Caracterización de bacterias probióticas aisladas del intestino grueso de cerdos como alternativa al uso de antibióticos

Objetivo. Caracterizar bacterias ácido lácticas probióticas aisladas del intestino grueso de cerdos adultos como posible alternativa al uso de antibióticos. Materiales y métodos. Se incluyeron muestras de intestino grueso de 20 cerdos adultos, para el aislamiento de bacterias lácticas (BAL). La caracterización de los parámetros bioquímicos-fisiológicos de las BAL contemplo la evaluación del pH del fermento, determinación de ácidos orgánicos por HPLC y detección de isómeros de ácido láctico. Los procedimientos microbiológicos evaluaron la capacidad de inhibición del crecimiento de patógenos y la actividad antagónica del probiótico vs antibiótico con su interacción competitiva. Se utilizaron pruebas API CHL 50 para la identificación de las BAL que se complementaron con la producción de gas, actividad de catalasa y viabilidad a diferentes concentraciones de sales biliares y temperaturas. Resultados. El plan de análisis permitió seleccionar dos aislados que se identificaron como: Lactobacillus plantarum 1 H1 y Lb. plantarum 1 H2. Las pruebas microbiológicas evidenciaron que las BAL seleccionadas inhibieron principalmente los enteropatógenos: Escherichia coli, Salmonella typhimurium y Clostridium perfringens. Las pruebas bioquímicas fueron compatibles con el género Lactobacillus, mostrando el siguiente perfil: Catalasa negativas; no productoras de gas; productoras de isómeros DL; resistentes a sales biliares y pH óptimo de crecimiento 3.5 a 38 o C. Conclusiones. Los dos aislados de Lactobacillus plantarum 1 reunieron las características para el uso potencial como probióticos. Se recomienda su uso como complemento de terapias con antibióticos y en la elaboración de inóculos para aplicación en raciones alimenticias de lechones destetos, sin embargo, estudios complementarios se requieren para evaluar el efecto directo del probiótico como sustituto del uso de antibióticos in vivo

Sequencing and evaluation of the antimicrobial effect of lactic acid bacteria against strains of Salmonella Tiphymurium isolated from intensive and extensive pig production

La producción intensiva y extensiva de cerdo en Argentina y España respectivamente presenta factores productivos diferentes. Sin embargo, cuando se trata de amenazas ante patógenos, específicamente Salmonella, ambos se ven afectados. Salmonella es un patógeno común en los alimentos relacionado con las toxiinfecciones alimentarias que provoca graves problemas en la salud pública. Las bacterias acidolácticas, específicamente los géneros Lactobacillus y Pediococcus se han caracterizado en los últimos años por tener gran importancia como antagonistas de diferentes bacterias patógenas. Una alternativa de control es la aplicación de Lactobacillus a lo largo de la cadena productiva de cerdo, evitando así la llegada de este patógeno a los consumidores. Se realizó una evaluación preliminar de la capacidad antagónica de bacterias acidolácticas identificadas tras secuenciación como Lactobacillus plantarum y Pediococcus acidilactici ante Salmonella Tiphymurium aislada de producción intensiva de cerdo de Argentina y Salmonella Tiphymurium aislada de producción extensiva de cerdo en España. Los resultados obtenidos reflejaron una alta capacidad antimicrobiana de las BAL seleccionadas ante ambas cepas patógenas (93.75%). De esta manera, se proponen como potenciales bacterias biopreservadoras en la producción de carne de cerdo y subproductos.The intensive and extensive production of pigs in Argentina and Spain, respectively, present different production factors. However, when dealing with pathogen threats, specifically Salmonella, both are affected by them. Salmonella is a common pathogen in food related to food outbreaks that cause serious problems in public health. Lactic acid bacteria, specifically the genera Lactobacillus and Pediococcus, have been characterized in the past few years for being of great importance as antagonists of different pathogenic bacteria. One control alternative is the application of Lactobacillus throughout the pig production chain, thus preventing the arrival of this pathogen to consumers. A preliminary assessment was made of the antagonistic capacity of lactic acid bacteria identified after sequencing as Lactobacillus plantarum and Pediococcus acidilactici against Salmonella Tiphymurium isolated from intensive pig production in Argentina, and Salmonella Tiphymurium isolated from extensive pig production in Spain. The results obtained showed the high antimicrobial capacity of the LAB selected against both pathogenic strains (93.75%). Thus, they can be proposed as potential biopreservative bacteria in the production of pig meat and its subproducts.Fil: Ruiz, María Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva. Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología; ArgentinaFil: Colello, Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva. Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología; ArgentinaFil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva. Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología; ArgentinaFil: Medina, Luis Manuel. Universidad de Córdoba. Departamento de Bromatología y Tecnología de los Alimentos; Españ

Manejo integral del lacto-suero : algunas aplicaciones del lacto-suero

En el libro se describen características generales del lactosuero, su definición, estructura, clasificación, aplicaciones, manejo integral mediante el estudio de potencial probiótico de bacterias nativas, manejo de lactosuero a través de la obtención de sustancias poliméricas extracelulares de bacterias nativas, manejo integral mediante la obtención de alimento animal y aplicaciones integrales de lactosuero.The book describes general characteristics of whey, its definition, structure, classification, applications, integral management through the study of probiotic potential of native bacteria, whey management through the obtaining of extracellular polymeric substances from native bacteria, integral management through the obtaining of animal feed and integral applications of whey.Generalidades -- lacto-suero -- Composición del lacto-suero -- Aplicaciones del lacto-suero -- Microorganismos de interés Industrial -- Caracterización macroscópica -- Caracterización microscópica -- potencial probiótico de bacterias ácido lácticas aisladas de efluentes de industrias lácteas de la ciudad de manizales -- Bacterias nativas del lacto-suero productoras de sustancias poliméricas extracelulares de importancia industrial -- Secado de lacto-suero para su incorporación en alimentación animalna44 página

Evaluación de la Actividad Bactericida de Bacterias Ácido Lácticas Aisladas en Calostro de Cerdas Frente a Salmonella typhimurium

Resumen. En los sistemas de crianza intensiva especialmente en cerdos, la resistencia antimicrobiana de algunas bacterias patógenas, se ha convertido en un problema mundial, tanto para los productores como para los consumidores. El uso de microorganismos probióticos aislados de calostro de cerda criadas en sistemas intensivos han demostrado eficacia en la inhibición del crecimiento de algunos patógenos entéricos. Se eligieron dos cepas denominadas como BAL1 y BAL3, a las cuales se les evaluó el potencial bactericida de los extractos bacterianos sobre el patógeno Salmonella thipymurium, por el método de difusión en pozos en agar Mueller Hinton. Los extractos se obtuvieron ajustando el inóculo a 0,5 McF en caldo MRS, centrifugados a 6.000 rpm por 5 minutos y filtrados con membrana de 0,2 μm. Ambos extractos mostraron tener un alto potencial bactericida frente a esta bacteria, con promedios de halo de inhibición de 11 mm in vitro.Abstract. In intensive farming systems especially in pigs, the antimicrobial resistance of some pathogenic bacteria has become a global problem, both for producers and consumers. The use of probiotic microorganisms isolated of sow colostrum in intensive farms have demonstrated the ability to inhibit the growth of some enteric pathogens. Two of these strains named as BAL1 and BAL3 were chosen for evaluate the bactericidal potential of their extracts against the pathogen Salmonella typhimurium. The well diffusion method, in Mueller Hinton agar was used. The BAL extracts were obtained, adjusted the BAL inoculum in MRS broth at 0.5 MacFarland, centrifuged at 6,000 rpm for 5 minutes and filtered with a 0.2 um membrane. Both extracts demonstrated to have bactericidal activity against this bacterium with mean inhibition halos of 11 mm in vitro

Uso de probioticos en la nutricion de monogastricos como alternativa para mejorar un sistema de producción.

El presente trabajo describe y analiza el uso de probióticos en la nutrición de monogástricos, como alternativa para mejorar un sistema de producción, siendo el objetivo primordial comprender y detallar todos los aspectos que permitan identificar los avances, teorías, postulados y demás escritos sobre probióticos, al igual que los efectos que tienen estos, en los sistemas productivos pecuarios con especies monogástricasThis document describes and analyzes the use of probiotics in the nutrition of monogastric, as alternative to improve a production system, the primary goal being to understand and detail all the aspects that identify progress, theories, postulates and others written on probiotics, as well as what effects they have on livestock production systems with monogastric specie

Sensibilidad y Resistencia a Antibióticos de Cepas Probióticas Empleadas en Productos Comerciales

Una característica deseada de los probióticos es su sensibilidad a los antibióticos para descartar la transmisión de resistencia en el ecosistema digestivo. Es importante conocer su susceptibilidad ya que se ingieren frecuentemente con la finalidad de reforzar la microflora intestinal. El objetivo de este trabajo fue analizar la susceptibilidad de probióticos aislados de productos comerciales a los principales antibióticos de uso clínico. La prueba de sensibilidad se realizó por el método de difusión en disco sobre agar MRS, empleando discos de antibióticos mixtos comerciales. Las bacterias Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei y Bifidobacterium bifidum fueron sensibles a: penicilina, ampicilina, ceftriaxona y cefalotina (Betalactámicos), eritromicina (Macrólidos) y cloranfenicol (Anfenicoles). Resistentes a dicloxacilina (Betalactámicos), oxacilina (Fluoroquinolona), netilmicina, gentamicina y amikacina (Aminoglucósidos) y trimetoprimsulfametoxazol (Sulfonamidas). Los resultados muestran la importancia de valorar la susceptibilidad (sensibilidad y resistencia) de los probióticos a los antibióticos ya que, se consumen de forma intencionada con el propósito de mantener el equilibrio de la flora intestinal. A characteristic of probiotics istheir sensitivity to antibioticsto discard the transmission of resistance in the digestive ecosystem. It is important to know your susceptibility, which is often ingested for the purpose of strengthening intestinal microflora. The purpose of this work was to analyze the susceptibility of probiotics isolated from commercial products to the main antibiotics for clinical use. The sensitivity test was carried out by means of a disk diffusion method on MRS agar, using disks of mixed commercial antibiotics. The bacteria’s Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei and Bifidobacterium bifidum were sensitive to: penicillin, ampicillin, ceftriaxone and cephalotin (Beta-lactam), erythromycin (Macrolides) and chloramphenicol (Amphenicoles). Resistant to dicloxacillin (Beta-lactam), enoxacillin (Fluoroquinolone), netilmicin, gentamicin and amikacin (Aminoglycosides) and trimethoprim-sulfamethoxazole (Sulfonamides). The results show the importance of assessing the susceptibility (sensitivity and resistance) of probiotics to antibiotics since they are consumed intentionally in order to maintain the balance of the intestinal flora

Identificación molecular de lactobacilos del tracto digestivo del lechón (Sus scrofa domesticus)

Los animales cuando nacen no presentan bacterias en su tracto digestivo, este va adquiriendo múltiples bacterias de su entorno, las cuales se establecen y permanecen durante las diferentes etapas de su vida. Muchas de estas bacterias están ligadas a la alimentación del animal, ejercen diferentes acciones benéficas, colonizan y logran ser parte de la flora natural del animal. Con el objeto de estudiar parte de esta diversidad microbiana y su efecto en lechones (Sus scrofa domesticus), se aislaron, identificaron y caracterizaron bacterias cultivables asociadas al tracto digestivo del lechón como las bacterias acido-lácticas, BAL. La identificación se realizó mediante caracterización bioquímica, encontrando 39 y 35 bacterias cultivables aisladas de diferentes regiones del tracto digestivo de dos lechones provenientes del estómago, duodeno, yeyuno e íleon del intestino delgado, además del ciego, colon y recto. Para la acción de las BAL, varias bacterias se descartaron bioquímicamente, quedando 9 y 15, respectivamente. Finalmente se identificaron molecularmente 8 bacterias con secuencias conservadas del gen 16S ARNr encontrando semejanzas genéticas entre ellos para Bacillus fermentus y 01 Lactococus lactis, todos conocidos como bacterias ácido-lácticas con efecto benéfico para la industria alimentaria

Evaluación del ensilado de residuos de pescado y de cabeza de langostino fermentado con Lactobacillus fermentus aislado de cerdo

The aim of this study was to determine the viability and nutritional characteristics of shrimp head silage and fish waste destined for pig feeding. In the conservation process, molasses and rice powder were used as a substrate and Lactobacullus fermentus, obtained from the digestive tract of the piglet, as a fermenter. Temperature, pH and percentage of acidity data were recorded, as well as organoleptic and nutritional characteristics in the first 30 days of conservation. The treatments were T1 = Shrimp head with molasses and yogurt; T2 = Shrimp head with rice powder and yogurt; T3 = Fish residue with molasses and yogurt; and T4 = Fish residue with rice powder and yogurt. T1 and T3 presented acidity and low pH, as well as low temperature during the first week, stabilizing the process on day 15. The fermentation of T2 and T4 was inadequate (not feasible). Aerobic mesophilic microorganisms, yeasts and fungi were within the acceptable limit in balanced feeds and the pathogenic bacterium Salmonella sp was absent. Crude protein content improved by 2.03% in T1 and 2.32% in T3. It is concluded that the T1 and T3 silages are adequate and stabilize from day 15, without containing pathogenic microorganisms and the protein content is according to the nutritional sources of animal origin for pig feeding.El objetivo del estudio fue determinar las características viables y nutricionales del ensilado de cabeza de langostino y de residuos de pescado destinado para la alimentación de cerdos. En el proceso de conservación se utilizó la melaza y el polvillo de arroz como sustrato y Lactobacullus fermentus, obtenido del tracto digestivo del lechón, como fermentador. Se tomaron registros de temperatura, pH, porcentaje de acidez, así como características organolépticas y nutritivas en los primeros 30 días de conservación. Los tratamientos fueron T1 = Cabeza de langostino con melaza y yogurt; T2 = Cabeza de langostino con polvillo y yogurt; T3 = Residuo de pescado con melaza y yogurt; y T4 = Residuo de pescado con polvillo y yogurt. T1 y T3 presentaron acidez y pH bajo, así como temperatura baja en la primera semana, llegando a estabilizar el proceso el día 15. La fermentación de T2 y T4 fue inadecuada (no viable). Los microorganismos aerobios mesófilos, levaduras y hongos estuvieron dentro del límite aceptable para alimento balanceado y donde la bacteria patógena Salmonella sp estuvo ausente. El contenido de proteína cruda mejoró en 2.03% en T1 y 2.32% en T3. Se concluye que los ensilados T1 y T3 son adecuados y se estabilizan a partir del día 15, sin contener microorganismos patógenos y el contenido proteico se ajusta a las fuentes nutricionales de origen animal para la alimentación porcina

Aislamiento, identificación y evaluación de levaduras con potencial probiótico in vitro provenientes del suero de queso Paipa

The objective of this study was to isolate and identify yeast strains from whey of Paipa cheese, and evaluate in vitro their potential as probiotics potential in animal feed. The yeast strains were isolated using chloramphenicol-glucose- medium, purified on PDA agar and molecularly characterized.  A total of 10 yeast strains were isolated from the whey of Paipa cheese, including Candida kefyr, Kluyveromyces marxianus, Pichia fermentans, among others. These strains were further screened for their use as alternative yeast probiotics strains for animal feed. Resistance to bile salts (0.05, 0.1, 0.15, 0.20, 0.25 and 0.30 %), stability at stomach pH (1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5 and 4.0) and resistance to gastric juice (pH 1.5, NaCl 0.2 % and pepsin 0.32 %) were evaluated. The isolates of Kluyveromyces marxianus (30_4) y la Pichia fermentans (28_5) had a higher growth at 0,3 % bile salts. In the pH test, the best performance was for P. marxianus and Yarrowia lipolytica. Finally, in the gastric juice test, Candida kefyr and K. marxianus (R_1) strains were the best. K. marxianus (30_4) and P. fermentans (28_5) strains presented good performance in almost all tests, for that reason, these yeasts isolated from Paipa cheese whey have potential for application as probiotics in animal feed.El objetivo de este trabajo fue aislar e identificar levaduras del lactosuero del queso Paipa y evaluar su potencial probiótico (in vitro) para su uso en alimentación animal. Las cepas se aislaron en caldo extracto de levadura-glucosa-cloranfenicol, se purificaron en agar PDA y se caracterizaron molecularmente. Se aislaron 10 cepas dentro de las que se encuentran Candida kefyr, Kluyveromyces marxianus, Pichia fermentans, entre otras. Las levaduras aisladas fueron evaluadas para evidenciar su uso potencial como probióticos en alimentación animal. Se determinó la resistencia a sales biliares (0,05, 0,1, 0,15, 0,20, 0,25 y 0,30 %), la estabilidad al pH del estómago (1,5, 2,0, 2,5, 3,0, 3,5 y 4,0) y resistencia al jugo gástrico (pH 1,5, NaCl de 0,2 % y pepsina de 0,32 %). En la prueba con diferentes concentraciones de sales biliares, las mejores cepas fueron K. marxianus (30_4) y P. fermentans (28_5). En la prueba de pH, el mejor desempeño lo tuvieron P. marxianus (30_4) y Yarrowia lipolytica. Finalmente, en la prueba de jugos gástricos se destacaron C. kefyr y K. marxianus (R_1). Las cepas que presentaron buen desempeño en casi todas las pruebas fueron K. marxianus (30_4) y P. fermentans (28_5), de tal forma que estas levaduras aisladas del lactosuero de queso Paipa tienen potencial en la aplicación como probióticos en la alimentación animal

Actividad de un probiótico comercial en cepas de Salmonella spp. Resistentes a antibióticos aisladas en la cadena de producción de porcinos en Colombia

Uno de los patógenos más importantes transmitidos por alimentos es Salmonella spp, puede estar presentes en el intestino de aves, reptiles, tortugas y porcinos, siendo este ultimo unas de las principales fuentes de infección, por el consumo de productos de origen porcino, lo cual genera un problema de salud animal y salud publica dada su alta prevalencia de 28.2% en el país. La enfermedad generada por este microorganismo es denominada salmonelosis, en porcinos puede ser asintomático o septicémico causando diarrea y fiebre; en humanos es la principal causa de gastroenteritis. Otro de los inconvenientes con este patógeno es la aparición de cepas resistentes a antibióticos debido al uso excesivo de estos en la producción animal con fines sub-terapéuticos, contribuyendo a la aparición y proliferación de cepas resistentes de Salmonella spp dificultando el control de dicho microorganismo, pues presentan resistencia a antibióticos que son usados como tratamientos de primera elección contra la salmonelosis humana causando un problema de salud debido a la ineficiencia en tratamientos en personas con salmonelosis ; estudios recientes han utilizado probióticos como alternativa al uso de antibióticos en producción animal para la eliminación de microorganismos patógenos y favoreciendo el crecimiento de los porcinos, el incremento en la ganancia de peso, la promoción en la salud de los porcinos y mejorando el sistema inmune. Por lo tanto, el objetivo de esta investigación es evaluar el efecto de un probiótico comercial en cepas de Salmonella spp resistentes a antibióticos aisladas de la cadena porcina en Colombia. La metodología que se realizó fue un co-cultivo de un probiótico comercial junto a una cepa control de Salmonella spp y diferentes cepas de Salmonella spp resistentes a antibióticos aisladas de la industria porcina, durante 48 horas. Adicionalmente, se estudió el crecimiento en co-cultivo en un ensayo alimentado utilizando una cepa de Salmonella spp multirresistentes junto con el probiótico durante 48 horas, inoculando el probiótico cada 12 horas. Para el primer ensayo se realizó mediciones cada 6 horas de crecimiento, pH y densidad óptica; para el segundo ensayo se evaluaron parámetros como densidad óptica y recuento en placa. Por último, se identificó la cepa probiótica. Se encontró que durante las horas 18 y 36 el probiótico tiene una actividad antagónica sobre el crecimiento de todas las cepas de Salmonella spp estudiadas. En el caso del ensayo alimentado se presentaron mayores reducciones en el crecimiento del patógeno respecto a los que solo fueron suplementados con probióticos al inicio del ensayo.CeniporcinoOne of the most important foodborne pathogens is Salmonella spp, which can be present in the intestines of birds, reptiles, turtles and swine, the latter being one of the main sources of infection, due to the consumption of porcine products, which generates a problem of animal health and public health given its high prevalence of 28.2% in the country. The disease generated by this microorganism is called salmonellosis, in pigs it can be asymptomatic or septicemic causing diarrhea and fever; in humans it is the main cause of gastroenteritis. Another drawback with this pathogen is the appearance of strains resistant to antibiotics due to the excessive use of these in animal production for subtherapeutic purposes, contributing to the appearance and proliferation of resistant strains of Salmonella spp making control of said microorganism difficult, they present resistance to antibiotics that are used as first-line treatments against human salmonellosis, causing a health problem due to the inefficiency of treatments in people with salmonellosis; Recent studies have used probiotics as an alternative to the use of antibiotics in animal production for the elimination of pathogenic microorganisms and favoring the growth of swine, the increase in weight gain, the promotion of swine health and improving the immune system. Therefore, the objective of this research is to evaluate the effect of a commercial probiotic on strains of Salmonella spp. Resistant to antibiotics isolated from the porcine chain in Colombia. The methodology that was carried out was a co-culture of a commercial probiotic together with a control strain of Salmonella spp and different strains of Salmonella spp resistant to antibiotics isolated from the swine industry, for 48 hours. Additionally, growth in co-culture was studied in a test fed using a multi-resistant strain of Salmonella spp along with the probiotic for 48 hours, inoculating the probiotic every 12 hours. For the first test, measurements were made every 6 hours of growth, pH and optical density; For the second test, parameters such as optical density and plate count were evaluated. Finally, the probiotic strain was identified. It was found that during hours 18 and 36 the probiotic has an antagonistic activity on the growth of all Salmonella spp strains studied. In the case of the fed test, there were greater reductions in the growth of the pathogen compared to those that were only supplemented with probiotics at the beginning of the trial.Microbiólogo (a) IndustrialPregrad