Terapia fotodinâmica mediada por nanoemulsão à base de óleo de açaí (euterpe oleracea martius) para o tratamento de melanoma in vitro e in vivo

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Biologia Animal, 2014.O melanoma é um tipo de câncer de pele que tem origem nos melanócitos. Embora o melanoma seja responsável por apenas 4% de todos os tipos de câncer de pele, ele é o mais agressivo, uma vez que possui um alto potencial metastático, causando a morte de 80% dospacientes portadores dessa doença. Perante a necessidade de desenvolver terapias maiseficazes, estudos propõem a Terapia Fotodinâmica (TFD) como uma promissora modalidade terapêutica que utiliza três elementos essenciais: um fotossensibilizante (FS), luz em um comprimento de onda específico e oxigênio, reagindo conjuntamente para produzir espécies reativas de oxigênio que em última instância causam a morte celular das células e tecidosalvo. Considerando as propriedades terapêuticas e o potencial fotoquímico do óleo de açaí, este foi usado como fotossensibilizante. Porém, a sua natureza hidrofóbica dificulta sua aplicação biológica, portanto foi usada uma abordagem nanotecnológica para permitir seu uso no tratamento contra o câncer. No presente trabalho objetivou-se desenvolver uma nanoemulsão contendo gotículas de óleo de açaí (NanoA) como fotossensibilizante para investigar os efeitos da TFD in vitro e in vivo no tratamento do melanoma. Uma vez preparada a NanoA, foi feita a sua caracterização físico-química, fotofísica e fotoquímica. A irradiação (λ=660) do óleo de açaí livre e em nanoemulsão mostrou que ambos possuem capacidade de geração de espécies reativas de oxigênio, comprovando a sua atividade fotoquímica. A caracterização físico-química da NanoA mostrou um diâmetro hidrodinâmico médio de 117,5 nm para cada nanogotícula, índice de polidispersão de 0,144 e potencial zeta de -0,536 mV, evidenciando características desejáveis para seu uso biológico. Os espectros de absorbância e de fluorescência apontaram que a NanoA apresenta pico de absorção em 666 nm (região do vermelho) e de emissão em 670 nm. Microscopia eletrônica de transmissão mostrou gotículas com diâmetro médio de 74 nm, morfologia esférica e baixa polidispersão. Para os testes in vitro foram utilizadas duas linhagens celulares imortalizadas: NIH/3T3 (fibroblasto murino não tumoral) e B16F10 (melanoma murino). Em ensaios de citotoxicidade sem irradiação, utilizaram-se diversas concentrações da NanoA, com vários tempos de exposição, com o objetivo de identificar as condições que inibem 10% da viabilidade (CC10) de células não tumorais, mostrando uma CC10 equivalente a 617,00 μg/mL pelo tempo de exposição de 15 minutos. Citotoxicidade sem irradiação, avaliada por ensaio colorimétrico de MTT, foi tempo e dose dependente. Para testar os efeitos da TFD, as células foram expostas à NanoA na concentração de 617,00 μg/mL por 15 minutos e irradiadas com as fluências de 12,9 J/cm2, 25,9 J/cm2 e 51,8 J/cm2. Resultados mostraram que as células tumorais tratadas com NanoA na concentração de 617,00 μg/mL e irradiadas com fluência de 25,9 J/cm2 apresentaram as menores porcentagens de viabilidade (15%), enquanto que as células não tumorais sob as mesmas condições mantiveram uma viabilidade de 70%. Análises de citometria de fluxo determinaram que a maioria das células que perderam a sua viabilidade devido ao tratamento com TFD mostraram dupla marcação, com anexina V e iodeto de propídeo, indicando possível morte por apoptose tardia/necrose, dado corroborado pela externalização da fosfatidilserina e pelas mudanças de tamanho e granulosidade observadas. Experimentos in vivo em camundongos C57BL/6 mostraram que a TFD aplicada cinco vezes com concentração de NanoA de 50 mg/mL e fluência de 25,9 J/cm2 teve redução do volume tumoral dos animais equivalente a 82%, mostrando grandes áreas de necrose no tecido tumoral, quando comparado com o volume tumoral e histopatologia dos animais do grupo controle com tumor. Diante do exposto, o óleo de açaí contido na NanoA apresentou características fotofísicas, fotoquímicas e físico-químicas favoráveis para o seu uso como FS para a TFD com aplicação em sistemas biológicos. O tratamento com TFD in vitro mostrou uma redução de 85% na viabilidade celular das células de melanoma, enquanto manteve uma alta viabilidade (70%) das células normais, e no caso de camundongos com tumor tratados com TFD foi observada uma redução de 82% no volumen tumoral, mostrando a eficácia in vivo do tratamento investigado. ______________________________________________________________________________ ABSTRACTMelanoma is a type of skin cancer that originates in the melanocytes. Even though melanoma accounts for only 4% of all dermatologic cancers, it remains responsible for 80% of deaths from skin cancer due to its high metastatic potential. Regarding this, there is the need to develop new and more efficient types of therapies. Photodynamic Therapy (PDT) is a promising new cancer treatment that makes use of three essential elements: photosensitizer (PS), light of a particular wavelength, and oxygen, which react ultimately causing cell death. Considering the therapeutic properties and photochemical potential already described in other studies, açaí oil was explored as a PS for PDT. However, high hydrophobicity characteristic of açaí oil difficults its efficient biological application. For this reason, nanotechnological solutions were explored, incorporating açaí oil in nanoemulsions (NanoA) to be used along with PDT for in vitro and in vivo melanoma treatment. Once the NanoA was formulated, we proceeded to its physicochemical, photophysical and photochemical characterization. Free and nano-incorporated açaí oil were irradiated (λ=660) showing their capacity to generate singlet oxygen, proving their photochemical activity. NanoA physicochemical characterization showed an average hydrodynamic diameter of 117.5 nm, polydispersity index of 0.144 and zeta potential of -0.536 mV, exhibiting desirable characteristics for its biological application. Absorbance and fluorescence spectra showed absorbance peak at 666 nm (red region of spectrum) and emission at 670 nm. Transmission electron microscopy showed spherical and similar sized nanodroplets (average diameter of 74 nm), confirming low polydispersity. In vitro tests were performed using two immortalized cell lines: NIH/3T3 (normal murine fibroblast) and B16F10 (murine melanoma). Dark cytotoxicity studies used several NanoA concentrations with different exposition times in order to determine the concentration that kills only 10% (CC10) of normal cells. Results revealed CC10 equivalent to 617 μg/mL when exposed for 15 minutes. Cytotoxity in the dark evaluated by colorimetric MTT assay was a time and concentration dependent event. In order to test PDT in vitro, cells were exposed to NanoA in the concentration of 617 μg/mL for 15 minutes and then irradiated with fluence values of 12.9 J/cm2, 25.9 J/cm2 and 51.8 J/cm2. MTT results revealed that melanoma cells treated with 617 μg/mL and irradiated with 25.9 J/cm2 presented viability results of 15%, while normal cells treated under the same conditions mantained a 70% viability. Flow cytometry results showed that most cells that lost their viability due to PDT treatment were double marked by annexin V and propidium iodide, event that occurs when cells die by late apoptosis/necrosis. This was evidenced by externalization of phosphatidylserine and morphological changes in cell size and granulosity as seen by light scatter flow cytometry. In vivo experiments with C57BL/6 mice showed that tumor bearing animals treated five times by PDT with NanoA concentration of 50 mg/mL and fluence of 25.9 J/cm2 showed a tumor volume reduction of 82% with considerable number of necrotic areas in tumor tissue, in comparison to animals in control group. Overall, açaí oil in NanoA presented favorable photophysical, photochemical, and physico-chemical, characteristics for its use as PS for PDT with application in biological systems. PDT treatment with NanoA in melanoma cells showed an 85% cell viability reduction, while maintaining normal cell viability high (70%), and an 82% tumor volume reduction in tumor bearing mice treated with PDT, proving the in vivo efficacy of the investigated treatment

O processo de internacionalização de uma construtora brasileira: o caso da OAS no mercado da Costa Rica

Monografia (graduação)—Universidade de Brasília, Faculdade de Economia, Administração e Contabilidade, Departamento de Administração, 2012.Nos dias atuais, é notável o fato de que as nações e os mais diversos mercados e empresas estão sendo afetados direta e indiretamente pela globalização, fazendo com que o tema internacionalização esteja cada vez mais em voga. O entendimento das variadas teorias acerca de internacionalização, os processos, assim como fatores motivantes e barreiras enfrentadas por organizações que optam pela expansão em terras internacionais, são objetos de estudos ao redor do mundo. O presente trabalho objetivou explicitar o processo de internacionalização da construtora brasileira OAS, buscando compreender a fundo como se deu a entrada no mercado da Costa Rica. Quanto à metodologia utilizada, diante dos dados apurados foi realizada análise qualitativa, sendo aplicadas entrevistas semi-estruturadas com o diretor da área de Relações Internacionais da construtora, e questionários respondidos pelo diretor operacional para América Central e o Caribe, e o gerente corporativo internacional. Observou-se, com base nas informações fornecidas pelos executivos, que um dos motivos mais fortes para a internacionalizacao da OAS foi o intuito de explorar potenciais oportunidades percebidas em países em desenvolvimento. Além disso, por meio dos dados recolhidos, também ficou evidente que a construtora estudada não considera a distância geográfica ou a diversidade de idiomas como fatores limitantes. Destaca-se ainda que diferenças culturas, a infraestrutura do país, capacidade logística,grau de desenvolvimento econômico, estabilidade econômica e governo são considerados fatores intervenientes que dificultam e criam barreiras à empresa no seu processo de internacionalização. Por fim, foi possível constatar que a OAS tem tido sucesso no processo de internacionalização em inúmeros países e que, o que inclui a Costa Rica, aqui estudada, pois conta com uma localização estratégica e possui infraestrutura favorável em um mercado estável

Impacto socioeconómico caso: Construcción del “Aeropuerto internacional de Chinchero” en las comunidades de Yanacona, Ayllopongo y Racchi Ayllo, provincia de Urubamba, departamento del Cusco

El presente trabajo de investigación es el resultado de la investigación realizada entre los años 2021 y 2023, años en la que el proyecto de construcción del aeropuerto internacional de Chinchero se encuentra en término medio de ejecución. El trabajo de tesis responde a las siguientes preguntas: ¿Cuál es el impacto socioeconómico, generado por la construcción del aeropuerto internacional de Chinchero en las comunidades campesinas de Yanacona, Ayllopongo y Racchi Ayllo, de la, provincia de Urubamba, departamento de Cusco? Y preguntas especificas; ¿Qué impactos sociales genera la construcción del aeropuerto internacional de Chinchero en las comunidades campesinas de Yanacona, Ayllopongo y Racchi Ayllo? y ¿Qué impactos económicos genera la construcción del Aeropuerto Internacional de Chinchero en las comunidades de Yanacona, Ayllopongo y Racchi Ayllo? Para responder a las preguntas planteadas se ha obtenido datos cualitativos entre los años 2021 y 2023, utilizando la técnica de la entrevista a informantes claves de las comunidades de Yanacona, Ayllopongo y Racchi Ayllo, quienes han sido identificados bajo criterios definidos según las categorías y subcategorías de las hipótesis. Asimismo, se realizó el procesamiento de la información a través de la transcripción de testimonios mediante el análisis descriptivo. De esta manera a partir de los datos sistematizados y analizados se concluye que el proceso de construcción del aeropuerto internacional de Chinchero hasta la actualidad generó impactos a nivel socio económicos, conllevando a los comuneros de Yanacona, Ayllopongo y Racchi Ayllo a asumir nuevas prácticas sociales y económicas, distintas a su forma tradicional

Experimental Investigation of the Coprecipitation Method: An Approach to Obtain Magnetite and Maghemite Nanoparticles with Improved Properties

Iron oxides that exhibit magnetic properties have been widely studied not only from an academic standpoint, but also for numerous applications in different fields of knowledge, such as biomedical and technological research. In this work, magnetite and maghemite nanoparticles were synthesized by chemical coprecipitation of FeCl2·4H2O and FeCl3·6H2O (proportion of 1 : 2) in three different cases using two bases (sodium hydroxide and hydroxide ammonium) as precipitants. The chemical coprecipitation method was selected for its simplicity, convenience, reproducibility, and low cost in the use of glassware. The nanostructured materials were characterized by transmission electron microscopy (TEM), X-ray diffraction (XRD) and magnetometry (VSM). The objective of this work is to study the variation in the morphological characteristics and physical properties of nanoparticles magnetic as a function of the different production processes. As observed by TEM, the materials obtained from the precipitating agent NH4OH are more uniform than those obtained with NaOH. From XRD pattern analysis, it appears that the obtained materials correspond to magnetite and maghemite and, from magnetometry VSM analysis, show high magnetization as a function of the magnetic field at room temperature, indicating that these materials are superparamagnetic

Intermetallic coinage metal-catalyzed functionalization of alkanes with ethyl diazoacetate : gold as a ligand

The complexes [Au2M2(C6F5)4(NCMe)2]n (M = Cu, 1; M = Ag, 2) have been tested as catalysts for the functionalization of alkanes by the carbene insertion methodology, using ethyl diazoacetate as the carbene source. Moderate to high conversions have been obtained. The observed selectivities seem to favor the proposal that the active metal for catalysis is the Cu/Ag center, the Au(C6F5)2 unit acting as a spectator ligand in both cases.DGI for funding (CTQ2008-00042/BQU and CTQ2010-20500-C02-02

Robots miniaturizados: diseño, implementación y aplicaciones

Proyecto de Investigación (Código: 5402-1360-2401 FI-298-09) Instituto Tecnológico de Costa Rica. Escuela de Ingeniería Electrónica, Escuela de Física, Escuela de Ingeniería en Computación, 2014Este informe presenta los resultados obtenidos en el proyecto “Robots miniaturizados: diseño, implementación y aplicaciones”, con número de proyecto 5402-1360-2401. Se presentan los resultados obtenidos con respecto a locomoción autónoma, comunicación inalámbrica óptica y alimentación inalámbrica, actuadores para manipulación y microcorte e interfaz con una PC para datos y comandos. El minirobot fue diseñado para operar en un área de al menos 30cm de diámetro y tiene un tamaño de 2.3 cm x 2.6 cm x 1.78 cm. Para el estudio de los actuadores del minirobot se utilizó simulación multifísica por el método de elementos finitos con el software COMSOL Multiphysics. La estructura del informe es la siguiente: en la sección de Introducción se tratan los antecedentes, la descripción del problema a resolver, así como los objetivos planteados en el proyecto de investigación. En la sección de metodología se resume el método de investigación y los flujos de diseño. En la sección de resultados se presentan los resultados obtenidos correspondientes a: comunicación inlámbrica óptica, sistema de locomoción, interfaz humano-máquina y software, alimentación inalámbrica de energia y actuadores. Posteriormente, se discuten los resultados obtenidos junto con las principales conclusiones del proyecto y las recomendaciones para su continuación y/o aprovechamiento de los resultados.Instituto Tecnológico de Costa Rica. Escuela de Ingeniería Electrónica. Escuela de Física. Escuela de Ingeniería en Computación

Association between Ancestry-Specific 6q25 Variants and Breast Cancer Subtypes in Peruvian Women

Background: Breast cancer incidence in the United States is lower in Hispanic/Latina (H/L) compared with African American/ Black or Non-Hispanic White women. An Indigenous American breast cancer-protective germline variant (rs140068132) has been reported near the estrogen receptor 1 gene. This study tests the association of rs140068132 and other polymorphisms in the 6q25 region with subtype-specific breast cancer risk in H/Ls of high Indigenous American ancestry. Methods: Genotypes were obtained for 5,094 Peruvian women with (1,755) and without (3,337) breast cancer. Associations between genotype and overall and subtype-specific risk for the protective variant were tested using logistic regression models and conditional analyses, including other risk-associated polymorphisms in the region. Results: We replicated the reported association between rs140068132 and breast cancer risk overall [odds ratio (OR), 0.53; 95% confidence interval (CI), 0.47-0.59], as well as the lower odds of developing hormone receptor negative (HR-) versus HR+ disease (OR, 0.77; 95% CI, 0.61-0.97). Models, including HER2, showed further heterogeneity with reduced odds for HR+HER2+ (OR, 0.68; 95% CI, 0.51-0.92), HR-HER2+ (OR, 0.63; 95% CI, 0.44-0.90) and HR-HER2- (OR, 0.77; 95% CI, 0.56-1.05) compared with HR+HER2-. Inclusion of other risk-associated variants did not change these observations. Conclusions: The rs140068132 polymorphism is associated with decreased risk of breast cancer in Peruvians and is more protective against HR- and HER2+ diseases independently of other breast cancer-associated variants in the 6q25 region. Impact: These results could inform functional analyses to understand the mechanism by which rs140068132-G reduces risk of breast cancer development in a subtype-specific manner. They also illustrate the importance of including diverse individuals in genetic studies.National Institutes of HealthRevisión por pare

Antifungal activity of amphotericin B conjugated to nanosized magnetite in the treatment of paracoccidioidomycosis

This study reports on in vitro and in vivo tests that sought to assess the antifungal activity of a newly developed magnetic carrier system comprising amphotericin B loaded onto the surface of pre-coated (with a double-layer of lauric acid) magnetite nanoparticles. The in vitro tests compared two drugs; i.e., this newly developed form and free amphotericin B. We found that this nanocomplex exhibited antifungal activity without cytotoxicity to human urinary cells and with low cytotoxicity to peritoneal macrophages. We also evaluated the efficacy of the nanocomplex in experimental paracoccidioidomycosis. BALB/c mice were intratracheally infected with Paracoccidioides brasiliensis and treated with the compound for 30 or 60 days beginning the day after infection. The newly developed amphotericin B coupled with magnetic nanoparticles was effective against experimental paracoccidioidomycosis, and it did not induce clinical, biochemical or histopathological alterations. The nanocomplex also did not induce genotoxic effects in bone marrow cells. Therefore, it is reasonable to believe that amphotericin B coupled to magnetic nanoparticles and stabilized with bilayer lauric acid is a promising nanotool for the treatment of the experimental paracoccidioidomycosis because it exhibited antifungal activity that was similar to that of free amphotericin B, did not induce adverse effects in therapeutic doses and allowed for a reduction in the number of applications

The JWST Galactic Center Survey -- A White Paper

The inner hundred parsecs of the Milky Way hosts the nearest supermassive black hole, largest reservoir of dense gas, greatest stellar density, hundreds of massive main and post main sequence stars, and the highest volume density of supernovae in the Galaxy. As the nearest environment in which it is possible to simultaneously observe many of the extreme processes shaping the Universe, it is one of the most well-studied regions in astrophysics. Due to its proximity, we can study the center of our Galaxy on scales down to a few hundred AU, a hundred times better than in similar Local Group galaxies and thousands of times better than in the nearest active galaxies. The Galactic Center (GC) is therefore of outstanding astrophysical interest. However, in spite of intense observational work over the past decades, there are still fundamental things unknown about the GC. JWST has the unique capability to provide us with the necessary, game-changing data. In this White Paper, we advocate for a JWST NIRCam survey that aims at solving central questions, that we have identified as a community: i) the 3D structure and kinematics of gas and stars; ii) ancient star formation and its relation with the overall history of the Milky Way, as well as recent star formation and its implications for the overall energetics of our galaxy's nucleus; and iii) the (non-)universality of star formation and the stellar initial mass function. We advocate for a large-area, multi-epoch, multi-wavelength NIRCam survey of the inner 100\,pc of the Galaxy in the form of a Treasury GO JWST Large Program that is open to the community. We describe how this survey will derive the physical and kinematic properties of ~10,000,000 stars, how this will solve the key unknowns and provide a valuable resource for the community with long-lasting legacy value.Comment: This White Paper will be updated when required (e.g. new authors joining, editing of content). Most recent update: 24 Oct 202

Anales de Edafología y Agrobiología Tomo 33 Número 9-10

Estudio del equilibrio nutritivo en cultivos de chirimoyo (Annona cherimolia), por César González O., Miguel Fuentes y Soledad Díaz.-- Resistencia a la desecación del tejido foliar y cierre de estomas en alfalfa (M edicago sativa L.) y trébol blanco (Trijolium repens L.) con relación al déficit agua, por M. Sánchez-Díaz y M. Sánchez-Marín.-- Determinación del calor isostérico y consideraciones sobre el mecanismo de la adsorción de fosfato por óxidos de hierro, por L. Madrid, F. Cabrera, P. de Arambarri y E. Díaz.-- Studies on sodium-calcium exchange equilibria. II. In Egyptian soils, by M. H. Nafady.-- Indices nutritivos en manzano (var. R. Delicious), por C. González, O. M. Rodríguez M., J. Solé D. y A. Wylie W.-- Caracteres de los suelos de las zonas citrícolas del valle de Murcia (España), por J. A. Sánchez F., F. Artes y J. López-Tarruella.-- Estudio micromorfológico de suelos desarrollados sobre andesitas en Andalucía oriental, por J. Aguilar y M. Delgado.-- Estudio edafológico de los relieves próximos a la vega de Motril, por J. Aguilar, Ruiz, A. Monge Ureña y C. Sierra Ruiz de la F.-- Consideraciones experimentales sobre el análisis de boro en plantas, por A. León, F.J. López-Andréu, F. Romojaro y C. Alcaraz.-- Efectos de la aplicación conjunta de fertilizantes químicos y microbianos (Azotobaeter Fosjobaeterias) en cultivos enarenados de tomate, por R. Azcón, M. Gómez y J. M. Barea.-- Formas de calcio en suelos del piso tropical de Barbacoas, Colombia, por G. Hugo Eraso, L. Federman Ortiz y O. Hernán Burbano.-- Compuestos íenólicos en Eriea vagans L., por J. Arinés, J. L. G. Mantilla y E. Vieitiz.-- Determinación de glúcidos en plantas por fotocolorimetría. Estudio comparativo de métodos clásicos y automáticos, por C. Cadahía y M. T. Piñeiro.-- Notas. Nombramiento de Consejeros Adjuntos del Patronato Alonso de Herrera.-- Nombramiento y cese de Vocales de la Junta de Gobierno del Patronato Alonso de Herrera.--Fallo de los Premios Alonso de Herrera y Antonio José de Cavanilles.-- Propuesta del Instituto de Alimentación y Productividad Animal sobre nombramiento de Vicedirector del mismo.-- Congresos y Reuniones internacionales.-- Creación de la Comisión Conjunta de Investigación Agraria de los Ministerios de Educación y Ciencia y de Agricultura.-- Restauración y adecuación del Jardín Botánico de Madrid.-- III Reunión Nacional de Centros de Investigación Ganadera Tribunales.-- Clausura del XI Curso Internacional de Edafología y Biología Vegetal.-- 7th International Colloquium on Plant Analysis and Fertilizer Problems.-- X Congreso Internacional de Ciencia del Suelo.-- Clausura del IV Congreso de Ciencia y Tecnología de Alimentos.-- 50th Anniversary Meeting of the British Society for Experimental Biología.-- XXIX Symposium on Symbiosis, Society for Experimental Biología.-- IV Reunión de la Sociedad Español de Microscopía Electrónica.-- Subvención de la Fundación Barrie de la Maza a la Misión Biológica de Galicia.-- Conferencia.-- Los universitarios y la defensa de la naturaleza.-- Seminario, sobre Tipos diferentes de costras calizas y su distribución regional.-- BibliografíaPeer reviewed2019-08.- CopyBook.- Libnova.- Biblioteca ICA