom phospholipase A2 .Неослабевающий в течение десятилетий интерес научного сообщества к змеиным ядам обусловлен двумя причинами. Во-первых, от укусов змей ежегодно умирает большое количество людей. Во-вторых, многочисленные компоненты змеиных ядов находят все бóльшее применение в медицине и терапии целого ряда заболеваний. Фосфолипазы A2 змеиных ядов являются одними из наиболее агрессивных токсических белков, часто играя основную роль в иммобилизации и умерщвлении жертвы змеиного укуса. Эти ферменты катализируют реакцию гидролиза глицерофосфолипидов до жирных кислот и лизоглицерофосфолипидов. Однако разнообразие эффектов фосфолипаз не ограничивается только каталитическим действием. В обзоре (часть 1) рассмотрены особенности строения и свойства фосфолипаз яда змей семейства гадюковых

Экспериментальное обоснование применения дексмедетомидина для медикаментозного сопровождения фотодинамической терапии

The influence of anesthetics, namelydexmeditomidine (Dexdor®, «Orion PharmaLtd.») and propofol (Propofol®, «Fresenius Kabi Ltd.»), on a photoinduced lysis of human red blood cells was under study in conditions close to the physiological ones (pH 7,4, 37 oC) using radachlorin (Radachlorin® «Radapharma Ltd.») as a photosensitizer. The «red» diode served as a source of light (658 nm). After irradiation (1.15 J/sm2.s) the process of haemolysis was monitored by a photometry, and a value T50 was measured, that is a period of time from the irradiation ending to the 50 % lysis of red blood cells in an incubation mixture. Dexmeditomidine in all concentrations tested, including the therapeutic range, failed to influence the T50 value. Propofol in the therapeutic range of its concentrations caused significant but doseindependent increase of T50 that is an evidence of the preparation antioxidant action. The absence of the dexmeditomidine «interference» into the mechanism of a photo dynamic effect can be considered as an advantage of thisanesthetic properly for the medical support of a photodynamic therapy.Исследование влияния анестетиков дексмедетомидина (Dexdor ®, ООО «ОРИОН ФАРМА») и пропофола (Propofol®, FRESENIUS KABI Ltd.) на фотоиндуцированный лизис эритроцитов человека проводили в условиях, при ближенных к физиологическим (pH=7,4, 37 oC) с применением радахлорина (ООО «РАДАФАРМА») в качестве фотосенсибилизатора. Источником света служил красный светодиод (658 нм). После облучения (1,15 Дж/см2.с) с помощью фотометрии регистрировали процесс гемолиза и определяли величину Т50, т. е. время от завершения облучения до лизиса 50 % эритроцитов инкубационной смеси. Дексмедетомидин во всех исследованных концентрация, включающих терапевтический диапазон, не оказывал влияния на Т50. Пропофол в терапевтических концентрациях вызывал достоверное, но не зависимое от дозы препарата увеличение Т50, что является свидетельством его антиоксидантного действия. Отсутствие «вмешательства» дексмедетомидина в механизм фотодинамического эффекта можно считать преимуществом этого анестетика именно для медикаментозного сопровождения фотодинамической терапии

ЗНАЧЕНИЕ РЕГИСТРАЦИИ ВЫЦВЕТАНИЯ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРА ДЛЯ ОЦЕНКИ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТОВ НА ФОТОИНДУЦИРОВАННЫЙ ГЕМОЛИЗ

The influence of three pharmaceutical preparations on photo-induced lysis (irradiation with light-emitting diode of 653 nm) of human erythrocytes in the presence of photosensitizer radachlorin and also on the quantum yield of radachlorin photobleaching was studied. Both processes are mediated by singlet oxygen generation and therefore can become a target for antioxidant or prooxidant regulation. The pyridine preparation mexidol (action principle – 3-hydroxy-6-methyl-2-ethylpyridine succinate) in concentration of 152 µM used as an antioxidant and a membrane protector and aminazine (action principle – chlorpromazine) in concentration of 70 µM many times accelerated manyfold the photo-induced hemolysis. However only mexidol increased the quantum yield of radachlorin photobleaching in many times. The obtained data showed the direct prooxidant action of mexidol, but not aminazine that accelerated a photo-induced hemolysis due to other mechanism. A pyridine preparation nicotinic acid tested in equimolar to mexidol concentration, failed to influence both the velocity of the photo-induced hemolysis and the quantum yield of radachlorin photobleaching. Our study shows the possible use of a photobleaching tests for detection of the direct prooxidant action.Исследовано влияние трех лекарственных препаратов на фотоиндуцированный лизис (облучение светодиодом 653 нм) взвеси эритроцитов человека в присутствии фотосенсибилизатора радахлорин, а также на квантовый выход фотовыцветания радахлорина. Оба процесса опосредованы генерацией активных форм кислорода, поэтому могут быть объектами регуляции антиоксидантами и прооксидантами. Используемый в качестве антиоксиданта и мембранопротектора пиридиновый препарат мексидол (действующее начало – 3-окси-6-метил-2-этилпиридина сукцинат) в концентрации 152 мкМ и аминазин (действующее начало – хлорпромазин) в концентрации 70 мкМ многократно ускоряли фотоиндуцированный гемолиз. При этом только мексидол в несколько раз увеличивал квантовый выход выцветания радахлорина. Полученные данные свидетельствуют о прямом прооксидантном действии мексидола, но не аминазина, который ускорял фотоиндуцированный гемолиз иным механизмом. Пиридиновый препарат никотиновая кислота, испытанный в эквимолярной мексидолу концентрации не оказывал влияния ни на скорость фотоиндуцированного гемолиза, ни на квантовый выход выцветания радахлорина. Проведенное исследование демонстрирует возможность использования регистрации фотовыцветания фотосенсибилизатора для выявления прооксидантов прямого действия

THE IMPORTANCE OF A PHOTOSENSITIZER BLEACHING REGISTRATION FOR THE EVALUATION OF MECHANISM OF PREPARATION ACTION ON THE PHOTO-INDUCED HEMOLYSIS

The influence of three pharmaceutical preparations on photo-induced lysis (irradiation with light-emitting diode of 653 nm) of human erythrocytes in the presence of photosensitizer radachlorin and also on the quantum yield of radachlorin photobleaching was studied. Both processes are mediated by singlet oxygen generation and therefore can become a target for antioxidant or prooxidant regulation. The pyridine preparation mexidol (action principle – 3-hydroxy-6-methyl-2-ethylpyridine succinate) in concentration of 152 µM used as an antioxidant and a membrane protector and aminazine (action principle – chlorpromazine) in concentration of 70 µM many times accelerated manyfold the photo-induced hemolysis. However only mexidol increased the quantum yield of radachlorin photobleaching in many times. The obtained data showed the direct prooxidant action of mexidol, but not aminazine that accelerated a photo-induced hemolysis due to other mechanism. A pyridine preparation nicotinic acid tested in equimolar to mexidol concentration, failed to influence both the velocity of the photo-induced hemolysis and the quantum yield of radachlorin photobleaching. Our study shows the possible use of a photobleaching tests for detection of the direct prooxidant action