DAP kinase and DRP-1 mediate membrane blebbing and the formation of autophagic vesicles during programmed cell death

Death-associated protein kinase (DAPk) and DAPk-related protein kinase (DRP)-1 proteins are Ca+2/calmodulin–regulated Ser/Thr death kinases whose precise roles in programmed cell death are still mostly unknown. In this study, we dissected the subcellular events in which these kinases are involved during cell death. Expression of each of these DAPk subfamily members in their activated forms triggered two major cytoplasmic events: membrane blebbing, characteristic of several types of cell death, and extensive autophagy, which is typical of autophagic (type II) programmed cell death. These two different cellular outcomes were totally independent of caspase activity. It was also found that dominant negative mutants of DAPk or DRP-1 reduced membrane blebbing during the p55/tumor necrosis factor receptor 1–induced type I apoptosis but did not prevent nuclear fragmentation. In addition, expression of the dominant negative mutant of DRP-1 or of DAPk antisense mRNA reduced autophagy induced by antiestrogens, amino acid starvation, or administration of interferon-γ. Thus, both endogenous DAPk and DRP-1 possess rate-limiting functions in these two distinct cytoplasmic events. Finally, immunogold staining showed that DRP-1 is localized inside the autophagic vesicles, suggesting a direct involvement of this kinase in the process of autophagy

Retention of a cell adhesion complex at the paranodal junction requires the cytoplasmic region of Caspr

An axonal complex of cell adhesion molecules consisting of Caspr and contactin has been found to be essential for the generation of the paranodal axo-glial junctions flanking the nodes of Ranvier. Here we report that although the extracellular region of Caspr was sufficient for directing it to the paranodes in transgenic mice, retention of the Caspr–contactin complex at the junction depended on the presence of an intact cytoplasmic domain of Caspr. Using immunoelectron microscopy, we found that a Caspr mutant lacking its intracellular domain was often found within the axon instead of the junctional axolemma. We further show that a short sequence in the cytoplasmic domain of Caspr mediated its binding to the cytoskeleton-associated protein 4.1B. Clustering of contactin on the cell surface induced coclustering of Caspr and immobilized protein 4.1B at the plasma membrane. Furthermore, deletion of the protein 4.1B binding site accelerated the internalization of a Caspr–contactin chimera from the cell surface. These results suggest that Caspr serves as a “transmembrane scaffold” that stabilizes the Caspr/contactin adhesion complex at the paranodal junction by connecting it to cytoskeletal components within the axon

O lixo como uma problemática antropológica: Entrevista com Freek Colombijn

Resumo: Entrevista realizada com Dr. Freek Colombijn, antropólogo, professor e coordenador do Department of Social and Cultural Anthropology da Vrije Universiteit Amsterdam. Desde 2011 atua em parceria com Carmen Rial através do convênio firmado CAPES/NUFFIC, tendo, ambos, orientado mais de uma dezena de pesquisas com foco nas questões que circundam a temática do lixo. Nesta conversa, Colombijn aborda questões relativas a sua formação acadêmica, além das principais influências teóricas, parcerias com Brasil e o lugar da problemática dos resíduos nas seus trabalhos. Também nos fala um pouco da tradição antropológica holandesa, citando principais autores e linhas de pesquisa.Palavras-chave: Tradição Antropológica nos Países Baixos. Antropologia do Lixo. Freek Colombijn WASTE AS AN ANTHROPOLOGICAL ISSUE: INTERVIEW WITH FREEK COLOMBIJN Interview with Dr. Freek Colombijn, anthropologist, professor and Vrije Universiteit Amsterdam’s Department of Social and Cultural Anthropology coordinator. Since 2011 sustains a partnership with Carmen Rial throughout the CAPES/NUFFIC agreement, having, since then, conducted over a dozen researches focusing the thematic of waste. In this dialogue, Colombijn addresses the matters concerning his academic training, in addition to its main theoretical influences. He also tells us a little about the anthropological tradition of the Netherlands, exemplifying its principal authors and research lines.Keywords: Anthropological Tradition in the Netherlands. Waste Anthropology. Freek Colombij

Juxtaparanodal clustering of Shaker-like K+ channels in myelinated axons depends on Caspr2 and TAG-1

In myelinated axons, K+ channels are concealed under the myelin sheath in the juxtaparanodal region, where they are associated with Caspr2, a member of the neurexin superfamily. Deletion of Caspr2 in mice by gene targeting revealed that it is required to maintain K+ channels at this location. Furthermore, we show that the localization of Caspr2 and clustering of K+ channels at the juxtaparanodal region depends on the presence of TAG-1, an immunoglobulin-like cell adhesion molecule that binds Caspr2. These results demonstrate that Caspr2 and TAG-1 form a scaffold that is necessary to maintain K+ channels at the juxtaparanodal region, suggesting that axon–glia interactions mediated by these proteins allow myelinating glial cells to organize ion channels in the underlying axonal membrane

Anomalous Features of EMT during Keratinocyte Transformation

During the evolution of epithelial cancers, cells often lose their characteristic features and acquire a mesenchymal phenotype, in a process known as epithelial-mesenchymal transition (EMT). In the present study we followed early stages of keratinocyte transformation by HPV16, and observed diverse cellular changes, associated with EMT. We compared primary keratinocytes with early and late passages of HF1 cells, a cell line of HPV16-transformed keratinocytes. We have previously shown that during the progression from the normal cells to early HF1 cells, immortalization is acquired, while in the progression to late HF1, cells become anchorage independent. We show here that during the transition from the normal state to late HF1 cells, there is a progressive reduction in cytokeratin expression, desmosome formation, adherens junctions and focal adhesions, ultimately leading to poorly adhesive phenotype, which is associated with anchorage-independence. Surprisingly, unlike “conventional EMT”, these changes are associated with reduced Rac1-dependent cell migration. We monitored reduced Rac1-dependent migration also in the cervical cancer cell line SiHa. Therefore we can conclude that up to the stage of tumor formation migratory activity is eliminated

N-WASP is required for membrane wrapping and myelination by Schwann cells

During peripheral nerve myelination, Schwann cells sort larger axons, ensheath them, and eventually wrap their membrane to form the myelin sheath. These processes involve extensive changes in cell shape, but the exact mechanisms involved are still unknown. Neural Wiskott–Aldrich syndrome protein (N-WASP) integrates various extracellular signals to control actin dynamics and cytoskeletal reorganization through activation of the Arp2/3 complex. By generating mice lacking N-WASP in myelinating Schwann cells, we show that N-WASP is crucial for myelination. In N-WASP–deficient nerves, Schwann cells sort and ensheath axons, but most of them fail to myelinate and arrest at the promyelinating stage. Yet, a limited number of Schwann cells form unusually short internodes, containing thin myelin sheaths, with the occasional appearance of myelin misfoldings. These data suggest that regulation of actin filament nucleation in Schwann cells by N-WASP is crucial for membrane wrapping, longitudinal extension, and myelination

Economia circular: antropologia dos resíduos sólidos e experiências inovadoras entre Holanda e Brasil

Vídeo de apresentação do 31º Seminário de Iniciação Científica da Universidade Federal de Santa Catarina.O presente vídeo, apresentado para o 31º Seminário de Iniciação Científica da UFSC, tem como objetivo apresentar o desenvolvimento da pesquisa realizada pelo bolsista dentro do projeto "Economia circular: antropologias dos resíduos sólidos e experiências inovadoras entre Holanda/Brasil", onde realiza uma interpretação através das teorias antropológicas da greve dos trabalhadores da COMCAP de Florianópolis no início do ano de 2021, pautado na noção de pureza e impureza de Mary Douglas, sua incorporação nos trabalhadores e nas relações de poder entre Estado e servidores públicos, sujeito, direito e produto pautado nos estudos de Michel Focault sobre poder, inspira-se, posteriormente para a análise dos materiais coletados em trabalho de campo de 2019 pelas pesquisadoras do núcleo, trazendo à discussão a relação entre gestão de resíduos popular e estatal, se há cooperação ou dissonância e suas possíveis causas, e o questionamento da situação do projeto Revolução dos Baldinhos e o impacto da pandemia de Covid-19 no seu desenvolvimento para possíveis pesquisas futuras. Para além do projeto explicita-se os outros trabalhos realizados pelo bolsista durante o ciclo e o impacto do Projeto de Iniciação Científica no desenvolvimento da experiência acadêmica

A balança entre Verbo e Imagem: Análise de discurso e de imagem de reportagens das greves da Comcap em 2021

O objetivo pretendido desse ciclo era observar e pesquisar as práticas comunitárias dos moradores do Monte Verde em Florianópolis, através do projeto Revolução dos Baldinhos a fim de diminuir o impacto de covid-19 na vida da comunidade. Para isso fora projetado um plano de trabalho que iniciasse o estudante à pesquisa antropológica em campo e a vivência na inserção dos trabalhos do núcleo de pesquisa do qual a orientadora coordena. Foram realizadas com sucesso e continuamente, as atividades da vida acadêmica como participação de reuniões, projetos e eventos do núcleo de pesquisa NAVI durante todo o ciclo 2021/2022. Outras discussões acerca do tema da revolução dos baldinhos surgiram e, por interesse do discente, houve aprofundamento na relação das autarquias responsáveis pela coleta de lixo e a relação com os órgãos municipais responsáveis pela sua gestão. A fim de iniciação e prática relacionada à pesquisa, o escopo fora delimitado acerca das greves dos trabalhadores da Comcap no início de 2021, a discussão, predominantemente teórica, trata, através de uma análise discursiva de artigos jornalísticos, o papel da linguagem nas relações institucionais e seu impacto nas necessidades trabalhistas daqueles responsáveis pela coleta dos resíduos sólidos, para além de outras perspectivas como análise imagética e a uma breve perspectiva do método da Antropologia para a pesquisa digital. Dessa forma, outros embates são abordados como sugestão analítica, a fim de exemplificar as possibilidades analíticas que circundam a temática dos resíduos sólidos

Projeto, experimentação, produção: Uma perspectiva antropológica da socialização no VRChat

TCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Filosofia e Ciências Humanas, Ciências Sociais.Este trabalho trata de uma análise da noção de aprendizagem e de socialização no jogo VRChat. Toma-se como perspectiva inicial a ideia de que as plataformas digitais podem ser usadas como laboratórios de experimentação de si para, em seguida, abordar a temática da socialização e de aprendizagem a partir da descrição das características do programa. Os dados coletados são fruto de um trabalho de campo realizado no período de dois meses na plataforma. Para efetuar a análise desejada é necessário um deslocamento ontológico para uma perspectiva capaz de integrar a noção de sujeito e objeto, processo que resultou no questionamento do uso de termos binários que separam e distanciam experiências online e offline. Portanto, utilizou-se a Teoria Ator-Rede e a Teoria das Affordances para incorporar a agência não-humana ao processo constituinte de se tornar sujeito através e na plataforma. Os objetivos desta pesquisa era observar e descrever as ações propiciadas pelas features da plataforma aos usuários, para que, a partir disso, se possa indagar a correlação entre aprendizado e socialização em uma perspectiva ecológica de interação e integração agente-ambiente. Por fim, a partir da análise das experiências descritas, conclui-se que o socializar-se na plataforma é processo ativo de atuação e readaptação constante entre os agentes integrantes do sistema, sendo os processos de subjetivação um fluxo constante entre o corpo do usuário e do avatar, formando uma estrutura que ocupa, simultaneamente, dois lugares. Resulta no questionamento das operações/perspectivas binárias de análise social e propõe uma a partir de uma abordagem totalizante e humano-descentrada dos fenômenos sociais