Effect of a novel postbiotic containing lactic acid bacteria on the intestinal microbiota and disease resistance of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)

Objective: This study was aimed to assess the effect of a novel postbiotic on bacterial community composition and structure within the intestinal ecosystem of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), as well as evaluate its capacity to protect rainbow trout from Lactococcus garvieae infection. Results: After 30 days of dietary postbiotic supplementation, high-throughput 16S rRNA gene sequencing revealed that bacterial community composition, diversity and richness were significantly higher in treated fish than in control fish. The proportion of sequences affiliated to the phylum Tenericutes, and to a lesser extent, the phyla Spirochaetes and Bacteroidetes was increased in fish fed a postbiotic-enriched diet compared to control fish, whereas the abundance of Fusobacteria was higher in control fish. Moreover, the treated fish showed significantly (p < 0.05) improved protection against L. garvieae compared to control fish. Conclusions: These findings suggest that dietary postbiotic supplementation may represent an environmentally friendly strategy for preventing and controlling diseases in aquaculture

Mitotic arrest and JNK-induced proteasomal degradation of FLIP and Mcl-1 are key events in the sensitization of breast tumor cells to TRAIL by antimicrotubule agents

12 páginas, 7 figuras.Breast tumor cells are often resistant to tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (tumour necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL)/APO-2 L). Here, we describe the sensitization by microtubule-interfering agents (MIAs) to TRAIL-induced apoptosis in breast tumor cells through a mitotic arrest and c-Jun N-terminal kinase (JNK)-dependent mechanism. MIA treatment resulted in BubR1-dependent mitotic arrest leading to the sustained activation of JNK and the proteasome-mediated downregulation of cellular FLICE-inhibitory protein (cFLIP) and myeloid cell leukemia-1 (Mcl-1) expression. The JNK inhibitor SP600125 abrogated MIA-induced mitotic arrest and downregulation of cFLIP and Mcl-1 and reduced the apoptosis caused by the combination of MIAs and TRAIL. Silencing of cFLIP and Mcl-1 expression by RNA interference resulted in a marked sensitization to TRAIL-induced apoptosis. Furthermore, in FLIP-overexpressing cells, MIA-induced sensitization to TRAIL-activated apoptosis was markedly reduced. In summary, our results show that mitotic arrest imposed by MIAs activates JNK and facilitates TRAIL-induced activation of an apoptotic pathway in breast tumor cells by promoting the proteasome-mediated degradation of cFLIP and Mcl-1.This work was supported by grants from Ministerio de Educación y Ciencia (SAF2006-00633), Red Temática de Investigación Cooperativa en Cáncer (RTICC) (RD06/0020/0068) and Junta de Andalucía (CTS-211) to ALR. GO-F and TS-P were supported by a contract and fellowship from Ministerio de Ciencia e Innovación, respectively.Peer reviewe

Effect of bio activators’ application and manual fruit thinning on yield and quality of melon (Cucumis melo L.) grown under protected cultivation in Costa Rica

Se evaluó el efecto del raleo manual de frutos y de la aplicación de los bioactivadores Algamix y Engordone, sobre el rendimiento y la calidad del melón amarillo var. JMX-902. No se encontraron diferencias significativas con respecto a la firmeza del fruto, concentración de sólidos solubles totales, peso del fruto, rendimiento total, peso del fruto comercializable, rendimiento comercializable, y rendimiento por planta. Se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos para el número de frutos por planta; las plantas tratadas con solo Engordone y solo Algamix presentaron mayor número de frutos por planta con respecto a otros tratamientos, pero estos resultados no fueron distintos del Testigo. Se encontraron diferencias significativas al distribuir la producción según distintas categorías de peso; el rendimiento de frutos de melón con un peso entre 601-800 gramos fue superior en plantas tratadas con solo Algamix respecto a los demás tratamientos; el rendimiento de frutos de melón con un peso entre 801-1000 gramos fue superior en plantas tratadas con solo Engordone respecto a los demás tratamientos.The effects of manual fruit thinning and of applying the bio activators Algamix and Engordone on the yield and quality of yellow honey dew melon var. JMX-902, were evaluated. Significant differences were not found with respect to fruit firmness, total soluble solids concentration, fruit weight, total yield, marketable fruit weight, marketable yield, and yield per plant. Significant differences between treatments were found for the number of fruits per plant: Plants treated with Engordone alone and Algamix alone showed higher number of fruits per plant compared to other treatments, but these results were not different from the Control. Significant differences were also observed by distributing the output per weight categories: With respect to the other treatments, the yield of melon fruits weighting between 601-800 grams was higher in plants treated with Algamix alone, and the yield of melon fruits weighting between 801-1000 grams was higher in plants treated with Engordone alone.UCR::Vicerrectoría de Investigación::Unidades de Investigación::Ciencias Agroalimentarias::Estación Experimental Agrícola Fabio Baudrit Moreno (EEAFBM

Enzyme-powered nanobots enhance anticancer drug delivery

The use of enzyme catalysis to power micro- and nanomotors exploiting biocompatible fuels has opened new ventures for biomedical applications such as the active transport and delivery of specific drugs to the site of interest. Here, urease-powered nanomotors (nanobots) for doxorubicin (Dox) anticancer drug loading, release, and efficient delivery to cells are presented. These mesoporous silica-based core-shell nanobots are able to self-propel in ionic media, as confirmed by optical tracking and dynamic light scattering analysis. A four-fold increase in drug release is achieved by nanobots after 6 h compared to their passive counterparts. Furthermore, the use of Dox-loaded nanobots presents an enhanced anticancer efficiency toward HeLa cells, which arises from a synergistic effect of the enhanced drug release and the ammonia produced at high concentrations of urea substrate. A higher content of Dox inside HeLa cells is detected after 1, 4, 6, and 24 h incubation with active nanobots compared to passive Dox-loaded nanoparticles. The improvement in drug delivery efficiency achieved by enzyme-powered nanobots may hold potential toward their use in future biomedical applications such as the substrate-triggered release of drugs in target locations

Multi-class determination of undesirables in aquaculture samples by gas chromatography/tandem mass spectrometry with atmospheric pressure chemical ionization: A novel approach for polycyclic aromatic hydrocarbons

In this work, a method for the analysis of 24 PAHs in 19 different matrices, including fish tissues, feeds and feed ingredients, has been developed using gas chromatography coupled to triple quadrupole tandem mass spectrometry with atmospheric pressure chemical ionization source (GC-APCI-MS/MS). The method is based on a modification of the unbuffered QuEChERS method, using freezing as an additional clean-up step and applying a 20-fold dilution factor to the final extract. The procedure was also tested for 15 pesticides and 7 polychlorinated biphenyl (PCB) congeners in order to widen the scope of the method. The excellent sensitivity and selectivity provided by GC-APCI-MS/MS allowed the dilution of the sample extracts and quantification using calibration with standards in solvent for all the 19 matrices tested. The developed method was evaluated at 2, 5 and 50 ng·g-1 spiking levels. LOQs were 2 ng·g-1 for most compounds, and LODs ranged from 0.5 to 2 ng·g-1. Analysis of real-world samples revealed the presence of naphthalene, fluorene, phenanthrene, fluoranthene and pyrene at concentration levels ranging from 4.8 to 187 ng·g-1. No PCBs, DDTs and pesticides were found in fillets from salmon and sea bream

Screening of Pesticides and Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Feeds and Fish Tissues by Gas Chromatography Coupled to High-Resolution Mass Spectrometry Using Atmospheric Pressure Chemical Ionization

This paper reports a wide-scope screening for detection and identification of pesticides and polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in feeds and fish tissues. QuEChERS sample treatment was applied, using freezing as an additional cleanup. Analysis was carried out by gas chromatography coupled to hybrid quadrupole time-of-flight mass spectrometry with atmospheric pressure chemical ionization (GC-(APCI) QTOF MS). The qualitative validation was performed for over 133 representative pesticides and 24 PAHs at 0.01 and 0.05 mg/kg. Subsequent application of the screening method to aquaculture samples made it possible to detect several compounds from the target list, such as chlorpyrifos-methyl, pirimiphos-methyl, and ethoxyquin, among others. Light PAHs (≤4 rings) were found in both animal and vegetable samples. The reliable identification of the compounds was supported by accurate mass measurements and the presence of at least two representative m/z ions in the spectrum together with the retention time of the peak, in agreement with the reference standard. Additionally, the search was widened to include other pesticides for which standards were not available, thanks to the expected presence of the protonated molecule and/or molecular ion in the APCI spectra. This could allow the detection and tentative identification of other pesticides different from those included in the validated target list

¿Qué son los activismos textiles? : Una mirada desde los estudios feministas a catorce casos bogotanos

En este artículo analizamos 14 iniciativas de activismo textil en Bogotá, dando cuenta de cómo el quehacer textil que las soporta y su producción material son ejemplos de posturas feministas que no siempre son explícitas. Las iniciativas fueron identificadas a través de un rastreo por vínculos, sus representantes fueron entrevistadas y la información recogida analizada dando cuenta del tipo de activismo que desarrollan, subrayando sus objetivos y las prácticas que realizan. Tomamos como base la propuesta de continuum feminista desarrollada por Anne Beth Pentney que permitió tipificar los diferentes casos como de construcción de colectividad, orientadas a promover causas sociales o como formas de denuncia o protesta. Discutimos las limitaciones de esta propuesta de continuum cuando se toman en consideración aspectos temporales y espaciales, condiciones materiales de producción de lo textil o cuando se dimensionan las apuestas pedagógicas de transmisión de conocimiento que algunos casos definen como su objetivo central.In this paper we analyze 14 textile activism initiatives in Bogotá, explaining how the textile activity that supports them and their material production are examples of feminist postures that are not always explicit. The initiatives were identified through a chain referral sample method, their representatives were interviewed and the information gathered was analyzed in order to give an account of the type of activism they develop, underlining their objectives and the practices they perform. For this exercise, we took as a starting point the proposal of feminist continuum developed by Anne Beth Pentney, which allowed typifying the different cases as collective construction, oriented to promote social causes or as forms of denunciation or protest. We discuss the limitations of this continuum proposal when considering: temporal and spatial aspects, material conditions of textile production or when dimensioning the pedagogical proposals of knowledge transmission that some cases define as their central objective

Campylobacter en pollos de engorde: contribución a su epidemiología, control y profilaxis mediante el uso de métodos de biología molecular, análisis antimicrobiano y evaluación de un tratamiento preventivo

En la actualidad, y desde los últimos doce años, la campilobacteriosis continúa siendo la zoonosis con el mayor número de casos humanos notificados en la Unión Europea (229.213 en el año 2015). Es por ello que la mayoría de los Estados Miembros tienen la obligación de notificarlos, siendo Campylobacter jejuni la especie termofílica aislada con mayor frecuencia en las personas, seguida en la distancia de Campylobacter coli. La principal fuente de infección humana es el consumo de carne de pollo contaminada por este patógeno.Esta Tesis tiene como objetivo principal diseñar e implementar técnicas de diagnóstico rápido fiables basadas en biología molecular con el fin de permitir su detección en explotaciones de pollos de engorde. Por otra parte, se ha realizado un estudio minucioso acerca de la resistencia antimicrobiana a partir de diferentes aislados procedentes de muestras de calzas. La metodología empleada consistió en la técnica de microdiluciones y la detección de genes de resistencia para los antibióticos que se administran con mayor frecuencia en avicultura de carne.Otro de los enfoques de este Trabajo radica en el estudio de la microbiota intestinal de ciegos de pollos para observar el efecto de un pienso complementario líquido administrado en el agua de bebida (Vitaid) mediante secuenciación masiva.Los resultados derivados de la puesta a punto de las diferentes técnicas diagnósticas revelaron excelentes valores de validez y fiabilidad (> 99%) en todas las pruebas diseñadas para la detección individual o conjunta de Campylobacter (C. jejuni o C. coli). Además, se aislaron 23 cepas de Campylobacter sobre un total de las 25 naves positivas, con tan solo un aislado correspondiente a C. coli. El estudio antimicrobiano determinó una correlación del 100% entre el resistotipo (amoxicilina, doxiciclina, enrofloxacina, lincomicina y tilosina) y el genotipo resistente presente en todos los aislados bacterianos. Asimismo, se ha detectado la mutación Thr86Ile en la región QRDR del gen gyrA para todos los aislados de C. jejuni.Para finalizar, el análisis de secuenciación masiva reflejó una mayor diversidad de especies microbianas en los individuos tratados en relación al grupo control. Además, se observó que las hembras poseían una microbiota más heterogénea en comparación a los machos. Sin embargo, este ensayo preventivo no resultó efectivo para Campylobacter ya que aumentó entre 2-4 veces su carga bacteriana.<br /

Herramientas de control biológico para la prevención de la lactococosis en el cultivo de la trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss).

ResumenEn los últimos años, la acuicultura ha experimentado un desarrollo importante a nivel mundial, generando con su expansión la presencia de enfermedades provocadas principalmente por agentes bacterianos, las cuales han sido controladas tradicionalmente mediante el uso de antibióticos para disminuir las pérdidas económicas en los cultivos acuícolas. Sin embargo, los métodos utilizados hasta el día de hoy en el control de estas enfermedades han repercutido de manera negativa en la salud humana, generando resistencia antimicrobiana e impacto negativo en el medio ambiente, siendo una de las principales preocupaciones, no solo para el sector acuícola sino también para la salud pública. Para dar respuesta a esta problemática se requieren estrategias alternativas que permitan controlar los patógenos sin los efectos colaterales que regularmente producen los antibióticos.Basándonos en una actualización de datos que realizamos, pudimos evidenciar la existencia de resultados satisfactorios del uso de fitobióticos, como una alternativa terapéutica demostrando su capacidad inhibitoria frente a diferentes patógenos bacterianos en distintas especies de animales acuícolas. De igual manera el uso de postbióticos, a pesar de ser una estrategia reciente, los pocos estudios demuestran que es una alternativa prometedora y segura. Esta tesis tiene como finalidad evaluar el uso de alternativas que consideramos podrían ser empleadas para el control del agente infeccioso L. garvieae, que afecta principalmente al cultivo de trucha arcoíris, causante de grandes pérdidas económicas.En primer lugar, se realizó una actualización de las ventajas y desventajas sobre el uso de estrategias biológicas en el control de agentes patógenos, para prevenir y controlar las enfermedades presentes en cultivos acuícolas. De igual manera evaluamos la capacidad inhibitoria del producto comercial Biocitro®, demostrando su efecto inhibitorio frente a L. garvieae en cultivo de trucha arcoíris. Consideramos también importante evaluar un nuevo postbiótico, obtenido de la fermentación de una cepa ácido láctica del género Lactobacillus, demostrando su capacidad inhibitoria frente al patógeno en estudio.Posteriormente evaluamos una dieta suplementada con un postbiótico, obtenida de la fermentación de dos bacterias ácido lácticas del género Lactobacillus y Leuconostoc, que provocó un aumento en la diversidad de la microbiota intestinal en los peces y proporcionó protección frente a L. garvieae.Finalmente, realizamos un análisis filogenético de la microbiota intestinal en salmónidos, en el que se encontró un nuevo filotipo de Mycoplasma, y al mismo tiempo expresamos la necesidad de llevar a cabo más estudios que permitan evaluar el beneficio que éste pueda causar en la salud de los peces.<br /