The biorefinery of the heterotrophic marine microalga Crypthecodinium cohnii grown on low-cost substrates: Production of DHA and biodiesel

Mestrado em Engenharia Alimentar. Universidade de Lisboa, Instituto Superior de AgronomiaThe present work explored the use of low-cost substrates for the cultivation of the marine heterotrophic microalga Crypthecodinium cohnii, to produce high concentrations of docosahexaenoic acid (DHA) and fatty acids for biodiesel production. Three cultivations were conducted, in a benchtop bioreactor operated under fed-batch regime, using different nutrient sources: crude glycerol, sugarcane molasses and corn steep liquor (CSL), all industrial by-products. The use of crude glycerol and CSL as carbon and nitrogen sources (Assay I), presented the best results, with a biomass concentration of 10.69 g L-1, total fatty acids (TFA) content of 28.29% (w/w), TFA productivity of 19.31 mg L-1 h-1 and DHA productivity of 6.64 mg L-1 h-1. After the cultivation, the lyophilized biomass obtained underwent a saponification reaction, to produce fatty acid soaps, which were further converted into fatty acid ethyl esters (FAEE). These compounds were fractionated, using the urea complexation method at different temperatures, to obtain a polyunsaturated FAEE rich fraction (with potential for food, pharmaceutical and cosmetic purposes) and a saturated and monounsaturated FAEE rich fraction (potentially for biodiesel purposes). At the crystallization temperature of -18ºC, in Assay I fractions with 91.6% purity of DHA ethyl ester and 88.0% purity of saturated and monounsaturated FAEE were obtained. In Assay III, fractions with 69.91% purity of DHA ethyl ester and 97.4% purity of saturated and monounsaturated FAEE were attained. Finally, physical parameters of the fractions rich in saturated and monounsaturated FAEE were estimated and confirmed to be appropriate for biodiesel production, after a hydrogenation step, according to limits defined by the European Standard EN 14214. The attained results represent an innovative and sustainable method for producing DHA and biodiesel from C. cohnii, increasing the potential revenue generated by the entire process, since all compounds produced are valorised and no waste is generated, respecting the circular economy.O presente estudo permitiu explorar a utilização de substratos de baixo custo no cultivo da microalga heterotrófica marinha Crypthecodinium cohnii, para produzir elevadas concentrações de ácido docosahexaenóico (DHA) e ácidos gordos para produção de biodiesel. Foram realizados três ensaios em biorreator de bancada, em regime fed-batch, utilizando subprodutos industriais como substrato: glicerol bruto, melaço de cana-de-açúcar e corn step liquor (CSL). Foi possível concluir que a utilização de glicerol bruto e CSL (Ensaio I), conduziu a melhores resultados, atingindo-se uma concentração em biomassa de 10.69 g de L-1, um teor em ácidos gordos totais (TFA) de 28.29% (m/m), produtividade em TFA de 19.31 mg L-1 h-1 e produtividade em DHA de 6.64 mg L-1 h-1. Após cultivo, a biomassa liofilizada produzida foi saponificada, permitindo formação de sabões de ácidos gordos, que foram convertidos em ésteres etílicos e, seguidamente, fracionados, através do método de complexação com ureia a diferentes temperaturas. Este método permitiu a obtenção de uma fração rica em ésteres etílicos polinsaturados (com potencial utilização nas indústrias alimentar, farmacêutica e cosmética) e uma fração rica em ésteres etílicos saturados e monoinsaturados (potencialmente para produção de biodiesel). À temperatura de cristalização de -18ºC foram obtidas frações com 91.6% e 69.91% de pureza em ésteres etílicos de DHA e frações com 88.0% e 97.4% de pureza de esteres etílicos saturados e monoinsaturados nos Ensaios I e III, respetivamente. Por último, foram estimados os parâmetros físicos das frações para biodiesel, verificando-se que, após uma etapa de hidrogenação, são adequadas para produção deste biocombustível, de acordo com os limites definidos pela Norma Europeia EN 14214. Os resultados obtidos permitiram concluir que este se trata de um método inovador e sustentável para produção de DHA e biodiesel, uma vez que todos os compostos produzidos são valorizados e não são gerados resíduos, respeitando a economia circular.N/

The role of key post-translational modifications in the nuclear translocation of STAT3 dimers upon cytokine stimulation

Tese de mestrado, Bioquímica (Bioquímica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2022STAT3 is a pleiotropic transcription factor that plays key roles in development, immunity, response to stress/damage and cancer. Its activity is largely regulated by specific post-translational modifications (PTMs) and protein-protein interactions. Most studies focus only on the phosphorylation at Y705 and/or S727, neglecting almost 80 identified PTMs. Furthermore, it is unlikely that all STAT3 molecules are modified simultaneously exactly in the same residues, existing different pools of STAT3 molecules. The main goal of this work was to determine the influence of key post-translational modifications on STAT3 translocation to the nucleus upon canonical stimulation with cytokines from the IL-6 family. To address this question, we first characterized a STAT3 knockout HeLa cell strain recently developed in our laboratory and created a series of molecular tools to analyze the dynamics of STAT3 homodimers in living cells based on BiFC (i.e., STAT3 expression plasmids with mutations preventing key PTMs, such as Y705F, K49R, K685R, S727A, T236A, Y640F and T714A). STAT3 knockout cells have a distinct gene expression profile and increased oxidative stress. Second, we studied the influence of symmetrically and asymmetrically modified STAT3 homodimers in their response to cytokines. Phosphorylation of only one of the STAT3 monomers is enough to drive STAT3 dimers into the nucleus after LIF stimulation. STAT3 dimers can accumulate in the nucleus independently of their phosphorylation status at Y705 and LIF stimulation. And third, we studied the effect of the disease-associated phosphoresistant Y640F mutation in the behavior of STAT3 dimers. This mutation increases the accumulation of STAT3 in the nucleus in response to LIF but is not related to oxidative stress and gene expression. Our results advance our understanding of STAT3 signaling and could potentially contribute to the study of several human pathologies involving STAT3, such as cancer, hyper-IgE Syndrome, or Inflammatory Hepatocellular Adenoma.O Transdutor de Sinal e Ativador da Transcrição 3 (STAT3) é um fator de transcrição pleiotrópico que desempenha funções importantes numa variedade de processos fisiológicos, incluindo proliferação celular, sobrevivência, diferenciação, inflamação, angiogénese, apoptose, progressão do ciclo celular e migração celular. O STAT3 está constitutivamente ativo em cerca de 70% dos cancros nos humanos. Esta ativação constitutiva deve-se maioritariamente à desregulação das vias de sinalização a montante. Os cancros incluem tanto tumores hematológicos (ex. leucemia, linfoma ou mieloma múltiplo) como tumores sólidos. Para além disto, mutações ativadoras no STAT3 (ex. Y640F) têm sido associadas a algumas doenças como Leucemia Linfocítica Granular e Adenoma Hepatocelular Inflamatório. Enquanto mutações inativadoras do STAT3 (ex. S636Y, T708S ou T714A) associam-se com a Síndrome de hiper-imunoglobulina E. Apesar do papel claro do STAT3 no cancro, também existem evidências de funções supressoras de tumores para o STAT3. Deste modo as consequências biológicas da ativação do STAT3 no cancro dependem do tipo de tumor e do contexto celular. O STAT3 é ativado a jusante de muitos tipos de sinais extracelulares, incluindo a família IL-6 de citocinas (ex. IL-6, IL-11, fator inibidor de leucemia (LIF), etc.), hormonas (hormona do crescimento, prolactina e leptina), fatores de crescimento (EGF, PDGF, FGF e IGF), interferões, entre outros. A família IL-6 de citocinas ativa o STAT3 através da via de sinalização canónica JAK-STAT3. Esta via começa com a ligação de uma citocina ao seu recetor na membrana celular. Isto ativa um dos membros da família de Janus kinase (JAK) que por sua vez fosforila o recetor da citocina. Os dímeros de STAT3 são recrutados ao recetor ativado e são fosforilados na tirosina 705 (Y705). Isto leva à acumulação dos dímeros de STAT3 fosforilados no núcleo. Os mecanismos moleculares pelos quais a acumulação no núcleo ocorre ainda estão sob discussão. Alguns investigadores defendem que o STAT3 é maioritariamente encontrado no citoplasma de células não estimuladas e que só vai para o núcleo após estimulação com uma citocina. Outros defendem que o STAT3 está permanentemente a mover-se entre o citoplasma e o núcleo e que fica retido no núcleo após a sua fosforilação induzida por uma citocina. Uma vez no núcleo, o STAT3 fosforilado liga-se ao DNA e consegue ativar ou reprimir a expressão génica. Alguns dos genes ativados pelo STAT3 são genes pró-sobrevivência (ex. BCL2, BCL2L1, MCL1 e BIRC5); genes de progressão do ciclo celular (ex., CCND1 e c-MYC); e genes pró migratórios (ex., MMP2). O STAT3 fosforilado também reprime a expressão de alguns genes relacionados com a proliferação e sobrevivência celular, como TP53, FAS e NDN. A expressão e ativação do STAT3 é altamente regulada através de uma variedade de proteínas endógenas (ex. SOCS e PIAS) que conseguem silenciar a via de sinalização JAK-STAT3. Para além desta via canónica, também foram descritas outras vias não canónicas do STAT3 que são independentes da fosforilação do STAT3 no resíduo Y705. Estas vias não canónicas incluem a atividade transcripcional do STAT3 não fosforilado e a atividade do STAT3 na mitocôndria e no retículo endoplasmático. Nestes organelos, o STAT3 desempenha diversas funções como a regulação da respiração e do metabolismo mitocondrial e a regulação de espécies reativas de oxigénio (ROS) e de cálcio (Ca2+). Ambas as vias de STAT3 canónicas e não canónicas dependem fortemente de interações com outras proteínas e de modificações pós-traducionais (PTMs). A maioria das funções e interações do STAT3 foram estudadas em relação à fosforilação nos resíduos Y705 ou S727. No entanto, o STAT3 tem cerca de 80 PTMs comprovadas experimentalmente, incluindo muitos outros eventos de fosforilação, acetilação, metilação, ubiquitinação e SUMOilação. As funções biológicas destas PTMs são pouco estudadas, e a sua influência nas interações com outras proteínas é mal compreendida. É também improvável que todas as moléculas de STAT3 sejam modificadas simultaneamente nos mesmos resíduos, existindo diferentes conjuntos de moléculas de STAT3 na célula. Recentemente, descrevemos que dímeros de STAT3 modificados assimetricamente apresentaram alterações no seu comportamento e função. No entanto, estas observações foram realizadas em células que expressavam STAT3 endógeno e em ausência de estímulo de citocinas. O principal objetivo deste trabalho foi determinar a influência de modificações pós-traducionais importantes na translocação do STAT3 para o núcleo, após estimulação com citocinas da família IL-6. Para responder a esta questão, usámos células HeLa com knockout do gene STAT3 (STAT3-/-) que foram recentemente desenvolvidas no laboratório do Dr. Federico Herrera. Primeiramente, caracterizámos esta linha celular em termos de proliferação, stress oxidativo, níveis de Ca2+, potencial de membrana mitocondrial, expressão génica e níveis de proteínas, usando citometria de fluxo, qPCR e Western Blot. Observámos que as células HeLa STAT3-/- têm um perfil genético distinto e maior stress oxidativo. Criámos também uma série de ferramentas moleculares baseadas no ensaio de complementação de fluorescência bimolecular (BiFC) para analisar a dinâmica dos homodímeros de STAT3 nas células. Nestes ensaios BiFC, duas proteínas de interesse são unidas a duas metades complementares não fluorescentes de um repórter fluorescente, como Vénus. Se as proteínas de interesse interagirem, as metades do repórter unem-se reconstituindo o fluoróforo funcional. A fluorescência é, portanto, proporcional à dimerização das proteínas e pode ser facilmente medida por citometria de fluxo ou microscopia. Plasmídeos Venus-STAT3 BiFC, desenvolvidos previamente no laboratório do Dr. Federico Herrera, foram modificados por site-directed mutagenesis. Resíduos fosforiláveis (serina (S), treonina (T) e tirosina (Y)) e resíduos lisina (K) (acetiláveis, metiláveis, ubiquitináveis e SUMOiláveis) foram mutados para resíduos estruturalmente semelhantes, não modificáveis [fenilalanina (F), alanina (A) ou arginina (R), a depender do tipo de resíduo]. Deste modo, foram desenvolvidos plasmídeos que expressam STAT3 com mutações que previnem PTMs essenciais ou relacionadas com doenças humanas, como Y705F, K49R, K685R, S727A, T236A, Y640F e T714A. Em segundo lugar, estudámos a influência dos homodímeros de STAT3 modificados simetricamente e assimetricamente na sua resposta a citocinas. As células HeLa STAT3-/- foram transfetadas com combinações de dois plasmídeos Venus-STAT3 BiFC complementares. Foram feitas combinações simétricas de plasmídeos, ou seja, nas quais os dois plasmídeos eram wild type ou tinham a mesma mutação. Também foram feitas combinações assimétricas em que os plasmídeos eram diferentes, ou seja, um dos plasmídeos podia ser wild type e o outro podia ter uma mutação ou então podiam ser dois plasmídeos mutados, mas com diferentes mutações. Após transfeção e tratamento com LIF, as proteínas nucleares foram extraídas e analisadas por Western Blot. Observámos que enquanto os dímeros simétricos de wild type STAT3 acumularam-se rapidamente no núcleo em resposta ao LIF, os dímeros simétricos mutantes Y705F não. Os dímeros STAT3 assimétricos onde um dos monómeros era wild type STAT3 responderam como os dímeros simétricos de wild type STAT3. Deste modo, a fosforilação de apenas um dos monómeros de STAT3 é suficiente para provocar a translocação dos dímeros de STAT3 para o núcleo após estimulação com LIF. Os dímeros de STAT3 podem acumular se no núcleo independentemente do seu estado de fosforilação no resíduo Y705 e de estimulação com LIF. Em terceiro lugar, estudámos o efeito da mutação fosforesistente Y640F relacionada com doenças no comportamento dos dímeros de STAT3. Esta mutação aumenta a acumulação de STAT3 no núcleo em resposta ao LIF, mas não está relacionada com stress oxidativo e expressão génica. Os nossos resultados permitem aprimorar o nosso conhecimento sobre as vias de sinalização do STAT3 e podem potencialmente contribuir para o estudo de diversas patologias humanas que envolvem o STAT3, como cancro, Síndrome de hiper-imunoglobulina E ou Adenoma Hepatocelular Inflamatório

Euro Area monetary policy and financial stress regimes: a threshold var approach

We investigate how the state of financial conditions affects the transmission of monetary policy to the euro area macroeconomy. Our main goal is to analyze the responses of output growth and inflation to monetary policy shocks during periods of low and high financial stress. Results from a Threshold Vector Autoregression model show that monetary policy is of negligible importance to the real economy during normal times. However, an effective tool to ease the state of financial conditions when the economy is already facing strains. Empirical evidence also suggests that in the short-run monetary policy cannot significantly influence the inflation rate

Assistance of nursing home care in the puerperium to guarantee breastfeeding success : case study

As duas primeiras semanas pós-parto constituem o período mais vulnerável para o êxito do aleitamento materno. Neste período, o apoio do profissional da saúde e um ambiente favorável à amamentação são muito importantes para a mãe. Como já descreveram alguns estudos, o suporte profissional em domicílio está associado à satisfação e ao aumento de confiança para o aleitamento materno. Este estudo de caso teve como objetivo relatar as possíveis contribuições da assistência de enfermagem domiciliar na primeira semana pós-parto para o sucesso do aleitamento materno exclusivo de mãe primípara. Para isso, inicialmente, foi realizado um protocolo para sistematizar a assistência prestada. Em seguida, diariamente, a nutriz foi assistida, e as queixas e dificuldades foram colhidas. Foram realizados diagnósticos de enfermagem, prescrições de intervenção e,posteriormente, documentados os resultados. A puérpera apresentou características definidoras similares aos descritos em estudos recentes. A intervenção prescrita trouxe resolução aos problemas identificados e preveniu possíveis complicações. Conclui-se que este estudo descritivo identificou vários fatores positivos da intervenção de enfermagem, que podem ter contribuído para o sucesso do aleitamento materno. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACTThe first two weeks postpartum is the most vulnerable period to breastfeeding success. In this time, the health professional support and the propitious surrounding are very important to the mother. As some research already describes, the professional support at home is associated with maternal satisfaction and improved confidence with breastfeeding. The aim of this case study was to describe the contributions of nursing home care support at the first week postpartum of first-time mother to achieve exclusive breastfeeding. A protocol was developed to systemize the nursing assistance. Every day, for 5 days, the mother received home assistance, where were gathered the complaints and difficulties for breastfeeding. It was made the nursing diagnosis and was prescribed the nursing intervention. After that, it was registered the outcomes. The mother showed breast feeding difficulties similar to the ones described in a recent study. The nursing intervention resolved the problems identified and prevented the possible complications. This descriptive study identified positives factors that the home-based nursing support could have contributed to the exclusive breastfeeding success

Adapted physical activity and sport in the rheumatologic conditions

As condições reumatológicas caracterizam-se por manifestações crônicas e degenerativas que geram disfunções limitantes das atividades de vida diária. Dores, limitações da amplitude de movimento articular, recrutamento neuromuscular inadequado, perda do condicionamento cardiovascular e respiratório, alterações do trofismo da pele, além de transtornos em outros sistemas, fazem parte do conjunto de incapacidades apresentadas por estes indivíduos. Afetando principalmente o sistema osteomioarticular, as alterações do movimento são marcantes e necessitam de programa de reabilitação específica para garantir um repertório mínimo de movimentação que promova independência funcional. Dentre os recursos disponíveis, evidências científicas têm apresentado resultados interessantes da aplicação da atividade física e esportiva adaptada para esta população. Entretanto, profissionais responsáveis pela utilização deste recurso necessitam de cuidados especiais que devem ser adicionados aos programas para evitar o agravamento das disfunções reumatológicas pela prática inadequada de atividade física. _________________________________________________________________________________ ABSTRACTRheumatologic conditions are characterized by chronic and degenerative manifestation and it generate disabilities dysfunctions of daily life activities. Pains, articular limitations of range of motion, inappropriate neuromuscular recruitment, loss of cardiovascular and respiratory conditioning, changes of skin trophism beyond disorder sin other systems being part of disabilities ensemble showed by these individuals. Affecting mainly osteomioarticular system, movement alterations are remarkable and it needs specific rehabilitation program to guarantee a minimal movement repertory to promote functional independency. Among available resources, scientific evidences had showed interesting results of physical activity application and adapted sports for this population. However, professionals responsible by such resources utilization need special cares that must be added to the programs to avoid enhancement of rheumatologic dysfunctions by inappropriate practices of physical activity

The impact of the wine routes on the international promotion of the Portuguese wine : the case of the Vinho Verde route

The aim of this research is to understand to which extent wine tourism contributes to the internationalization strategy of wine. The emphasis will be on Portuguese Wine Tourism, more precisely on the Vinho Verde route. The major topics of concern are understanding how wine routes are composed, what tools are used to promote Portuguese regional wine abroad and what development level the Vinho Verde route has. The multiple case study approach will serve as a way to answer the different research questions and to create a comparison between an international player, such as Champagne, that is under the same conditions of wine exclusivity as the Vinho Verde. Data collection was mostly based on primary data, although secondary data backed the research. Eight interviews were made with agents linked to the wine and wine tourism industry. The conclusions indicate that wine routes have a soft contribution for the Portuguese wine recognition abroad, being that this role is not crucial. The fragmented offer, lack of funds and the almost exclusive national focus are the main reasons on why this impact is moderate. The recommendations for better development and efficiency are based on creating synergies and applying more funds to training, promotion and setting tourism programs.O objetivo desta pesquisa é perceber em que medida o Enoturismo contribui para a estratégia de internacionalização do vinho. O enfoque será no Enoturismo português, mais precisamente na Rota do Vinho Verde. Os tópicos de maior atenção são entender como estão compostas as rotas do vinho, que ferramentas são usadas para promover o vinho regional português no estrangeiro e o nível de desenvolvimento que a Rota do Vinho Verde tem. A abordagem do múltiplo caso de estudo servirá para responder às diferentes perguntas de investigação e para criar uma comparação entre um agente internacional como o Champanhe, que possui as mesmas condições de exclusividade vínica que o Vinho Verde. A recolha de informação baseou-se principalmente em informação primária, apesar de informação secundária ter apoiado o estudo. Foram feitas oito entrevistas com agentes ligados à indústria do vinho e do Enoturismo. As conclusões indicam que as rotas do vinho têm uma ligeira contribuição no reconhecimento internacional do vinho português, sendo que este papel não é crucial. A oferta desfragmentada, a falta de fundos e o quase exclusivo foco nacional são as principais razões deste impacto ser moderado. As recomendações para um melhor desenvolvimento e eficiência baseiam-se em criar sinergias e aplicar mais fundos à formação, promoção e definição de programas turísticos

Remote project management: challenges and best practices

With the advance of technology, such as the internet and media communications, the world has become much more connected. People have shortened the physical distance through technology facilitations. This advance not only has affected the social side of humanity, but has also opened up doors so that organizations could take part of these benefits. People were trained and encouraged to work from home. Companies saw an opportunity to reduce costs and get the most qualified professionals regardless of their geographic location. In this way, Project Management (PM) with Remote Teams (RT) has taken a relevant place inside organizations. In face of the pandemic situation the world is undergoing, working remotely stopped being an option and became the way to move on. There is an uncountable study on scientific community about PM talking about issues, challenges, best practices, frameworks and other topics, but only a few of them is direct related with remote project management (RPM) and/or RT. To fill this gap, this research aims to identify the main RPM challenges as well as the practices to mitigate such challenges. To evaluate and demonstrate findings, 30 qualitative interviews were performed and 69 surveys were applied with Project Managers who are developing their activities in a remote mode 100% of the time after the beginning of the Covid-19 pandemic. In the end, it is possible to see a list of 14 challenges and 13 best practices they had to apply to maintain their projects in the track and support their teams in this such difficult moment. The author concluded that was a disruptive moment for both workers and companies. Increased quality of life and flexible schedules were identified as a great benefit. On the other hand, much more dedicated work-hours were needed to maintain projects productivity.Com o avanço da tecnologia, tal como a internet e os meios de comunicação o mundo ficou muito mais conectado. As pessoas passaram a encurtar a distancia fisica através de facilidades tecnologicas. Esse avanço não afetou apenas o lado social da humanidade, mas abriu portas para que as organizações também pudessem usufruir desses beneficios. As pessoas foram capacitadas e incentivadas a trabalhar de casa. As empresas viram uma oportunidade de reduzir custos e obter os mais qualificados profissionais independente de sua posição geografica. Desta forma, a gestão de projetos com equipas remotas passou a ter um relevante lugar dentro das organizações. Diante da situação pandêmica que o mundo está a ultrapassar, trabalhar remotamente deixou de ser opção e passou a ser a forma de seguirmos em frente. Existem incontaveis estudos na comunidade cientifica a dissertar sobre gestao de projetos, seus riscos, desafios, melhores praticas, ferramentas e outros assuntos pertinentes. Mas somente um grupo pequeno e restrito de estudos estão diretamente relacionados com a gestão de projetos remota e equipas remotas. Para preencher essa lacuna, esse estudo visa identificar os principais desafios da gestão de projetos remota, bem como as práticas para mitiga-los. Para avaliar e demonstrar os resultados, 30 entrevistas qualitativas e 69 questionarios foram aplicados com gestores de projetos que estão desenvolvendo suas atividades de modo remoto 100% do tempo após o inicio da pandemia Covid-19. No final, pode-se ver uma lista de 14 desafios e 13 boas praticas que foram adotadas para manter seus projetos em dia e apoiar suas equipas nesse momento tão dificil. O autor conclui que foi um momento disruptivo tanto para os trabalhadores quanto para as empresas. Aumento da qualidade de vida e horarios mais flexiveis foram vistos como um grande beneficio. Em contra-partida, foram necessarias muito mais horas de dedicacao ao trabalho para que fosse possivel manter a produtividade dos projetos

Brand equity within business networks : the case of Innoenergy

Mestrado em MarketingEsta investigação visa estudar o valor da marca dentro das redes de negócios através do caso da KIC InnoEnergy, uma entidade europeia que promove a inovação na área da energia sustentável. Com base em conceitos como redes de negócios, brand equity e comportamento de compra organizacional, pretende-se avaliar o valor da marca da empresa na sua rede, bem como entender as necessidades do seu ecossistema e o que mais valorizam. Os dados foram recolhidos através de métodos qualitativos e a amostra incluiu alguns dos stakeholders. Concluiu-se que a InnoEnergy tem um forte valor de marca entre o ecossistema das start-ups, bem como entre os seus parceiros, enquanto a educação é a linha de negócios em que as associações da marca precisam de ser mais trabalhadas. Concluiu-se também que as semelhanças entre Knowledge and Innovation Communities (KIC) podem ser prejudiciais para a saliência da marca no seu ecossistema. De uma perspectiva teórica, sugere-se a inclusão de um novo bloco na adaptação do modelo de Keller para business-to-business, que teria o nome de "network". Futura investigação deve centrar-se em cada relação com os diferentes atores e linhas de negócio, o papel da marca neste contexto e as consequências práticas das semelhanças em termos de branding das diferentes KICs.This research aims to study brand equity within business networks through InnoEnergy's case, a European entity that promotes innovation in the sustainable energy field. Based on concepts such as business networks, brand equity and organizational buying behavior, it is intended to evaluate the brand equity of the company in its network as well as to understand the needs of its ecosystem and what they value the most. To this end, data was collected through qualitative methods and the sample included some of the stakeholders. It was concluded that InnoEnergy has strong brand equity among the start-up's ecosystem, as well as among its partners, whereas Education is the business line in which the associations need to strengthen the most. It was also concluded that the similarities between Knowledge and Innovation Communities can be harmful to the salience of the brand in its ecosystem. From a theoretical perspective, it is suggested the inclusion of a new block in the Keller's model adaptation to business-to-business, called "networks". Further research should focus on each relationship with the different actors and business lines, the role of branding in this context and the practical consequences of the similarities between KICs branding.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Técnicas de Filtragem Adaptativa para Redução da Interferência Respiratória Materna no Eletrohisterograma

O parto prematuro é qualquer nascimento que ocorre antes das 37 semanas completas de gestação e possui elevados riscos para a saúde do feto. A prematuridade apresenta-se como a principal causa de morte em recém-nascidos no mundo e a segunda principal causa de morte infantil, pelo que a previsão de partos pré-termo é um problema de extrema importância que ainda carece de uma solução satisfatória. Nesta perspetiva e em estudos recentes, o eletrohisterograma (EHG) surgiu como uma alternativa mais precisa ao instrumento atualmente usado na descrição das contrações uterinas, o tocograma. O EHG consiste no registo do sinal elétrico gerado pela atividade contráctil do útero e apresenta potencial para a previsão do parto termo e pré-termo, podendo auxiliar na tomada de decisão médica relativamente à utilização de terapia tocolítica (antagonista da oxitocina) para retardar o parto. Esta medicação possui efeitos secundários pelo que deve ser evitada quando possível. Deste modo, o EHG não invasivo é uma ferramenta apropriada para a monitorização da gravidez e do parto. As ondas Alvarez (Alv) são uma das componentes que constitui o sinal do EHG e, segundo vários autores, possuem potencial para a previsão do parto termo e pré-termo, pelo que o seu estudo é um assunto de grande interesse. Contudo, o sinal elétrico proveniente do eletromiograma da respiração materna (MR-EMG) apresenta-se como uma interferência prevalente no EHG, na medida em que a sua banda de frequência se sobrepõe à das ondas Alv, afetando os resultados obtidos. Portanto, um método de atenuação do MR-EMG sem comprometer as ondas Alv é necessário. As propriedades dos filtros adaptativos tornam-nos adequados para esta tarefa. No entanto, selecionar o filtro adaptativo ótimo e os respetivos parâmetros é uma tarefa importante para o sucesso da operação de filtragem. Neste trabalho foram estudados 16 algoritmos de filtragem adaptativa. Para a seleção automática dos filtros com melhor desempenho e dos respetivos parâmetros otimizados foi implementado um algoritmo, que visa minimizar a raiz do erro quadrático médio (RMSE) entre o sinal uterino puro e o sinal filtrado. Deste modo, para uma fase inicial, a utilização de sinais sintéticos é fundamental, pois de outra forma não seria possível aceder ao sinal uterino puro. Os filtros Wiener, Recursive Least Squares (RLS), Householder Recursive Least Squares (HRLS) e QR-Decomposition Recursive Least Squares (QRD-RLS) foram os que obtiveram melhor desempenho para os parâmetros otimizados, cujo comprimento do filtro (L) adota o valor de 2 (para todos eles) e o fator de esquecimento (λ) é 1 (para os três últimos). Numa segunda fase do trabalho, os filtros e parâmetros otimizados foram aplicados a dados de EHG da vida real (Icelandic Reykjavik University EHG database). Para avaliar quantitativamente os resultados obtidos analisaram-se seis propriedades dos periodogramas das ondas Alv: a largura de banda ocupada (bw), os limites inferior e superior da bw (f lo e f hi), a potência contida na bw (power), a amplitude máxima (peak) e a frequência para a qual essa amplitude ocorre (f req_peak). Os resultados obtidos mostraram que foi possível atenuar o MR-EMG preservando as ondas Alv. Verificaram-se variações como o aumento de bw e f hi, bem como, a diminuição de f lo, power, peak e f req_peak, sobretudo para o filtroWiener. Estas alterações indicaram que a componente do MR-EMG foi atenuada das ondas Alv.Preterm birth is defined as any birth occurring before the 37 weeks of pregnancy, which poses several risks for the newborn. It is the leading cause of death among newborns and the second major cause of infant death. Preterm risk assessment is, therefore, very important but it still lacks of an accurate monitoring tool. Recent studies have shown that eletrohysterogram (EHG) is a more precise alternative to the tocogram, where the latter is frequently used to describe uterine contractions. EHG consists in the registration of the electric signals resulting from uterine contractions and it can potentially be used to predict both preterm and term birth. Hence, this exam can improve medical decision-making for tocolithic therapy (i.e., the use of labor suppressants). Since this kind of medication presents secondary effects, it should be avoided whenever possible. Thus, the non-invasive EHG is a suitable tool for monitoring pregnancy and birth. Alvarez (Alv) waves are one of the components of the EHG signal and, according to many authors, can potentially predict term and preterm birth. Therefore, the study of these EHG signal components is very relevant. Yet, the electromyographic signals resulting from the maternal respiration (MR-EMG) tend to interfere with the EHG. This affects the EHG signal since the MR-EMG signal bandwidth overlaps with that of the Alv waves. Therefore, a method capable of attenuating the MR-EMG signal without compromising the Alv waves would be suitable for this application. Adaptive filtering seems to be a good choice for such a task. However, selecting the optimal adaptive filter and its parameters is an important first step for the filtering operation’s success. Sixteen different adaptive filtering algorithms were investigated in the present work. The best performing algorithms and their respective parameters were automatically selected based on a root mean squared error (RMSE) optimisation procedure between the pure and the filtered uterine signals. Thus, for an initial phase, the use of synthetic signals is essential, as otherwise, it was not possible to access the pure uterine signal. TheWiener, the Recursive Least Squares (RLS), the Householder Recursive Least Squares (HRLS) and the QR-Decomposition Recursive Least Squares (QRD-RLS) filters were found as the best performing adaptive filters. All of them presented an optimised filter length L=2 and, the last three, a forgetting factor λ=1. Afterwards, the optimised filter parameters obtainedwere applied to real EHG signals, namely signals from the Icelandic Reykjavik University EHG database. The performance of the aformentioned filters was assessed based on specific properties of the periodograms obtained from the Alv waves: the occupied bandwidth (bw), the limiting frequencies of bw (lower-bound frequency, f lo, and upper-bound frequency, f hi), the power contained in the bw (power), the maximum amplitude (peak) and the frequency for which this amplitude occurs (f req_peak). The results showed that it is possible to attenuate the MR-EMG signal while preserving the Alv waves. Moreover, increases in bw and f hi were observed as well as decreases in f lo, power, peak and f req_peak, especially for theWiener filter. These variations account for MR-EMG attenuation in the Alv waves

Covid-19: the impact on the hotel industry - the Nh hotel group case study

This work project aims at measuring the impact of the COVID-19 outbreak on the hotel industry by taking NH Hotel Group as a case study. Firstly, an analysis of the surrounding environment and the crisis originated by the pandemic was performed, focusing on the tourism sector and, specifically, the lodging industry. Thereafter, a research on the above-mentioned company was conducted in order to understand its business model and market context. Finally, a valuation of NH Hotel Group was completed based on a 5-year business plan under three different scenarios related with a vaccine development. An enterprise value of €5,063 million and €2,786 million was obtained in the best and worst-case scenarios, respectively, which translated to a stock price of €7.25 and €1.44in each. These results illustrate how a faster vaccine develop mentis expected to lead to a lower COVID-19 outbreak impact on NH Hotel Group value