Analysis of the role of Granzyme-A in the development of colorectal cancer stem cells

Colorectal cancer is the third leading cause of cancer death worldwide with nearly 150.000 new cases diagnose annually. New therapies have been developed for the last years targeting different proliferation and survival signalling pathways but few advances have been done to avoid relapse in patients. Cancer stem cells are proposed as the main mechanism of resistance in current therapies. These cells have been described as a subset among all the tumour cell populations which have stemness properties such as self-renewal and differentiation capabilities. These features allow them to survive after antitumour treatments and regenerate the entire tumour mass. Also, cancer stem cells have been proposed as the responsible of metastasis. Inflammation in colorectal cancer is a sign of poor prognosis and it has been proposed as the main driver of the tumour progression. Its relation with cancer stem cells has not been clasified yet but pro-inflammatory molecules such as TNF-α or IL-1B are able to activate cancer stem cells-related signalling pathways such as Wnt or Notch pathways. Granzyme-A, a protease released by immune cells, is involved in implication during like bacterial sepsis or arthritis. Our preliminary data indicate it is involved in development of colorectal cancer. The current study analyse the implication of Granzyme-A in the activation of CSCs during inflammation-associated colorectal cancer in a mouse model

Fractura y mecanismos de deformación de un polipropileno reforzado con cenizas y modificado con un copolímero de bloque

[Resumo] Nesta memoria, preséntase os resultados do estudio da fractura e deformación de compostos de polipropileno (PP), un copolímero olefínico en bloque (OBC) e cinzas, procedentes da queima de biomasa forestal, modificadas cun axente de acoplamento silano e procesadas por técnicas de extrusión. Caracterizáronse as propiedades mecánicas dos novos materiais mediante a súa resistencia á tracción, ó impacto e a morfoloxía asociada obtida por microscopia electrónica de varrido (SEM). As propiedades térmicas dos novos materiais compostos e a matriz polimérica, foron estudados por calorímetría diferencial de varrido (DSC), análise termogravimétrico (TGA) e a súa temperatura de flexión baixo carga (HDT). Foron avaliados os parámetros de fractura en baixa e moderada velocidade. Determinaronse tamén os mecanismos de deformación implicados no proceso de fractura de cada formulación dos novos materiais compostos.[Resumen] En esta memoria se presenta los resultados del estudio de la fractura y los mecanismos de deformación de materiales compuestos basados en polipropileno (PP), un copolímero olefínico de bloque (OBC) y cenizas provenientes de la combustión de biomasa forestal modificadas con un agente de acoplamiento tipo silano y procesados mediante técnicas de extrusión. Se han caracterizado las propiedades mecánicas de los nuevos materiales estudiados mediante el análisis de su resistencia a tracción, impacto y dureza, relacionándolos con su morfología, observada por microscopía electrónica de barrido (SEM). Las propiedades térmicas de los materiales compuestos y la matriz polimérica, han sido analizadas mediante análisis por calorimetría diferencial de barrido (DSC), análisis termogravimétrico (TGA) y la temperatura de flexión bajo carga (HDT). Se evaluaron los parámetros de fractura en condiciones de baja y moderada alta velocidad, así como, los mecanismos de deformación que intervienen durante el proceso de fractura para cada formulación de los nuevos materiales.[Abstract] In this work, the fracture and failure behaviour of environmentally friendly composites based on polypropylene (PP), an olefin block copolymer (OBC) and ash, from wood combustion, modified with a silane coupling agent were investigated. The mechanical properties of new composites have been characterized by analyzing their tensile properties, impact toughness and associated morphology by scanning electron microscopy (SEM). The thermal properties of the new materials and the polymer matrix were analized by differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetric analysis (TGA) and measuring their heat deflection temperature (HDT). The fracture parameters were determined at low and moderately high speed. The role of deformation mechanisms, involved during the process of fracture, was investigated by SEM and optical microscopy

Las vistas panorámicas de núcleos urbanos: propuesta para su análisis y aplicación al caso de Andalucía

Las vistas panorámicas urbanas presentan un gran interés desde las perspectivas histórica, de identidad, de preferencia paisajística, de legibilidad territorial y como recurso económico. Muchas de ellas se generaron a través de modelos tradicionales de creación de ciudad, pero como consecuencia de la ausencia de herramientas para su gestión y del desarrollo acelerado de las últimas décadas, frecuentemente se han deteriorado o han desaparecido. En esta tesis se propone una estrategia aplicada para el análisis de las vistas panorámicas urbanas, que se definen como las imágenes de un núcleo urbano, ya sean percepciones directas de un observador o representaciones en cualquier medio, que incluyan una parte sustancial y relevante del tejido edificado, y permitan la percepción, más o menos nítida, de sus límites y de su marco territorial. Consideramos que esas vistas pueden obtenerse tanto desde puntos interiores (p.e. torres con miradores) como exteriores a la ciudad (p.e. colinas cercanas). La metodología descrita es una aportación basada en los principios del Convenio Europeo del Paisaje (CEP), así como en una extensa revisión de referencias previas, tanto académicas como instrumentos internacionales de ordenación urbana y territorial. Se organizaría en tres grandes etapas: (1) conocimiento de los paisajes, (2) definición de objetivos de calidad paisajística y (3) determinación de guías, propuestas y recomendaciones. En este trabajo se desarrolla en profundidad la primera de ellas, y se realizan aproximaciones a las dos siguientes, cuyo estudio detallado requeriría procedimientos de participación ciudadana específicos que exceden las posibilidades de esta tesis doctoral. La fase de conocimiento de los paisajes comprende una secuencia compuesta por las etapas de: (1) estudio de los factores que influyen en las vistas panorámicas, (2) análisis de su evolución histórica, (3) identificación de los principales puntos de visión, (4) caracterización detallada de las vistas seleccionadas (que incluye un estudio de su legibilidad y significados) y (5) evaluación de las mismas (en la que se analizan los instrumentos de planeamiento urbano y territorial). Este esquema incluye procedimientos específicos para el análisis de diferentes aspectos de las vistas, como la morfología del relieve, la visibilidad, la popularidad de ciertos enclaves y la relación entre la planta urbana y los panoramas. Incorpora procesos de participación pública y, entre otras cuestiones, permite obtener resultados útiles para la sensibilización paisajística y la toma de decisiones espaciales. La metodología propuesta se ha aplicado en cinco casos representativos de la estructura urbana de Andalucía, que han sido seleccionados con el objeto de experimentar los procedimientos en situaciones muy diversas. Se trata de las poblaciones de Ardales (provincia de Málaga), Alhama de Granada (provincia de Granada), Osuna (provincia de Sevilla), Jaén y Málaga. Se incluye también una aproximación al sistema urbano andaluz, centrado en las cuestiones vinculadas a la generación de vistas de cada población. La aplicación particular de los métodos propuestos a esos casos ha hecho posible contrastar y enriquecer la metodología, concretar sus limitaciones y generar documentación específica para cada población

El paisaje en el Conjunto Arqueológico de Itálica

En reseña de:Zoido Naranjo, Florencio (director); Caballero Sánchez, Juan Vicente; Fernández Salinas, Víctor; García Vázquez, Irena y López Martín, Esther (2013). El paisaje en el conjunto arqueológico de Itálica. Sevilla: Consejería de Educación, Cultura y Deporte. Junta de Andalucía. 392 pp. ISBN: 978-84-9959-144-5 (Edición digital en CD)

Relevancia de la inflamación mediada por la granzima A en autoinmunidad y cáncer

La inflamación es un mecanismo clave que regula la actividad del sistema inmunitario en situaciones fisiológicas, por ejemplo, durante la eliminación de tumores y agentes patógenos. Sin embargo, la inflamación también es la responsable de respuestas fisiopatológicas durante las enfermedades infecciosas o autoinmunes y en la génesis y progresión del cáncer.Las células citotóxicas (células NK y linfocitos T citotóxicos) son esenciales para la defensa del huésped contra patógenos y tumores, sin embargo, también pueden estar implicadas en el daño asociado a inflamación crónica a través de la producción de citoquinas proinflamatorias o de la regulación de su producción por otros grupos celulares.Uno de los mecanismos que utilizan estas células para ejercer sus efectos citotóxicos es la exocitosis granular. Este es un proceso de interacción funcional entre la Perf (proteína formadora de poros) y las granzimas (Gzms), una familia de proteasas de serina, contenidas dentro de los gránulos citoplasmáticos de las células citotóxicas.Las granzimas A y B son las Gzms más abundantes y mejor estudiadas. Tradicionalmente, se ha pensado que las Gzms ejercen sus efectos biológicos eliminando las células afectadas. En la actualidad, ha quedado bien esclarecido que la GzmB es eminentemente citotóxica. Recientemente, varios grupos de investigación, incluido el nuestro, han destacado la capacidad de la GzmA para actuar como un mediador proinflamatorio.El objetivo general de esta tesis ha sido establecer la relevancia biológica de la inflamación inducida por la GzmA in vivo, durante la artritis reumatoide (AR) inducida con colágeno o el cáncer colorrectal de origen inflamatorio (CAC) inducido con DSS/AOM, así como, estudiar el mecanismo implicado en cada patología.Los resultados de este trabajo han permitido constatar que la deficiencia de GzmA atenúa la severidad de la artritis inducida por colágeno, lo que se acompaña de una menor producción de citoquinas proinflamatorias, en suero y en cultivo de ganglios linfáticos.Durante el estudio constamos que, al igual que lo que ocurre en humanos, los niveles de GzmA se incrementan en el suero y en las articulaciones de ratones con AR. Además que, la generación de la respuesta de células B frente al colágeno disminuye en ausencia de GzmA. Sin embargo, la protección observada en ausencia de GzmA no se debe a la generación de menos células T autorreactivas.Por otro lado, hemos comprobado que, la GzmA induce la formación y maduración de OCs desde sus precursores a través de un mecanismo dependiente de TNF. Con respecto a la implicación de la GzmA en el CAC se constató que, en ausencia de GzmA disminuyó la severidad del CAC inducido por DSS/AOM. Por otro lado, la disminución de la severidad en los ratones deficientes en GzmA se acompañó de una menor producción de citoquinas proinflamatorias a nivel intestinal. Durante la ausencia de GzmA disminuyó la incidencia tumoral, el número de tumores por ratón y el tamaño de los tumores desarrollados. Además, la GzmA reguló la transición de un epitelio sano a carcinoma, estando implicada en la transición epitelio-mesénquima y la proliferación celular.En cuanto al mecanismo implicado, se demostró que la GzmA activa inducía la producción de IL-6 y TNF en macrófagos de fenotipo M1 por un mecanismo dependiente de NF-kB. Posteriormente, la producción de IL-6 inducida por GzmA en macrófagos M1, promovía la activación de STAT3 en células de CCR.Finalmente, hemos demostrado que la inhibición de GzmA extracelular por Serpinab6b reduce los niveles de las citoquinas proinflamatorias IL-6 y TNF y el número e incidencia de tumores.Otro resultado relevante de este trabajo es que se demostró que existe correlación significativa entre la expresión de mRNA de GZMA y la inflamación en muestras de CCR humano.<br /

Estimating multicountry tourism flows by transport mode

This article describes the methodology used to obtain a harmonized database of country-to-country flows of tourists and visitors built upon the UNWTO original database. Focusing on 74 countries for the period 1995–2018 and starting with data on outbound tourism, we develop a methodology using other alternative indicators from the UNWTO which fills the gaps related to two main indicators (Foreign Visitors by country of Residence and Foreign Tourists by country of Residence). Subsequently, intra-national domestic tourism and the transport mode specific flows are obtained. The paper finally contrasts the robustness of the results obtained with the gravity equation for all flows, thereby confirming the solvency of the process and the final data retrievedH2019/HUM-5761 INNOJOBMAD-C

Identificación de inhibidores de la proteasa pro-inflamatoria granzima A mediante cribado de librerías de compuestos químicos

La perpetuación de la respuesta inflamatoria conduce a la aparición de procesos patológicos, entre los que se incluyen el cáncer y trastornos autoinmunes. Recientemente se ha descrito que la granzima A (gzmA), una serín-proteasa expresada en los gránulos de linfocitos T citotóxicos (T CD8+) y células Natural Killer (NK), tiene un papel eminentemente pro-inflamatorio, regulando la producción de las citoquinas pro-inflamatorias IL-1, IL-6 y TNFα en macrófagos y otros grupos celulares. Se ha demostrado que la gzmA juega un papel fundamental en procesos inflamatorios como artritis reumatoide, sepsis bacteriana, colitis ulcerosa y cáncer colorrectal. Además, se ha comprobado que su ausencia no produce efectos inmunosupresores. Es por esto que la búsqueda de posibles inhibidores de gzmA es de gran interés, con el fin de desarrollar nuevos tratamientos que atenuen selectivamente la inflamación sin provocar inmunosupresión. En este trabajo, se ha realizado un cribado de compuestos químicos con el fin de identificar posibles inhibidores de gzmA, utilizando distintas librerías de compuestos químicos. Para ello, se llevó a cabo la sobreexpresión y purificación de gzmA recombinante de ratón en un sistema de expresión en Escherichia coli. Con la gzmA obtenida, se realizaron ensayos de inhibición con un total de 533 compuestos químicos diferentes. Los compuestos que inhibieron in vitro la la actividad enzimática de gzmA, fueron seleccionados para evaluar si eran capaces de reducir la producción de IL-6 inducida por gzmA en macrófagos. Únicamente 2 compuestos pudieron ser seleccionados como posibles inhibidores, pero finalmente ninguno mostró capacidad de inhibir la producción de IL-6 mediada por gzmA en macrófagos.<br /

Granzyme-A deficiency attenuates experimental osteoarthritis in mice, but perforin deficiency does not

Objectives: This study aims to assess the development of osteoarthritis (OA) in granzyme A- (gzmA) and B- (gzmB) and perforin- (perf) knockout mice. Materials and methods: A total of 75 male and female C57BL/6 (eight to nine-week-old) mice were allocated to: gzmA-deficient (gzmA-/-) (11 females, 8 males), gzmB-deficient (gzmB-/-) (9 females, 8 males), perf-deficient (perf-/-) (10 females, 9 males), and control group (10 females, 10 males). Osteoarthritis was induced in the right knee by instability of the meniscus medial ligament. Sham surgery was practiced in the left knee. Knee samples obtained eight weeks after surgery were stained (Safranin-O) and blindly scored in lateral and medial femur and tibia using the Osteoarthritis Research Society International scale (OARSI) (from Grade 0, cartilage intact to 6, deformation), (five stages from 0, no OA to 4, >50% surface involvement); OARSI score (grade x stage); and a semi-quantitative scale from Grade 0 (normal) to 6 (cartilage erosion >80%). Results: Significantly higher values in all scales in the right knees compared to the left knees in male and female mice were observed (p<0.05). Males of all strains showed in the right knee higher values than females on all scales. Deficiency of perforin did not modify OA severity in any sex. The gzmA-/- females presented less degenerative changes than the other groups. Conclusion: Our study results show that sex plays an important role in the development of experimental OA in mice. Deficiency of gzmA can protect from the development of OA in female mice

Comparison between the speech and Language Therapist’s Transversal / Generic Competences in Spain and Europe. Reformulation

Desde los inicios del modelo educativo del Espacio Europeo de Educación Superior, la formación de los estudiantes de grado tiene como fin prioritario la adquisición de unas competencias profesionales que respondan a la realidad social. La definición y adquisición de dichas competencias son esenciales para la formación continua del profesional, el diseño y desarrollo de planes educativos e implementación de servicios asistenciales. El objetivo del trabajo es realizar un análisis comparativo entre las actuales competencias profesionales transversales/genéricas del logopeda en España y en Europa. Se ha utilizado la relación de competencias transversales recogidas en el Libro Blanco del Grado en Logopedia, la orden CIN y las competencias genéricas establecidas en el proyecto internacional NetQues (Red para la Unificación de Estándares y Calidad de los Programas Educativos de Logopedia en Europa). Se ha realizado un estudio cualitativo de documentos para identificar similitudes y diferencias entre ellos. Los resultados establecen las relaciones entre las competencias transversales en España y las genéricas en Europa y se propone un listado completo y claro de competencias transversales que pueda ser referencia para los logopedas españoles e idealmente de Europa. Como conclusiones cabe resaltar que hay equivalencias entre las competencias transversales españolas y las consensuadas en el proyecto europeo NetQues. Tanto las competencias transversales españolas como las europeas pueden agruparse y reducir su número. La reformulación de las competencias transversales es una oportunidad para facilitar su manejo a los estudiantes, formadores y profesionales interesadosSince the beginning of the educational model of the European Higher Education Area more than 20 years ago, the training of undergraduate students has as a priority aim the acquisition of professional skills that respond to social reality. The definition and acquisition of these competences is essential for the professional’s continuous training, the design and development of educational programmes and the implementation of healthcare services. The objective is to carry out a comparative analysis of the speech and language therapist’s transversal/generic professional competences in Spain and Europe. The lists of transversal competences collected in the White Book of the Degree in Speech and Language Therapy, the CIN order, and the list of generic competences established in the international project NetQues (Network for Tuning Standards and Quality of Education programmes in Speech and Language Therapy across Europe) have been used. A qualitative analysis of documents has been performed in order to identify similarities and differences among them. The relationships between the transversal competences in Spain and the generic competences in Europe are established; a complete and clear list of transversal competences is proposed. This list of transversal competences is a potential reference for Spanish and ideally European speech and language therapists. Concerning conclusions, there are equivalences between Spanish transversal competences and those agreed in the European NetQues project. Spanish and European transversal competences can be grouped together and reduced in number. The reformulation of transversal competences is an opportunity to facilitate their management by interested students, trainers, and professional

Quality of care of patients with type-2 diabetes in Galicia (NW Spain) [OBTEDIGA project]

[Abstract] Aims:  The aim of this study was to describe the degree of compliance of agreed practices with reference to primary care patients with Type 2 diabetes of 40 years old and older in Galicia (NW Spain). Methods:  A total of 108 primary care physicians were selected at random from the totality of doctors. Each physician selected 30 patients at random from their patients suffering from diabetes of 40 years old or older. External observers gathered information from each patient’s medical record regarding their characteristics, condition and degree of compliance of selected indicators of good practice. Results:  Group of physicians participated in this study had a mean age of 50 years (standard deviation = 3.9); 48% of them were females; and 17.5% involved in medical residents training. A total of 3078 diabetic patients were included in the study: mean age = 69 years (SD = 10.9), 47.6% women, presence of high blood pressure (72%), hypercholesterolaemia (56%), and regular smokers (10.3%). Compliance with selected indicators such as foot examination (14%), ophthalmological examination (30.6%), abdominal circumference measurement (6.1%), measurement of total or LDL-cholesterol (78.1), blood pressure measurement (84.8), glycosylated haemoglobin measurement < 7% (54.3%) was observed. Adequate monitoring in cases of high blood pressure and hypercholesterolaemia were 34.2% and 27.4%, respectively. Variability between physicians differs according to the different indicators, with interquartile range for compliance of between 16.4 and 66%. Conclusions:  There is a wide margin for improvement in the adaptation of clinical practice to recommendations for diabetic patients. The large variation existing in certain indicators would suggest that certain control objectives are less demanding than advisable in those that comply least, while low compliance and low variability in other indicators point to structural problems or unsatisfactory training of doctors