Nucleophosmin/B23 activates Aurora A at the centrosome through phosphorylation of serine 89.: Activation of Aurora-A by Nucleophosmin

International audienceAurora A (AurA) is a major mitotic protein kinase involved in centrosome maturation and spindle assembly. Nucleophosmin/B23 (NPM) is a pleiotropic nucleolar protein involved in a variety of cellular processes including centrosome maturation. In the present study, we report that NPM is a strong activator of AurA kinase activity. NPM and AurA coimmunoprecipitate and colocalize to centrosomes in G2 phase, where AurA becomes active. In contrast with previously characterized AurA activators, NPM does not trigger autophosphorylation of AurA on threonine 288. NPM induces phosphorylation of AurA on serine 89, and this phosphorylation is necessary for activation of AurA. These data were confirmed in vivo, as depletion of NPM by ribonucleic acid interference eliminated phosphorylation of CDC25B on S353 at the centrosome, indicating a local loss of AurA activity. Our data demonstrate that NPM is a strong activator of AurA kinase activity at the centrosome and support a novel mechanism of activation for AurA

Contacts et acculturations en Méditerranée occidentale

La question des contacts entre les différents peuples qui bordent les rives de la Méditerranée nord occidentale est l’un des sujets phares de la recherche archéologique de ces trente dernières années. Que l’on parle d’époque archaïque et classique ou de Protohistoire et d’âge du Fer, les échanges et les processus d’acculturation de ces peuples qui entrèrent alors en contact les uns avec les autres : Grecs, Celtes, Phéniciens, Ibères, Ligures, Étrusques, ont retenu l’attention des chercheurs travaillant sur l’expansion grecque dans ces régions, sur les trafics commerciaux, sur les échanges culturels. L’œuvre de Michel Bats (Directeur de recherche honoraire du CNRS) traverse toutes ces thématiques : la présence des Phocéens et des Étrusques dans le bassin occidental de la Méditerranée, l’acculturation et les identités ethno-culturelles, les recherches sur la céramique et ses usages dans une perspective anthropologique, l’appropriation de l’écriture par les sociétés protohistoriques. Ses collègues et amis, en organisant ce colloque et en participant à ces actes, entendent lui témoigner leur amitié et leur dette intellectuelle. Ce volume réunit des articles des meilleurs spécialistes, actuels de la question - des chercheurs de toute la Méditerranée - autour des quatre grands thèmes que nous venons d’évoquer afin tout à la fois de dresser un bilan et de définir de nouvelles perspectives. Cet ouvrage présente donc aussi bien des synthèses - sur la présence grecque en Espagne, sur l’origine de l’écriture, sur les pratiques funéraires, sur les identités culturelles et ethniques - que des découvertes récentes concernant la thématique des contacts et de l’acculturation en Méditerranée nord occidentale : l’agglomération du Premier âge du Fer de La Cougourlude (Lattes, Hérault) fouillée durant l’été 2010 ; le sanctuaire hellénistique de Cumes et les fouilles récentes de Fratte en Italie ; les ateliers de potiers de Rosas en Espagne ; les dernières découvertes d’Olbia de Provence

Extracorporeal Membrane Oxygenation for Severe Acute Respiratory Distress Syndrome associated with COVID-19: An Emulated Target Trial Analysis.

RATIONALE: Whether COVID patients may benefit from extracorporeal membrane oxygenation (ECMO) compared with conventional invasive mechanical ventilation (IMV) remains unknown. OBJECTIVES: To estimate the effect of ECMO on 90-Day mortality vs IMV only Methods: Among 4,244 critically ill adult patients with COVID-19 included in a multicenter cohort study, we emulated a target trial comparing the treatment strategies of initiating ECMO vs. no ECMO within 7 days of IMV in patients with severe acute respiratory distress syndrome (PaO2/FiO2 <80 or PaCO2 ≥60 mmHg). We controlled for confounding using a multivariable Cox model based on predefined variables. MAIN RESULTS: 1,235 patients met the full eligibility criteria for the emulated trial, among whom 164 patients initiated ECMO. The ECMO strategy had a higher survival probability at Day-7 from the onset of eligibility criteria (87% vs 83%, risk difference: 4%, 95% CI 0;9%) which decreased during follow-up (survival at Day-90: 63% vs 65%, risk difference: -2%, 95% CI -10;5%). However, ECMO was associated with higher survival when performed in high-volume ECMO centers or in regions where a specific ECMO network organization was set up to handle high demand, and when initiated within the first 4 days of MV and in profoundly hypoxemic patients. CONCLUSIONS: In an emulated trial based on a nationwide COVID-19 cohort, we found differential survival over time of an ECMO compared with a no-ECMO strategy. However, ECMO was consistently associated with better outcomes when performed in high-volume centers and in regions with ECMO capacities specifically organized to handle high demand. This article is open access and distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial No Derivatives License 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)

Intérêt des polymères à empreintes moléculaires pour la préparation d'échantillons par extraction solide-liquide. <br />Applications aux triterpènes dans les plantes et aux dopants dans les urines.

This thesis reports results obtained with molecularly imprinted polymers (MIP) during solid-liquid extraction. The effects of various parameters (polymer-analyte interactions, composition of the sample matrix, extraction solvents polarity) on the selectivity and the capacity of the MIP have been studied.The first application has revealed the influence of hydrogen bonds during extraction of an organic sample with a MIP synthesized with methacrylic acid (MAA). Cross reactivity experiences performed with analogues of the template (glycyrrhetinic acid) have proved the power of the nature and the position of functional groups over the specificity of rebinding of the analytes by the MIP. The capacity of the SPE cartridge has been assessed with a standard solution, then with a plant extract and washing solvents adapted to the matrix.Then, the polymer-analyte interactions have been studied with a saline aqueous matrix. Two MIPs respectively prepared with MAA and styrene-MAA, with clomiphene as template, have been characterized by Freundlich isotherms and applied to the preconcentration of the tamoxifen, a lipophilic and weakly basic molecule contained in hydrolysed urines. Adsorption equilibria and SPE experiments have displayed the part of hydrogen bonds, hydrophobic and ionic interactions in the retention of the analytes. The percolation of the urine through a hydrophobic sorbent before MIP-SPE, or directly through an MIP (MAA-styrene) with enhanced hydrophobic character, has allowed an increase of the extraction recovery with a reduced number of washing-steps.Ce mémoire reporte les études menées sur des polymères à empreintes moléculaires (MIP) en extraction solide-liquide (SPE). L'influence de différents facteurs (nature des interactions polymère-analyte, composition de la matrice de l'échantillon, polarité des solvants d'extraction) sur la sélectivité et la capacité des MIPs est étudiée. La première application révèle l'influence des liaisons hydrogène lors de l'extraction d'un échantillon organique sur un MIP préparé à partir d'acide méthacrylique (MAA). Des expériences de réactivité croisée réalisées sur des molécules analogues à la molécule empreinte (triterpène) montrent l'impact de la nature et de la position des groupes fonctionnels sur la spécificité de reconnaissance des analytes par le MIP. La capacité d'une cartouche SPE est évaluée à partir d'une solution standard puis d'un extrait végétal avec des solvants de lavage adaptés à la matrice. Les interactions polymère-analyte sont ensuite étudiées dans une matrice aqueuse saline. Deux MIPs respectivement préparés à partir de MAA et de MAA-styrène, avec le clomiphène comme molécule empreinte, sont caractérisés par les isothermes de Freundlich puis appliqués à la préconcentration du tamoxifène, molécule hydrophobe et basique contenue dans des urines hydrolysées et dopées. Les liaisons hydrogène, ioniques et hydrophobes intervenant dans la rétention des analytes sont étudiées par des équilibres d'adsorption et par SPE. La percolation de l'urine sur un support hydrophobe en préalable de la SPE-MIP, ou directement sur un MIP à caractère hydrophobe renforcé (MAA-styrène) entraîne une augmentation des rendements d'extraction avec un nombre d'étapes de lavage réduit

Analyse rétrospective d'une série de 25 cas d'ostéosarcomes traités au CHU de Tours par une association de chimiothérapie néoadjuvante et de chirurgie

TOURS-BU Médecine (372612103) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF

Intérêt des polymères à empreintes moléculaires pour la préparation d'échantillons par extraction solide-liquide (applications aux triterpènes dans les plantes et aux dopants dans les urines)

Ce mémoire reporte les études menées sur des polymères à empreintes moléculaires (MIP) en extraction solide-liquide (SPE). L influence de différents facteurs (nature des interactions polymère-analyte, composition de la matrice de l échantillon, polarité des solvants d extraction) sur la sélectivité et la capacité des MIPs est étudiée. La première application révèle l influence des liaisons hydrogène lors de l extraction d un échantillon organique sur un MIP préparé à partir d acide méthacrylique (MAA). Des expériences de réactivité croisée réalisées sur des molécules analogues à la molécule empreinte (triterpène) montrent l impact de la nature et de la position des groupes fonctionnels sur la spécificité de reconnaissance des analytes par le MIP. La capacité d une cartouche SPE est évaluée à partir d une solution standard puis d un extrait végétal avec des solvants de lavage adaptés à la matrice. Les interactions polymère-analyte sont ensuite étudiées dans une matrice aqueuse saline. Deux MIPs respectivement préparés à partir de MAA et de MAA-styrène, avec le clomiphène comme molécule empreinte, sont caractérisés par les isothermes de Freundlich puis appliqués à la préconcentration du tamoxifène, molécule hydrophobe et basique contenue dans des urines hydrolysées et dopées. Les liaisons hydrogène, ioniques et hydrophobes intervenant dans la rétention des analytes sont étudiées par des équilibres d adsorption et par SPE. La percolation de l urine sur un support hydrophobe en préalable de la SPE-MIP, ou directement sur un MIP à caractère hydrophobe renforcé (MAA-styrène) entraîne une augmentation des rendements d extraction avec un nombre d étapes de lavage réduit.ORLEANS-BU Sciences (452342104) / SudocSudocFranceF

Extraction du glyphosate et de son métabolite (AMPA) dans l'eau avec un polymère à empreintes moléculaires

La présente étude a donc comme objectif le développement de polymères à empreintes moléculaires capables de retenir spécifiquement les analytes ciblés au sein d'une eau souterraine. Plusieurs monomères fonctionnels ont été sélectionnés de telle sorte que les interactions avec les groupements fonctionnels du GLY et de l'AMPA soient favorisées au sein des cavités du MIP. La sélectivité du MIP par rapport au NIP (polymère non imprimé constitué des mêmes monomères que le MIP à l'exception de la molécule empreinte) a été prouvée à partir d'un protocole simple d'extraction sur phase solide (SPE) avec des cartouches remplies de MIP (250 mg) ou de NIP : dépôt de 3 mL d'eau dopée en glyphosate et AMPA à 25 mg/L et élution avec 3 mL NH4OH (10 mM). Les fractions ont été analysées par électrophorèse capillaire. Les résultats obtenus pour l'un des MIPs sont particulièrement satisfaisants tant en termes de rendements d'extraction sur le MIP (105% pour GLY et 80 % pour AMPA) qu'en termes de sélectivité MIP/NIP avec de meilleurs rendements pour le MIP que pour le NIP (105 (MIP) / 68 (NIP) pour GLY et 80 (MIP) / 19 (NIP) pour AMPA). En revanche, on observe une diminution de la rétention des analytes lorsque l'échantillon est constitué de 15 mL d'eau Volvic dopés à 5 mg/L. Pour cette raison, l'utilisation de résines échangeuses d'ions en amont du MIP a été développée avec une amélioration notable du rendement d'extraction du GLY et de l'AMPA par le MIP

Aurora kinase C et cancer

Aurora kinases belong to a conserved family of serine/threonine kinases key regulators of cell cycle progression. Aurora-A and Aurora-B are expressed in somatic cells and involved mainly in mitosis while Aurora-C is expressed during spermatogenesis and oogenesis and is involved in meiosis. Aurora-C is hardly detectable in normal somatic cells. However all three kinases are overexpressed in many cancer lines. Aurora-A possesses an oncogenic activity while Aurora-B does not. Here we investigated whether Aurora-C possesses such an oncogenic activity. We report that overexpression of Aurora-C induces abnormal cell division resulting in centrosome amplification and multinucleation in both transiently transfected cells and in stable cell lines. Only stable NIH3T3 cell clones overexpressing active Aurora-C formed foci of colonies when grown on soft agar, indicating that a gain of Aurora-C activity is sufficient to transform cells. Furthermore, we reported that NIH-3T3 stable cell lines overexpressing Aurora-C induced tumour formation when injected into nude mice, demonstrating the oncogenic activity of enzymatically active Aurora kinase C. Interestingly enough tumour aggressiveness was positively correlated with the rate of kinase activity, making Aurora-C a potential anti-cancer therapeutic target.Les kinases Aurora appartiennent à une famille très conservée de sérine/thréonine kinases. Ces kinases sont des régulateurs clés de la progression dans le cycle cellulaire. Aurora-A et Aurora-B sont exprimées dans les cellules somatiques et sont impliquées principalement en mitose. Aurora-C, en revanche, est exprimée au cours de la spermatogenèse et de l oogenèse et est impliquée en méiose. Aurora-C est à peine détectable dans les cellules somatiques normales. Ces trois kinases cependant sont surexprimées dans de nombreuses lignées issues de cellules cancéreuses. Aurora-A est un oncogène alors que Aurora-B ne l est pas. Dans ce travail, nous cherchons à déterminer si Aurora-C présente aussi une activité oncogénique. Nous rapportons que la surexpression d Aurora-C induit une division cellulaire anormale résultant en une amplification des centrosomes et une multinucléation à la fois dans les cellules transfectées transitoirement et dans les lignées stables surexprimant Aurora-C. Seuls les clones stables de cellules NIH3T3 surexprimant Aurora-C active sont capable de former des colonies en agar mou, indiquant qu un gain d activité d Aurora-C est suffisant pour transformer des cellules. De plus, nous rapportons que les clones stables de cellules NIH3T3 surexprimant Aurora-C active sont capable d induire une formation de tumeur quand ces cellules sont injectées dans des souris immuno-compromises, démontrant l activité oncogénique d Aurora-C enzymatiquement active. Finalement, nous trouvons que l aggressivité des tumeurs est positivement corrélée au taux d activité kinase d Aurora-C. Nos travaux posent Aurora-C en tant que bonne cible potentielle thérapeutique pour le traitement de cancers.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF

Extraction du glyphosate et de son métabolite (AMPA) dans l'eau avec un polymère à empreintes moléculaires

La présente étude a donc comme objectif le développement de polymères à empreintes moléculaires capables de retenir spécifiquement les analytes ciblés au sein d'une eau souterraine. Plusieurs monomères fonctionnels ont été sélectionnés de telle sorte que les interactions avec les groupements fonctionnels du GLY et de l'AMPA soient favorisées au sein des cavités du MIP. La sélectivité du MIP par rapport au NIP (polymère non imprimé constitué des mêmes monomères que le MIP à l'exception de la molécule empreinte) a été prouvée à partir d'un protocole simple d'extraction sur phase solide (SPE) avec des cartouches remplies de MIP (250 mg) ou de NIP : dépôt de 3 mL d'eau dopée en glyphosate et AMPA à 25 mg/L et élution avec 3 mL NH4OH (10 mM). Les fractions ont été analysées par électrophorèse capillaire. Les résultats obtenus pour l'un des MIPs sont particulièrement satisfaisants tant en termes de rendements d'extraction sur le MIP (105% pour GLY et 80 % pour AMPA) qu'en termes de sélectivité MIP/NIP avec de meilleurs rendements pour le MIP que pour le NIP (105 (MIP) / 68 (NIP) pour GLY et 80 (MIP) / 19 (NIP) pour AMPA). En revanche, on observe une diminution de la rétention des analytes lorsque l'échantillon est constitué de 15 mL d'eau Volvic dopés à 5 mg/L. Pour cette raison, l'utilisation de résines échangeuses d'ions en amont du MIP a été développée avec une amélioration notable du rendement d'extraction du GLY et de l'AMPA par le MIP

Capillary electrophoresis procedure for the simultaneous analysis and stoichiometry determination of a drug and its counter-ion by using dual-opposite end injection and contactless conductivity detection: Application to labetalol hydrochloride

International audienc