Identification and real time PCR expression analysis of drought-related lipid metabolism genes in soybean

Tese de mestrado, Biologia Molecular e Genética, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2017Soybean (Glycine max) is among the most important food crops due to the high protein and lipid content of its seeds. Its importance in the world economy is not only related to its use as a food commodity but also due to its impact in the biodiesel industry. World agriculture face major constrains with the increase of global warming, being drought a major factor affecting productivity. Soybean is considerably sensitive to drought. Previous studies have shown that the lipid content and composition of plant leaves change in response to water deficit, as a result of variations in both biosynthetic and lipolytic enzymatic activities. These changes can be related to the induction of signaling pathways, leading to the activation of drought resistance mechanisms, but can also reflect structural changes at the membrane level. Several lipolytic enzymes are involved in such processes, including phospholipases A (PLA), which remove fatty acids from membrane lipids. Despite the importance of this group of enzymes in the mediation of stress responses, revealed namely by studies using Arabidopsis, little is known about their role in drought-induced remodeling of the lipid metabolism in soybean leaves. In the present study, a comprehensive analysis of the PLA superfamily in the soybean genome allowed the identification of 50 genes, belonging to the three major plant PLA families: patatin-like phospholipases (pPLA), DAD-like phospholipase A1 (PLA1) and low molecular weight secreted phospholipase A2 (sPLA2) as well as a phosphatidic acid-preferring PLA1 (PA-preferring PLA1). Although the number of soybean PLAs is considerably higher than the one present in Arabidopsis, comparative sequence analyses revealed a high conservation between orthologs from the two species, which may indicate conserved functions. The expression of a subset of PLA genes, selected according to publicly available transcriptomics data and predicted subcellular location, together with other key lipid metabolism genes, was investigated by qPCR, under three stages of water deficit. Lipid profiling data revealed that the typical reduction in the plastidial lipids content was accompanied by a transient increase in linolenic-acid enriched- phosphatidylcholine and neutral lipids, suggesting a channeling of plastidial fatty acids into triacylglycerol. The potential involvement of PLA isoforms in this process is discussed, taking into account their expression profiles under water deficit, together with literature data on the subcellular locations and substrate specificities of orthologous proteins. Since thylakoid membranes are affected by drought, some photosynthetic features were assessed, such as chlorophyll- content and fluorescence, through pulse amplitude modulation (PAM) and laser induced fluorescence (LIF) analyses. The results show variations in chlorophyll content as well as an adaptation of the photosynthetic apparatus to moderate drought, but reveal the negative impact of severe drought.A soja (Glycine max) é uma leguminosa amplamente consumida, cuja produção mundial compete com as dos cereais. O seu valor advém do facto de ser rica em macronutrientes, designadamente proteínas e lípidos. Os lípidos presentes apresentam importância acrescida a nível industrial, dado que por reação de transesterificação se obtêm ésteres metílicos de ácidos gordos, os constituintes do biodiesel. As Nações Unidas estimam um crescimento da desertificação em regiões áridas, semiáridas e sub-húmidas a uma taxa de 23 hectares por minuto. Deste modo, torna-se inviável a produção agrícola, com consequências negativas nos ecossistemas, no clima, no desenvolvimento económico dos países e no bem-estar populacional. A disponibilidade hídrica tem sido considerada o fator climático de maior efeito sobre a produtividade agrícola, afetando o cultivo da soja, espécie considerada sensível à seca. Estudos anteriores demonstraram que o conteúdo e composição lipídica das folhas são alterados em resposta ao stress hídrico. Estas alterações poderão estar relacionadas com a indução de vias de sinalização que ativam mecanismos de resistência, mas podem igualmente refletir danos membranares induzidos pelo stress. Enzimas lipolíticas, como as fosfolipases A (PLA), estão envolvidas na alteração dos lípidos de membrana. Apesar da importância destes enzimas nos mecanismos lipolíticos, o seu envolvimento na resistência ao stress hídrico ainda não está totalmente caracterizado. No presente trabalho, pretendeu-se caracterizar os mecanismos de resposta da soja ao stress hídrico e investigar o envolvimento das fosfolipases A neste processo. O ensaio experimental de stress hídrico consistiu na suspensão da rega de plantas em vaso, até um período máximo de 7 dias. Diferentes níveis de stress foram definidos: moderada, severa e extrema, tendo em conta o teor hídrico das folhas e do solo. Com o objetivo de estudar os efeitos do stress hídrico na composição de lípidos foliares, realizaram-se análises de cromatografia gasosa e de camada fina. Os resultados obtidos apontam para uma acentuada diminuição do teor dos galactolípidos, monogalactosildiacilglicerol e digalactosildiacilglicerol (MGDG e DGDG, respetivamente) e um aumento do conteúdo de lípidos neutros, onde se inclui o triacilglicerol (TAG). O ácido gordo mais abundante nas membranas das folhas de soja, o ácido linolénico (C18:3) apresenta uma diminuição no MGDG e no DGDG, ao contrário do que sucede nos lípidos neutros. Visto que as membranas dos cloroplastos são ricas em galactolípidos e se observaram alterações nestes sob condições de stress hídrico, procedeu-se ao estudo do comportamento do aparelho fotossintético. Para tal, analisou-se o conteúdo clorofilino, bem como a fluorescência da clorofila, recorrendo aos métodos de fluorometria de pulso de amplitude modulado (PAM) e de fluorescência induzida por laser (LIF). Os resultados apontam para um decréscimo do rácio clorofila a/b, previamente descrito como um indicador de stress. Os dados do PAM relativos ao rendimento máximo do fotossistema II não apresentam variação, no entanto, a eficiência fotossintética da captação da luz e a taxa de transporte eletrónico máximo decresceram com a seca, indicando que o fotossistema II é relativamente resistente, mas a cadeia de transporte eletrónico é sensível aos danos causados pelo stress. Confirmando esses dados, também se verificou que, no estado mais severo de seca, existiu uma maior absorção de energia aumentando o potencial redox negativo. Uma vez que o excesso de potencial redox negativo pode causar danos no fotossistema, esta energia terá de ser libertada. Os dados do LIF apontam para uma alteração no pico de fluorescência na região do vermelho-longínquo, com uma diminuição da fluorescência máxima. Estas alterações não se prendem com a diminuição do conteúdo de clorofila a, pois este não revela diferenças, no entanto podem estar relacionadas com características estruturais e óticas das folhas de soja, nomeadamente o coeficiente de absorção e a refletância que já foram previamente descritas, em soja, como sendo baixa e alta, respetivamente. Com o objetivo de melhor compreender as vias metabólicas associadas às alterações da composição lipídica previamente descritas procedeu-se a uma análise de expressão génica. Numa primeira abordagem caracterizou-se a superfamília das fosfolipases A (PLAs) de Glycine max cultivar Williams 82, cujo genoma se encontra sequenciado. A superfamília das PLA de soja é caracterizada por 50 genes que codificam 55 proteínas, distribuídos por 17 dos 20 cromossomas da planta. Esta superfamília, à semelhança de Arabidopsis thaliana e Oryza sativa, encontra-se subdividida em quatro famílias as PLA1, as com preferência para o ácido fosfatídico (PA-preferring PLA1), as PLA do tipo patatina (pPLA) e PLA2 secretadas (sPLA2). As PLA1 apresentam o domínio lípase 3 e as pPLA partilham o domínio patatina. Em ambas as famílias PLA1 e pPLA verifica-se uma divisão em 3 subgrupos, I, II e III, bem como a presença dos motivos conservados GxSxG (PLA1) e GTSTG (pPLA). A família das sPLA apresenta proteínas de menor peso molecular, exibindo o motivo conservado PA2c. Posteriormente, e de forma a comprovar a hipótese de que os ácidos gordos, com especial foco no C18:3, são libertados dos galactolípidos por ação das PLA plastidiais, sendo de seguida exportados para o citosol e incorporados no PC em condições de stress, foi avaliada a expressão de vários genes das PLAs. Visto que o PC é um intermediário na biossíntese de TAG, sendo o C18:3 incorporado neste lípido de reserva, num processo envolvendo uma PLA citosólica e/ou PDAT, foi também avaliada a expressão de 2 enzimas envolvidos na biossíntese do TAG, designadamente o Acil-CoA: Diacilglicerol Aciltransferase (DGAT) e o Fosfolípido: Diacilglicerol Aciltransferase (PDAT) que transferem um grupo acilo de modo a produzir Triacilglicerol (TAG); e uma dessaturase, a Omega-3 Dessaturase de ácidos gordos (FAD3), responsável pela conversão de C18:2 em C18:3. A análise de expressão da FAD3 foi realizada, pois o aumento de C18:3 no PC poder-se-ia dever à atividade deste enzima. Contudo, os resultados apontam para uma forte repressão do gene codificante para este enzima, em condições de seca, o que apoia a nossa hipótese a favor de uma acumulação transiente do C18:3 plastidial no PC, que é depois incorporado no TAG. Nas sementes, DGAT e PDAT estão envolvidos na biossíntese de TAG, pelo que se estudou se estes enzimas seriam ou não expressos nas folhas de soja. A análise de expressão do DGAT e do PDAT revelou que estes enzimas mantêm-se inalterado e reprimido, respetivamente, o que apoia o facto de poder haver um outro mecanismo, nas folhas, para a biossíntese de TAG, possivelmente envolvendo as PLA

Dependência química e trabalho: a Oficina da Vida da Universidade Federal de Uberlândia

Palavras-chave e resumo criados pelo pesquisador dos Projetos “(Per)cursos da graduação em História: entre a iniciação científica e a conclusão de curso.” (PROGRAD/DIREN/UFU 2017/2018) e “Entre a iniciação científica e a conclusão de curso: a produção monográfica dos Cursos de Graduação em História da UFU” (PIBIC EM CNPq/UFU 2017-2018).Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação)O objetivo geral desta monografia é estudar os principais aspectos do consumo de drogas na sociedade brasileira contemporânea e seus efeitos em uma situação social específica, o ambiente de trabalho da Universidade Federal de Uberlândia. Trata-se de estudar a dependência química entre sujeitos que se encontram em situações relativamente regulares de vida social, ou seja, mantêm vínculos formais de trabalho, convivem com a família, com colegas de trabalho, com amigos, ainda que experimentem, eventualmente, situações de desajustes sociais. Especificamente, a finalidade é compreender a clientela e a experiência histórica da Oficina da Vida, programa de recuperação de dependentes químicos da UFU no período de 1995 (ano de sua instalação) a 1999. Como é um estudo de história contemporânea cujo foco incide sobre a questão do consumo de drogas nas sociedades e culturas diversas e a mesma questão em situações e grupos específicos, adotou-se uma abordagem com dois procedimentos metodológicos básicos. Primeiro, as práticas dos dependentes químicos foram observadas no ambiente de trabalho, incluindo suas condutas perante as funções que lhes são atribuídas e suas condutas nas relações com os demais sujeitos inseridos neste espaço social. A seguir se considerou as condutas dos dependentes nas demais relações da vida social, incluindo as familiares, as relações de amizade e outras. As análises foram baseadas nos registros da história pessoal de vida dos dependentes e nos relatos dos profissionais da Oficina da Vida, que estão documentados nos arquivos do programa. De posse desse material, analisou-se, também, algumas representações que os próprios dependentes fazem de sua condição patológica e de sua inserção no mundo do trabalho e na vida social como um todo. O texto monográfico está dividido em três capítulos: o primeiro se refere ao consumo de drogas na História e nas culturas ao longo do tempo. O segundo destaca as drogas no mundo do trabalho. Por fim no terceiro capítulo discorre sobre a Oficina da Vida da Universidade Federal de Uberlândia

Análise biomecânica da artroplastia radiocarpal com implante não cimentado

A artoplastia do pulso ainda continua a ser uma alternativa secundária à artodese em casos avançados de artrite e outras patologias, muito pelas complicações que lhes estão associadas. Actualmente, esforços tem sido feitos para reduzir os problemas de estabilização e loosening. Neste trabalho o principal objectivo é analisar as diferenças nas estruturas ósseas da articulação radiocarpal, no estado intacto e implantado usando um implante não cimentado REMOTION. Numa primeira fase, foram analisadas a anatomia e biomecânica da articulação, tal como as patologias e tratamentos, para assim se compreender o funcionamento da articulação. Seguidamente, foram desenvolvidos modelos numéricos de elementos finitos representativos da articulação (mais concretamente o rádio) no estado intacto e implantado, de onde derivaram três modelos: intacto, implantado não osteointegrado - representativo da situação pós-operatória - e implantado osteointegrado, representativo da condição a longo termo, aos quais foram simulados três condições de carga e contacto. As condições de carga são representativas de três actividades fisiológicas do pulso: Neutra, Abdução e Adução, segundo um ângulo de 0º,15º e 45º, medidas segundo o eixo maior do rádio. Em cada um destes, foram avaliadas as deformações principais máximas e mínimas no osso cortical e esponjoso, as tensões de von Mises no implante e os micromovimentos na interface entre o implante e o osso. Simultaneamente foi efectuado um estudo experimental da articulação, em osso de material sintético, onde foram colocados extensómetros na superfície do cortéx do rádio, para avaliar as extensões no osso cortical, em três movimentos tipo da articulação. Posteriormente, os dados obtidos foram comparados entre o estado nativo e implantado, servindo também para validação e comparação nos modelos numéricos desenvolvidos. Os resultados mostram uma alteração do campo de deformação entre o estado intacto e implantado, evidenciando-se regiões onde o estado de deformação no modelo implantado aumenta significativamente comparado com o modelo intacto, potenciando o risco de falência por efeito de fadiga. No entanto, também revela regiões onde a deformação diminui significativamente comparado com o modelo intacto, podendo levar ao efeito de stress-shielding e a um risco acrescido para a reabsorção óssea.Wrist arthroplasty is still a secondary alternative to arthrodesis in advanced cases of arthritis and other pathologies, largely because of the complications associated with it. Currently, efforts are being made to reduce stabilization and loosening problems. In this work the main objective is to analyze the differences in the bony structures of the radiocarpal joint, in the intact and implanted state using a cementless REMOTION implant. In the first phase, the anatomy and biomechanics of the joint were analyzed, as well as the pathologies and treatments, in order to understand the functioning of the joint. Next, finite elements’ numerical models representative of the joint (more specifically the radius) in the intact and implanted state were developed, from which resulted three different models: intact, implanted not osseointegrated - representative of the postoperative situation - and osseointegrated, representative of the condition in the long term., in wich were simulated three different load and contact conditions. The loading conditions are representative of three physiological activities of the Wrist: Neutral, Abduction and Adduction, according to an angle of 0º, 15º and 45º, measured along the long axis of the radius. In each of these, were evaluated the maximum and minimum main strains in the cortical and cancellous bone, the von Mises stresses in the implant and the micromovements in the interface between the implant and the bone. Simultaneously, an experimental study of the joint was carried out, in bone made of synthetic material, where strain gauges were placed on the surface of the radial cortex, to assess the extensions in the cortical bone for the same three joint-type movements simulated in the numerial models. Subsequently, the obtained data were compared between the intact and implanted state, also serving for validation and comparison of the numerical models previously generated. The results show changes in the strain field between the intact and implanted state, showing regions where the strains in the implanted model significantly increases compared to the intact model, strengthening the risk of failure due to fatigue effect. On the other hand, it was visible regions where the strains were significantly decreased compared to the intact model, which can lead to the stress-shielding effect and an increased risk for bone resorption.Mestrado em Engenharia Mecânic

Influência da composição de substratos na imunomodulação por MSCs

Mestrado em Biomedicina MolecularMesenchymal stem cells (MSCs) are non-hematopoietic multipotent stem cells capable to self-renew and differentiate along different cell lineages. MSCs can be found in adult tissues and extra embryonic tissues like the umbilical cord matrix/Wharton’s Jelly (WJ). The latter constitute a good source of MSCs, being more naïve and having a higher proliferative potential than MSCs from adult tissues like the bone marrow, turning them more appealing for clinical use. It is clear that MSCs modulate both innate and adaptive immune responses and its immunodulatory effects are wide, extending to T cells and dendritic cells, being therapeutically useful for treatment of immune system disorders. Mechanotransduction is by definition the mechanism by which cells transform mechanical signals translating that information into biochemical and morphological changes. Here, we hypothesize that by culturing WJ-MSCs on distinct substrates with different stiffness and biochemical composition, may influence the immunomodulatory capacity of the cells. Here, we showed that WJ-MSCs cultured on distinct PDMS substrates presented different secretory profiles from cells cultured on regular tissue culture polystyrene plates (TCP), showing higher secretion of several cytokines analysed. Moreover, it was also shown that WJ-MSCs cultured on PDMS substrates seems to possess higher immunomodulatory capabilities and to differentially regulate the functional compartments of T cells when compared to MSCs maintained on TCP. Taken together, our results suggest that elements of mechanotransduction seem to be influencing the immunomodulatory ability of MSCs, as well as their secretory profile. Thus, future strategies will be further explored to better understand these observation and to envisage new in vitro culture conditions for MSCs aiming at distinct therapeutic approaches, namely for immune-mediated disorders.As células estaminais mesenquimais (MSCs) são células não-hematopoéticas, multipotentes, capazes de se auto-renovar e de diferenciar em diferentes tipos celulares. As MSCs estão presentes em tecidos mesenquimais e de tecidos extra embrionários, tais como a matriz do cordão umbilical/Wharton’s Jelly(WJ). Estes últimos constituem uma boa fonte de de MSCs, sendo estas mais naive e tendo um maior potencial de proliferação do que as MSCs obtidas de tecidos adultos, como a medula óssea, tornando as MSCs da matriz do cordão umbilical/Wharton’s Jelly sejam mais apelativas para uso clínico. As MSCs possuem a capacidade de modularem tanto o sistema imune inato como o adquirido e os seus efeitos são vastos, afectando todas as células do sistema imune. Esta capacidade é bastante vantajosa para o uso terapêutico destas células em doenças do sistema imunitário. A mecanotransducção é por definição o mecanismos pelo qual as células convertem estímulos mecânicos em uma resposta bioquímica e com mudanças na sua morfologia. Apartir destas observações colocámos a hipotese de que mantendo MSCs in vitro em diferentes substratos poderia influencia a sua capacidade imunomoduladora. Com este trabalho, demonstrámos que ao plaquear MSCs em diferentes substratos de PDMS, estas mostram uma tendência para secretar quantidades diferentes de vários factores soluveis analisados, relativamente a MSCs mantidas em cultura em plataformas convencionais (placas de cultura de células - TCP). Para além disto, foi também observado que MSCs plaqueadas em substratos de PDMS aparentavam possuir uma maior capacidade imunomoduladora quando comparadas com MSCs mantidas em condições convencionais. Em conjunto todos os resultados obtidos sugerem que elementos relacionados com a mecanotransdução parecem influenciar a capacidade imunomoduladora de MSCs e a sua secreção de factores solúveis. Deste modo, estudos futuros poderão elucidar os mecanismos responsáveis por estas observações, de modo a permitir que se possa constitutuir melhores estratégias de cultura de MSCs para futuro uso terapêutico dirigido a doenças do sistema imunitário

Abordagem clínica de intoxicações em canídeos por inseticidas anticolinesterásicos e utilização de testes imediatos (point of care)

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaPerante a suspeita de intoxicação aguda, a abordagem célere e sistemática ao doente, permite uma rápida prestação de cuidados específicos. A triagem, recolha da história clínica, avaliação e intervenção médica de urgência, o diagnóstico e a terapêutica são processos chave nessa abordagem. O diagnóstico, por norma, é suportado por um painel analítico inicial. O recurso a testes imediatos (“point of care”), permite avaliar não só a condição geral dos doentes em tempo real, mas também os efeitos que os xenobióticos possam ter a nível orgânico e que se traduzam, nomeadamente, em alterações do equilíbrio hidroeletrólitico e estado ácido base. O presente estudo pretendeu avaliar as alterações analíticas, detetadas através da ferramenta ePOC (“Enterprise Point of Care”), em animais suspeitos de intoxicação por inseticidas anticolinesterásicos e a sua eventual influência no diagnóstico e implementação da terapêutica. A amostra estudada consistiu em 14 canídeos, que na triagem médica apresentavam sintomas inespecíficos e outros compatíveis com intoxicação aguda por insecticidas anticolinesterásicos: tremores musculares (93%), hipersiália (64%), hipertermia (57%), cianose (50%), diarreia (57%) e vómito (36%). Foram colhidas amostras de sangue para a realização do teste ePOC e para ulterior análise toxicológica.Os resultados obtidos através do ePOC mostraram diminuição da pressão parcial de dióxido de carbono (pCO2) (64%), aumento da concentração de lactato (36%), aumento dos valores de hemoglobina e hematócrito (50%), hiperglicémia (36%) e aumento dos valores de creatinina (50%), não havendo, contudo, relação estatisticamente significativa entre as variáveis testadas e o diagnóstico toxicológico (p>0.05). Porém, em todos os animais considerados acidémicos houve detecção de compostos do grupo dos inseticidas anticolinesterásicos na análise toxicológica. O estudo clínico individualizado de cada caso permitiu verificar que, apesar da sintomatologia similar, os animais apresentavam distúrbios ácido-base diferentes, sendo por isso também necessária uma abordagem terapêutica diferenciada, fulcral especialmente em condições críticas. Estudos futuros, com uma amostra de maior dimensão e preferencialmente com exposição a diferentes xenobióticos, poderão permitir uma avaliação mais exata e abrangente da relação entre a etiologia das intoxicações e as alterações hidroeletrolíticas e de gases sanguíneas verificadas.ABSTRACT - Clinical Approach to Poisoning in Canidae by Anticholinesterase Insecticides and use of immediate tests (Point of Care) - Faced with a suspected acute intoxication, a prompt and systematic approach to the patient, allows a fast provision of specific care. The triage, history taking, assessment and emergency medical intervention, diagnosis and treatment are key processes in this approach. The diagnosis is usually supported by an initial analytic panel. The use of immediate testing ("point of care"), allows the evaluation, not only of the patient’s general condition in real time, but also the effects that xenobiotics may have at an organic level, which may result in electrolyte and acid base disorders. The presente study intended to evaluate the analytical changes detected by ePOC ("Enterprise Point of Care") in animals suspected of poisoning by anticholinesterase insecticides and their possible influence on the diagnostic and therapeutic implementation. The sample consisted of 14 canines, which had nonspecific symptoms and other compatible with acute poisoning by anticholinesterase insecticides: muscle tremors (93%), hypersialia (64%), fever (57%), cyanosis (50%), diarrhea (57%) and vomiting (36%). Blood samples were collect to perform ePOC testing and for further toxicological analysis. Analytical changes (ePOC) showed a decreased partial pressure of carbon dioxide (pCO2) (64%), an increased lactate concentration (36%), na increase in hemoglobin and hematocrit levels (50%), hyperglycemia (36%) and an increased serum creatinine values (50%), without, however, statistically significant relationship between the variables tested and toxicological diagnosis (p> 0.05). Nevertheless, in all animals considered acidemic, toxicological analysis showed the detection of anticholinesterase insecticides. The individualized clinical study of each case has shown, that despite the similar symptoms, the animals had different acid-base disorders and is, therefore, also required a different therapeutic approach, especially in critical conditions. Further studies with a larger sample and preferably with exposure to different xenobiotics may allow a more accurate and comprehensive evaluation of the relationship between the etiology of poisoning and blood gas and electrolyte changes observed

Desenvolvimento de um módulo veicular capaz de se movimentar a 360° e a 90°

Num contexto de disrupção da mobilidade, devido ao crescimento acelerado de novas tecnologias e às políticas de sustentabilidade, surge uma nova classe de veículos que, dependendo do tipo e da sua função, exigem novas tecnologias adequadas ao seu objetivo. As plataformas modulares autónomas elétricas surgiram, neste cenário, para reduzir o tempo de colocação de veículos elétricos no mercado, a complexidade da oferta e o custo total de produção do veículo. De forma a facilitar e adaptar manobrabilidade dos veículos aos futuros desafios da mobilidade, esta dissertação propõe a criação de um módulo facilmente adaptável a uma plataforma modular, já existente, que possibilite ao veículo os movimentos 360° e 90°. A dificuldade do desenvolvimento deste projeto, passa por encontrar um mecanismo para o sistema de direção que cumpra todos os requisitos cinemáticos, sem comprometer os restantes sistemas de controlo e estabilidade do movimento. Assim, após a definição de parâmetros de tração e de suspensão, são realizados, com recurso ao software SolidWorks®, testes a possíveis soluções encontradas. Por fim, é concebida a estrutura responsável pela união de todos os componentes envolvidos, e destes com a plataforma modular já existente. A geometria dos componentes é validada por um dimensionamento à fadiga, pelo Método de Elementos Finitos. A solução apresentada utiliza motores nas rodas, um sistema de suspensão do tipo Double Wishbone e um controlo de direção resultante da combinação de um conjunto de tirantes acionados por atuadores lineares regidos por um sistema by-wire. Desta forma, é possível um controlo independente de cada roda, de forma a cumprir todos os requisitos propostos.In a context of disruption of mobility, due to the accelerated growth of new technologies and sustainability policies, a new class of vehicles emerges that depending on the type and their function, require new technologies appropriate to their goal. The autonomous electrical modular platforms emerged, in this scenario, to reduce the time of placing electric vehicles on the market, the complexity of supply and the total cost of production of the vehicle. To facilitate and adapt vehicle manoeuvrability to future mobility challenges, this dissertation proposes the creation of an easily adaptable module to an existing modular platform that allows the vehicle to move 360° and 90°. The difficulty of developing this project is to find a mechanism for the steering system that meets all cinematic requirements, without compromising the other systems of control and stability of movement. Thus, after the definition of traction and suspension parameters, tests are performed using SolidWorks® software, using possible solutions found. Finally, the structure responsible for the union of all the components involved was conceived, and these with the existing modular platform. The geometry of the components is validated by a fatigue dimensioning by the Finite Element Method. The presented solution uses wheel motors, a Double Wishbone suspension system and steering control resulting from the combination of a set of rods driven by linear actuators governed by a by-wire system. In this way, independent control of each wheel is possible to meet all proposed requirements

Reacendendo memórias

O presente relatório é produto do processo de estágio realizado entre outubro de 2017e maio de 2018, no âmbito do Mestrado em Ciências da Educação na Faculdade de Psicologiae Ciências da Educação da Universidade do Porto, no domínio de Educação, Comunidades eMudança Social. O estágio desenvolveu-se no âmbito do Pelouro da Cultura da CâmaraMunicipal de Espinho e decorreu nos espaços o FACE e da Biblioteca Municipal de EspinhoJosé Marmelo Silva. Este relatório, intitulado "Reacendendo Memórias", reflete sobreprojeto que, no âmbito do mestrado, foi proposto e aceite pela Câmara Municipal de Espinho,tendo como objetivo a recolha de memórias dos trabalhadores da Fosforeira Portuguesa emEspinho, de forma a contribuir para a divulgação de um olhar sobre a história dos seusoperários e o impacto que esta indústria teve, enquanto espaço de formação e participaçãocívica.Partindo das histórias de vida de ex-trabalhadores da Fosforeira Portuguesa emEspinho, o presente documento é resultado de um trabalho de investigação que procuraconstituir um contributo para o estudo e reflexão sobre diversas abordagens de formação deadultos e sobre o papel que a formação informal pode desempenhar no decorrer da vida dossujeitos e de toda uma comunidade , através dos conhecimentos e valores que vão sendoadquiridos dentro do contexto de trabalho, que se constituíram como instâncias formativase de intervenção social.A partir dos discursos de diferentes interlocutores e de diversas fontes a imprensalocal, propus-me estudar e documentar uma realidade que era bastante significativa paramim, as vivências e experiências que atravessaram o meu município durante oito décadas, eque, ainda hoje fazem parte do nosso património enquanto espinhenses. Trata-se de históriasindividuais e familiares e, acima de tudo comunitárias e identitárias de Espinho. As paredescaíram, mas os "filhos da Fosforeira" tinham e têm muito que partilhar com Espinho,memórias que nunca foram contadas à cidade depois que as portas se fecharam. Apreservasão das memórias dos trabalhadores da Fosforeira vem enaltecer as representaçõessobre as vivências que tiveram lugar no contexto, assim como os significados que foramatribuídos às mesmas. Com este registo visa-se a criação de um espaço permita repensar opassado e ,assim, poder contribuir para a construção do futuro

O PLANO NACIONAL DE EDUCAÇÃO E POLÍTICA NACIONAL DE EDUCAÇÃO ESPECIAL: UM ESTUDO DE CASO SOBRE A EDUCAÇÃO INCLUSIVA NA PRÁTICA ESCOLAR

The purpose of this article is to analyze the elements present in the National Education Plan (PNE) 2014-2024 related to the National Special Education Policy (PNEE 2008) from the empirical analysis carried out in a basic education school, in Riacho Fundo I) in the Inclusive Education Perspective, trying to verify how the educational institution in question has served the public that demands specialized educational assistance. The article addresses, from a documental, bibliographic and empirical point of view, the theme related to the implementation of goal 4 of the PNE 2014-2024 and the PNEE, asking the following question: What is the reality of the school routine that is under the influence of the Policy National Special Education in the Perspective of Inclusive Education (2008) and PNE (2014-2024) goal 4? The itinerary for the resolution of the question goes through the analysis of the legislation related to a case study of a specific school reality. The results show that the school community was not prepared in advance to assist people with disabilities, does not have an adequate infrastructure for serving the Special Education public and points to a group of Education professionals who did not receive continuing training from the State Department of Education of the Federal District as they should, but who are developing the work based on their own efforts. O presente artigo tem como proposta analisar os elementos presentes no Plano Nacional de Educação (PNE) 2014-2024 relacionado com a Política Nacional de Educação Especial (PNEE 2008) a partir da análise empírica realizada em uma escola de educação básica, no Riacho Fundo I) na Perspectiva da Educação Inclusiva, procurando verificar como a instituição de ensino em questão tem atendido ao público que demanda atendimento educacional especializado. O artigo aborda sob o ponto de vista documental, bibliográfico e empírico a temática relacionada à implementação da meta 4 do PNE 2014-2024 e da PNEE tendo como pergunta a seguinte indagação: Qual é a realidade do cotidiano escolar que está sob a influência da Política Nacional de Educação Especial na Perspectiva da Educação Inclusiva (2008) e do PNE (2014-2024) meta 4? O itinerário para a resolução da pergunta passa pela análise da legislação relacionado com um estudo de caso de uma realidade escolar específica. Os resultados mostram que a comunidade escolar não foi preparada com antecedência para o atendimento das pessoas com deficiência, não tem uma infraestrutura adequada para o atendimento ao público da Educação Especial e aponta para um grupo de profissionais da Educação que não receberam formação continuada por parte da Secretaria Estadual de Educação do DF como deveriam, mas, que estão desenvolvendo o trabalho baseado em seus próprios esforços.&nbsp

Trabalho doméstico: análise da percepção do trabalhador após a regulamentação da lei complementar nº 150/2015

O presente trabalho tem como finalidade analisar o conhecimento do trabalhador doméstico a respeito dos seus direitos e as mudanças percebidas pelos mesmos, assim como levanRtar os perfis demográficos dos profissionais pesquisados. A pesquisa será direta e objetiva e levantará dados primários por meio da aplicação de formulários e após será feita uma análise quanti-qualitativa. O referencial teórico abordou assuntos relacionados à definição e características do empregado doméstico, história do trabalho doméstico no Brasil e o reconhecimento profissional, social e jurídico proveniente com a Emenda Constitucional Nº 72/2013. A metodologia usada quanto a pesquisa foi a descritiva e a técnica utilizada foi o levantamento de dados primários em campo a partir da adoção de 100 formulários semiestruturados aplicados em Belo Horizonte