3D printing-based technology using mesenchymal stem cells for personalized psoriasis therapy

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2020, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A psoríase é uma doença inflamatória crónica que afeta cerca de 2-3% da população mundial. Esta doença é caracterizada pela hiperproliferação aberrante dos queratinócitos e infiltração de células inflamatórias na derme que resultam no aparecimento de lesões cutâneas ruborizadas, pruriginosas e em placa. A sua patogénese tem sido intensamente estudada ao longo dos anos, no entanto o mecanismo exato da doença é bastante complexo e permanece elusivo. Esta complexidade inclui fatores genéticos, epigenéticos e ambientais e uma forte interação entre o sistema imunitário inato e adaptativo. O desequilíbrio de vias inflamatórias leva a uma forte ativação das células dendríticas e produção de péptidos antimicrobianos, citocinas e quimiocinas que exacerbam a resposta inflamatória. Atualmente, o tratamento tópico desta patologia passa pela aplicação de cremes emolientes, queratolíticos e anti-inflamatórios para tratar as zonas afetadas e diminuir a inflamação da pele. Nos casos mais severos da doença, muitas vezes é necessário recorrer a terapêutica sistémica, que pode desencadear efeitos adversos mais graves. Assim sendo, as terapêuticas tópicas são preferíveis, contudo, atualmente apenas aliviam os sintomas e são insuficientes no tratamento da patologia. Por este motivo, e considerando que a indústria farmacêutica está em crescente desenvolvimento, é incentivado o desenvolvimento de abordagens terapêuticas inovadoras com tecnologias mais avançadas. O secretoma das células estaminais mesenquimais (MSC) poderá ser uma boa opção para contornar este problema. As células estaminais mesenquimais (MSC) pertencem a um subgrupo de células estaminais e podem ser isoladas a partir de vários tecidos como a medula óssea, o cordão umbilical, os dentes, a pele ou mesmo o tecido adiposo. Estas células possuem propriedades regenerativas e imunomoduladoras, através da secreção de fatores bioativos que atuam de forma parácrina, induzindo a remodelação tecidular. Tendo em conta a fragilidade destas células, vários estudos referem vantagens na utilização do secretoma celular em substituição das mesmas. O secretoma constitui os biofatores produzidos pela maquinaria celular como proteínas, hormonas, lípidos e ácidos nucleicos que exercem funções importantes não só no seu desenvolvimento, mas também no de outras células. As suas mais-valias incluem uma fácil utilização e armazenamento, uma menor imunogenicidade e acessibilidade económica. Considerando estas suas propriedades, o secretoma das MSC é um potencial candidato para uma terapêutica de inovação tópica. Atualmente, o desenvolvimento de biotintas para aplicação tópica recorrendo à impressão 3D tem sido revolucionária no sentido em que permite a produção de formas farmacêuticas melhoradas e personalizadas. A impressão 3D é uma técnica utilizada em diferentes áreas incluindo produção de órgãos, próteses, implantes, modelos anatómicos e formas farmacêuticas. Esta tecnologia baseia-se na criação de um ficheiro modelo 3D através de um software digital de design, em inglês denominado por computer aided design (CAD) software. Depois de desenvolvido, este ficheiro modelo é convertido num formato reconhecido pela impressora a utilizar e procede-se a impressão 3D da biotinta com o design pré-definido. Dentro das várias tecnologias de impressão 3D, a extrusão é a mais adequada para a bioimpressão de células porque permite a impressão de formulações semissólidas à temperatura ambiente, mantendo a viabilidade celular; permite também a utilização ampla de vários polímeros e é facilmente personalizável, ajustando parâmetros da formulação e do processo. A escolha do polímero para a formulação da biotinta é de extrema importância porque os seus parâmetros físico-químicos irão influenciar significativamente a qualidade do produto final. Um polímero ideal deve ser biocompatível, biodegradável, pouco tóxico e possuir boas propriedades mecânicas para manter a integridade do impresso 3D. Há dois principais tipos de polímeros: os polímeros naturais e os polímeros sintéticos, sendo que os primeiros geralmente possuem melhor biocompatibilidade, mas piores propriedades mecânicas relativamente aos últimos, que possuem pior biocompatibilidade, mas melhores propriedades mecânicas. O alginato e o quitosano são dois polímeros naturais frequentemente utilizados por investigadores na impressão 3D de células porque, além de possuírem as características previamente descritas, também são relativamente económicos. Após seleção dos polímeros, é necessária a produção de uma formulação otimizada que seja imprimível, mantenha a sua integridade após impressão e que constitua um meio adequado para a incorporação do secretoma celular. No sentido de evitar gastos excessivos de tempo e dinheiro no desenvolvimento de várias formulações e apenas posteriormente averiguar a sua qualidade numa abordagem quality by testing, a indústria farmacêutica tem apostado numa abordagem muito mais eficiente denominada quality by design (QbD). A QbD é uma abordagem sistemática, proativa e baseada na gestão de risco que incentiva a definição dos padrões de qualidade antes do processo de manufatura propriamente dito e a adoção de procedimentos consistentes para atingir o objetivo de qualidade previamente definido. O principal objetivo deste trabalho é a otimização de uma forma farmacêutica tridimensional (3D) para futura libertação tópica de secretoma de MSC, utilizando uma estratégia de QbD. Formulações iniciais de alginato e quitosano foram desenvolvidas para avaliar as suas propriedades físico-químicas, estudo esse que resultou na exclusão das formulações de quitosano por apresentarem valores de pH incompatíveis com a viabilidade celular. Subsequentemente, um estudo de otimização foi desenvolvido, onde se avaliou o impacto da concentração de alginato, da concentração do agente de gelificação e do efeito pré-crosslink no tempo de gelificação, que foi definido como a característica de qualidade a controlar. Os resultados demonstraram que apenas o agente de gelificação apresentou um impacto significativo no tempo de gelificação. Esta abordagem de QbD é importante para perceber em que concentrações e condições se deve trabalhar para atingir a qualidade do produto pretendida. A formulação otimizada foi utilizada como prova de conceito para corroborar a sua sustentabilidade para incorporar o secretoma celular das MSC. A produção de formas farmacêuticas que requerem a manipulação celular, deve ser realizada em condições asséticas. Quando isso não é possível, opta-se pela esterilização do material e meio de cultura e adição de conservantes à formulação. O impacto do método de esterilização, bem como da incorporação de meio celular na formulação foi avaliado recorrendo a uma análise reológica. Verificou-se uma menor interferência nos valores iniciais de viscosidade com o método de esterilização UV-C e assistiu-se a um aumento de viscosidade com a adição de meio celular. Também foi estudada a influência da incorporação na viscosidade da biotinta e a biocompatibilidade de cinco conservantes diferentes, tendo sido selecionado o NipaginTM/Nipazol® como o mais adequado. O processo de impressão e a qualidade do produto final também foram avaliadas e concluiu-se que a formulação otimizada está efetivamente apta para ser utilizada na incorporação de secretoma celular de MSC. Trabalhos futuros nesta área podem incluir o estudo e otimização de formulações com misturas de polímeros naturais e sintéticos, a fim de se obter um melhor comprometimento entre biocompatibilidade e propriedades mecânicas e também estudar a libertação de secretoma celular de MSC através da forma farmacêutica 3D.Psoriasis is a chronic inflammatory disease characterized by hyperproliferation of keratinocytes and infiltration of inflammatory cells manifested by characteristic skin lesions typically red, itchy, and scaly. Enhanced understanding of the underlying pathomechanisms and the interplay between the innate and adaptive immune system resulted in the development of many therapeutical options. Nevertheless, psoriasis remains without cure and this lack of curative therapeutics in the market demands a search for novel therapeutical approaches. Mesenchymal stem cell (MSC) derived secretome presents regenerative and immunomodulatory properties and therefore may be a suitable option if embedded in the adequate bioink. In the pharmaceutical industry, the development of hydrogel bioinks for topical application using semisolid extrusion-based 3D printing has been revolutionary since it allows the production of improved pharmaceutical forms with tuneable properties. Alginate and chitosan are natural polymers commonly used by researchers in this area due to their biocompatibility, biodegradability, non-toxicity, and relatively low cost. The main goal of this project was the optimization of a 3D system for future application for topical delivery of secretome using a Quality by Design (QbD) approach. Initial formulations were developed to understand physicochemical properties of both polymers and chitosan formulations were excluded for not presenting biocompatible pH values. Then an optimization study was performed where the impact of different parameters on gelation time was evaluated. The results showed that only the crosslinking agent had a significant impact on gelation time. A proof of concept was performed to guarantee the suitability of the optimized hydrogel in encapsulating cells secretome. The rheological influence of two sterilization methods, incorporation of preservatives and cell culture medium were studied, as well as the biocompatibility of five different preservatives. The printability process and the quality of the final product in terms of structural properties were also evaluated. The results obtained confirmed the potential use of this bioink for secretome delivery.Com o patrocínio da Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa e do Instituto Politécnico de Setúbal

Evalution of global self-concept in higher education students

"International Conference on New Horizons in Education", realizada na Guarda, de 5-7 de Junho de 2011A presente investigação centra-se nos processos de mudança do auto-conceito no período designado por pós-adolescência e traduz-se num estudo comparativo entre os níveis de auto-conceito global de estudantes do ensino superior iniciantes e finalistas. Recorrendo a uma metodologia de cariz quantitativo, a nossa amostra foi constituída por 552 sujeitos. Para a avaliação do nível de auto-conceito global valemo-nos da adaptação do Self Description Questionnaire III realizada por Faria e Fontaine (1992) a estudantes universitários portugueses. Concluímos que não existem diferenças significativas entre os dois grupos de estudantes, apesar dos iniciantes apresentarem um nível de auto-conceito global inferior aos finalistas. Estes resultados podem ser compreendidos a partir das experiências e ansiedades vivenciadas pelos estudantes do ensino superior, quer no processo de adaptação ao contexto académico, no caso dos que estão a iniciar a formação, quer na antecipação de reais dificuldades de inserção no mercado de trabalho, no caso dos finalistas

The link between social responsibility and diversity in the workplace

Corporate Social Responsibility (CSR) is gaining increasing importance, not only to organizations, but to society in general. In addition, as the labour force is ageing, and more women are economically active, the importance of efforts towards intergenerational work teams and gender equality, is growing. Thus, to contribute to a deeper insight on the fields of CSR, Human Resource Management (HRM), and Diversity, it became interesting to study the Portuguese context, in terms of the organizational practices adopted, how firms align CSR with HRM, and the way HRM practices influence Diversity Management, focusing on the perceptions of practices of gender and age diversity, in companies. A questionnaire was conducted to 240 participants, where their perceptions were investigated, according to their socio-demographic characteristics. The results showed that women are more supportive of gender quota systems, than men. Thus, men are more influenced by meritocratic beliefs. Although measures of age-diversity had a greater acceptance, when compared to gender-diversity practices, we found that older individuals tend to perceive negatively initiatives that benefit a younger generation. Therefore, Generation X is highly reactive to these practices. Finally, highly literate respondents are more in favour of measures that benefit a specific group of individuals (e.g. women, or older workers). This finding can be associated with their awareness of CSR.A Responsabilidade Social Empresarial (RSE) tem cada vez mais importância, não apenas para as organizações, como para a sociedade em geral. À medida que a força de trabalho envelhece, e que mais mulheres estão economicamente ativas, a importância dos esforços relativos a equipas de trabalho intergeracionais e igualdade de género, aumenta. De forma a contribuir para uma visão mais profunda sobre as áreas da RSE, Gestão de Recursos Humanos (GRH), e Diversidade, tornou-se interessante estudar o contexto português, relativamente às práticas organizacionais adotadas, à forma como as empresas alinham a RSE com a GRH, e à influência das práticas de GRH na Diversidade, focando nas perceções de práticas de diversidade de género e etária, nas empresas. Foi aplicado um questionário a 240 participantes, no qual as perceções dos mesmos foram investigadas, de acordo com as suas características sócio-demográficas. Os resultados mostraram que as mulheres são mais apoiantes de sistemas de quotas de género, do que os homens. Assim, os homens são mais influenciados por crenças meritocráticas. Apesar de as medidas de diversidade etária terem tido uma maior aceitação, quando comparadas às práticas de diversidade de género, descobrimos que os indivíduos mais velhos tendiam a percecionar negativamente as iniciativas que beneficiavam a geração mais jovem. Como tal, a Geração X é altamente reativa a estas práticas. Por fim, os respondentes com elevados níveis de literacia são mais a favor de medidas que beneficiam um grupo específico de indivíduos (e.g. mulheres, ou trabalhadores seniores). Este resultado pode estar associado à consciencialização sobre RSE

UPTAKE ICT: A NETWORK OF STAKEHOLDERS AGAINST DIGITAL ILLITERACY

#Uptake_ICT2life-cycle: digital literacy and inclusion to learners with disadvantaged background# is an Erasmus + project that aims at enhancing digital literacy among adults with disadvantaged backgrounds. The partners have produced didactic materials and pedagogical guidelines to meet this aim. Based on these materials, and their didactical exploitation, a network of stakeholders was formed and trained in order to subsequently be able to teach citizens that both have disadvantaged backgrounds and are digitally illiterate or quasi-illiterate. This paper relates how this experience was undertaken in Portugal in what concerns the creation of the Stakeholders' network and presents its results. The reality that has boosted the creation of this project was the shocking situation portrayed in 2013 Eurostat statistics, according to which one in every three Portuguese had never used the Internet. Uptake ICT was then conceived and designed in order to engage synergies to counter this problem, aiming at a variety of focus groups (but paying special attention to learners of various ages that have never used Internet, like adults with disadvantaged backgrounds), in line with the transversal priorities for education, training and youth of the European Commission and seeking to assist in the meeting of the aims of Europe 2020. To add up, it also intended to enhance and to develop ideas that answer to the Societal Challenges’ needs, by sharing and creating scientific, social, technological and policies impact. The main aspects that the project focused on were digital literacy inclusion, re-qualification and employability of disadvantaged citizens, in order to help them to face the present process of civilizational change (social, political, economic, and cultural). The addressed priorities were to contribute towards a reduction of the number of low-skilled adults (re-skilling and up-skilling of adults thanks to lifelong-learning and training), and to strengthen the links between education and employment in the area of ICT | New technologies | digital literacy and digital competences | basic skills. After having identified both the most preeminent needs and ways of integrating ICT in daily life, and a set of good practices already tested in the areas of digital literacy, inclusion and employability, the project team has built a number of educational contents addressing the issues that were considered most relevant in three main levels of knowledge (Basic, Intermediate, and advanced) , and in the four languages of the project (Portuguese, Italian, English and German). The decision to work on the three levels was due to the fact that in the various partner countries there were groups of target audiences that were positioned differently with respect to their level of digital expertise. The teachinglearning materials that were conceived were afterwards reworked in order to fit in a variety of contexts and formats (e-modules, ebook, MOOC). This option for multi-format was taken having in mind different learning profiles, and the need to provide flexible and attractive materials in order to avoid any kind of rejection. Finally, a number of didactical guidelines were produced in order to provide an interface of suggestions to the stakeholders that would use these materials in their classes or workshop sessions.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

A breakthrough wine concept

Double degreeThe Portuguese wine market model is traditionally based on attributes such as region, grapes and enologist, which makes an educated choice of the wine by younger consumers a difficult and uncomfortable process. The purpose of this work is to develop a hypothesis of a wine based on what young consumers value, such as the bond that drinking wine creates (friendship), instead of the traditional attributes. This new wine will break its connection with tradition, becoming a modern product, directed to an unconventional target that is increasingly consuming more wine

Autoconceito Académico e ELearning no Ensino Superior em Portugal

A presente investigação tem por objetivo descrever o impacto da utilização dos ambientes online no autoconceito académico de estudantes do ensino superior português (n=70), a partir da análise qualitativa das suas percepções e narrativas e tendo como referencial de fundo o modelo de e- moderating, de Salmon (2000). Os resultados mostram que estes ambientes, ancorados num design centrado no desenvolvimento de competências e na aprendizagem e num modelo pedagógico virtual baseado nos princípios do construtivismo, da autonomia e da interação, podem ter efeitos muito positivos no autoconceito académico dos estudantes do ensino superior, a nível das diferentes dimensões consideradas: Motivação, Orientação para a Tarefa, Confiança nas suas Capacidades e Relação com os Colegas. São discutidas as implicações dos resultados encontrados, tanto do ponto de vista de intervenção prática, quer em termos de investigações futuras

Crise dos refugiados no Twitter: As representações sociais e o papel dos influenciadores da rede

O aparecimento dos social media provocou uma mudança de paradigma relativamente à forma de acesso à informação, uma vez que esta deixa de chegar apenas através dos média e passa a chegar também, mas não só, através de múltiplas partilhas feitas pelos utilizadores. É, então, através destes múltiplos canais que, atualmente, se acede a diferentes realidades, muitas delas completamente distantes do cidadão, como é o caso da crise dos refugiados.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Optimization of raw ewes’ milk high-pressure pre-treatment for improved production of raw milk cheese

Serra da Estrela protected designation of origin (PDO) cheese is manufactured with raw milk from Bordaleira and/or Churra Mondegueira da Serra da Estrela sheep breeds. Several socio-environmental shortcomings have reduced production capacity; hence, treatments that may contribute to its efficient transformation into cheese are welcome. High-pressure processing (HPP) milk pre-treatment may contribute to a cheese yield increment, yet optimization of processing conditions is warranted. An initial wide-scope screening experiment allowed for pinpointing pressure intensity, holding time under pressure and time after HPP as the most important factors influencing curd yield. Based on this, a more targeted screening experiment allowed for selecting the range of experimental conditions to be used for an experimental design study that revealed an HPP treatment at 121 MPa for 30 min as the optimum for milk processing to improve curd yield (>9%) and effectively maintain the beneficial cheese microbiota; the optimum was validated in a final experimental framework