Development of polysaccharide-based carriers for pulmonary tuberculosis therapy

A tuberculose é uma doença infeciosa provocada pelo Mycobacterium tuberculosis. A transmissão da bactéria ocorre por via inalatória, após o que a mesma se aloja nos macrófagos existentes na região alveolar. A bactéria tem a capacidade de sobreviver e multiplicar-se mesmo depois de fagocitada pelos macrófagos alveolares, podendo ficar em estado latente por vários meses e até anos. Apesar de existir uma vacina contra a doença, a denominada BCG, de Bacillus Calmette-Guérin, esta não é totalmente eficaz e muitas pessoas desenvolvem a doença apesar de imunizadas. A tuberculose continua a ser a principal causa de morte evitável a nível mundial e está a reaparecer na Europa, estando muito associada aos casos de co-morbilidade com o vírus da imunodeficiência humana (VIH). Segundo a Organização Mundial de Saúde (OMS), a terapia da tuberculose é obrigatoriamente combinada, para potenciar a eficácia do tratamento. Neste contexto, a isoniazida (INH) e a rifabutina (RFB) são dois dos fármacos de primeira linha utilizados, a última usada particularmente nos casos em que o doente apresenta também infeção por VIH. Estas moléculas apresentam características diferentes, nomeadamente em termos de massa molecular e afinidade aquosa. A INH é uma molécula hidrofílica com 137 g/mol, enquanto a RFB tem 847 g/mol e é hidrofóbica, exigindo solventes orgânicos ou soluções ácidas para dissolver. Considerando a tuberculose pulmonar como a principal manifestação da doença, a administração direta de antibióticos ao pulmão e, particularmente, aos alvéolos, onde residem os macrófagos que atuam como hospedeiros da bactéria, compreende uma abordagem muito promissora, permitindo a entrega de fármacos no local primário da infeção. Esta estratégia implica o desenvolvimento de formulações para inalação, requerendo o uso de transportadores de fármacos que exibam propriedades aerodinâmicas adequadas para alcançar a região alveolar, onde residem os macrófagos que podem, assim, internalizar os fármacos. A literatura mostra que, para alcançar esta zona do pulmão, os transportadores devem ter um diâmetro aerodinâmico entre 1 e 5 μm. Na realidade, devido à geometria dos pulmões, as partículas a utilizar como transportadores precisam de ter um tamanho suficientemente pequeno para entrar nas vias aéreas inferiores, mas a sua massa deve ser suficiente para impedir que sejam exaladas juntamente com o ar expirado, o que justifica o intervalo de diâmetros referido anteriormente e a frequente utilização de micropartículas para inalação. A opção pela utilização de transportadores como veículos dos fármacos requer também que a matriz constituinte das partículas seja o mais inerte possível, não induzindo toxicidade ou reações de inflamação. Neste sentido, os materiais de origem natural e, particularmente, os polímeros como os polissacáridos, são reportados como tendo maior probabilidade de exibir biocompatibilidade e biodegradabilidade, duas características essenciais para uma aplicação na área da administração de fármacos. Considerando que o agente patogénico se aloja nos macrófagos alveolares, os fármacos devem alcançar este compartimento intracelular antes de ocorrer a sua libertação a partir do transportador inalado, o que ficará facilitado pela internalização dos próprios transportadores pelas células. Para melhorar este processo de internalização, alguns trabalhos reportam a funcionalização da superfície das partículas com ligandos que são reconhecidos pelos recetores dos macrófagos. Alguns polímeros naturais apresentam uma importante vantagem a esse respeito, sendo compostos por unidades estruturais que são reconhecidas diretamente por vários recetores dos macrófagos. O sulfato de condroitina (ChS) e a k-carragenina (CRG) são dois exemplos desses polímeros naturais. O primeiro é composto por unidades alternadas de N-acetilgalactosamina e ácido glucurónico, enquanto o último contém resíduos de galactose-4-sulfato e galactose anidra. Ambos estão reportados como sendo reconhecidos especificamente pelos macrófagos, bem como por proporcionarem a ativação destas células. Neste trabalho, foram produzidas micropartículas por um processo de atomização, as quais contêm os fármacos modelo (INH e RFB) de forma combinada, respeitando assim as indicações da Organização Mundial da Saúde. Os fármacos foram sempre associados às micropartículas numa razão de massa polímero/INH/RFB de 10/1/0.5. À formulação produzida com CRG, adicionou-se um outro polímero de matriz de forma a mitigar o potencial inflamatório que tem sido reportado para a CRG na literatura. As micropartículas foram, neste caso, preparadas com uma relação de massa de amido/CRG de 8/2. Esta formulação obteve um rendimento de produção de 70% e associou efetivamente 96% da INH e 74% da RFB. Ao analisar o diâmetro aerodinâmico foi verificado que este variou entre 3.3 μm e 3.9 μm e obteve-se uma percentagem de partículas finas de 32% - 38%. Estes valores seriam satisfatórios não fosse a deposição de aproximadamente 50% das partículas na zona correspondente à garganta. Por esse motivo, identificou-se a necessidade de aperfeiçoamento desta formulação para utilização futura. Por outro lado, para as micropartículas compostas por ChS como material de matriz, foram testados dois solventes (etanol e ácido clorídrico) para solubilização da RFB, avaliando-se qual dos dois conduz à obtenção de partículas com melhores características. Ambas as formulações evidenciaram micropartículas de forma esférica, com uma superfície tendencialmente mais rugosa após a associação dos fármacos. Os rendimentos de produção foram bastante satisfatórios, na ordem dos 80%, e os fármacos foram associados com eficácia de 95% para INH e 59-69% para RFB. Apesar de ambas as formulações apresentarem diâmetros aerodinâmicos semelhantes (3.8 – 4.0 μm), as micropartículas produzidas com etanol demonstraram melhores resultados, registando uma maior percentagem de partículas finas (43% contra 35% nas micropartículas preparadas com HCl), o que reflete melhor capacidade para alcançar a região respiratória e uma maior dose de fármaco contida na fração de partículas finas que alcançarão a zona alveolar. Acresce que esta formulação permitiu ainda maior controlo sobre a libertação dos fármacos associados, nomeadamente da RFB. Desta forma, a formulação de micropartículas em que o etanol foi utilizado como solvente, foi selecionada para prosseguir os ensaios de biocompatibilidade em células. Na formulação de micropartículas com matriz à base de amido/CRG não foi possível testar a utilização de etanol, uma vez que o protocolo de preparação implica o recurso a um banho de água quente durante o processo de atomização, o qual levaria à evaporação do solvente. Assim se justifica que essas micropartículas tenham sido produzidas unicamente com ácido clorídrico como co-solvente. A atividade inibitória dos fármacos modelo contra a M. bovis BCG foi mantida após o processo de microencapsulação por atomização em todas as formulações, independentemente dos materiais de matriz e dos solventes utilizados, o que indica a adequação do método de produção das micropartículas. Por forma a avaliar o perfil de citotoxicidade das micropartículas desenvolvidas, foram realizados ensaios em diferentes linhas celulares humanas, variando concentrações e tempos de exposição (até 24 h). As micropartículas foram testadas em células epiteliais alveolares (A549) e em macrófagos derivados de monócitos (dTHP-1), ambos de grande relevância no contexto da tuberculose pulmonar. Verificou-se que as micropartículas compostas por amido/CRG podem apresentar algumas limitações, com algum nível de toxicidade indesejável, ao contrário das micropartículas com matriz de ChS, que mantiveram os níveis de viabilidade celular acima de 70% em todas as condições testadas. Os macrófagos derivados de monócitos foram ainda utilizados para testar quer a capacidade das células para capturar as micropartículas, quer a capacidade das últimas para induzir a ativação dos macrófagos. O ensaio de captura macrofágica demonstrou que, em comparação, as micropartículas de ChS conseguem um maior nível de internalização para um tempo de exposição e uma dose semelhante. Por outro lado, a produção de interleucinas (TNF-α e IL-8) pelas células foi mais pronunciada após contacto com as micropartículas de amido/CRG, indicando uma maior apetência destas para ativar os macrófagos mesmo a concentrações mais baixas. Considerando os bons resultados obtidos com as micropartículas com matriz de ChS, a avaliação do seu perfil toxicológico foi aprofundada por meio da realização de um estudo multiparamétrico, o qual recorreu à utilização de macrófagos de ratinho (células J774A.1). O estudo envolveu a incubação das células com concentrações não tóxicas dos materiais, realizando-se posteriormente, por microscopia de fluorescência, uma análise de conteúdos específicos que indicam a resposta celular. Os parâmeros analisados foram a atividade mitocondrial, a área da célula, a área do núcleo, a permeabilidade da membrana, o conteúdo de fosfolípidos (fosfolipidose) e o conteúdo de lípidos neutros (esteatose). Após incubação com as micropartículas de ChS (produzidas com etanol), não foi verificada nenhuma alteração nos parâmetros estudados. Apenas para a RFB na forma livre se verificou uma alteração da quantidade de fosfolípidos existentes quando comparado com o controlo de células não expostas. Contudo, estas alterações apenas se verificaram em concentrações de fármaco muito mais elevadas do que as presentes nas micropartículas, pelo que se acredita que a níveis terapêuticos não ocorrerão as alterações verificadas, o que foi sugerido também quando se testaram as micropartículas com fármaco. Foi realizado também um estudo preliminar in vivo em ratinhos BALB/c, no qual os animais foram expostos a micropartículas sem fármaco. Devido ao facto dos materiais de matriz utilizados neste trabalho, o sulfato de condroitina e o amido/CRG, não terem utilização reportada para via inalatória, considerou-se relevante fazer uma análise preliminar da resposta dos animais ao contacto com os mesmos. Foram testadas as micropartículas quer de ChS, quer de amido/CRG, as quais foram administradas aos ratinhos por inalação, num total de dez aplicações num intervalo temporal de duas semanas. Após o sacrifício dos animais foi avaliado o índice tecidular de diferentes órgãos, nomeadamente fígado, pulmão e rim, e realizada a análise de esfregaços sanguíneos, de modo a verificar o tipo de leucócitos presentes. Não foram observadas alterações do índice tecidular de nenhum dos órgãos analisados, nem se registaram modificações das percentagens dos vários leucócitos constituintes do sangue, para nenhuma das formulações de micropartículas. Os níveis séricos de ALT, AST e LDH, marcadores de alterações tecidulares, também não demonstraram alterações significativas, o que indica a tolerância dos animais ao contacto com as micropartículas e os seus materiais constituintes. As formulações desenvolvidas ao longo deste trabalho demonstraram possuir características adequadas para a entrega de fármacos por via inalatória, com o propósito de alcançar a região alveolar e proporcionar um direcionamento para os macrófagos. No geral, a formulação com matriz de sulfato de condroitina (ChS/INH/RFB), produzida utilizando etanol como co-solvente, foi a que demonstrou melhores propriedades, sendo aquela identificada como tendo mais potencial.Tuberculosis remains a leading cause of death, with therapeutic failure being mainly due to non-compliance with prolonged treatments, often associated with severe side-effects. New therapeutic strategies are demanded and, considering that the lung is the primary site of infection, direct lung delivery of antibiotics is an interesting and, possibly, effective approach. Therapeutic success in this context depends on suitable carriers that reach the alveoli where Mycobacterium hosts (macrophages) reside, as well as on their ability to promote macrophage capture and intracellular accumulation of drugs. In this work, we propose inhalable polymeric microparticles produced by spray-drying and tailored to suitable aerodynamic properties to reach the alveoli. Macrophage targeting will be driven by microparticle composition based on chondroitin sulphate or k-carrageenan. Both are sulphated polymers composed by moieties preferentially recognised by macrophage surface receptors. The spray-dried microparticles successfully associated two first-line antitubercular drugs (isoniazid and rifabutin). Furthermore, starch/CRG and ChS microparticles presented satisfactory aerodynamic properties, compatible with deep lung deposition. In ChS microparticles, ethanol and HCl were tested as co-solvents to aid the solubilisation of RFB and microparticles produced with ethanol general revealed the best features, being selected for further assessment. ChS-based formulations evidenced absence of toxicity in alveolar epithelial cells and macrophages (human and mouse). Starch/CRG formulation exhibited some toxicity, especially in mouse macrophages. The latter further elicited stronger production of interleukins from human macrophages, compared with the mild response to ChS microparticles, which reflects the ability to activate macrophages. ChS microparticles also evidenced better ability to undergo macrophage uptake and were, thus, further evaluated in a high content analysis (HCA) assay evaluating the response of mouse macrophages to exposure (lipid accumulation, nuclei area, etc.). The results revealed no subtoxic effects after 48 h exposure. Free RFB demonstrated some phospholipid accumulation, which was overpassed upon microencapsulation. Considering the general trend of the results, good indications are given that encourage the continuation of the studies in order to establish the potential of these microparticles as inhalable carriers in tuberculosis treatment

Entanglement and non-ontology: how Putnam clarifies the Link between aesthetic and ethical value

In this article we consider Putnam's project of an "ethics without ontology," focusing on some of its crucial aspects, namely, the entanglement of fact and value and the idea of forming and "imaginatively identifying" with a "particular evaluative outlook." We use that approach to shed light on the issue of value objectivity. Putnam's "pragmatist enlightenment" suggests a way of abandoning the traditional project of grounding ethics and aesthetics on metaphysics, preserving the idea of realism and objectivity about values. Ethical and aesthetic discriminations may be contextually specific and depend on the responses and the socially embedded experience of observers, but they are brought about by certain features of reality, far more complex than a domain of "objects" that would "correspond" to values. With our eyes set on these aspects, we draw important lessons for the project of a joint approach to aesthetic and ethical value, taking seriously the pervading entanglement of both, as suggested by the way we are able to apply the so-called thick concepts. This provides us with the outline of a contextualist approach to aesthetics that draws on Putnam's project for ethics. We conclude by suggesting that a fruitful way of pursuing this connection could be found in co-opting resources from virtue ethics

Deciphering the interplay of molecular alterations underpinning renal cell carcinoma by label-free mass spectrometry and clinical proteomics: A systems medicine approach for precision diagnosis

Renal neoplasia is the 14th most common tumor type diagnosed worldwide. With a vast heterogeneity, renal neoplasia encompasses different subtypes. 90% of the neoplasms arise from the epithelial layer of the nephron and vary from benign renal masses (renal oncocytoma, RO) to more indolent or aggressive cancers (renal cell carcinomas, RCC). As RCC subtypes, clear cell (ccRCC) subtype is the most predominant subtype, followed by papillary (pRCC) and chromophobe (chRCC). Despite the different outcomes, some overlapped histological and morphological features difficult their differentiation and diagnosis. Therefore, new approaches for a clear and accurate diagnosis are still needed. To achieve this goal, renal tissue biopsies diagnosed with ccRCC (n = 7), pRCC (n = 5), chRCC (n = 5), RO (n = 5) and normal adjacent tissue (NAT, n= 5) were enrolled in this study. As a very resourceful tool for proteome analysis and biomarker discovery, mass spectrometry (MS)-based methods were used to interrogate the proteome of each tumor in order to undisclosed differences trough which to develop faster and accurate diagnostics. The results achieved with this doctoral thesis include i) the accomplishment of an effective ultrasonic workflow to recover the proteome of optimal cutting temperature (OCT)-embedded tissues, ii) a novel analytical approach based on MALDI-MS profiling to distinguish chRCC from RO, iii) a 109-protein panel to discriminate between chRCC and RO and NAT, iv) a top 24-protein panel to diagnose ccRCC, pRCC, chRCC and RO based on absolute concentration values, v) the translation and validation of three promising biomarkers by immunohistochemical analysis, and vi) an approach for phosphopeptide enrichment. This work brings new insights into the different mechanisms underlying formation of these tumors as well as it provides valuable information to improve clinical diagnosis by opening new avenues for immunohistochemistry and mass spectrometry-based approaches

Modulation of angiogenesis by fibroblasts in tissue regeneration

O trabalho descrito na tese foi realizado na Universidade do Porto. INEB-Instituto de Engenharia Biomédica, Universidade do Porto. Faculdade de Medicina. Departamento de Bioquímica, Johannes Gutenberg University. University Medical Center. REPAIR Lab-Institute of PathologyTese de doutoramento. Engenharia Biomédica. Universidade do Porto. Faculdade de Engenharia. 201

"Alguém dirá o que fazer" - (im)preparação face às ameaças costeiras

A resposta a emergências no quadro da estrutura de protecção civil pressupõe o progressivo envolvimento de meios, por patamares, desde o nível local ao nacional, passando pelo concelhio e distrital. O envolvimento de meios (e a assunção do comando) por parte de um nível territorial mais amplo deverá resultar, por sua vez, de pedido do nível territorial precedente, que considere esgotada a sua capacidade de resposta à situação. A resposta eficaz a calamidades, por parte de uma estrutura deste tipo, pressuporia entretanto o conhecimento, ao nível dos vários patamares, dos planos existentes e das formas de actuação previstas. No entanto, o caso de uma zona costeira próxima de Lisboa e significativamente vulnerável a inundações vindas do mar não corresponde, de todo, a tais requisitos. A um nível local, as autoridades costeiras e as instituições existentes pressupõem que existirá algum plano de emergência municipal para o caso de galgamentos graves ou tsunamis, mas não têm conhecimento dele, nem de qual se espera seja a sua actuação. Assumem apenas que, em caso de necessidade, lhes sejam dadas ordens claras e adequadas, e tenham capacidade para as porem em prática. A um nível distrital, o comando da protecção civil assume não ter conhecimento ou preparação para responder a ameaças vindas do mar, pressupondo também a existência de algum plano concelhio de emergência e evacuação, e que terá capacidade para fornecer os meios necessários, em caso de necessidade. A um nível nacional, a autoridade de protecção civil privilegia abordagens preventivas e proactivas, mas reconhece as limitações que enfrenta para, inclusivamente, fazer respeitar as suas recomendações de que não seja autorizada nova construção nas zonas costeiras de risco

Pescadores, conhecimento local e mudanças costeiras no litoral Português

As alterações climáticas são um dos maiores desafios que a sociedade enfrenta atualmente. As comunidades costeiras são particularmente vulneráveis, uma vez que estão crescentemente expostas aos riscos de erosão costeira e de subida do nível do mar. Os pescadores que vivem na e da costa têm uma visão privilegiada das mudanças costeiras e, em resultado da sua atividade, detêm um conhecimento que, apesar de não ser técnico, se baseia na experiência e é específico ao local. Em Portugal, este é um tema ainda pouco explorado e são raros os estudos das ciências sociais sobre as comunidades piscatórias. Este estudo pretende assim ser um contributo para uma temática que se encontra num estado ainda muito incipiente no nosso país. Para tal, analisamos os discursos de uma amostra de entrevistas em profundidade realizadas a pescadores de três zonas da costa portuguesa - Vagueira, Costa da Caparica e Quarteira. Os resultados revelam a existência de um conhecimento específico e profundo acerca da evolução da costa, das mudanças costeiras e das suas causas. Concluímos, através dos seus discursos, que os pescadores compreendem a complexidade das questões costeiras e a multiplicidade de fatores e usos que a influenciam. São também críticos em relação às opções técnicas que têm sido tomadas. Apesar de se verificarem algumas diferenças entre as três zonas de estudo na análise que os entrevistados fazem da eficácia das obras de proteção costeira, todos são capazes de propor medidas alternativas para mitigar o avanço o mar e a erosão costeira. Verifica-se ainda que este saber local não só não é incorporado nas soluções técnicas de gestão costeira, como os pescadores não são consultados aquando da tomada de decisões que os afetam diretamente. Tal poderá dever-se, por um lado, a uma desvalorização social da própria atividade pesqueira o que terá originado uma auto-avaliação negativa do valor social dos pescadores, refletindo-se numa incapacidade de reivindicação, só parcialmente ultrapassada quando estes são representados em associações ou sindicatos. Para além deste estatuto social inferior, parece haver também uma certa “incompatibilidade cultural” e de linguagem entre pescadores e especialistas, dificultando ainda mais o diálogo entre os dois e a incorporação do conhecimento local em decisões técnicas

Uma identidade valorizada ao encontro do que o subúrbio tem

A área de investigação da presente dissertação estende-se aos campos do branding e do design social. Tem como objetivo último a criação de uma imagem representativa da identidade suburbana de Massamá e Monte Abraão – concelho de Sintra, distrito de Lisboa – e, consequentemente, a sua utilização numa campanha de comunicação enquadrada pela Junta de Freguesia homónima. A dissertação e a respetiva componente propriamente projetual partem do seguinte problema: a União de Freguesias de Massamá e Monte Abraão ainda não encontrou uma forma reconhecível de expressar a sua identidade; apesar de nos depararmos com diferentes níveis de identificação; para muitos moradores e outra população que não a conhecem presencialmente, é um local sem uma imagem pública legível. Ao considerar determinadas cidades, vilas, aldeias ou até bairros, promovidos como dotados de carácter no âmbito de campanhas de comunicação, constata- -se que esses locais têm em comum o facto de possuírem, como ponto de partida, património histórico, monumental ou locais emblemáticos, bem como tradições culturais e gastronómicas vivas, enfim, todo um imaginário local com o qual a sua população se encontra familiarizada e é reconhecido sobretudo pelos visitantes. Massamá e Monte Abraão não dispõem destes elementos ou, ao nível humano, de massa crítica para valorizar socialmente o que tem, uma vez que o território sofreu um “boom” demográfico sobretudo a partir dos anos noventa, com a chegada de habitantes oriundos de todo o território nacional e também de outros países e continentes. Estes fatores deram origem a uma população tão diversificada quanto jovem, sem um corpo de referências comum que se considera, neste anteprojeto de branding, ser imperativo efetivar.É com vista a preencher esta lacuna ao nível da comunicação que surge a presente proposta de dissertação. Partindo de tudo o que a União de Freguesias não tem, o desafio será perceber aquilo que esta tem para oferecer e que a define: o que tem que a possa caracterizar, distinguir, dignificar e que permita criar novas memórias e desenvolver no imediato um imaginário coletivo, que enuncie fatores de valorização e identificação da comunidade. Considera-se que procurar e estimular quotidianamente tal legibilidade identitária é importante para a autoestima da população que ali vive, bem como para transmitir uma imagem positiva da freguesia fora do seu perímetro de cativações mais restrito. O trabalho resultou num projeto de imagem assente na cultura visual local e que se concluiu na construção de uma identidade visual e suas aplicações iniciais; o conjunto de soluções entrevistas foi finalmente aferido através de uma inquirição pública que traz consigo um potencial de autocrítica porventura capaz de alimentar futuros desenvolvimentos dos resultados praticamente obtidos (newsletter e protótipos de peças complementares)

Flowering of guadua trinii (Poaceae, Bambusoideae, Bambuseae)

Flowering in bamboo is an unusual event. Documenting flowering individuals or populations provides valuable information about bamboo life cycles. Guadua trinii is endemic to northeastern Argentina, southern Brazil, Paraguay and Uruguay. We here report theflowering of this species in native and cultivated stands in Argentina and confirm its flowering cycle to be of 30-33 years.Floração em bambu é um evento incomum. A documentação de indivíduos ou populações em florescimento fornece informações importantes sobre os ciclos de vida do bambu. Guadua trinii é endêmica do nordeste da Argentina, sul do Brasil, Paraguai e Uruguai. Aqui relatamos o florescimento dessa espécie em agregados nativos e cultivados na Argentina, além da confirmação de seu ciclo de floração por 30-33 anos.Fil: Guerreiro, Carolina Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Botánica Darwinion. Academia Nacional de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Botánica Darwinion; ArgentinaFil: Peichoto, Myriam Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Vega, Andrea Susana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Cátedra de Botánica General; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario; Argentin

Tornar a energia visível: aspectos sócio-psicológicos da utilização de smart meters em contexto doméstico

Este estudo tem como objectivo contribuir para a compreensão dos aspectos sóciopsicológicos que influenciam a utilização dos smart meters – novos contadores de electricidade considerados instrumentais para alcançar reduções substanciais no consumo energético e, assim, contribuir para mitigar os impactos das alterações climáticas, ajudando simultaneamente a reduzir a dependência dos combustíveis fósseis. Ao fornecerem ao consumidor feedback directo - informação detalhada e em tempo real sobre os consumos - os smart meters permitirão aos consumidores assumir um papel activo, monitorizando os seus gastos e alterando as suas rotinas de consumo. Contudo, até à data ainda se sabe muito pouco sobre a aceitação e utilização desta tecnologia. Para enquadrar esta problemática são utilizadas propostas da Teoria da Acção Reflectida, do Modelo da Aceitação da Tecnologia e outros factores sugeridos na literatura. Um primeiro estudo quantitativo, com uma amostra de 515 actuais utilizadores de smart meters em contexto doméstico, demonstrou que a norma subjectiva, a utilidade percebida, a percepção de risco e de justiça processual, bem como o tempo de utilização, determinam o comportamento de utilização destes smart meters. Num segundo estudo, de cariz qualitativo, a análise dos discursos de uma amostra de blogs sobre smart meters permitiu corroborar a importância de alguns destes aspectos e sugeriu ainda outros factores – percepção de injustiça distributiva, percepção de riscos de saúde e de perda de controlo, entre outros – que podem influenciar a utilização destes novos contadores. No final são discutidas as implicações destes resultados e algumas recomendações para o futuro.The purpose of this study is to contribute to a better understanding of the socio-psychological aspects that influence the use of smart meters - new electricity meters that are considered instrumental to achieve substantial reductions in energy consumption, and therefore, contribute to mitigate climate change impacts, while at the same time reduces dependency on fossil fuels. Because they provide direct feedback (real-time and detailed information about energy consumption) smart meters will allow individuals to play an active role, monitoring their energy spending and changing their consumption routines. However, to this date little is known about acceptance and use of this technology. The Theory of Reasoned Action, the Technology Acceptance Model and other factors suggested in the literature are used to frame these issues. First we conducted a quantitative study with a sample of 515 electricity consumers with a smart meter installed in their homes. The results showed that subjective norm, perceived utility, risk perception, procedural justice, as well as time of usage, determine smart meter usage behaviour. In a second qualitative study, the analysis of the discourses of a sample of blogs from current smart meter users confirmed some of the aspects found in the first study and suggested other factors – perceived distributive injustice, health risk perception and loss of control and privacy risk perception, among others – that can influence the use of these new meters and that should be taken into account in future studies. Finally we discuss the implications of these results and leve recommendations for the future

A experiência estética em contexto museal: para uma relação privilegiada entre escola e museu

O relatório está dividido em duas partes fundamentais. No primeiro capítulo será feita a descrição da prática de ensino supervisionada no ensino da filosofia no secundário, realizada na escola secundária de Miraflores, no ano letivo 2016/2017. A descrição apresentada será acompanhada de uma reflexão sobre a experiência de ensino, das práticas pedagógicas e metodologias e estratégias desenvolvidas ao longo do ano letivo. No segundo capítulo, com base numa atividade realizada com uma das turmas, irá aprofundar-se a importância da relação entre escola e museu no ensino da estética e da filosofia da arte.The report is divided in two main parts. The first part aims to describe a supervised teaching practice of philosophy at high school, carried out in Escola Secundária de Miraflores, in the 2016/2017 school year. This description will be accompanied by a reflection on the teaching experience, the methodological and educational practices, as well as on the strategies, that have been developed during this school year. In the second part, based on an activity carried out with one of the classes, it will be clarified the relevance of the relation between school and the museums for the teaching of both aesthetics and philosophy of art