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    Detección y prevención de los Trastornos de la Conducta Alimentaria: Importancia de la consulta de enfermería adolescente.

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    Introducción: Los trastornos de la conducta alimentaria son un grupo de enfermedades mentales vinculadas a una percepción distorsionada del propio cuerpo y relacionadas con alteraciones en el comportamiento alimenticio. Suponen la tercera enfermedad crónica más común en adolescentes y se ven favorecidas por factores de riesgo individuales, grupales y sociales. Objetivo: El objetivo general de este trabajo es comprender la importancia del papel de enfermería en la detección precoz de los trastornos de la conducta alimentaria en adolescentes. Los objetivos específicos son; describir los factores de riesgo asociados a este tipo de trastornos, exponer las intervenciones de la enfermera comunitaria en la detección precoz y mostrar la necesidad de crear una consulta de enfermería adolescente. Metodología: Se ha realizado una revisión bibliográfica de la investigación ya existente respecto a los trastornos de la conducta alimentaria, su detección y prevención, empleándose las siguientes bases de datos: SciELO, CUIDEN, Google académico y PubMed, de las cuales se han seleccionado un total de 27 artículos. Resultados: Es importante tener en cuenta los factores de riesgo implicados en el desarrollo de estos trastornos para poder identificar a una persona susceptible de padecer un TCA como son los medios de comunicación, la insatisfacción corporal y el acoso entre otros. Las actividades de prevención realizadas por parte de enfermería suponen uno de los pilares fundamentales de la consulta de atención primaria. La creación de una consulta enfermera en la adolescencia permitiría una mejor accesibilidad de esta población a los servicios de salud, una atención individualizada y un seguimiento más estrecho de las patologías más frecuentes en esta franja de edad. Conclusiones: Los trastornos de la conducta alimentaria suponen un problema importante en nuestra sociedad. El profesional de enfermería como agente de salud comunitario, dispone de las herramientas necesarias para detectar precozmente aquellos problemas relacionados y asociados con los mismos. La educación sanitaria, la sensibilización de la población y la implicación del núcleo familiar en el cuidado y recuperación del adolescente se consideran aspectos clave para la mejora de la calidad de vida del adolescente y su entorno.Grado en Enfermerí

    Thinking up an original scientific research project

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    Writing a research proposal is not a simple task if we wish-and we do usually wish!-to succeed in putting our project into practice. Three different developing stages should indeed be clearly borne in mind from the very beginning. The first stage requires you (the applicant) "To have your own idea", thus demanding novelty and originality in the way of thinking; the second has the goal "To get your idea funded", thus entailing project feasibility and persuasion in the way in which the idea is presented; and the third is "To run the project", thus requiring resources and local implementation. The first step-i.e., to think out of the box, to be different, to be unique-is the most difficult task, the challenging point in the elaboration process. The importance of reading scientific literature, being aware of competitors and developing original thoughts will be discussed. And communication-from brain to brain, from yours to proposal reviewers' mind-will unavoidably emerge as the voussoir, the wedge-shaped or tapered stone used to construct the whole project. In this context, the three pillars of the Aristotle's Rhetorical Triangle will be discussed: ethos (credibility), logos (reasoning) and pathos (empathy). It will end with a basic, central principle as "Have the brain full up with the whole story before writing any single word on any blank piece of paper"

    A Trusted and Privacy-Enhanced In-Memory Data Store

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    The recent advent of hardware-based trusted execution environments provides isolated execution, protected from untrusted operating systems, allowing for the establishment of hardware-shielded trust computing base components. As the processor provides such a “shielded” trusted execution environment (TEE), their use will allow users to run appli cations securely, for example on the remote cloud servers, whose operating systems and hardware are exposed to potentially malicious remote attackers, non-controlled system administrators and staff from the cloud providers. On the other hand, Linux containers managed by Docker or Kubernetes are interesting solutions to provide lower resource footprints, faster and flexible startup times, and higher I/O performance, compared with virtual machines (VM) enabled by hypervisors. However, these solutions suffer from soft ware kernel mechanisms, easier to be compromised in confidentiality and integrity as sumptions of supported application data. In this dissertation we designed, implemented and evaluated a Trusted and Privacy-Enhanced In-Memory Data Store, making use of a hardware-shielded containerised OS-library to support its trust-ability assumptions. To support large datasets, requiring data to be mapped outside those hardware-enabled con tainers, our solution uses partial homomorphic encryption, allowing trusted operations executed in the protected execution environment to manage in-memory always-encrypted data, that can be or not mapped inside the TEE.Os recentes avanços de ambientes de execução confiáveis baseados em hardware fornecem execução isolada, protegida contra sistemas operativos não confiáveis, permitindo o estabelecimento de componentes base de computação de confiança protegidos por hardware. Como o processador fornece esses ambientes de execução confiável e "protegida" (TEE), o seu uso permitirá que os utilizadores executem aplicações com segurança, por exemplo em servidores cloud remotos, cujos sistemas operativos e hardware estão expostos a atacantes potencialmente maliciosos assim como administradores de sistema não controlados e membros empregados dos sistemas de cloud. Por outro lado, os containers Linux geridos por sistemas Docker ou Kubernetes são soluções interessantes para poupar recursos físicos, obter tempos de inicialização mais rápidos e flexíveis e maior desempenho de I/O (interfaces de entrada e saída), em comparação com as tradicionais máquinas virtuais (VM) activadas pelos hipervisores. No entanto, essas soluções sofrem com software e mecanismos de kernel mais fáceis de comprometerem os dados das aplicações na sua integridade e privacidade. Nesta dissertação projectamos, implementamos e avaliamos um Sistema de Armazenamento de Dados em Memória Confiável e Focado na Privacidade, utilizando uma biblioteca conteinerizada e protegida por hardware para suportar as suas suposições de capacidade de confiança. Para oferecer suporte para grandes conjuntos de dados, exigindo assim que os dados sejam mapeados fora dos containers seguros pelo hardware, a solução utiliza encriptação homomórfica parcial, permitindo que operações executadas no ambiente de execução protegido façam gestão de dados na memória que estão permanentemente cifrados, estando eles mapeados dentro ou fora dos containers seguros

    Insider trading: o abuso de informação privilegiada

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    The financial market should be guided by its efficiency, integrity, transparency and equal access to information. All these values are called upon question by situations of market abuse, such as the crime of insider trading. The illicit of insider trading occurs when a person possesses inside information and uses that information by acquiring or disposing of, for its own account or for the account of a third party, directly or indirectly, financial instruments to which that information relate, obtaining for himself an undue benefit from the inside information to the disadvantage of third parties who are unaware of such information. This illicit practice results in the weakening of the integrity of financial markets and investor confidence. In order to ensure the integrity of the markets and the trust of the acting agents, the practice of insider trading crime should be censored and, as a consequence, sanctions should be applied.O mercado de valores mobiliários dever ser pautado pela sua eficiência, integridade, transparência e igualdade de acesso à informação. Todos estes valores são postos em causa com as situações de abuso de mercado, como é exemplo o crime de abuso de informação privilegiada. O ilícito de "insider trading" ocorre quando uma pessoa que dispõe de informação privilegiada utiliza essa informação ao adquirir ou alienar, por sua conta ou por conta de um terceiro, direta ou indiretamente, instrumentos financeiros a que essa informação diz respeito, obtendo para si um benefício indevido a partir da informação privilegiada em detrimento de terceiros que desconhecem tal informação. Esta prática ilícita resulta na fragilização da integridade dos mercados financeiros e da confiança dos investidores. Por forma a garantir a integridade dos mercados e confiança dos agentes que lá atuam, a prática do crime de abuso de informação privilegiada deve ser censurada e, como consequência, ser aplicadas as devias sanções

    HARDI Methods: tractography reconstructions and automatic parcellation of brain connectivity

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    Tese de mestrado integrado em Engenharia Biomédica e Biofísica (Radiações em Diagnóstico e Terapia), apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2012A neuroanatomia humana tem sido objecto de estudo científico desde que surgiu o interesse na organização do corpo humano e nas suas funções, quer como um todo quer através das partes que o constituem. Para atingir este fim, as autópsias foram a primeira forma de revelar algum conhecimento, o qual tem vindo a ser catalogado e sistematizado à medida que a medicina evolui. Passando por novas técnicas de conservação e tratamento de tecido humano, de que são exemplo as dissecções de Klinger, nas quais se fazem secções de material conservado criogenicamente, bem como por estudos histológicos através da utilização de corantes, conseguiu-se uma forma complementar de realizar estes estudos. Permanecia, no entanto, a impossibilidade de analisar in vivo a estrutura e função dos diferentes sistemas que constitutem o Homem. Com o surgimento das técnicas imagiológicas o diagnóstico e monitorização do corpo humano, bem como das patologias a ele associadas, melhoraram consideravelmente. Mais recentemente, com o aparecimento da ressonância magnética (MRI: do Inglês "Magnetic Resonance Imaging"), tornou-se possível estudar as propriedades magnéticas do tecido, reflectindo as suas características intrínsecas com base na aplicação de impulsos de radiofrequência. Através de ressonância magnética é possível estudar essas propriedades em vários núcleos atómicos, sendo mais comum o estudo do hidrogénio, pois somos maioritariamente consistituídos por água e gordura. Uma vez que só é possível medir variações do campo magnético, aplicam-se impulsos de radiofrequência para perturbar o equilíbrio dos spins e medir os seus mecanismos de relaxação, os quais, indirectamente, reflectem a estrutura do tecido. Contudo, o sinal medido é desprovido de qualquer informação espacial. De facto, para podermos proceder a essa quantificação, é necessária a utilização de gradientes de campo magnético, que permitem modificar localmente a frequência de precessão dos protões, através da alteração local do campo magnético, permitindo assim, adquirir o sinal de forma sequencial. A informação obtida constitui uma função variável no espaço e através da transformação de Fourier pode ser quantificada em frequências espaciais, sendo estes dados armazenados no espaço k. O preencimento deste espaço, caracterizado por frequências espaciais, bem como os gradientes de campo magnético que são aplicados, permitem determinar a resolução da imagem que podemos obter, aplicando uma transformação de Fourier inversa. O estudo da ressonância magnética não se restringe à análise da estrutura mas também ao estudo da função e difusão das moléculas de água. A difusão é um processo aleatório, que se traduz pelo movimento térmico das moléculas de água, e o seu estudo permite inferir sobre o estado do tecido e microestrutura associada, de uma forma não invasiva e in vivo. A técnica de imagiologia de ressonância magnética ponderada por difusão (DWI: do Inglês "Diffusion Weighted Imaging") permite o estudo da direccionalidade das moléculas de água e extracção de índices que reflectem directamente a integridade dos tecidos biológicos. De modo a sensibilizar as moléculas de água à difusão, é necessário aplicar sequências de ressonância magnética modificadas, nas quais se aplicam gradientes de campo magnético de difusão para quantificar o deslocamento das moléculas e a sua relação com o coeficiente de difusão das mesmas. Num ambiente livre e sem barreiras a difusão das moléculas de água é isotrópica, uma vez que se apresenta igual em todas as direcções. Todavia, tal não se verifica no corpo humano. A presença destas barreiras leva a que, na verdade, apenas possa ser medido um coeficiente de difusão aparente. Este, por sua vez, traduz a interacção entre as moléculas de água com a microestrutura e, como tal, uma anisotropia na sua difusão. Como caso particular de difusão anisotrópica a nível cerebral, tem-se a difusão das moléculas de água na matéria branca, uma vez que esta apresenta uma direccionalidade preferencial de acordo com a orientação dos axónios, visto estarem presentes menos restrições à sua propagação, ao contrário do que acontece com a direcção perpendicular (devido à membrana celular e às bainhas de mielina). Por oposição, a matéria cinzenta, constituída pelo aglomerado dos corpos celulares dos neurónios, e o líquido cefalorraquidiano apresentam uma difusão sem direcção preferencial (i.e. aproximadamente isotrópica). A informação obtida através da difusão das moléculas de água encontra-se limitada pelo número de direcções segundo o qual aplicamos os gradientes de difusão. Deste modo, surgiu a imagiologia por tensor de difusão (DTI: do Inglês "Diffusion Tensor Imaging"). Esta técnica permite extrair informação acerca da tridimensionalidade da distribuição da difusão de moléculas de água através da aplicação de seis gradientes de difusão não colineares entre si. A distribuição destas moléculas pode, então, ser vista como um elipsóide, no qual o principal vector próprio do tensor representa a contribuição da difusão das moléculas segundo a direcção do axónio (ou paralela), sendo os dois restantes componentes responsáveis pela contribuição transversal. Além da difusividade média (MD: do Inglês "Mean Diffusivity") e das contribuições da difusão paralela (MD//) e perpendicular (MD ) às fibras, é também possível extrair outros índices, como a anisotropia fraccional (FA: do Inglês "Fractional Anisotropy"), que fornece informação acerca da percentagem de difusão anisotrópica num determinado voxel. Para a matéria branca, tal como já foi referido, existe difusão preferencial e, portanto, a anisotropia fraccional será elevada. Por outro lado, para a matéria cinzenta e para o líquido cefalorraquidiano, verificar-se-á uma FA reduzida, devido à ausência de anisotropia. Todavia, regiões com reduzida anisotropia fraccional podem camuflar regiões de conformação de cruzamento de fibras, ou fibras muito anguladas, que a imagiologia por tensor de difusão não consegue resolver. A razão para esta limitação reside no número reduzido de diferentes direcções de difusão que são exploradas, assim como o pressuposto de que a distribuição das moléculas de água é Gaussiana em todo o cérebro, o que não é necessariamente verdade. A fim de se ultrapassar estas limitações, novas técnicas surgiram, nomeadamente as de elevada resolução angular (HARDI: do Inglês "High Angular Resolution Diffusion Imaging"). Estas fazem uso de uma aquisição em função de múltiplas direcções de gradiente e de uma diferente modelação dos dados obtidos, dividindo-se em dois tipos. As técnicas livres de modelos permitem extrair uma função de distribuição da orientação das fibras num determinado voxel directamente do sinal e/ou transformações da função densidade de probabilidade do deslocamento das moléculas de água. Contrariamente, as técnicas baseadas em modelos admitem existir determinados constrangimentos anatómicos e que o sinal proveniente de um determinado voxel é originado por um conjunto de sinais individuais de fibras, caracterizados por uma distribuição preferencial das direcções das fibras. Todos estes métodos têm como objectivo principal recuperar a direcção preferencial da difusão das moléculas de água e reconstruir um trajecto tridimensional que represente a organização das fibras neuronais, pelo que se designam métodos de tractografia. Esta representa a única ferramenta não invasiva de visualização in vivo da matéria branca cerebral e o seu estudo tem revelado uma grande expansão associada ao estabelecimento de marcador biológico para diversas patologias. Adicionalmente, esta técnica tem vindo a tornar-se uma modalidade clínica de rotina e de diversos protocolos de investigação, sendo inclusivamente utilizada para complementar o planeamento em cirurgia, devido à natureza dos dados que gera. Particularmente no caso de dissecções manuais, nas quais os dados de tractografia são manuseados por pessoal especializado, com vista a realizar a parcelização de diferentes tractos de interesse, o processo é moroso e dependente do utilizador, revelando-se necessária a automatização do mesmo. Na realidade, já existem técnicas automáticas que fazem uso de algoritmos de agregação1, nos quais fibras são analisadas e agrupadas segundo características semelhantes, assim como técnicas baseadas em regiões de interesse, em que se extraem apenas os tractos seleccionados entre as regiões escolhidas. O objectivo principal desta dissertação prende-se com a análise automática de dados de tractografia, bem como a parcelização personalizada de tractos de interesse, também esta automática. Em primeiro lugar, foi desenvolvido um algoritmo capaz de lidar automaticamente com funções básicas de carregamento dos ficheiros de tractografia, o seu armazenamento em variáveis fáceis de manusear e a sua filtragem básica de acordo com regiões de interesse de teste. Neste processo de filtragem é feita a avaliação das fibras que atravessam a região de interesse considerada. Assim, após a localização das fibras entre as regiões de interesse os tractos resultantes podem ser guardados de duas formas, as quais têm, necessariamente, que ser especificadas antes de utilizar o software: um ficheiro que contém todas as fibras resultantes da parcelização e outro que contém o mapa de densidade associado, isto é, o número de fibras que se encontra em cada voxel. Após esta fase inicial, a flexibilidade e complexidade do software foi aumentando, uma vez que foram implementados novos filtros e a possibilidade de utilizar regiões de interesse de diferentes espaços anatómicos padrão. Fazendo uma análise a esta última melhoria, pode referir-se que, através de um procedimento de registo não linear da imagem anatómica do espaço padrão ao espaço individual de cada sujeito, foi possível, de forma automática, guardar o campo de deformações que caracteriza a transformação e, assim, gerar regiões de interesse personalizadas ao espaço do sujeito. Estas regiões de interesse serviram depois para a parcelização básica e para seleccionar tractos, mas também para filtragens adicionais, como a exclusão de fibras artefactuosas2 e um filtro especial, no qual apenas os pontos que ligam directamente as diferentes regiões são mantidos. Além do que já foi referido, recorreu-se também à aplicação de planos de interesse que actuam como constrangimentos neuroanatómicos, o que não permite, por exemplo, no caso da radiação óptica, que as fibras se propaguem para o lobo frontal. Esta ferramenta foi utilizada com sucesso para a parcelização automática do Fascículo Arcuado, Corpo Caloso e Radiação Óptica, tendo sido feita a comparação com a dissecção manual, em todos os casos. O estudo do Fasciculo Arcuado demonstrou ser o teste ideal para a ferramenta desenvolvida na medida que permitiu identificar o segmento longo, assim como descrito na literatura. O método automático de duas regiões de interesse deu a origem aos mesmos resultados obtidos manualmente e permitiu confirmar a necessidade de estudos mais aprofundados. Aumentando a complexidade do estudo, realizou-se a parcelização do Corpo Caloso de acordo com conectividade estrutural, isto é, com diferentes regiões envolvidas em funções distintas. Procedeu-se deste modo, e não com base em informação acerca de divisões geométricas, uma vez que estas já demonstraram incongruências quando correlacionadas com subdivisões funcionais. O uso adicional de regiões de interesse para a exclusão de fibras demonstrou-se benéfico na obtenção dos mapas finais. Finalmente, incluiu-se a utilização de um novo filtro para realizar a parcelização da Radiação Óptica, comparando os resultados para DTI e SD(do Inglês "Spherical Deconvolution"). Foi possível determinar limitações na primeira técnica que foram, no entanto, ultrapassadas pela utilização de SD. O atlas final gerado apresenta-se como uma mais-valia para o planeamento cirúrgico num ambiente clínico. O desenvolvimento desta ferramenta resultou em duas apresentações orais em conferências internacionais e encontra-se, de momento, a ser melhorada, a fim de se submeter um artigo de investigação original. Embora se tenha chegado a um resultado final positivo, tendo em conta a meta previamente estabelecida, está aberto o caminho para o seu aperfeiçoamento. Como exemplo disso, poder-se-á recorrer ao uso combinado das duas abordagens de parcelização automática e à utilização de índices específicos dos tractos, o que poderá trazer uma nova força à delineação dos tractos de interesse. Adicionalmente, é também possível melhorar os algoritmos de registo de imagem, tendo em conta a elevada variabilidade anatómica que alguns sujeitos apresentam. Como nota final, gostaria apenas de salientar que a imagiologia por difusão e, em particular, a tractografia, têm ainda muito espaço para progredir. A veracidade desta afirmação traduz-se pela existência de uma grande variedade de modelos e algoritmos implementados, sem que, no entanto, exista consenso na comunidade científica acerca da melhor abordagem a seguir.Diffusion weighted imaging (DWI) has provided us a non-invasive technique to determine physiological information and infer about tissue microstructure. The human body is filled with barriers affecting the mobility of molecules and preventing it from being constant in different directions (anisotropic diffusion). In the brain, the sources for this anisotropy arise from dense packing axons and from the myelin sheath that surrounds them. Only with Diffusion Tensor Imaging (DTI) it was possible to fully characterize anisotropy by offering estimations for average diffusivities in each voxel. However, these methods were limited, not being able to reflect the index of anisotropic diffusion in regions with complex fibre conformations. It was possible to reduce those problems through the acquisition of many gradient directions with High Angular Resolution Diffusion Imaging (HARDI). There are model-free approaches such as Diffusion Spectrum Imaging (DSI) and Q-ball Imaging (QBI) which retrieve an orientation distribution function (ODF) directly from the water molecular displacement. Another method is Spherical Deconvolution, which is a model-based approach based on the computation of a fibre orientation distribution (FOD) from the deconvolution of the diffusion signal and a chosen fibre response function. Reconstructing the fibre orientations from the diffusion profile, generates a three-dimensional reconstruction of neuronal fibres (Tractography) whether in a deterministic, probabilistic or global way. Tractography has two main purposes: non-invasive and in vivo mapping of human white matter and neurosurgical planning. In order to achieve those purposes it is common to apply parcellation techniques which can be subdivided into ROI-based or Clustering base. The aim of this project is to develop an automated method of tract-based parcellation of different brain regions. This tool is essential to retrieve information about the architecture and connectivity of the brain, overcoming time consuming and expertise related issues derived from manual dissections. Firstly we investigated basic functions to handle diffusion and tractography data. In particular, we focused on how to load track files, filter them according to regions of interest and save the output in different formats. Results were always compared with manual dissection. The developed tool increased complexity by introduction a new filtering and the use of regions of interest from different standard spaces, created trough non-linear registrations. Three major tracts of interest were analysed: Arcuate Fasciculus, Corpus Callosum and Optic Radiation

    Inserción del enfermero en el ámbito escolar

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    Es misión del enfermero el cuidado de la salud del ser humano individual y del colectivo a través de los procesos vitales y en contextos culturales específicos para alcanzar mejores condiciones de vida. Su acción está orientada por principios y fundamentos científicos, humanísticos y éticos de respeto a la vida y a la dignidad humana. Su práctica requiere de un pensamiento interdisciplinario, de un actuar multiprofesional y en equipo con visión holística del ser humano en su relación con el contexto social y ambiental. Esto legitima a enfermería, como elemento clave en el engranaje entre padres, docentes, alumnos y otros profesionales de la salud. Con la inclusión del profesional de enfermería en los centros escolares, se lograría incrementar los conocimientos y la información en materia de salud, para que los alumnos puedan decidir libremente sobre ella, con base en el conocimiento. Asimismo también se conseguiría educar a los escolares, para que puedan defenderse de los riesgos con los que ineludiblemente se van a enfrentar en el futuro. Ejercer la triple perspectiva enfermera de función asistencial, promoción de la salud, prevención de la enfermedad y problemas de salud, así como ser el agente mediador entre la familia, la escuela y la salud. Este trabajo de investigación tiene como objetivo determinar cuales son los conocimientos que tienen los docentes de la comunidad educativa de la escuela nº 1-113 Bolaños del departamento de San Martín, Mendoza sobre las funciones del enfermero en el ámbito escolar durante el primer semestre del 2012.Fil: Aloqui, Miguel Ángel. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Escuela de Enfermería..Fil: De Marco, Raúl. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Escuela de Enfermería..Fil: Pérez, Rosa. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Escuela de Enfermería.

    Estudio de diversas especies de los géneros Trachelomonas y Strombomonas (Euglenophyta).

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    Se estudian siete especies de Euglenofíceas loricadas, 2 pertenecientes al género Strombomonas y5 de Trachelomonas. Se analiza la microarquitectura de la lórica a microscopio óptico y electrónico de barrido, describiendo los elementos ornamentales de cada especie.Destacamos el estudio de tres poblaciones de Trachelomonas, dos de ellas incluidas provisionalmente en T. nigra y T. similis respectivamente, mientras que en la tercera: Trachelomonas sp., con una gran variabilidad morfológica de la lórica, destaca la existencia de un anillo de perforaciones que se disponen alrededor del poro flagelarSeven species of Euglenophyceae with lorica (2 Strombomonas and 5 Trachelomonas) haven been studied. We analyzed their lorica microarchitecture by means of ligh microscopy and scanning electron microscopy, enumerating their different ornamental elements. We stand out the study of three population of Trachelomonas, two of them are provisionally included in T. nigra and T. similis respectively. The third one: Trachelomonas sp. show a large morphological variability with only one common ornamental character within of the population: a ring of perforations around the flagellum pore

    Poly-l/dl-lactic acid films functionalized with collagen IV as carrier substrata for corneal epithelial stem cells

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    Limbal epithelial stem cells (LESCs) are responsible for the renewal of corneal epithelium. Cultivated limbal epithelial transplantation is the current treatment of choice for restoring the loss or dysfunction of LESCs. To perform this procedure, a substratum is necessary for in vitro culturing of limbal epithelial cells and their subsequent transplantation onto the ocular surface. In this work, we evaluated poly-L/DL-lactic acid 70:30 (PLA) films functionalized with type IV collagen (col IV) as potential in vitro carrier substrata for LESCs. We first demonstrated that PLA-col IV films were biocompatible and suitable for the proliferation of human corneal epithelial cells. Subsequently, limbal epithelial cell suspensions, isolated from human limbal rings, were cultivated using culture medium that did not contain animal components. The cells adhered significantly faster to PLA-col IV films than to tissue culture plastic (TCP). The mRNA expression levels for the LESC specific markers, K15, P63α and ABCG2 were similar or greater (significantly in the case of K15) in limbal epithelial cells cultured on PLA-col IV films than limbal epithelial cells cultured on TCP. The percentage of cells expressing the corneal (K3, K12) and the LESC (P63α, ABCG2) specific markers was similar for both substrata. These results suggest that the PLA-col IV films promoted LESC attachment and helped to maintain their undifferentiated stem cell phenotype. Consequently, these substrata offer an alternative for the transplantation of limbal cells onto the ocular surface.This work was supported by the Carlos III National Institute of Health, Spain (CIBER-BBN and Spanish Network on Cell Therapy, (TerCel RD12/0019/0036), MINECO/FEDER, EU), and the Castilla y León Regional Government, Spain (Regional Center for Regenerative Medicine and Cell Therapy, SAN673/VA/28/08 and SAN126/VA11/09)
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