Efeito estimulatório da tiroxina no transporte de aminoácidos, captação de 45Ca2+ e na exocitose em células de sertoli de testículos de ratos imaturos

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2011A atividade secretória das células de Sertoli é dependente das funções dos canais iônicos e da síntese de proteínas e é essencial para a espermatogênese. Além das ações genômicas dos hormônios tireóideos (HT), ações não-genômicas da tiroxina (T4) e do 3,5,3'-L-triiodotironina (T3) são relatados em testículos de ratos imaturos. O objetivo deste trabalho foi estudar o mecanismo de ação do T4 no transporte de aminoácidos e investigar a função do receptor de integrina neste evento. Também, esclarecer se o efeito estimulatório do T4 no transporte de aminoácidos e a captação de Ca2+ culminam em secreção celular. Descrevemos que o efeito estimulatório do T4 no transporte de aminoácidos parece ser mediado por um receptor de integrina presente na membrana plasmática, já que o tetrac (inibidor da ação do T4 na integrina), assim como o peptídio RGD (bloqueador da ligação do T4 ao receptor ?v?3) foram capazes de anular o efeito do hormônio. Além disso, o T4 aumenta a captação de Ca2+ e o Ca2+ intracelular aumenta a atividade nuclear, mas esta ação genômica parece não influenciar na função secretória das células de Sertoli iniciada pela interação do T4 ao receptor de integrina. Além do mais, o citoesqueleto e os canais de cloreto do tipo ClC-3, envolvidos na secreção celular, contribuem para as respostas rápidas das células de Sertoli que culminam na exocitose. Uma importante conclusão deste trabalho é que as vias de sinalização ativadas pela interação do T4 ao receptor de integrina convergem para determinar respostas rápidas das células de Sertoli, como a exocitose. A compreensão do mecanismo pelo qual o T4 promove o evento rápido de secreção celular, e independe da atividade nuclear, é um campo de investigação e pode levar à identificação de novos alvos terapêuticos

Função dos hormônios tireoideos e da 1,25(OH)2 vitamina D3 em células testiculares de ratos imaturos

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015.A espermatogênese, processo que ocorre nos túbulos seminíferos (TS), é controlada por uma rede de fatores endócrinos e outros fatores regulatórios. Dentre eles, os hormônios da tireoide (HT), a 1a,25(OH)2-vitamina D3 (1,25-D3), e o 17ß-estradiol (E2) são críticos para a manutenção da reprodução. Os resultados obtidos neste estudo, utilizando células de Sertoli de ratos de 11 dias de idade, mostraram que concentrações muito baixas de T3 reverso (T3r) estimulam a captação de cálcio nestas células depois de 1 minuto de exposição. Este efeito estimulatório envolve alterações no fluxo iônico, uma vez que canais de cálcio dependentes de voltagem, canais de potássio, canais de cloreto e o cálcio intracelular estão envolvidos no efeito do hormônio. Além disso, sugere-se que a integrina avß3 atue como um receptor para o T3r, evidenciado pelo bloqueio do influxo de cálcio na presença do RGD (um inibidor da interação integrina-ligante). Também foi demonstrado que a entrada de cálcio estimulada pelo hormônio é dependente de PKC e ERK e que o T3r estimula a secreção celular, mediada pelo receptor de integrina. Além do T3r, o metabólito T2 também apresentou um efeito estimulatório na captação de cálcio tanto em testículos (10-13 M e 10-7 M) quanto em células de Sertoli isoladas (10-12 M e 10-15 M). Este efeito ocorreu com apenas 30 segundos de exposição ao hormônio. Estes dados apontam que os metabólitos T3r e T2 apresentam efeitos importantes nas células de Sertoli de ratos imaturos. O T3r modula a entrada de cálcio e a secreção celular, o qual pode ter uma função na regulação de uma variedade de processos intracelulares envolvidos na fisiologia da reprodução masculina, por outro lado, mais estudos devem ser realizados para compreender as funções do T2 nestas células. Neste estudo, também foi demonstrado que o E2 (10-6 M), assim como a 1,25-D3 (10-9 M), estimulam a captação de cálcio em testículos de ratos de 30 dias de idade e parece que ambos os hormônios dependem dos receptores clássicos do E2 (ESR1 e ESR2) para que este efeito ocorra. Este evento estimulado pelo E2 envolve a participação de canais de cálcio dependentes de voltagem, canais de cloreto e do cálcio intracelular. Além disso, PLC, PKA, PKC e MAPK estão envolvidas neste efeito estimulatório. Resultados semelhantes já foram descritos para a 1,25-D3 em testículos de ratos de 30 dias. Como estas vias de sinalização são utilizadas por diferentes hormônios esteróides para ligar ações iniciadas na membrana com ações nucleares, verificou-se o envolvimento da 1,25-D3 na expressão de genes envolvidos na sinalização do E2 e no ciclo celular. A quantificação dos níveis detranscritos de genes relacionados à sinalização do E2 e ao ciclo celular, em cultura de TS, foi realizada usando o método quantitativo de PCR em tempo real. Investigando os efeitos da 1,25-D3 na expressão dos receptores de estrogênio (ESR), observou-se que a expressão de ESR1 e ESR2 foi inibida quando os TS foram tratados com 1,25-D3, E2, ou ambos. Além disso, a 1,25-D3 inibiu a expressão gênica e protéica das ciclinas A1 e B1, enquanto que o E2 inibiu somente a expressão do gene da ciclina A1, porém inibiu a expressão de ambas proteínas (ciclinas A1 e B1). Para a expressão das proteínas p16 e p53, o tratamento dos TS com a 1,25-D3 aumentou a expressão das mesmas, já o tratamento com E2 aumentou somente os níveis da proteína p16. Estes resultados mostram que a 1,25-D3 pode regular a sinalização do E2, uma vez que este secosteróide estimula a expressão do gene Cyp19, assim como, diminui a expressão dos genes ESR1 e ESR2. Em TS, as ciclinas A1 e B1 são altamente expressas nas células germinativas que progridem através da espermatogênese, assim, a diminuição da expressão dos genes destas ciclinas e o aumento da expressão das proteínas p16 e p53 induzida pela 1,25-D3 em TS sugere que este metabólito ativo da vitamina D possa controlar o balanço entre proliferação/diferenciação na espermatogênese.Abstract : Spermatogenesis which takes place in the seminiferous tubules (ST) is a complex process controlled by a network of endocrine and other regulatory factors. In this context, thyroid hormones (TH), 1a,25(OH)2-vitamin D3 (1,25D3), and 17ß-estradiol (E2) are critical for the maintenance of normal reproduction. The results here presented show that very low concentrations of reverse T3 (rT3) are able to increase calcium uptake in 11 day-old rat Sertoli cells after 1 min of exposure. This stimulatory effect involves changes in ionic flow since voltage-dependent calcium channels, potassium and chloride channels and intracellular calcium are involved in the hormone effect. Also, our findings suggest that calcium uptake stimulated by rT3 may be mediated by integrin avß3 receptor in as much as that effect was blocked in the presence of the RGD peptide (an inhibitor of integrin-ligand interactions). In addition, it was demonstrated that calcium uptake stimulated by rT3 is PKC and ERK-dependent and the outcomes indicate that rT3 also stimulates cellular secretion via integrin receptor. Beyond rT3, the T2 metabolite also showed a stimulatory effect on calcium uptake in both testes (10-13 M and 10-7 M) and in isolated Sertoli cells (10-12 M and 10-15 M). This effect occurred with only 30 seconds of exposure to the hormone. These data indicate that rT3 and T2 metabolites have significant effects on Sertoli cells of immature rats.The rT3 modulates the calcium entry and cellular secretion, which might play a role in the regulation of a plethora of intracellular processes involved in male reproductive physiology, on the other hand, further studies must be conducted to understand the functions of T2 in these cells. Our study also demonstrated that E2 (10-6 M), as well as 1,25-D3 (10-9 M), stimulated calcium uptake in 30-day-old rat testis and it seems that the classical E2 receptors (ESR1 and ESR2) are necessary for this effect to occur. The event stimulated by E2 involves the voltage-dependent calcium channels, chloride channels and intracellular calcium participation. In addition, PLC, PKA, PKC and MAPK are involved in this stimulatory effect. Similar results have been described for 1,25-D3 in 30-day-old rat testis. In so far as these signaling pathways are used by various steroid hormones to connect membrane-initiated actions to nuclear actions, the involvement of 1,25-D3 in the expression of genes involved in E2 signaling and in the cell cycle was verified. The quantification of transcripts levels from genes related to the E2 signal and the cell cycle was performed in TS culture using the RT-PCR. Investigating the 1,25-D3 effects on the estrogen receptor (ESR)expression, it was observed that ESR1 and ESR2 expression was inhibited when TS were treated with 1,25-D3, E2, or both. Moreover, 1,25-D3 inhibited the cyclin A1 and B1 gene and protein expression while E2 only inhibited the cyclin A1 gene expression but inhibited the expression of both proteins (cyclin A1 and B1). TS treatment with 1,25-D3 increased the expression of p16 and p53 proteins whereas the E2 treatment only increased p16 protein levels. These results show that 1,25-D3 can regulate E2 signal, since this secosteroid stimulates Cyp19 gene expression as well as decreases ESR1 and ESR2 gene expression. In TS, cyclins B1 and A1 are highly expressed in germ cells that progress through spermatogenesis, thus the decrease of these cyclins genes expression and the increase of the p16 and p53 proteins expression induced by 1,25-D3 suggests that the active metabolite of vitamin D can control the balance between proliferation / differentiation in spermatogenesis

Nanopartículas magnéticas incorporadas em argila bentonita para obtenção de nanocompósitos Pebd/mBent

O trabalho tem como objetivo a obtenção de nanocompósitos de polietileno de baixa densidade com bentonita modificada (mBent) com nanopartículas de magnetita (Fe3O4). Foram preparados nanocompósitos PEBD/Bent, PEBD/mBent e PEBD/Fe3O4 e com dois teores de nanocarga (3 e 5%) e utilizando dois métodos de preparação (sem e com aplicação de campo magnético externo) para análise do efeito da adição da carga e do alinhamento das nanopartículas. As nanopartículas magnéticas foram obtidas por coprecitação dos íons de Fe3+ e Fe2+. Posteriormente, a argila bentonita (Bent) foi modificada através da obtenção de partículas magnéticas na presença de Bent. O método de preparação dos nanocompósitos se deu via intercalação por solução e os filmes foram obtidos através de casting. As nanopartículas foram caracterizadas por análises magnéticas, fisíco-químicas e térmicas, sendo possível observar a obtenção da mBent através da presença dos picos característicos de ambas as estruturas (Fe3O4 e Bent). Os filmes nanocompósitos foram caracterizados quanto a sua morfologia, e suas propriedades térmicas, dinâmico-mecânicas e mecânicas. Eles apresentaram melhor estabilidade térmica quando comparados ao polímero puro. Os resultados de calorimetria exploratória diferencial (DSC) demonstraram que as nanocargas não afetaram significativamente as temperaturas de cristalização e fusão da matriz, porém, o grau de cristalinidade sofreu um decréscimo com a inserção das nanocargas. Observa-se que com o alinhamento dessas nanocargas esse resultado é atenuado, devido a efeitos causados pelo alinhamento. Além disso, é possível observar uma boa interação das nanopartículas com a fase de PEBD através da análise de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Por fim, através das análises de microscopia eletrônica de varredura com emissão de campo (MEV-FEG) e microscopia ótica foi visto que a mBent e Fe3O4 apresentaram boa dispersão na matriz de PEBD e ainda evidenciou o alinhamento sofrido pelas partículas nos sistemas de preparação com a presença de campo magnético externo, o que pode garantir propriedades de barreira interessantes nesses materiais.The aim of this work is to obtain low density polyethylene nanocomposites with bentonite (mBent) modified by the addition of magnetite nanoparticles (Fe3O4). LDPE/Bent, LDPE/mBent and LDPE/Fe3O4 nanocomposites were prepared with two nanofillers content (3 and 5%) and using two preparation methods (with and without external magnetic field application) to investigate the effect of addition of the charge and the alignment of nanoparticles. The magnetic nanoparticles were obtained by coprecipitation of the Fe3+ and Fe2+ ions in the presence of Bent. The method of preparation of the nanocomposites was via solution intercalation and the films were obtained by casting. The nanoparticles were characterized by magnetic, physicochemical and thermal analyzes, and it was possible to observe that the mBent presented the characteristic peaks of both structures (Fe3O4 and Bent). The nanocomposite films were characterized in terms of their morphology and their thermal, dynamic-mechanical and mechanical properties. They presented better thermal stability when compared to the pure polymer. The differential scanning calorimetry (DSC) results showed that nanofillers did not significantly affect the crystallization and melting temperatures of the matrix, but the degree of crystallinity decreased with the addition of the nanofiller. The alignment of these nanofillers resulted in attenuation of this effect due to their alignment. In addition, it was possible to observe a good interaction of the nanoparticles with the LDPE phase through the analysis of scanning electron microscopy (SEM). Finally, through the field emission scanning electron microscopy (SEM-FEG) and optical microscopy, it was observed that mBent and Fe3O4 showed good dispersion in the LDPE matrix and also evidenced the alignment of the particles with the presence of external magnetic field, which can guarantee interesting barrier properties in these materials

Nafion/sulfonated poly(indene) polyelectrolyte membranes for fuel cell application

Sulfonated poly(indene) (SPInd), with 35% and 45% degree of sulfonation, was blended with Nafion to prepare blended membranes with 10, 15 and 20 wt.% of SPInd. Membranes were evaluated by infrared spectroscopy, thermogravimetric analysis, differential scanning calorimetry, scanning electron microscopy and X-ray diffraction. Water uptake (WU), ion exchange capacity (IEC) and through-plane proton conductivity were measured. The membranes presented similar thermal stability to Nafion. WU was slightly higher for Nafion/SPInd membranes (19-21% at RT and 40-44% at 90 °C) compared with recast Nafion (16% and 34%, respectively), and IEC values showed a similar trend. Blended Nafion membranes had increased proton conductivity of 2.41 x 10-2 and 2.37 x 10-2 Scm-1 (20 wt. % of SPInd 35% and 45%, respectively), compared with 1.16 x 10-2 Scm-1 for recast Nafion. The results show that the addition of SPInd to Nafion is a potential route towards improving the performance of Nafion in proton conductivity for use in fuel cells devices

Evaluation of the brain-derived neurotrophic factor, nerve growth factor and memory in adult rats survivors of the neonatal meningitis by Streptococcus agalactiae

AbstractStreptococcus agalactiae (GBS) is a major cause of severe morbidity and mortality in neonates and young infants, causing sepsis, pneumonia and meningitis. The survivors from this meningitis can suffer serious long-term neurological consequences, such as, seizures, hearing loss, learning and memory impairments. Neurotrophins, such as nerve growth factor (NGF) and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) control the neuronal cell death during the brain development and play an important role in neuronal differentiation, survival and growth of neurons. Neonate Wistar rats, received either 10μL of sterile saline as a placebo or an equivalent volume of GBS suspension at a concentration of 1×106cfu/mL. Sixty days after induction of meningitis, the animals underwent behavioral tests, after were killed and the hippocampus and cortex were retired for analyze of the BDNF and NGF levels. In the open-field demonstrated no difference in motor, exploratory activity and habituation memory between the groups. The step-down inhibitory avoidance, when we evaluated the long-term memory at 24h after training session, we found that the meningitis group had a decrease in aversive memory when compared with the long-term memory test of the sham group. BDNF levels decreased in hippocampus and cortex; however the NGF levels decreased only in hippocampus. These findings suggest that the meningitis model could be a good research tool for the study of the biological mechanisms involved in the behavioral alterations secondary to GBS meningitis

A educação em saúde e o bem-estar do idoso em meio a pandemia / Health education and the well-being of the elderly in the midst of the pandemic

1 INTRODUÇÃOO acelerado envelhecimento populacional é um fenômento presente em escala global. Como consequência, é notório o aumento da prevalência de doenças crônicas não transmissíveis (DCNT), como doenças cardiovasculares, diabetes melitus e hipertensão arterial sistêmica (COSTA et al., 2016). Nesse contexto epidemiológico, a obesidade figura como DCNT de importante prevalência, além de fator de risco modificável associado as outras DCNT. (SILVEIRA et al., 2018)Em especial durante a pandemia do COVID-19, o manejo da obesidade e demais DCNT tornou-se um desafio. O período de isolamente dificultou o controle dessas doenças, fato relacionado a diminuição do acompanhamento clínico de doenças crônicas, a dificuldade em manter exercícios físicos regulares e, inclusive, pela potencial diminuição do autocuidado secundária a sintomas depressivos, exigindo ainda mais atenção ao tema. (FILHO, 2020)Diante do exposto, torna-se explícita a necessidade de intervenções nos diversos fatores relacionados às DCNT que prejudicam o envelhecimento saudável e a qualidade de vida do idoso (SILVA et al., 2020), em especial durante o período de pandemia e isolamento social. Neste contexto, A Liga Acadêmica de Clínica Médica da Universidade de Passo Fundo (LACM-UPF) juntamente com o Centro de Referência e Atenção ao Idoso da Universidade de Passo Fundo (CREATI – UPF) realiza quinzenalmente aulas sobre temas relevantes ao público em questão, ministradas através de videoconferência.Diante disso, o presente trabalho tem por objetivo descrever a experiência da LACM-UPF em uma aula ministrada com foco na obesidade em meio a pandemia do COVID-19 e promover discussão sobre o papel de práticas integrativas de educação em saúde no bem-estar e na saúde do idoso durante a pandemia do COVID-19. 2 MATERIAIS E MÉTODOSTrata-se de um estudo descritivo, tipo relato de experiência, sobre aula ministrada pela Liga Acadêmica de Clínica Medica da Universidade de Passo Fundo abordando como tema principal a obesidade em meio a pandemia de COVID-19. A atividade foi realizada por meio de Live na Plataforma Facebook promovida na página do Centro de Referência e Atenção ao Idoso da Universidade de Passo Fundo, respeitanto orientações de distanciamento social e utilizando redes sociais de fácil acesso. A atividade foi desenvolvida por estudantes da Faculdade de Medicina da Universidade de Passo Fundo, integrantes da LACM-UPF. A aula foi realizada por meio de explanação inicial seguida pela fomentação de diálogos informais com integrantes do CREATI-UPF. O tema abordado foi selecionado a partir de demandas pautadas pelos integrantes da LACM-UPF e coordenadores do CREATI-UPF e pela análise do contexto atual e de patologias prevalentes.3 RESULTADOSA pandemia do COVID-19 levou à adoção do isolamento social como principal medida de contensão do vírus. A população idosa representa o principal grupo de risco da doença, sendo assim, a recomendação primordial para a terceira idade durante esse período é a de permanecer em casa.Além do coronavírus, DCNT também apresentam-se como desafios a serem manejados durante a pandemia. Fato associado a variáveis como o menor acompanhamento clínico de doenças crônicas, a dificuldade em manter uma rotina de exercícios físicos regulares e a potencial diminuição do autocuidado devido a sintomas depressivos. (FILHO, 2020)Nesse contexto, a fim de manter a qualidade de vida, a saúde e a interação social dos idosos, foi necessária a reinvenção de diversos projetos e sua adaptação às plataformas digitais. A exemplo do Centro de Referência e Atenção ao Idoso da Universidade de Passo Fundo, o qual promove atividades interativas por meio de Lives no Facebook, anteriormente realizadas de forma presencial. Nessa perspectiva, através de parceria com a Liga de Clínica Médica da Universidade de Passo Fundo, foi realizada uma palestra online aos idosos sobre a obesidade em meio a pandemia do COVID-19.O objetivo projetado foi desmitificar certos estigmas intrínsecos à obesidade, assim como fazer-lhes compreender essa condição como uma doença crônica que vai além dos padrões estéticos. Ademais, ao final da palestra, os participantes foram orientados sobre práticas de alimentação saudável e exercícios físicos aplicáveis à realidade do isolamento social, bem como foi aberto um espaço para dúvidas e comentários. Durante a aula, houve a participação de cerca de 40 idosos e, após a apresentação, o vídeo ficou disponível ao público geral, tornando possível a marca de 1.500 visualizações.A ferramenta de videoconferência online foi escolhida para que o público não ficasse apenas no papel de ouvinte, mas pudesse interagir por meio de perguntas, comentários e relatos de experiência.  A dinâmica colocou os discentes integrantes da LACM em um papel ativo no ensino, bem como tornou possível estabelecer um ambiente de aprendizagem participativo, promovendo a troca de experiências entre os participantes e um momento de interação.A aula ministrada online, transmitida através do Facebook e gravada para posteriormente ser assistida, permitiu ampliar a disseminação de conhecimento acerca de assuntos relevantes, como a obesidade, expandindo o alcance de práticas de educação em saúde.  Outrossim, além gerar aprendizado, a metodologia utilizada permitiu um ambiente de descontração e interação social, promovendo bem-estar, autocuidado, e entretenimento durante o período de isolamento.Esse formato de atividade, no entanto, é dependente da internet e dos aparelhos eletrônicos do usuário, sendo sujeita a interferências por problemas de rede, como foi o caso de alguns alunos do CREATI, apontando a necessidade de melhor orientação quanto a esses fatores. 4 CONCLUSÃO/CONSIDERAÇÕES FINAISA aula sobre obesidade por videoconferência em meio a pandemia do COVID-19 mostrou-se promotora de saúde e articuladora entre os discentes integrantes da LACM-UPF e o público do CREATI-UPF. A participação ativa dos idosos promoveu um ambiente de aprendizagem interativa, bem-estar e interação social, permitindo a abordagem científica da obesidade juntamente à troca de experiências entre os participantes. O ambiente virtual permitiu um amplo alcance do conteúdo trabalhado, aprensentando-se como uma próspera metodologia complementar ao ensino em saúde, embora ainda seja necessário melhores orientações quanto aos fatores tecnológicos envolvidos. Assim, a exemplo da atividade relatada, práticas integrativas em saúde aplicadas ao ambiente virtual apontam para novas perspectivas de cuidado que ultrapassam as barreiras da presencialidade, tornando-se relevantes especialmente ao público idoso durante o período de isolamento social

Chemical Composition, Antioxidant, Antimicrobial and Antidiabetic Potential of Philodendron Bipinnatifidum Schott ex Endl

Many of the species used in popular medicine do not have their biological activities already proven by scientific studies. Among these species, the endemic South American Philodendron bipinnatifidum Schott ex Endl deserves special attention since it is already in use in popular medicine for inflammation cases, such as erysipelas, orchitis and ulcers. This study evaluated the antioxidant, antimicrobial and antidiabetic activities of extracts of the hastes de P. bipinnatifidum. The ethanolic extract showed a significant antioxidant potential. The ethyl acetate extract resulted in high antimicrobial activity against Streptococcus pyogenes. The most significant biological activity of ethyl acetate extract relates to its chemical composition when compared with ethanolic extract, which showed the highest concentration of bioactive compounds. In vitro antidiabetic activity was only evaluated for ethyl acetate extract, resulting in inhibition of intestinal disaccharidases (maltase and sucrase) at concentration of 500 μg/mL

Minimal intervention in dentistry : which is the best approach for silorane composite restoration repairs?

This study aimed to evaluate surface treatments, adhesives and composites for repairing silorane based restorations. One hundred and twenty truncated cones (2 mm smaller diameter and 4 mm larger diameter) made of silorane composite were divided in 12 g

Ocupação KSA ROSA

A Associação KSA ROSA é um Centro de Educaçao Popular e Resistência Cultural que trabalha com catadores e moradores de rua nas proximidades do Centro de Porto Alegre. A coordenadora Maristoni Moura, juntamente com os demais integrantes, tem usado seu trabalho como fonte de reorganização social e produtiva do mundo da rua, articulando várias políticas públicas como por exemplo, de redução de danos. O objetivo desse trabalho pedagógico arquitetônico é colocar graduandos, extensionistas e pesquisadores em contato com realidades de extrema vulnerabilidade social e capacitá-los metodologicamente