Legacy effects of Acacia species on amphibian pond communities

Tese de mestrado em Biologia da Conservação, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2020As invasões biológicas constituem uma das principais ameaças à biodiversidade a nível global, provocando impactes significativos a nível ecológico, económico e social. Os impactes de várias espécies de árvores invasoras, por exemplo Acacia spp., podem persistir no ecossistema mesmo após a sua remoção, através de mecanismos que possibilitam que estes legados permaneçam no solo. Podemos encontrar alguns destes mecanismos nas acácias, pertencentes à família das leguminosas, que têm a capacidade de fixar azoto no solo, o que lhes confere uma vantagem na colonização de solos pobres, e que produzem grandes quantidades de sementes que se acumulam no solo e mantêm viáveis durante vários anos; isto permite que os legados das suas invasões persistam a longo prazo. Têm ocorrido em todo o mundo ações de controlo e erradicação de espécies invasoras, sendo que também estas ações podem causar impactes. Neste sentido, após o corte, a lixiviação do azoto fixado em torno das raízes das acácias pode impactar negativamente as águas superficiais e as suas comunidades. Por outro lado, a abertura de clareiras resultante da remoção das acácias permite que uma maior quantidade de luz atinja o solo e os corpos de água, aumentando, de forma generalizada, a produtividade dos mesmos. Com o avançar da sucessão ecológica, o aumento da cobertura arbórea levará ao ensombramento dos corpos de água e, consequentemente, a uma diminuição dessa produtividade. No entanto, a alteração das espécies arbóreas existentes provocará também uma alteração da qualidade da manta morta, o que poderá resultar em comunidades diferentes no pré e no pós-intervenção. O presente estudo tem como objetivo avaliar o impacte das ações de gestão florestal na comunidade de anfíbios da Serra de Sintra, nomeadamente em propriedades geridas pela Parques de Sintra – Monte da Lua, S. A.. Para tal, foi selecionado um conjunto de corpos de água distribuídos por locais com as seguintes características: áreas ainda invadidas com acácias, áreas com diferentes idades após remoção de acácias e áreas já com flora nativa mais desenvolvida. Nestes locais investigou-se se ocorreram alterações nas concentrações de compostos azotados nos corpos de água; se as ações de remoção de acácias incrementaram a produtividade do corpo de água; se a condição corporal das larvas de anfíbios melhorou em áreas abertas comparativamente a áreas florestadas, identificando também os fatores que mais influenciam a condição corporal. Os resultados mostraram que após a ação de remoção de acácias houve um aumento acentuado na concentração de compostos azotados nos corpos de água, com tendência a diminuir ao longo do tempo. A produtividade dos corpos de água, em geral, aumentou após as intervenções; um aumento comprovado pela maior abundância de zooplâncton e de pequenos macroinvertebrados. No entanto, com o desenvolvimento da flora arbórea nativa, esta produtividade tende a diminuir. A comunidade de anfíbios apresentou maior riqueza específica após a remoção de Acacia spp., com uma ligeira diminuição à medida que a floresta nativa se desenvolve. Focando especificamente na espécie mais comum, a salamandra-de-pintas-amarelas (Salamandra salamandra), foi possível verificar alterações na condição corporal da suas formas larvares após as intervenções, sendo que 1) o tipo de corpo de água e a sua largura e 2) a profundidade máxima e cobertura herbácea em redor do corpo de água são as variáveis que melhor explicam essa variação relativamente à robustez da larva e proporção da musculatura da cauda, respetivamente. No geral, com a exceção de um charco, não foram atingidas concentrações de compostos azotados potencialmente perigosas para a comunidade de anfíbios após a remoção das árvores invasoras. O aumento da produtividade dos corpos de água após as intervenções pode ser consequência do aumento de luz solar que chega ao solo e à água, ou, por outro lado, ser consequência indireta do aumento de compostos azotados, ou até de uma interação entre estes. O aumento da robustez das larvas de salamandra em corpos de água artificiais quando comparado com corpos de água naturais e com o aumento da largura do corpo de água poderá estar relacionado com o hidroperíodo do mesmo, uma vez que em charcos temporários será mais importante a aceleração da metamorfose. A diminuição da proporção da musculatura da cauda em charcos mais profundos poderá ser uma estratégia de sobrevivência à predação, pois membranas maiores aumentam as probabilidades de sobrevivência a um ataque. Já a relação entre a cobertura herbácea e a proporção da musculatura da cauda não é linear, diminuindo até aos 40% de cobertura, o que pode ser resultado de condições ambientais favoráveis até para larvas menos musculadas, ou ser uma resposta à predação. A partir dos 40% de cobertura herbácea, e até aos 80%, essa proporção tende a aumentar, o que pode ser resultado de uma diminuição na produtividade do corpo de água como consequência do aumento da sombra, favorecendo larvas mais musculadas, com maior velocidade natatória, capazes de evitar o canibalismo, caçar mais presas ou até de canibalizar larvas mais pequenas. A remoção de Acacia spp. e o restauro ecológico dos locais previamente invadidos são importantes para a conservação das comunidades de anfíbios (como os mais raros rã-de-focinho-pontiagudo (Discoglossus galganoi) ou salamandra-de-costelas-salientes (Pleurodeles waltl)). De futuro, a manutenção de clareiras em redor de alguns destes corpos de água contribuirá para uma maior diversidade das comunidades dos charcos e para o aumento das populações de espécies de anfíbios ameaçadas nas propriedades da PSML e na serra de Sintra. Estas intervenções poderão mesmo beneficiar espécies de anuros como a rela-mediterrânica (Hyla meridionalis) e o raro, e talvez localmente extinto, sapo-parteiro-comum (Alytes obstetricans). Um projeto de monitorização, no seguimento do que já vem a ser feito pela PSML com o lagarto-de-água (Lacerta schreiberi), será importante para avaliar a expansão destas duas espécies nas zonas sem acácia. Para além da comunidade de anfíbios, também a comunidade de répteis, incluindo L. schreiberi, poderá beneficiar da manutenção de algumas destas clareiras.Biological invasions are amongst the main threats to biodiversity. Alien invasive tree species, such as Acacia spp. often cause impacts on the invaded ecosystem that persist after their removal. Acacia spp. are able to fix nitrogen and are prolific producers of seeds that remain viable in the soil for several years; these mechanisms guarantee the persistence of their legacies in the long term. The removal of Acacia spp. may lead to a release of nitrogenous compounds, present in their roots, to ground and surface waters, affecting pond and stream communities. On the other hand, the removal of trees results in clearings, which allows more light to reach the forest ground and water bodies, increasing their productivity. These conditions will change over time as succession takes place and, eventually, the shade over the water bodies will again decrease their productivity. However, if the eradication is successful the leaf litter and root systems of the new trees will be different, and therefore the soil and pond communities before and after the interventions may differ. The main goal of this study is to assess the influence of forest management actions (removal of Acacia spp.) on the amphibian community of the Serra de Sintra areas managed by Parques de Sintra – Monte da Lua, S. A.. We selected ponds located in plots still occupied by invasive Acacia spp., in plots of different ages after Acacia spp. removal, and in plots with native flora, and investigated: if there are differences in the nitrogenous compounds concentrations among ponds; if plot clearing promotes an increase in pond productivity; if amphibian larvae improve their body condition in cleared areas when compared with the forested plots. The results showed that after the removal of Acacia spp. there is a notorious increase in the nitrogenous compounds concentration, and then it tends to decrease over time. The increase in zooplankton and small macroinvertebrates abundance indicated that the water bodies productivity increased after the interventions. However, with the development of native trees, this productivity tended to decrease. We found that the amphibian community presented a higher species richness after the removal of the invasive trees, decreasing afterwards as the native forest develops. The body conditions of the larvae of the most common amphibian, Salamandra salamandra, change after the interventions. The type of water body and its width were the factors that better explained the variation of the ratio between maximum abdominal width and snout-vent length (A/SVL) and the maximum pond depth and bank cover by short vegetation were the factors that better explained the variation of the ratio between middle tail muscle depth and middle tail fin depth (M/F). In general, the nitrogenous compounds concentration did not rise to potentially harmful levels for the amphibian community, except for one of the sampled ponds. The increase in water bodies productivity after the interventions may be a result of the increase of sunlight reaching the water bodies, an indirect result of the increase of nitrogenous compounds concentration, or it may result from the interaction between both factors. The increase of larval salamanders A/SVL ratio in artificial pools when compared to natural ponds and with the increase of the water body’s width may be related to hydroperiod, since in natural ponds with shorter hydroperiods larvae need to invest earlier in metamorphosis. The decrease of M/F ratio in deeper ponds may be a strategy to predation. This ratio decreases in response to a low bank cover by short vegetation, which may be due to favourable environmental conditions to less muscled larvae or as a response to predation. As vegetation cover increases, this ratio also increases, which may be a result of the decrease in productivity by increased shading; in this less productive environment, muscled larvae, which can swim faster, better avoid cannibalism, catch more preys or cannibalise their conspecifics, are more likely to survive. The removal of alien invasive plants and restoration of the invaded sites are extremely important to preserve native amphibians. Maintaining forest clearings around at least some of the ponds will contribute to a higher diversity of pond communities and to increase the populations of threatened amphibians

Pictorial characterization of eight coleoptera families with forensic interest

Tese de mestrado, Biologia Humana e Ambiente, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2016Desde tempos remotos, os insetos têm suscitado um interesse no ser humano, o que se pode confirmar através da observação de artefactos de civilizações antigas como os Egípcios, Chineses, Maias e Aztecas. Estas obras de arte, como pinturas e esculturas, frequentemente associavam determinados insetos não só à morte mas também à reincarnação e vida pós-morte. A aplicação de conhecimentos entomológicos em investigações criminais tem uma história bastante extensa e bem documentada. Começando no primeiro caso registado da aplicação da entomologia na resolução de um homicídio na China Medieval, a utilização desta ciência como uma ferramenta forense tem vindo a percorrer um longo caminho repleto de contribuições científicas provenientes dos quatro cantos do mundo. No entanto, foi a investigação do homicídio de um recém-nascido em França no final do século XVII que marcou o início da entomologia forense moderna e que contribuiu para a publicação da notável obra de Mégnin “La Faune des Cadavres: Application de l’Entomologie à la Médicine Légale”. A partir de então, esta ferramenta forense foi desenvolvida principalmente através de contribuições de investigações científicas durante os anos das grandes guerras e a sua completa aceitação só foi possível devido ao trabalho conjunto de académicos e forças de segurança. Os insetos podem fornecer importantes informações em investigações forenses não só em casos de homicídios como também em casos de negligência tanto de seres humanos como de animais domésticos ou selvagens, por exemplo, em jardins zoológicos. Adicionalmente, numa área complementar designada entomotoxicologia, conjugam-se os conhecimentos da entomologia e da toxicologia para responder a diversas questões, como a possibilidade da presença de substâncias tóxicas no cadáver, em casos de homicídio, suicídio ou mortes acidentais. A entomologia forense pode igualmente ser utilizada em casos de investigação de pragas tanto num âmbito imobiliário como alimentar. Contudo, a utilização dos conhecimentos entomológicos em investigações de homicídios é, possivelmente, a mais mediatizada, principalmente pelos meios de comunicação social e cinematográficos. Uma vez que contribuem para a decomposição do cadáver, os insetos constituem evidências cruciais. Assim sendo, quando é descoberto um cadáver, os insetos possibilitam o conhecimento de diversos parâmetros que, em certos casos, seriam impossíveis de descobrir utilizando outros campos do saber, nomeadamente as técnicas médico-legais, como é o caso da temperatura corporal. Os insetos que colonizam o cadáver permitem não só estimar o intervalo pós-morte (IPM) através dos seus padrões de desenvolvimento e sucessão, como também poderão auxiliar na descoberta do local do crime primário nos casos em que há a suspeita de que o cadáver foi movido postmortem. Contudo, a primeira grande etapa é a recolha, no local do crime, de todos os vestígios entomológicos e sua correta identificação. No entanto, este potencial forense dos insetos só pode ser totalmente reconhecido se se realizarem extensos estudos a fim de compreender melhor não só a sua biologia e funcionamento enquanto seres vivos, como também a sua bioecologia, ou seja, as interações que estes realizam com o meio à sua volta. Contudo, a aplicação de tais estudos a investigações é um processo que necessita de ser realizado com caução uma vez que, estando distribuídos globalmente, os insetos apresentam diferenças de comportamento. Adicionalmente, existem fatores que são relevantes e que necessitam de uma cuidada análise, como é o caso das condições meteorológicas. Sabe-se que a temperatura e humidade são importantes fatores que determinam a velocidade de desenvolvimento dos insetos. O processo de decomposição, apesar de ser uma ocorrência contínua no tempo, pode ser dividido em fases que são marcadas por diferenças significativas que ocorrem no cadáver. Esta divisão, que facilita a sua análise, é, por vezes, realizada diferentemente consoante o investigador mas, frequentemente, considera-se que todo o processo de decomposição é composto por cinco fases diferentes: fase fresca, fase de inchaço, fase de decomposição ativa, fase de decomposição avançada e, por fim, a fase seca. Estas etapas são frequentemente protagonizadas por um conjunto de fauna entomológica que auxilia a investigação e que, nos casos em que a morte ocorreu há mais de 72 horas, tornam-se evidências cruciais. Apesar de muitos insetos visitarem cadáveres em decomposição, as ordens que mais relevância têm no âmbito da entomologia forense são a Diptera (moscas) e a Coleoptera (escaravelhos). As moscas são conhecidas por serem os primeiros colonizadores de cadáveres e são, sem dúvida, as mais utilizadas em casos em que conhecimentos de entomologia forense são requeridos. Ao chegarem ao cadáver, depositam os seus ovos que, após eclodirem, originam larvas que se vão alimentar dos tecidos em decomposição. Estas passam por várias fases larvares, demarcadas pelas diferenças em tamanho, e, quando prontas, pupam por um período variável de tempo. Quando completo o processo de metamorfose dentro da câmara de pupação, adultos emergem, prontos para iniciar um novo ciclo. Uma das técnicas mais utilizadas em entomologia forense é a utilização das fases de desenvolvimento larvar das moscas para a estimativa do IPM. Este método tem, no entanto, uma série de condicionantes que necessitam de cuidada atenção, como é o caso da temperatura e humidade a que as larvas estão expostas. Estas variáveis podem alterar significativamente o tempo de desenvolvimento uma vez que estes insetos são poiquilotérmicos, condicionando assim a estimativa do IPM. Outro método utilizado para estimar o IPM é a sucessão entomológica de insetos no cadáver. Sabendo que diferentes fases de decomposição atraem diferentes espécies de insetos, a utilização deste padrão único de sucessão pode ser bastante útil, especialmente em casos em que o IPM é mais longo. O trabalho pioneiro de Mégnin, que descreveu a existência de oito ondas de colonização de cadáveres ao longo das cinco fases de decomposição, é ainda nos dias de hoje, amplamente referido quando se utiliza esta técnica. Em casos em que é necessário utilizar estes conhecimentos o cadáver já se encontra, frequentemente, em estados de decomposição mais avançados e as moscas deixaram de ser os seus principais colonizadores, passando a ser os escaravelhos os artrópodes mais relevantes. Apesar de poderem estar presentes nas fases iniciais de decomposição (frequentemente como predadores de fases larvares de outros insetos), os escaravelhos encontram-se mais associados a fases tardias deste processo e, muitas vezes, as únicas evidências entomológicas em casos nas quais a morte ocorreu há meses ou até anos. Apesar de ser uma ferramenta válida e estabelecida no âmbito das ciências forenses, a entomologia forense é ainda pouco utilizada em Portugal. No entanto, a realização de estudos científicos cujo principal objetivo é a compreensão das interações entre insetos e cadáveres tem sido uma importante contribuição para o desenvolvimento desta ciência em Portugal. Este estudo centra-se em oito famílias de coleópteros presentes em Portugal, fortemente relacionadas com casos de entomologia forense: Carabidae, Cleridae, Dermestidae, Histeridae, Nitidulidae, Scarabaeidae, Silphidae e Staphylinidae. O seu principal objetivo é utilizar imagens para caracterizar morfologicamente as espécies mais representativas dessas famílias. Para tal, foram utilizados espécimes previamente capturados em armadilhas com isco ou em carcaças de animais provenientes de diversas zonas de Portugal: Serra da Estrela, Sertã, Campo Grande e Aroeira. Estes espécimes foram recolhidos utilizando armadilhas do tipo “pitfall” e “malaise” e, após a sua captura., preservados em álcool 70%. Seguidamente, montaram-se os exemplares em alfinetes entomológicos e procedeu-se à sua observação utilizando um estereomicroscópio. Com o auxílio de chaves dicotómicas e galerias fotográficas, procedeu-se à sua identificação e seleção de características diagnosticantes que foram posteriormente fotografados num segundo estereomicroscópio com melhor definição. O registo fotográfico obtido foi então utilizado para a construção de chaves pictóricas interativas e caracterizações fotográficas, disponíveis online (www.csicoleoptera.weebly.com). Esta é uma importante ferramenta de auxílio em investigações com os mais variados quesitos uma vez que permitirá uma fácil e rápida identificação de grupos relevantes por técnicos forenses sem experiência em entomologia.Since ancient times, humans have shown a unique interest in insects, which can be seen in artworks of ancient civilizations like the Egyptians, Chinese, Mayans and Aztecs. These works of art, like paintings and sculptures, often associate certain insects not only with death but also with the reincarnation and afterlife. Despite of the fact that criminal investigations arouse the most curiosity within the scope of forensic entomology, this science can be used to deal with a wide range of other investigations. Neglect cases in civil investigations are also known to use this tool to answer several questions. Another known and well developed area is the entomology of stored products. In the last years, the union of toxicology and entomology created another field of work within forensic entomology: entomotoxicology. This recent tool is very useful to know if, at the time of death, toxic substances were present in the body. Insects can provide significant information in death investigations because of their contribution to corpse decomposition. As so, if a dead body is discovered, insects can help in the estimation of the postmortem interval (PMI). However, to apply entomological knowledge to criminal investigations is essential not only to have information regarding insects’ bioecology that is valid for the geographic place where the body was found but also to accomplish an accurate identification of the species found on the corpse. The focus of this study lies in eight Coleoptera families present in Portugal, strongly related to forensic entomology cases: Carabidae, Cleridae, Dermestidae, Histeridae, Nitidulidae, Scarabaeidae, Silphidae and Staphylinidae. Its main goal is to use pictures to characterize morphologically the most representative genus and species belonging to these families using specimens previously caught in baited traps or on animal carcasses. To proceed with this analysis, the diagnostic structures of the specimens are described and photographed using optical microscopy and the data obtained was used to build pictorial interactive keys and characterizations, available online (www.csicoleoptera. weebly.com). This will allow an easy identification of relevant groups for forensic technicians without expertise in entomology

Hormone Changes in Tolerant and Susceptible Grapevine Leaves Under Powdery Mildew Infection

The biotrophic fungus Erysiphe necator causes powdery mildew (PM) in grapevine. Phytohormones are major modulators of defensive responses in plants but the analysis of the hormonome associated with grapevine tolerance and susceptibility against this pathogen has not been elucidated. In this study, changes in hormonal profiling were compared between a tolerant (Vitis rupestris × riparia cv. 101-14 Millardet et de Grasset) and a susceptible (Vitis vinifera cv. Aragonêz) species upon E. necator infection. Control and PM-infected leaves were collected at 0, 6, 24, 96 h post-infection (hpi), and analysed through LC-MS/MS. The results showed a distinct constitutive hormonome between tolerant and susceptible species. Constitutive high levels of salicylic acid (SA) and indole-3- acetic acid together with additional fast induction of SA within the first 6 hpi as well as constitutive low levels of jasmonates and abscisic acid may enable a faster and more efficient response towards the PM. The balance among the different phytohormones seems to be species-specific and fundamental in providing tolerance or susceptibility. These insights may be used to develop strategies for conventional breeding and/or editing of genes involved in hormonal metabolism aiming at providing a durable resistance in grapevine against E. necatorinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio

Fatores associados à adesão a diferentes esquemas de tratamento com antimoniato de meglumina em ensaio clínico para leishmaniose cutânea

O desfecho favorável ao tratamento de uma enfermidade é influenciado pela adesão à terapia. Objetivamos avaliar fatores associados à adesão ao tratamento dos pacientes incluídos em ensaio clínico de equivalência entre o esquema de tratamento padrão e alternativos com antimoniato de meglumina (AM) no tratamento da leishmaniose cutânea (LC) no estado do Rio de Janeiro. Entre 2008 e 2011, 57 pacientes com LC foram entrevistados através de questionário para coleta de dados socioeconômicos. Para monitorização da adesão foram utilizados os seguintes métodos: contagem de ampolas excedentes, cartão de acompanhamento, teste de Morisky e teste de Morisky modificado (sem a pergunta referente ao horário). Observou-se adesão de 82,1% (devolução de ampolas), 86,0% (cartão de acompanhamento), 66,7% (teste de Morisky) e 86,0% (teste de Morisky modificado). Houve forte concordância entre o método contagem de ampolas e cartão de acompanhamento, bem como teste de Morisky modificado. Verificou-se associação significativa entre maior adesão ao tratamento e baixa dose de AM, bem como com menor número de pessoas dormindo no mesmo quarto. Recomendamos a utilização do teste de Morisky modificado na avaliação da adesão ao tratamento da LC com AM por ser método simples e com bom desempenho quando comparado aos outros testes.The favorable outcome of the treatment of a disease is influenced by the adherence to therapy. Our objective was to assess factors associated with adherence to treatment of patients included in a clinical trial of equivalence between the standard and alternative treatment schemes with meglumine antimoniate (MA) in the treatment of cutaneous leishmaniasis (CL), in the state of Rio de Janeiro. Between 2008 and 2011, 57 patients with CL were interviewed using a questionnaire to collect socioeconomic data. The following methods were used for adherence monitoring: counting of vial surplus, monitoring card, Morisky test and modified Morisky test (without the question regarding the schedule); we observed 82.1% (vial return), 86.0% (monitoring card), 66.7% (Morisky test) and 86.0% (modified Morisky test) adherence. There was a strong correlation between the method of vial counting and the monitoring card and modified Morisky test. A significant association was observed between greater adherence to treatment and low dose of MA, as well as with a lower number of people sleeping in the same room. We recommend the use of the modified Morisky test to assess adherence to treatment of CL with MA, because it is a simple method and with a good performance, when compared to other methods

Desempenho visual e motor de lactentes acompanhados em um programa de seguimento de risco / Visual and motor performance of infants accompanied in a risk follow-up program

A prematuridade é reconhecida como um dos maiores determinantes de morbimortalidade neonatal global, de forma que o lactente prematuro necessita ser acompanhado após a alta hospitalar por uma unidade de seguimento ambulatorial de risco, a fim de prevenir ou tratar qualquer alteração em seu desenvolvimento neuropsicomotor. Avaliar o desempenho visual e motor de lactentes acompanhados em um programa de Follow up/seguimento de risco. Este estudo tratou-se de uma série de casos, realizada com 10 lactentes selecionados no ambulatório de Follow up/seguimento de risco da Maternidade Escola Assis Chateaubriand (MEAC), no período de janeiro de 2019 à janeiro de 2020. Os instrumentos utilizados foram: avaliação do desempenho visual e motor por meio do Roteiro de Avaliação da Conduta Visual em Lactentes e a Escala Motora Infantil de Alberta.  Na avaliação de desempenho visual, uma criança, no primeiro mês de vida, não pontuou apenas na prova de seguimento visual vertical. Todas apresentaram um desempenho motor normal. No segundo mês, o estudo condiz com o que é esperado para seu desenvolvimento visual normal. Uma não pontuou em três testes em razão de apresentar um pouco mais de uma semana de diferença do grupo do primeiro para o segundo mês. Uma criança não apresentou uma boa pontuação em seu desempenho visual, sendo isso informado a equipe da unidade de atendimento. A maioria apresentou desempenho motor normal; apenas uma com desempenho suspeito, o que é bastante esperado do prematuro. Presume-se que os bons níveis de desenvolvimento, se devam aos estímulos oriundos do programa e aos cuidados neuroprotetores durante a internação hospitalar. No entanto, necessita-se de estudos com amostra mais volumosa a fim de apresentar fielmente a relevância aqui encontrada

Direct tissue-sensing reprograms TLR4+ Tfh-like cells inflammatory profile in the joints of rheumatoid arthritis patients

Funding Information: We thank Cláudia Andrade for technical support and Juliana Gonçalves for testing samples for SARS-CoV-2 exposure. We are extremely grateful to all the participants of the study and to the whole rheumatology department at Hospital Egas Moniz that made this study possible. This work was supported by Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT) PTDC/MEC-REU/29520/2017, by iNOVA4Health UID/Multi/04462 and by Portuguese Society for Rheumatology (SPR) grants to H.S. H.S. is supported by FCT through IF/01722/2013 and CEECIND/01049/2020, DAS and RCT were supported by FCT through PD/BD/137409/2018 and UID/Multi/04462, respectively. Publisher Copyright: © 2021, The Author(s).CD4+ T cells mediate rheumatoid arthritis (RA) pathogenesis through both antibody-dependent and independent mechanisms. It remains unclear how synovial microenvironment impinges on CD4+ T cells pathogenic functions. Here, we identified a TLR4+ follicular helper T (Tfh) cell-like population present in the blood and expanded in synovial fluid. TLR4+ T cells possess a two-pronged pathogenic activity whereby direct TLR4+ engagement by endogenous ligands in the arthritic joint reprograms them from an IL-21 response, known to sponsor antibody production towards an IL-17 inflammatory program recognized to fuel tissue damage. Ex vivo, synovial fluid TLR4+ T cells produced IL-17, but not IL-21. Blocking TLR4 signaling with a specific inhibitor impaired IL-17 production in response to synovial fluid recognition. Mechanistically, we unveiled that T-cell HLA-DR regulates their TLR4 expression. TLR4+ T cells appear to uniquely reconcile an ability to promote systemic antibody production with a local synovial driven tissue damage program.publishersversionpublishe

Influenza severe cases in hospitals, between 2014 and 2016 in Portugal

Rede Portuguesa de Laboratórios para o Diagnóstico da GripeBackground: Since 2009, the Portuguese Laboratory Network (PLNID) for Influenza Diagnosis has integrated 15 Laboratories in mainland and Atlantic Islands of Azores and Madeira. This PLNID added an important contribute to the National Influenza Surveillance Program regarding severe and hospitalized influenza cases. The present study aims to describe influenza viruses detected in influenza like illness (ILI) cases: outpatients (Outp), hospitalized (Hosp), and intensive care units (ICU), between 2014 and 2016. Methods: The PLNID performs influenza virus diagnosis by biomolecular methodologies. Weekly reports to the National Influenza Reference Laboratory ILI cases tested for influenza. Reports include data on detecting viruses, hospital assistance, antiviral therapeutics, and information on death outcome. Were reported during two winter seasons 8059 ILI cases,being 3560 cases in 2014/15 (1024 in Outp, 1750 Hosp, and 606 in ICU) and 4499 cases in 2015/2016 (1933 in Outp, 1826 Hosp, and 740 in ICU). Results: The higher percentage of influenza positive cases were detected in Outp in both seasons, 18% during 2014/15 and 20% in 2015/16. In 2014/15,influenza cases were more frequent in individuals older than 65 years old and these required more hospitalizations,even in ICU. In 2015/16,the influenza cases were mainly detected in individuals between 15-64 years old. A higher proportion of influenza positive cases with hospitalization in ICU were observed in adults between 45-64 years old.During the study period,the predominant circulating influenza viruses were different in the two seasons: influenza B and A(H3) co-circulated in 2014/15,and influenza A(H1)pdm09 was predominant during 2015/16. Even when influenza A is notthe dominant virus, A(H3) and A(H1)pdm09 subtypes correlate with higher detection rate in hospitalized cases (Hosp and UCI), with higher frequencies in adults older than 45. Influenza B,detected in higher proportion in outpatients, was frequently relatedwith influenza cases in younger age groups: 0-4 and 5-14 years old. Conclusions: This study highlights the correlation of theinfluenza virus type/subtype that circulates in each season with the possible need for hospitalization and intensive care in special groups of the population. Circulation of influenza A subtypes can cause more frequentdisease in individuals older than 45, with need of hospitalization including intensive care. On the other hand, influenza B is more frequently associated with less severe cases and with infection in children and younger adults. Influenza B circulation might predict lower number of hospitalizations.The identification of influenza type in circulation,byPLNID ineach season, could guide action planning measures in population health care.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Influenza seroprotection correlates with predominant circulating viruses during 2014/15 and 2015/16 seasons in Portugal

Rede Portuguesa de Laboratórios para o Diagnóstico da GripeBACKGROUND: Population immune profile for influenza is highly affected by circulating influenza viruses, thus changing the risk of infection for influenza. This study aims to assess influenza immunity in the Portuguese population by age groups, during 2014 and 2015 and establish a relationship between seroprotection and circulating influenza viruses in 2014/15 and 2015/16 seasons. METHODS: Two cross-sectional studies were developed based on a convenience serum sample collected in June 2014 (n=626) and July 2015 (n=675) in hospitals from mainland and Azores and Madeira.Serums equally represent all age groups. Antibody titers were evaluated by HI assay for strains recommended for seasonal influenza vaccine northern hemisphere,2014/15 and 2015/2016. Seroprevalences were estimated for each strain by age group and the association with seasonal cumulative influenza-like illness (ILI) rates for influenza virus during both seasons was analised. RESULTS: In June 2014 the highest seroprotection was observed for influenza A(H3) (39.0%; 95% CI: 36.2-43.8%) and A(H1)pdm09 (29.7; 95% CI: 26.3-33.4%), with higher levels in children 5-14 years old. In 2014/2015 a dominant circulation of influenza B/Yamagata was observed with high incidence rates in individuals under 65 years old, the ones that had lower seroprotection. Although before the start of the season high protection for A(H3) was observed, the circulation of the new drift A(H3) strains had gained an immunological advantage,in accordance with A(H3) elevated incidence rates observed during 2014/15. In July 2015 the highest seroprotection was observed for influenza B/ Yamagata (55.1%; 95% CI: 51.4-58.9%), 2.4 times the estimated 2014.This increase was even more pronounced in younger (≤ 4 years old), 6.3 times increase in 2015.This fact is in agreement with the predominant influenza B virus detected and the high ILI incidence rate observed in children during 2014/2015 epidemic. Seroprotection levels for influenza A in July 2015 were not significantly different from 2014.During 2015/16 season, influenza A(H1N1)pdm09 was predominant, with high incidence rate in < 65 year old. Influenza B/Victoria lineage,although detected at low levels increased in frequency, in agreement with the lowest level of seroprotection detected in the general population before the start of 2015/2016 season (21.8%; 95% CI: 18.7-24.0%). CONCLUSIONS There was a correlation between virus circulation, incidence rates for each age group and the previous seroprotection for seasonal influenza viruses.Our study highlights the value of measuring the serological profile for influenza to establishe risk groups for infection for which an increase preventive measures, including vaccination, should be fostered.info:eu-repo/semantics/publishedVersio