31 research outputs found

    Gene expression analysis using single molecule detection

    Get PDF
    Recent developments of single molecule detection techniques and in particular the introduction of fluorescence correlation spectroscopy (FCS) led to a number of important applications in biological research. We present a unique approach for the gene expression analysis using dual‐color cross‐correlation. The expression assay is based on gene‐specific hybridization of two dye‐labeled DNA probes to a selected target gene. The counting of the dual‐labeled molecules within the solution allows the quantification of the expressed gene copies in absolute numbers. As detection and analysis by FCS can be performed at the level of single molecules, there is no need for any type of amplification. We describe the gene expression assay and present data demonstrating the capacity of this novel technology. In order to prove the gene specificity, we performed experiments with gene‐depleted total cDNA. The biological application was demonstrated by quantifying selected high, medium and low abundant genes in cDNA prepared from HL‐60 cell

    Inkjet Metrology: High-Accuracy Mass Measurements of Microdroplets Produced by a Drop-on-Demand Dispenser

    Get PDF
    We describe gravimetric methods for measuring the mass of droplets generated by a drop-on-demand (DOD) microdispenser. Droplets are deposited, either continuously at a known frequency or as a burst of known number, into a cylinder positioned on a submicrogram balance. Mass measurements are acquired precisely by computer, and results are corrected for evaporation. Capabilities are demonstrated using isobutyl alcohol droplets. For ejection rates greater than 100 Hz, the repeatability of droplet mass measurements was 0.2%, while the combined relative standard uncertainty (uc) was 0.9%. When bursts of droplets were dispensed, the limit of quantitation was 72 μg (1490 droplets) with uc = 1.0%. Individual droplet size in a burst was evaluated by high-speed videography. Diameters were consistent from the tenth droplet onward, and the mass of an individual droplet was best estimated by the average droplet mass with a combined uncertainty of about 1%. Diameters of the first several droplets were anomalous, but their contribution was accounted for when dispensing bursts. Above the limits of quantitation, the gravimetric methods provided statistically equivalent results and permit detailed study of operational factors that influence droplet mass during dispensing, including the development of reliable microassays and standard materials using DOD technologies

    Sample handling in nanoscale chemistry

    No full text
    Miniaturization is a strong on-going trend within analyticalchemistry. This has led to an increased demand for newtechnologies allowing smaller volumes of samples as well asreagents to be utilized. This thesis deals with the use of openchip-based reactors (vials); a concept that offers an increasedflexibility compared to the use of closed reactors. The vialsare manufactured by anisotropic etching of silicon. First, a short introduction is given on the benefits ofperforming chemistry in miniaturized formats. Different typesof reactors useful for performing chemistry in nanoscale aredescribed and the advantages and disadvantages of using aclosed contra anopen system are discussed. Precise dosing of nanoliter-sized volumes of liquids incontact mode is performed by using miniaturized pipette tips orcapillaries(Paper I, III&IV). Also, non-contact dosing usingpiezo-electric dispensers is demonstrated by performingnanoliter sized acid-base titrations(Paper II). Standard deviations on the order of 1% wereobtained. Several strategies for handling the evaporation of water,while performing tryptic digests of native myoglobin in lownanoliter sized vials, are demonstrated. An increasedconversion rate of the protein to peptides was observed when ananovial (15 nL) reactor was used compared to the use of aconventional plastic vial (100 µL). Principles based onreducing the driving force for evaporation(Paper III), continuous compensation of evaporatedmaterial(Paper IV)as well as covering the reaction liquid witha volatile liquid lid of solvent(Paper V)are used. The volatile liquid lid is also usedwhen performing PCR in volumes as low as 50 nL(Paper VI). Short descriptions of the analytical methods utilized in thethesis; capillary electrophoresis(Paper III, IV, V&VI), matrix assisted laserdesorption/ionization time of flight mass spectrometry(Paper I)and fluorescence measurements(Paper II&VI)are presented. Finally, an outlook of the developed technologies is giventogether with a discussion concerning possible futurerequirements in miniaturized chemistry. Keywords: capillary electrophoresis, continuouscompensation, enzymatic degradation, evaporation,lab-on-a-chip, liquid lid, MALDI, miniaturization, myoglobin,nanoliter, nanoscale chemistry, parallel, picoliter,piezo?dispenser, polymerase chain reaction, reactor, titration,tryptic digest, vial © Erik Litborn, 2000NR 2014080

    To get a place on the map : An ethnological study of the forest fire in Västmanland 2014

    No full text
    The forest fire of Västmanland in 2014 had a significant cultural impact on local communities. Research is warranted to better understand the impact and process of recovery after natural disasters, as well as to discover how underlying political and cultural structures affect rescue and recovery. Thus far, any research in this area has been carried out by government-funded studies and evaluations of crisis management. This study complements that existing body of research by exploring this topic through local experiences and memories of the fire and emergency operations. The analysis builds on four theoretical perspectives: Foucault’s theory of power; phenomenology; memory theory, and theories of identity. Through these, the study examines how locals relate to the burnt landscape as well as explores how political tensions relating to Swedish countryside have gained new relevance as a result of the fire. These research results indicate that memories of the fire are characterized by chaotic rescue operations and crisis management, and that their failure generally is interpreted as a result of current political and cultural discourses defined by urban norms that for decades have disfavored infrastructure and social security in rural parts of Sweden. The research shows that favorable conditions for rural life in general are crucial for successful crisis management. From a societal perspective, the battle for resources between urban and rural areas, combined with inequality between city and countryside, is very problematic. Many crises occur in rural areas, which require security and infrastructure nationwide. The study therefore stresses the importance of active use of local knowledge in governing on local and regional as well as national levels. Diversity is not only a matter of ethnicity, gender and sexual orientation, but also includes perspectives from all generations living all over the country

    Kulturvägsinventering : Metod för inventering och bedömning av statliga vägar med höga kulturvärden

    No full text
    Rapporten beskriver Trafikverkets metod för inventering och bedömning av statliga vägar med höga kulturvärden. Arbetet med att identifiera och värdera infrastrukturens kulturmiljöer syftar bland annat till att prioritera riktade insatser nationellt och regionalt, identifiera vilka vägar som kräver anpassad skötsel samt att ta fram underlag till mer underbyggda avvägningar inom exploatering och investeringsprojekt/ombyggnadsprojekt. Informationen om kulturvägar som tas fram vid inventeringen lägger grunden för att i fortsatt arbete kunna tillgängliggöra och förmedla kunskap om vägars kulturarv. Resultatet av inventeringarna är en viktig del i Trafikverkets arbete med att bevara, utveckla och synliggöra de kulturvärden som finns i vägmiljön. Informationen om kulturvägar används som kunskapsunderlag i planerings- och byggskeden samt i förvaltningen av kulturmiljöer

    Vem vårdar mig? : Stressrelaterad psykisk ohälsa utifrån sjuksköterskans perspektiv

    No full text
    Sjuksköterskor som drabbas av stressrelaterad psykisk ohälsa är ett växande problem i dagens samhälle. Stress behöver inte vara skadligt för hälsan men när sjuksköterskan utsätts för stress under en längre period med minimal återhämtning ökar risken för att drabbas av sjukdom och ohälsa. Syftet med studien var att belysa sjuksköterskans upplevelse av stressorer på arbetsplatsen som leder till stressrelaterad psykisk ohälsa. Metoden som tillämpats var en litteraturstudie. Underlaget består av åtta vetenskapliga artiklar som var publicerade mellan åren 2012–2022. Artiklarna har granskats, dom har analyserats och sammanställts utifrån Akademin för vård, arbetsliv och välfärd Högskolan i Borås (2021). Resultatet presenteras genom två huvudkategorier hälsa som livsrytm och miljö. Stressorer i arbetsmiljön ses kunna leda till stressrelaterad psykisk ohälsa hos sjuksköterskan. En negativ effekt ses även på sjuksköterskans livsvärld och omgivning. Hög arbetsbelastning och personalbrist var de mest framträdande riskfaktorerna som framkallade stress

    Vem vårdar mig? : Stressrelaterad psykisk ohälsa utifrån sjuksköterskans perspektiv

    No full text
    Sjuksköterskor som drabbas av stressrelaterad psykisk ohälsa är ett växande problem i dagens samhälle. Stress behöver inte vara skadligt för hälsan men när sjuksköterskan utsätts för stress under en längre period med minimal återhämtning ökar risken för att drabbas av sjukdom och ohälsa. Syftet med studien var att belysa sjuksköterskans upplevelse av stressorer på arbetsplatsen som leder till stressrelaterad psykisk ohälsa. Metoden som tillämpats var en litteraturstudie. Underlaget består av åtta vetenskapliga artiklar som var publicerade mellan åren 2012–2022. Artiklarna har granskats, dom har analyserats och sammanställts utifrån Akademin för vård, arbetsliv och välfärd Högskolan i Borås (2021). Resultatet presenteras genom två huvudkategorier hälsa som livsrytm och miljö. Stressorer i arbetsmiljön ses kunna leda till stressrelaterad psykisk ohälsa hos sjuksköterskan. En negativ effekt ses även på sjuksköterskans livsvärld och omgivning. Hög arbetsbelastning och personalbrist var de mest framträdande riskfaktorerna som framkallade stress

    Trafikverkets Miljörapport 2022

    No full text
    Trafikverket ansvarar för långsiktig planering av transportsystemet för alla trafikslag samt för byggande, drift och underhåll av statliga vägar och järnvägar.Trafikverkets miljöarbete styrs av flera mål. FN:s hållbarhetsmål Agenda 2030 är globala mål för en hållbar utveckling. De transportpolitiska målen  och miljökvalitetsmålen styr den nationella politiken. Trafikverket har  konkretiserat dessa mål i Målbild 2030 – tillgänglighet i ett hållbart samhälle. För att visa vilken förflyttning som behövs för att nå de transportpolitiska målen och Målbild 2030 har Trafikverkets styrelse beslutat om strategiska mål för Trafikverket. Trafikverket har i uppdrag att verka för att de transportpolitiska målen  uppnås och utifrån hänsynsmålet ska vi bidra till Sveriges miljömål. För att följa Trafikverkets bidrag till de transportpolitiska målen används leverans­kvaliteter som beskriver Trafikverkets förmåga att leverera ett tillgängligt transportsystem som tar hänsyn till säkerhet, klimat, miljö och hälsa.Enligt förordningen (2009:907) om miljöledning i statliga myndigheter är varje nationell myndighet skyldig att införa miljöledningssystem för att bedriva ett systematiskt miljöarbete. Trafikverket har ett integrerat ledningssystem som ska efterleva kraven enligt miljöledningsstandarden ISO 14001. Trafikverket åtgärdar kartlagda brister i befintlig infrastruktur genom riktade miljöåtgärder, vilka redovisas i denna rapport. Därutöver åtgärdas brister även inom våra investerings­ och underhållsprojekt.Trafikverkets miljöarbete är indelat i sju prioriterade miljöområden. Miljö­områdena är kopplade till de miljökvalitetsmål som har störst bäring på  Trafikverkets verksamhet. Åtgärder och förbättringsarbete kan leda till  synergier och bidra till flera miljökvalitetsmål. Till de prioriterade miljö­områdena kommer också åtgärdsområdet aktivt resande som beskriver hur transportsystemet ger förutsättningar för ett aktivt resande och hur det inverkar på folkhälsan. Årets temaavsnitt har fokus på buller och vibrationer. Det beskriver hur buller och vibrationer påverkar människors hälsa och hur Trafikverket arbetar med att skapa bättre livsmiljöer för dem som är utsatta för störningar från trafiken längs statlig väg och järnväg
    corecore