Evaluation of chemically-induced steatosis in different human in vitro hepatic systems

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2017Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is histologically defined by atypical accumulation of hepatic lipid droplets, known as hepatic steatosis. The increased accumulation of triglycerides in the liver is a result of an abnormal lipid metabolism reflected by a greater input (uptake and synthesis) than the fatty acids output rate (oxidation and secretion). During the last decades liver toxicity has been not only the leading cause for pharmacovigilance safety reports and the withdrawing of previously approved drugs but also one of the major causes of discontinuation of the development of new chemical entities. Therefore, the issue of drug induced steatosis should be addressed during preclinical drug development. Since robust human-relevant in vitro models are lacking, it is necessary to develop predictable culture systems in toxicity testing. HepG2 cells are one of the most used in vitro models to study hepatotoxicity, however, this cell model has some limitations and does not fully represent the human hepatic metabolism nor the population diversity. On the other hand, stem cell-derived hepatic cells, such as human skin-derived precursors differentiated into hepatic cells (hSKP-HPC), are emerging as suitable in vitro study system for preclinical evaluation of hepatotoxic compounds. The present research work aims to characterize these cell systems for the study of steatogenic compounds, namely a fatty acid (Sodium Oleate), two drugs (Tetracycline and Sodium Valproate) and a chemical solvent (2-ethyhexanol). The induced steatosis was evaluated in each in vitro model through the observation of intracellular accumulation of lipids and through the analysis of the expression of important genes involved in intracellular lipid accumulation. Preliminary results revealed that hSKP-HPC was the cell model with highest accumulation of neutral lipids, followed by undifferentiated hSKP. Nonetheless, the obtained gene expression profiles were inconclusive, especially for hKSP-HPC. However, previous findings had already demonstrated the potential of hSKPs as a human relevant in vitro model to identify drug induced hepatotoxicity and future research work is needed. Stem cell technology is still an expanding area with potential use in hepatic toxicity testing. Yet, issues such as disparities between cell cultures and hepatic differentiations still need to be overcome.A doença de fígado gordo não alcoólico (NAFLD) é definida histologicamente como a acumulação atípica de gotículas lipídicas hepáticas, conhecida por esteatose hepática. A acumulação de triglicéridos no fígado é resultado de um metabolismo lipídico anormal que é refletido por um desequilíbrio entre a absorção e síntese de ácidos gordos e a oxidação e secreção. Ao longo das últimas décadas, a toxicidade hepática tem sido não só a principal causa para a retirada de fármacos do mercado, mas também, um dos maiores motivos para a descontinuação do processo de desenvolvimento e investigação de novas moléculas candidatas a fármacos. Assim, a esteatose potencialmente induzida por fármacos deve ser estudada durante a fase pré-clínica de desenvolvimento de fármacos. Para cumprir esse objetivo, é necessário o desenvolvimento de sistemas robustos in vitro de cultura de células de origem humana para estudo da hepatotoxicidade de modo a preencher as lacunas existentes. As células HepG2 são um dos modelos in vitro mais utilizados para estudar a hepatotoxicidade, contudo, este possui algumas limitações não representando o metabolismo hepático humano na sua globalidade nem a diversidade populacional. Por outro lado, células hepáticas diferenciadas de células estaminais, obtidas a partir de precursores derivados da pele humana (hSKP-HPC) têm vindo a emergir como um novo modelo in vitro para a avaliação pré-clínica de compostos que possam induzir esteatose. Este trabalho experimental visa caracterizar estes modelos celulares na investigação de compostos esteatogénicos tais como: um ácido gordo (oleato de sódio), dois fármacos (tetraciclina e valproato de sódio) e um solvente químico (2-etilhexanol). A indução da esteatose foi avaliada em cada modelo celular através da observação da acumulação intracelular de lípidos e da análise da expressão génica de diversos genes importantes no mecanismo celular da esteatose. Os resultados obtidos revelaram que as hSKP-HPC foram o modelo celular com maior acumulação lipídica. Contudo, os perfis de expressão génica observados foram inconclusivos. Ainda assim, estudos anteriores demonstraram o potencial das hSKP-HPC como um relevante modelo in vitro que permite a deteção de esteatose induzida por fármacos. A tecnologia das células estaminais é ainda uma área em expansão com aplicabilidade no estudo da hepatotoxicidade hepática. Porém, existem ainda diversas incertezas relacionadas com disparidades entre culturas celulares e processos de diferenciação hepática e, por isso mesmo, futuro trabalho de investigação deverá ser feito

Literacia da informação: o primeiro degrau para a Ciência Aberta

Introdução – No ensino superior, bibliotecários e professores têm desenvolvido estratégias para apoiar o desempenho académico dos estudantes, particularmente no respeitante às competências de literacia da informação, as quais são consideradas como uma poderosa ferramenta de intervenção na esfera da produção do conhecimento. Também a Ciência Aberta, centrada no eixo pesquisar fontes abertas/organizar dados abertos/publicar em acesso aberto, sobrevive das mesmas competências e dos mesmos saberes. Objetivos – O objetivo deste estudo é fazer uma reflexão sobre a missão das bibliotecas de ensino superior e o seu contributo para a Ciência Aberta, enquanto fonte e resultado da investigação científica, do ensino e da aprendizagem, através do fornecimento de competências de literacia da informação. Métodos – Revisão da literatura sustentada nos eixos da literacia da informação e da Ciência Aberta, compreendendo: a) seleção de três estudos de caso, desenvolvidos por bibliotecários e bibliotecas de ensino superior em Portugal no fomento de boas práticas e no fornecimento de competências que envolvam o saber pesquisar, selecionar, avaliar e utilizar a informação; b) seleção de um programa europeu de formação para doutorados e investigadores sobre literacia da informação e seu impacto na Ciência Aberta. Resultados/Conclusões – Os três estudos, desenvolvidos em comunidades académicas, apontam para: a) a necessidade de orientar a aprendizagem individual dos estudantes com a aprendizagem guiada por um docente; b) as competências de literacia da informação devem ser incluídas e desenvolvidas nos planos de estudo; c) a literacia da informação está associada ao ciclo de produção, comunicação, recuperação e utilização do conhecimento. O desenho curricular do programa FOSTER segue o mesmo conceito de formação de profissionais autónomos, reflexivos e críticos, à semelhança dos estudos de caso apresentados, capacitando doutorandos e investigadores para a investigação e para a divulgação dos dados científicos em acesso aberto. A literacia da informação, em conclusão, assume-se como uma ferramenta de aprendizagem essencial para o desenvolvimento da Ciência Aberta, potenciando o entendimento crítico dos conteúdos, a par do desenvolvimento e do progresso da investigação.ABSTRACT - Introduction - Librarians and teachers have developed strategies in higher education to support students' academic performance, particularly due to information literacy skills, which are considered as a powerful intervention tool in the knowledge production. Open Science, centered on the axis of researching open sources/organizing open data/publishing in open access, also survives from the same skills and knowledge. Main purpose - The main purpose of this study is a reflection on higher education libraries mission and their contribution to Open Science as a source and result of scientific research, teaching and learning, through the provision of information literacy skills. Methods – Literature review based on information literacy and Open Science, such as: a) selection of three case studies developed by librarians and Portuguese academic libraries, promoting good practices and the provision of skills that involve how to search, select, evaluate and use the information; b) selection of a European training program for PhDs and researchers on information literacy and its impact on Open Science. Results / Conclusions - The three studies, developed in academic communities, conclude that: a) orienting individual student learning with teacher-guided learning is a need; b) information literacy skills should be included and developed in the academic study plans; c) information literacy is associated with the cycle of production, communication, retrieval and use of knowledge. The curriculum design of the FOSTER program follows the same concept of training autonomous, reflexive and critical professionals, similar to the case studies presented, enabling Ph.D. students and researchers to research and disseminate scientific data in open access. Information literacy, in conclusion, is assumed as an essential learning tool for the development of Open Science, enhancing the critical understanding of contents, along with the development and research progress.info:eu-repo/semantics/acceptedVersio

Male Prostitution in Brazil: A Panorama of the Theoretical Production

Desde 1984, quando surge o primeiro artigo sobre a prostituição masculina no Brasil, outras pesquisas têm explorado a temática no intuito de compreender as vivências de sujeitos que optam por praticar sexo tarifado para complementar sua renda. A partir de um levantamento bibliográfico, o presente estudo encontrou quarenta e cinco produções teóricas sobre prostituição masculina no Brasil. Com as pesquisas catalogadas, foi criado um perfil sociológico do que vem sendo discutido no país. Pretendemos mostrar como esse conhecimento é organizado regionalmente no Brasil em termos de produção. Além disso, apresentaremos as transformações operadas no campo nas últimas três décadas, a partir, por exemplo, da apropriação de diferentes espaços para o desenvolvimento deste “negócio”. Por fim, daremos especial atenção às questões que perpassam sexualidade, raça, profissão e estigmatização.Since 1984, when the first article on male prostitution in Brazil was published, other researches have been exploring this issue, seeking to comprehend the life experiences of subjects that have opted to practice rated sex to complement their earnings. Through a bibliographic review, this study has found forty-five theoretical productions about male prostitution in Brazil. With the catalogued researches, we created a sociological profile of what has been discussed in the country. We intend to show how this knowledge is regionally organised in Brazil regarding its production. Also, we will present the transformations operated in the research field in the last three decades through, for example, the appropriation of different spaces for the development of this “business”. Finally, we will give special attention to issues that permeate sexuality, race, profession and stigmatization

Mesenchymal stem cells surpass the capacity of bone marrow aspirate concentrate for periodontal regeneration

Regenerative approaches using mesenchymal stem cells (MSCs) have been evaluated to promote the complete formation of all missing periodontal tissues, e.g., new cementum, bone, and functional periodontal ligaments. MSCs derived from bone marrow have been applied to bone and periodontal defects in several forms, including bone marrow aspirate concentrate (BMAC) and cultured and isolated bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSCs). This study aimed to evaluate the periodontal regeneration capacity of BMAC and cultured BM-MSCs in the wound healing of fenestration defects in rats. Methodology: BM-MSCs were obtained after bone marrow aspiration of the isogenic iliac crests of rats, followed by cultivation and isolation. Autogenous BMAC was collected and centrifuged immediately before surgery. In 36 rats, fenestration defects were created and treated with suspended BM-MSCs, BMAC or left to spontaneously heal (control) (N=6). Their regenerative potential was assessed by microcomputed tomography (µCT) and histomorphometry, as well as their cell phenotype and functionality by the Luminex assay at 15 and 30 postoperative days. Results: BMAC achieved higher bone volume in 30 days than spontaneous healing (p<0.0001) by enhancing osteoblastic lineage commitment maturation, with higher levels of osteopontin (p=0.0013). Defects filled with cultured BM-MSCs achieved higher mature bone formation in early stages than spontaneous healing and BMAC (p=0.0241 and p=0.0143, respectively). Moreover, significantly more cementum-like tissue formation (p<0.0001) was observed with new insertion of fibers in specimens treated with BM-MSCs within 30 days. Conclusion: Both forms of cell transport, BMAC and BM-MSCs, promoted bone formation. However, early bone formation and maturation were achieved when cultured BM-MSCs were used. Likewise, only cultured BM-MSCs were capable of achieving complete periodontal regeneration with inserted fibers in the new cementum-like tissue

Bioatividade de óleos essenciais sobre o fungo Didymella bryoniae da cultura do pepino

The objective of this study was to evaluate the in vitro antifungal activity of the essential oil of five plant species in the inhibition of mycelial growth of the fungus Didymella bryoniae causer of the gummy stem blight of cucumber (Cucumis sativa). In the inhibition of the mycelial growth of the fungus D. bryoniae was used five concentrations (250, 500, 750, 1000 and 1250 ppm) of essential oil of citronella grass (Cymbopogon nardus), lemon grass (Cymbopogon citratus), peppermint (Mentha piperita), lemongrass (Lippia alba) and eucalipto citriodora (Eucalyptus citriodora), in five times of assessment (2, 4, 6, 8 and 10 days after transplanting). Another experiment was performed with lower concentrations of essential oil of citronella grass (150, 300, 450 and 600 ppm) in four times of assessment (3, 5, 7 and 9 days after transplanting). The essential oils were distributed on the surface of the PDA meium crop (potato-dextrose-agar) for assessment of mycelial growth in different concentrations. The experiments were conducted in a completely randomized design with four replications. The essential oil of lemongrass provided the highest effect of inhibition of mycelial growth of D. bryoniae, 100% of inhibition at all tested concentrations. The essential oil of eucalipto citriodora (Eucalyptus citriodora) provided the smaller effect of inhibition.El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antifúngica in vitro de aceite esencial de cinco especies de plantas en la inhibición del crecimiento micelial del hongo Didymella bryoniae causador del tizón gomoso del tallo del pepino (Cucumis sativus). En la inhibición del crecimiento del micelio del hongo D. bryoniae se utilizaron cinco concentraciones (250, 500, 750, 1000 y 1250 ppm) de aceite esencial de hierba citronela (Cymbopogon nardus), hierba limón (Cymbopogon citratus), menta piperita (Mentha piperita), hierba prontoalívio (Lippia alba) e eucalipto citriodora (Eucalyptus citriodora), en cinco épocas de evaluación (2, 4, 6, 8 y 10 días después del trasplante). Otro experimento se llevó a cabo con concentraciones más bajas del aceite esencial de hierba citronela (150, 300, 450 y ppm 600) en cuatro épocas de evaluación (días 3, 5, 7 y 9 después del trasplante). Los aceites esenciales se han distribuido sobre la superficie del medio de cultivo PDA (agar de dextrosa de patata) para evaluar el crecimiento del micelio en diferentes concentraciones. Los experimentos se llevaron a cabo en un diseño completamente al azar con cuatro repeticiones. El aceite esencial de hierba limón produjo el mayor efecto de inhibición del crecimiento micelial del hongo D. bryoniae, 100% de inhibición en todas las concentraciones utilizadas. El aceite esencial de eucalipto citriodora (Eucalyptus citriodora) fue el que causó el menor efecto de inhibición.O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade fungicida in vitro do óleo essencial de cinco espécies vegetais na inibição do crescimento micelial do fungo Didymella bryoniae causador crestamento gomoso da haste do pepino (Cucumis sativus). Na inibição do crescimento micelial do fungo D. bryoniae foram usadas cinco concentrações (250, 500, 750, 1000 e 1250 ppm) do óleo essencial de capim-citronela (Cymbopogon nardus), capim-limão (Cymbopogon citratus), hortelã-pimenta (Mentha piperita), erva-cidreira (Lippia alba) e eucalipto citriodora (Eucalyptus citriodora), em cinco épocas de avaliação (2, 4, 6, 8 e 10 dias após repicagem). Outro experimento foi realizado com concentrações menores do óleo essencial do capim citronela (150, 300, 450 e 600 ppm), em quatro épocas de avaliação (3, 5, 7 e 9 dias após repicagem). Os óleos essenciais foram distribuídos na superfície do meio de cultura BDA (batata-dextrose-ágar) para avaliação do crescimento micelial nas diferentes concentrações. Os experimentos foram instalados no delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições. O óleo essencial do capim-limão proporcionou o maior efeito de inibição do crescimento micelial do fungo D. bryoniae, 100 % de inibição em todas as concentrações utilizadas. O óleo essencial do eucalipto citriodora (Eucalyptus citriodora) proporcionou o menor efeito de inibição

FACTORS RELATED TO DEPRESSIVE SYMPTOMS IN OLDER ADULTS WITH DIABETES MELLITUS

Objective: to identify the factors related to depressive symptoms in older adults with Diabetes Mellitus.Method: a cross-sectional study with a quantitative approach conducted with 144 older adults registered in 72 Family Health units from the municipality of João Pessoa, Paraíba, Brazil. The data were collected from September to December 2019, using an instrument to obtain information referring to the sociodemographic and clinical profile and the Geriatric Depression Scale by means of descriptive and inferential statistics.Results: it was observed that 75.7% of the diabetic older adults did not present depressive symptoms. There was a significant association between depressive symptoms and the following variables: personal income (p=0.044), type of income (p=0.020), dyslipidemia (p=0.038), diabetes complications (p=0.045) and retinopathy (p=0.033).Conclusion: the social and health factors, as well as those related to diabetes, can exert negative influences on older adults' psychological state and favor the onset of depressive symptoms

Melhoria da qualidade de vida em indivíduos vegetarianos por meio da educação alimentar e nutricional

A dieta vegetariana tem efeitos benéficos à saúde, embora haja risco de deficiências nutricionais caso não seja bem planejada. Diante disso, este trabalho teve por objetivo promover a saúde, a qualidade de vida e a prevenção da deficiência nutricional em vegetarianos e desenvolver habilidades práticas nos discentes e nos profissionais de saúde. Trata-se de um estudo transversal com vegetarianos, adultos, de ambos os sexos. Dados antropométricos, sociodemográficos e de estilo de vida foram coletados nos 476 atendimentos nutricionais realizados em 239 vegetarianos. Foram criados protocolos e realizados simpósios e oficinas. Após diagnóstico nutricional, elaboraram-se orientações para cada indivíduo. A deficiência de vitamina B12, ferritina e hemoglobina ocorreram em 93%, 37% e 11% dos indivíduos no 1º atendimento. Após as intervenções, a maioria reduziu a deficiência, demonstrando a importância do acompanhamento aos indivíduos vegetarianos

perceção dos cidadãos sobre os cuidados de enfermagem

O enfermeiro de família, pelos seus saberes e sua ação apresenta-se como um recurso importante para as famílias portuguesas. Constituiu objetivo do presente estudo descrever a perceção dos cidadãos sobre os cuidados de enfermagem prestados pelo enfermeiro de família no âmbito da enfermagem familiar. Métodos: Estudo de natureza qualitativa, junto de doze participantes, utentes de uma unidade de saúde familiar do norte de Portugal, recorrendo-se à entrevista semiestruturada, no último trimestre de 2018. Utilizou-se a técnica de análise de conteúdo com procedimentos indutivos, considerando as competências específicas do Enfermeiro Especialista em Enfermagem Comunitária na área de Enfermagem de Saúde Familiar (EEECAESF) e procedimentos dedutivos, definindo-se categorias à posteriori. Resultados: Na perspetiva do cidadão o enfermeiro de família conhece o sistema familiar, alicerçando os seus cuidados numa abordagem colaborativa, embora não tenham como foco a família como um todo. Destacam-se como pontos fortes o profissionalismo, os comportamentos afetivos, de respeito, empatia e as interações focadas na pessoa e na compreensão dos seus problemas e como constrangimentos o respeito pelas dotações seguras e organizacionais. Considerações Finais: as perceções integram alguns dos aspetos relativos às competências requeridas para o enfermeiro de família. Evidencia-se a necessidade de um maior investimento por parte dos enfermeiros na melhoria da perceção sobre os enfermeiros de família junto dos cidadãos.The family nurse, through their knowledge and action, is an important resource for Portuguese families. The objective of the present study was to describe the perception of citizens about the nursing care provided by family nurses in the context of family nursing. Methods: A qualitative study, with twelve participants, users of a family health unit in the north of Portugal, using a semi-structured interview, in the last quarter of 2018. The content analysis technique was used with inductive procedures, considering the specific competences of the Nurse Specialist in Community Nursing in the area of Family Health Nursing (EEECAESF) and deductive procedures, defining categories a posteriori. Results: From the citizen's perspective, family nurses know the family system, basing their care on a collaborative approach, although they do not focus on the family as a whole. Professionalism, affective behaviors, respect, empathy and interactions focused on the person and the understanding of their problems stand out as strengths, and respect for safe staffing as threats. Final Considerations: the perceptions integrate some of the aspects related to the competences required for the family nurse. The need for greater investment on the part of nurses to improve the perception of family nurses among citizens is evident.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Avaliação do efeito curativo e preventivo do óleo essencial do capim citronela no controle de Pyricularia grisea

The rice blast is the most important disease of the rice, due to the damage that it causes in the productivity andgrain quality. Aiming at the use of essential oils and plant extracts to control this disease. The objective of this study was to evaluate the curative and preventive effect of the extracts and essential oil of citronella grass (Cymbopogon nardus L.) to control rice blast. The evaluation of the curative effect was performed seven days after the sprayingwith the extracts of citronella grass. As for the evaluation of preventive effect, the plants were sprayed with thetreatments and 24 hours after inoculated with 20 mL of the spore solution per tray. In the assessing of the curative effect, it was found that the application of fungicide and the diluted essential oil of citronella grass at a concentration of 2% plants showed no symptoms of blast in 50% of the repetitions. Regarding the evaluation of preventive effect, the plants showed no symptoms of the disease in concentrations of 1.5, 1.75 and 2% of the essential oil of citronella grass in 50% of the repetitions.A brusone é a doença de maior importância da cultura do arroz, devido aos prejuízos que causa na produtividade e na qualidade dos grãos. Visando o emprego de óleos essencial e extratos vegetais no controle desta doença, objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito curativo e preventivo de extratos e óleo essencial do capim citronela (Cymbopogon nardus L.) no controle da brusone do arroz. A avaliação do efeito curativo foi realizada após sete dias da pulverização com os extratos do capim citronela. Quanto à avaliação do efeito preventivo, as plantas foram pulverizadas com os tratamentos e após 24 horas inoculadas com 20mL da solução de esporos por bandeja. Na avaliação do efeito curativo, verificou-se que com a aplicação do fungicida e do óleo essencial diluído do capim citronela na concentração de 2% as plantas não apresentaram sintomas da brusone em 50% das repetições. Em relação à avaliação do efeito preventivo, as plantas não apresentaram sintomas da doença nas concentrações de 1,5; 1,75 e 2% do óleo essencial do capim citronela em 50% das repetições

Early hematopoietic stem cell transplantation in a patient with severe mucopolysaccharidosis II : 7 years follow-up

Mucopolysaccharidosis type II (MPS II - Hunter syndrome) is an X-linked lysosomal storage disorder caused by a deficiency in the enzyme iduronate-2 sulfatase (I2S), leading to the accumulation of the glycosaminoglycans, affecting multiple organs and systems. Enzyme replacement therapy does not cross the blood brain barrier, limiting results in neurological forms of the disease. Another option of treatment for severe MPS, hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) has become the treatment of choice for the severe form of MPS type I, since it can preserve neurocognition when performed early in the course of the disease. To date, only few studies have examined the long-term outcomes of HSCT in patients with MPS II. We describe the seven-year follow-up of a prenatally diagnosed MPS II boy with positive family history of severe MPS form, submitted to HSCT with umbilical cord blood cells at 70 days of age. Engraftment after 30 days revealed mixed chimerism with 79% donor cells; after 7 years engraftment remains at 80%. I2S activity 30 days post-transplant was low in plasma and normal in leukocytes and the same pattern is observed to date. At age 7 years growth charts are normal and he is very healthy, although mild signs of dysostosis multiplex are present, as well as hearing loss. The neuropsychological evaluation (Wechsler Intelligence Scale for Children - Fourth Edition - WISC-IV), disclosed an IQ of 47. Despite this low measured IQ, the patient continues to show improvements in cognitive, language and motor skills, being quite functional. We believe that HSCT is a therapeutic option for MPS II patients with the severe phenotype, as it could preserve neurocognition or even halt neurodegeneration, provided strict selection criteria are followed