The role of microRNAs in X-linked myotubular myopathy

Tese de mestrado, Biologia (Bioplogia Humana e Ambiente), 2009, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasX-linked myotubular myopathy (XLMTM) is a congenital neuromuscular disorder characterized by profound hypotonia and severe skeletal muscle weakness in the affected newborn males. The pathology is associated with mutations in the MTM1 gene leading to loss of function of the resulting encoded protein, myotubularin. Myotubularin is a phosphoinositol lipid phosphases known to be involved in endosome trafficking and membrane remodeling, however, the molecular mechanisms underlying myotubular myopathy are not yet clear. MicroRNAs (miRNAs) are post transcriptional modulators of gene expression and play an important role in many developmental processes and diseases. To identify functional miRNA-protein networks that may be dysregulated in myotubular myopathy, we performed miRNA as well as mRNA expression profiling of skeletal muscle of Mtm1 knockout mice. Bioinformatic analysis and real-time RTPCR validation resulted in identification of 12 miRNAs that showed significantly differential expression in Mtm1 mice. The functional targets of these miRNAs in myotubular myopathy were identified by a combinatorial approach in which computationally predicted targets genes of these 12 miRNAs were matched with statistically altered genes obtained by mRNA profiling of skeletal muscle tissues from Mtm1 mice. Ontological classification of target genes revealed genes primarily belonging to skeletal muscle development and maintenance, regulation of cell cycle and differentiation of muscle fibers. Expression analyses of miRNA-target genes identified from this study were also performed during earlier developmental time points (2 and 4 weeks) in Mtm1 mice for a better comprehensive insight of miRNA-mRNAs in the progression of the disease. We observed that an increase in the severity of XLMTM is associated with an increase in the fold change of several miRNAs and their target genes, suggesting their crucial role in pathology of myotubular myopathy. We hope understanding the molecular pathways involving these miRNA-mRNA networks, which are disrupted in myotubular myopathy, will contribute to uncovering the mechanisms of muscle development and maintenance and the development of new therapies for myotubular myopathy.Resumo alargado em português disponível no document

Influence of EPICardial adipose tissue in HEART diseases (EPICHEART) study: Protocol for a translational study in coronary atherosclerosis

Accumulation of epicardial adipose tissue (EAT) is associated with coronary artery disease (CAD) and increased risk of coronary events in asymptomatic subjects and low-risk patients, suggesting that EAT promotes atherosclerosis in its early stage. Recent studies have shown that the presence of CAD affects the properties of adjacent EAT, leading to dynamic changes in the molecular players involved in the interplay between EAT and the coronary arteries over the history of the disease. The role of EAT in late-stage CAD has not been investigated.coronárioResumoIntroduc¸ão:Acumulac¸ão de tecido adiposo epicárdico (TAE) tem sido associado a doenc¸acoronária aterosclerótica (DC) e aumento do risco de eventos coronários em indivíduos ass-intomáticos e doentes de baixo risco, sugerindo que o TAE pode promover fases precoces daDC. Estudo recentes mostraram que a presenc¸a de DC afeta as características do TAE adja-cente levando a modificac¸ões dinâmicas nos mediadores envolvidos na comunicac¸ão entre oTAE e as artérias coronárias ao longo da história da DC. O papel doTAE nas fases avanc¸adas daaterosclerose coronária não foi investigado.Objetivos: Através de análise comparativa com o tecido adiposo mediastínico e subcutâneo,pretendemos investigar se o volume do TAE, avaliado por tomografia computadorizada (TC), eo seu proteoma, avaliado por espectrometria de massa técnica de SWATH, estão associados aestadios avanc¸ados da DC numa coorte de estenose aórtica grave.Métodos: O estudo EPICHEART (NCT03280433) é um estudo prospetivo que inclui doentescom estenose aórtica grave referenciados para substituic¸ão eletiva da válvula aórtica, cujoprotocolo envolve avaliac¸ão pré-operatória clínica, nutricional, ecocardiográfica, por TC eangiografia coronária invasiva. Durante a cirurgia cardíaca, colhemos amostras de tecido adi-poso epicárdico, mediastínico e subcutâneo para análise do seu proteoma por espectrometriade massa técnica de SWATH. Adicionalmente, colhemos líquido pericárdico, sangue venoso per-iférico e do seio coronário para investigar mediadores de DC derivados do TAE na circulac¸ãosistémica e local.Conclusão: Desenhámos um estudo de translac¸ão para explorar a associac¸ão da quantidade equalidade do TAE com a DC tardia. Esperamos identificar mediadores da comunicac¸ão recíprocaentre o TAE e as artérias coronárias que estão envolvidos na patogénese das fases avanc¸adas daDC, especialmente, calcificac¸ão coronária, os quais podem servir como novos alvos terapêuticose soluc¸ões de engenharia biomédica para visualizac¸ão da DC

IN 65: um cavalo de tróia

Este trabalho é uma aproximação crítica com a recente Instrução Normativa (IN) 65 de 30 de julho de 2020, editada pelo Ministério da Economia/Secretaria Especial de Desburocratização, Gestão e Governo Digital/Secretaria de Gestão e Desempenho de Pessoal que regulamenta o teletrabalho na administração pública. Isso não é uma novidade. Já havia previsão na IN 1 de 31 de agosto de 2018, que foi revogada pela IN 65. A nova norma aumenta o escopo de possibilidades para execução desta modalidade de trabalho, a partir da adesão ao programa de gestão pela instituição. O regime de trabalho remoto atual não é o mesmo que o teletrabalho. O trabalho remoto foi estabelecido para alguns/mas servidores/as públicos/as para atender a indicação de isolamento social durante a pandemia. Ou seja, a IN não regulamenta o trabalho remoto executado por nós agora.Essa normativa tem diferentes armadilhas. O regime de teletrabalho é sedutor. Há diversos/as colegas que gastam muito tempo de seu dia somente no deslocamento para o local de trabalho - seja pela distância, seja pelo trânsito - em meios de transporte precários e lotados. Entra também na conta a possibilidade de passar mais tempo com seus afetos: por exemplo, quando o/a servidor/a é responsável por alguma criança ou pessoa que demanda cuidados, é realmente atrativa a ideia de estar com eles/as, atento/a e disponível para questões que surgirem.O problema é que um conjunto de escolhas individuais podem gerar sérios impactos coletivos na política de educação superior. A experiência que estamos vivendo com o trabalho remoto mostra que os impactos negativos podem superar as vantagens. Sua implantação foi sem planejamento, sem orientação, sem garantia de condições de trabalho e tem se demonstrado bastante estressante. Em cada mês completado, a esperança do seu término aumenta, assim como as experiências negativas a ele associadas: o distanciamento entre as pessoas, a sobrecarga de trabalho, o estresse e as práticas assediantes sofridas. O teletrabalho não resolve tais problemas, na verdade, os consolida! A IN atribui ao servidor a responsabilidade para prover a suas condições laborais, assim como fortalece o poder da chefia no que diz respeito às nossas avaliações individuais e a definição das nossas metas, além de poder ser retirada a qualquer momento, posto que não é um direito. Nossa intenção é contribuir para o debate e tentar evitar a precarização mais profunda do trabalho no serviço público federal

Níveis de lisina para leitoas selecionadas geneticamente para deposição de carne magra, dos 30 aos 60 kg, mantendo constante a relação entre lisina e metionina+cistina, treonina, triptofano, isoleucina e valina Levels of lysine for gilts with high genetic potential for lean meat deposition from 30 to 60 kg, mantaining constant the relation of lysine and methionine+cystine, threonine, tryptophan, isoleucine and valine

Foram utilizadas 40 leitoas mestiças (Hampshire, Landrace Belga, Pietran) com peso inicial médio de 30,1±1,25 kg e alto potencial genético para deposição de carne magra na carcaça, para avaliar diferentes níveis de lisina. Foi usado delineamento de blocos ao acaso com quatro tratamentos, cinco repetições e dois animais por unidade experimental. Os tratamentos corresponderam a uma ração basal com 17,5% de proteína bruta, suplementada com quatro níveis de L-lisina HCl, resultando em rações com 1,00; 1,10; 1,20; e 1,30% de lisina. As rações foram suplementadas com níveis crescentes de treonina, metionina, isoleucina, valina e triptofano, resultando em rações nas quais a relação entre estes aminoácidos e a lisina se manteve constante em 67, 62, 60, 68 e 19%, respectivamente, com base na digestibilidade verdadeira. Não se observou efeito dos tratamentos sobre consumo de ração, ganho de peso diário e concentração de uréia no soro sangüíneo dos animais, entretanto, os animais pareceram ter atingido o potencial genético máximo para ganho de peso no nível de lisina de 1,10% (0,329%/Mcal de ED), correspondente a um consumo de lisina de 22 g/dia. Observou-se efeito linear sobre o consumo de lisina diário, que aumentou, e a conversão alimentar, que reduziu com o aumento do nível de lisina da ração. O nível de 1,30% (0,389%/Mcal de ED) ou 1,19% (0,356%/Mcal de ED), correspondente a um consumo de lisina total e digestível, respectivamente, de 24 e 22,1 g/dia, proporcionou os melhores resultados de conversão alimentar de leitoas dos 30 aos 60 kg, quando se utilizou o conceito de proteína ideal na formulação das rações experimentais.<br>Forty crossbred gilts (Hampshire, Belgium Landrace, Pietran) with initial average weight of 30.1±1.25 kg and high genetic potential for lean meat deposition were used to evaluate different lysine levels. A randomized block experimental design, with four treatments, five replications and two animal per experimental unit, was used. The treatments corresponded to the basal diet with 17.5% crude protein, supplemented with L-lysine-HCl, resulting in diets with 1.00, 1.10, 1.20 and 1.30% of lysine. The diets were supplemented with increasing levels of threonine, methionine, isoleucine, valine and tryptophan, resulting in diets where the amino acids:lysine ratio was constant in 67, 52, 60, 68 and 19%, respectively, based on the true digestibility. There was no effect of treatments on feed intake, daily weight gain and blood serum urea concentration of animals, however, the animals seems to reach their maximum genetic potential for weight gain at lysine level of 1.10% (0.329%/Mcal de DE), corresponding to a lysine intake of 22 g/day. There was linear effect on daily lysine intake, that increased, and on feed:gain ratio that reduced with increasing dietary lysine level. The level of 1.30% (0.389%/Mcal of DE) or 1.19% (0.356%/Mcal of DE), corresponding to a total and digestible lysine intake of 24 and 22.1 g/day, respectively, showed the best results of feed:gain ratio of gilts from 30 to 60 kg, when the ideal protein concept was used in the diet formulation