CRIOPRESERVAÇÃO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS CANINOS COM GLICEROL E ETILENOGLICOL

Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito dos crioprotetores glicerol e etilenoglicol em duas concentrações (1,5 M e 3,0 M) sobre a viabilidade de folículos pré-antrais caninos após exposição e criopreservação. Ovários (n=8) de cadelas, sem raça definida, foram submetidos ao processo de isolamento mecânico simples para resgate dos folículos pré-antrais. Em seguida, amostras do pool folicular foram destinadas a avaliação da viabilidade, após o teste de toxicidade com exposição de 20 minutos ao glicerol e etilenoglicol e após congelação/descongelação, utilizando o corante fluorescente iodeto de propídeo. No teste de toxicidade, apenas o grupo que utilizou etilenoglicol a 1,5 M (51,5%) não apresentou redução significativa da viabilidade folicular em relação ao controle (63,2%). Após os procedimentos de criopreservação, a viabilidade foi consideravelmente menor em todos os grupos, sendo 12% para glicerol (1,5 M), 15,5% para etilenoglicol (1,5 M), 14% para glicerol (3,0 M) e 28% para etilenoglicol (3,0 M). Ressaltando-se a necessidade de aperfeiçoamento das técnicas de criopreservação de folículos pré-antrais caninos, conclui-se que o etilenoglicol demonstrou os melhores resultados após o período de exposição e procedimentos de criopreservação/descongelação

EFEITO DO INTERVALO DE SECÇÃO SOBRE O ISOLAMENTO MECÂNICO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS DE CADELAS

O propósito deste estudo foi avaliar a quantidade e a viabilidade de folículos pré-antrais isolados mecanicamente de ovários de cadelas em dois intervalos de secção diferentes. Ovários de fêmeas caninas (n=10) foram seccionados com o aparelho tissue chopper em intervalos de 250 e 500 µm. Para quantificação folicular utilizou-se o microscópio invertido e para análise de viabilidade e qualidade, optou-se pelo microscópio invertido com fluorescência, associando os corantes fluorescentes Hoechst e iodeto de propídeo ao pool de folículos isolados. O número de folículos isolados nas espessuras testadas não diferiu estatisticamente, sendo 25200 para o intervalo de 250 µm e 11000 para o intervalo de 500 µm (P=0,08). A viabilidade e a qualidade medidas pela integridade da membrana basal, e presença de células da granulosa apresentaram melhores resultados junto aos folículos isolados na espessura de 500 µm, concluindo que este intervalo preserva melhor os folículos pré antrais isolados

Morfogênese do testículo de embriões e fetos de vacas da raça nelore (Bos taurus indicus)

The aim of this study was to accompany the process of testicular development from the non-differentiable phase to its complete formation. Embryos and fetuses of Nelore breed cows (Bos Taurus indicus) were obtained in slaughterhouses near the Uberlandia city, Minas Gerais. The gonads and the embryos were fixed in Bouin's fixative and afterwards processed for conventional optical microscopy. The gonadal was observed firstly in a 1.0 cm long embryo. In 2.5 cm long embryos the presence of the albuginea allows the sex identification. The mean thickness of the albuginea ranged from 29.08 to 558.45 mm. Gradually increase of vascularization of the albuginea and parenchyma is observed. The mediastinum is located centrally. There was a decrease in the space occupied by the testicular cords, from 63.71 to 41.99% of the total testes volume. Its diameter ranged from 31.68 to 48.80 mm. The diameter of germinal cells (and their nuclei) was from 12.27 (6.65) to 16.95 914.21) mm. The quantity of germinal cells by cross section of cord decreased from a maximum of 2.80 to 0.76. The total number of germinal cells was from 16 at the beginning of colonization of the gonad to 18.32 x 10(6) at the end of the study. The number of Sertoli's cells by cross section of cord ranged from 10.00 to 16.25. The results obtained show that the origin and formation of testes in embryos and fetuses from Nelore breed cows (Bos taurus indicus) does occur in a very similar way to what is described for Bos taurus taurus.Este estudo teve como objetivo acompanhar o processo de desenvolvimento testicular desde a fase indiferenciada até sua completa formação. Embriões e fetos de vacas da raça nelore (Bos taurus indicus) foram obtidos em frigoríficos próximos à cidade de Uberlândia, Minas Gerais. As gônadas dos fetos e os embriões foram fixados em bouin e processados para microscópica óptica convencional. A gônada foi observada primeiramente em um embrião de 1,0 cm de comprimento. Em embriões com 2,5 cm a presença da albugínea permite a identificação do sexo. A espessura média da albugínea variou de 29,08 a 558,46 mm. Gradativamente, observou-se aumento da vascularização da albugínea e do parênquima. O mediastino encontrava-se localizado centralmente. Houve uma diminuição no espaço ocupado pelos cordões testiculares de 63,71 para 41,99% do volume total dos testículos. O seu diâmetro variou de 31,68 a 48,80 mm. O diâmetro das células germinativas (e dos seus núcleos) foi de 12,27(6,65) a 16,95 (14,21) mm, respectivamente. A quantidade de células germinativas por corte transversal de cordão diminuiu de um máximo de 2,80 para 0,76. O número total de células germinativas foi de 16 no princípio da colonização da gônada para 18,32 x 10(6) no final do estudo. O número de células de Sertoli por corte transversal de cordão variou de 10,00 a 16,25. Os resultados obtidos mostram que a origem e a formação dos testículos nos embriões e fetos de vacas da raça Nelore (Bos taurus indicus) ocorre de forma muito semelhante ao do que é descrito para Bos taurus taurus

LH surge in response to the treatment with GnRH analog or estradiol in ovariectomized buffaloes with or without progesterone pre-exposition

The aim of the present study was to evaluate the LH surge after EB (estradiol benzoate) or GnRH administration with or without P4 (progesterone) pre-exposure in ovariectomized (OVX) buffalo cows. Females were randomly assigned to receive an intravaginal P4 device (D0–D9). They were then given EB 24 h or GnRH 36 h post-P4 device removal (factorial 2×2, n=6 per group). Blood collection for LH measurement began 36 h after the P4 device removal and continued at 3 h intervals. The area under the LH curve (AUC; 30.2 ng2 and 13.41 ng2; P=0.007) and the area of the LH peak (AP; 19.0 ng2 and 8.9 ng2; P=0.009) were greater for EB than GnRH. We did not observe an effect of P4 pre-exposure on the AUC and AP. Furthermore, there was no interaction between P4 pre-exposure and EB or GnRH treatment on the AUC and AP. However, there was an interaction (P<0.01) between P4 pre-exposure and the type of inducer (EB or GnRH) to release a preovulatory-like LH surge at the beginning (BP), final (FP) and time (TP) of the LH peak. The P4 pre-exposure anticipated the BP (2.5 and 7.4 h), TP (6.0 and 12.0 h) and FP (11.5 and 17.1 h) when EB was used to induce a preovulatory-like LH surge (P<0.01). However, there was no effect of P4 pre-exposure on BP (0.4 and 0.4 h), TP (3.0 and 3.0 h) and FP (5.9 and 6.1 h) with GnRH treatment. There was also no effect of the pre-exposure to P4, type of inducer or interaction on the amplitude of the LH peak. We concluded that EB therefore led to greater LH release than GnRH, and pre-exposure to P4 before EB administration anticipated the preovulatory-like LH surge in buffalo cows.The authors are thankful to Agência Paulista de Tecnologias dos Agronegócios, Registro, SP, Brazil (APTA) for allowing the use of the animals and facilities, Ourofino Agronegócio (Cravinhos, SP, Brazil) for the products support and to Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico eTecnológico (CNPq) for providing the post-doc scholarship the first author