Creencias de docentes de bachillerato sobre la enseñanza aprendizaje de la resolución de problemas matemáticos

Se identificaron y analizaron las creencias acerca de la naturaleza de la matemática, creencias que detecta en los alumnos acerca de su enseñanza y propuestas para mejorar su enseñanza de un grupo de profesores de nivel bachillerato de México. Asimismo, se obtuvo información para conocer sus creencias acerca de la enseñanza de las matemáticas mediante la resolución de problemas matemáticos. Se emplearon instrumentos para obtener información cualitativa, una entrevista semiestructurada, y cuantitativa, un cuestionario

DNA-binding determinants promoting NHEJ by human Polm

Non-homologous end-joining (NHEJ), the preferred pathway to repair double-strand breaks (DSBs) in higher eukaryotes, relies on a collection of molecular tools to process the broken ends, including specific DNA polymerases. Among them, Polο is unique as it can catalyze DNA synthesis upon connection of two non-complementary ends. Here, we demonstrate that this capacity is intrinsic to Polο, not conferred by other NHEJ factors. To understand the molecular determinants of its specific function in NHEJ, the interaction of human Polο with DNA has been directly visualized by electromobility shift assay and footprinting assays. Stable interaction with a DNA gap requires the presence of a recessive 5′-P, thus orienting the catalytic domain for primer and nucleotide binding. Accordingly, recognition of the 5′-P is crucial to align the two DNA substrates of the NHEJ reaction. Site-directed mutagenesis demonstrates the relevance of three specific residues (Lys 249, Arg253 and Arg416) in stabilizing the primer strand during end synapsis, allowing a range of microhomology-induced distortions beneficial for NHEJ. Moreover, our results suggest that the Polο BRCT domain, thought to be exclusively involved in interaction with NHEJ core factors, has a direct role in binding the DNA region neighbor to the 5′-P, thus boosting Polο-mediated NHEJ reactions. © 2012 The Author(s).Ministerio de Ciencia y Tecnología; Fundación Ramón Areces;Comunidad Autónoma de MadridPeer Reviewe

Metodologías bioanalíticas para el diagnóstico in vitro de alergia a antibióticos ß-lactámicos

[ES] Los fármacos pertenecientes a la familia de los ß-lactámicos son los antibióticos más usados en todo el mundo. Estudios recientes revelan que hasta un 10% de la población refiere haber presentado síntomas alérgico, esta porción de la población se considera "alérgica". En el diagnóstico de la alergia a antibióticos ß-lactámicos existen varios tipos de pruebas que sirven para orientar y confirmar la presencia de una alergia, clasificadas como ensayos in vivo e in vitro. En lo que se refiere a los ensayos in vivo, la detección de los procesos alérgicos más comunes se realiza mediante pruebas de exposición oral controladas, y pruebas intraepidérmicas e intradérmicas. No obstante, estas pruebas tienen sus limitaciones como es el riesgo de inducir reacciones alérgicas sistémicas graves. Por todo ello, su práctica requiere personal entrenado. Este requisito limitan la realización de este tipo de pruebas a centros hospitalarios especializados. La aplicación y desarrollo de técnicas de diagnóstico in vitro tiene como objetivo llegar a un diagnóstico de la alergia sin riesgos para el paciente. Entre las distintas pruebas serológicas y celulares que se pueden emplear, la detección de IgE específica es una de las más extendidas debido a que, dada su sensibilidad y especificidad, y mayor seguridad. Los sistemas de diagnóstico in vitro actuales utilizan una instrumentación analítica cara y de gran tamaño, así como materiales desechables caros, manejados por personal cualificado, por lo que este tipo de pruebas se realizan únicamente por servicios de alergia y/o análisis clínicos de grandes centros sanitarios. En consecuencia, hay una necesidad de desarrollar nuevos métodos de diagnóstico que cumplan los requisitos de sensibilidad, rapidez, sencillez, multiplexado y portabilidad, a un precio reducido para su implantación en todo tipo de laboratorios clínicos de los diferentes niveles de atención sanitaria. Por este motivo, en esta tesis doctoral se plantea como objetivo principal la puesta a punto de un inmunoensayo múltiple, utilizando la tecnología de disco compacto para la detección y cuantificación in vitro de niveles de IgE específica a un amplio espectro de antibióticos ß-lactámicos en muestras de suero humano. Las limitaciones más críticas para la determinación de IgE específica multianalito mediante métodos inmunoquímicos son las relacionados con la sensibilidad y selectividad. Por lo tanto, una parte importante de la tesis se ha centrado en la preparación y caracterización de un panel antígenos ß-lactámicos, selección de inmunoreactivos, formato y estudio de diferentes parámetros claves del inmunoensayo. Otra parte importante de la tesis se ha enfocado en abordar la mejora de la reproducibilidad de los resultados. La estrategia ha consistido en estudiar diferentes sistemas de calibración con el objetivo de estandarizar la cuantificación de los métodos in vitro de diagnóstico de este tipo de alergias. Para ello, se han evaluado las prestaciones de la calibración homóloga, heteróloga y el uso de un patrón interno, comparado sus prestaciones analíticas (relación señal ruido, sensibilidad, reproducibilidad, etc.) con el sistema de referencia. Finalmente, la validación del inmunoensayo se realizó con un conjunto de 101 muestras de suero de pacientes y controles. Los resultados obtenidos han sido comparados con los obtenidos mediante las técnicas de referencia, mostrando una mejor sensibilidad, especificidad, precisión, y linealidad. La capacidad múltiplex de la tecnología de disco compacto permitió llevar a cabo paralelamente estudios de reactividad cruzada frente a diferentes antibióticos ß-lactámicos esclareciendo el patrón de reconocimiento de los pacientes. En esta línea de trabajo, el uso de otras estrategias de conjugación de haptenos ha resultado en la mejora de la sensibilidad clínica del ensayo, identificando nuevos epítopos[CA] Els fàrmacs que pertanyen a la família dels beta-lactams, són els antibiòtics d'us més estès a tot el món. Estudis recents posen de manifest que fins un 10% de la població ha presentat símptomes d'al·lèrgia, essent considerats població al·lèrgica als beta-lactams. En el diagnòstic de l'al·lèrgia front aquest tipus d'antibiòtics, existeixen diferents tipus de proves que serveixen per orientar i confirmar la presència d'una al·lèrgia, classificades com assajos in vivo i in vitro. Pel que fa als assajos in vivo, la detecció dels processos al·lèrgics més comuns es realitza mitjançant proves d'exposició oral controlades, i proves intra-epidèrmiques i intradèrmiques. No obstant això, aquestes proves tenen les seues limitacions com és el risc d'induir reaccions al·lèrgiques sistèmiques greus. Per tot això, la seua pràctica requereix personal entrenat. Aquests requisits limiten la realització d'aquesta mena de proves a centres hospitalaris especialitzats. L'aplicació i desenvolupament de tècniques de diagnòstic in vitro té com a objectiu arribar a un diagnòstic de l'al·lèrgia sense riscos per al pacient. Entre les diferents proves serològiques i cel·lulars que es poden emprar, la detecció d'IgE específica és una de les més esteses donada la seua sensibilitat, especificitat, i major seguretat. Els sistemes de diagnòstic in vitro actuals utilitzen una instrumentació analítica cara i de gran grandària, així com materials d'un sol ús també cars, que requereixen de personal qualificat, per la qual cosa aquest tipus de proves es realitzen únicament per serveis d'al·lèrgia i/o anàlisis clíniques de grans centres sanitaris. En conseqüència, hi ha una necessitat de desenvolupar nous mètodes de diagnòstic que complisquen els requisits de sensibilitat, rapidesa, senzillesa, multiplexatge i portabilitat, a un preu reduït per a la seua implantació en tota mena de laboratoris clínics dels diferents nivells d'atenció sanitària. Per aquest motiu, en aquesta tesi doctoral es planteja com a objectiu principal la posada a punt d'un immunoassaig múltiple, utilitzant la tecnologia de disc compacte per a la detecció i quantificació in vitro de nivells d'IgE específica a un ampli espectre d'antibiòtics ß-lactáms en mostres de sèrum humà. Les limitacions més crítiques per a la determinació d'IgE específica multianàlit mitjançant mètodes inmunoquímics estan directament relacionades amb la sensibilitat i selectivitat. Per tant, una part important de la tesi s'ha centrat en la preparació i caracterització d'un panell antígens ß-lactáms, selecció d'inmunoreactius, del format d'assaig i estudi de diferents paràmetres claus de l'immunoassaig. Una altra part important de la tesi s'ha enfocat a abordar la millora de la reproductibilitat dels resultats. L'estratègia ha consistit a estudiar diferents sistemes de calibratge amb l'objectiu d'estandarditzar la quantificació dels mètodes in vitro de diagnòstic d'aquesta mena d'al·lèrgies. Per a això, s'han avaluat les prestacions del calibratge homòleg, heteròleg i l'ús d'un patró intern, comparant les seues prestacions analítiques (relació senyal soroll, sensibilitat, reproductibilitat, etc.) amb el sistema de referència. Finalment, la validació de l'immunoassaig es va realitzar amb un conjunt de 101 mostres de sèrum de pacients i controls. Els resultats obtinguts han sigut comparats amb els obtinguts mitjançant les tècniques de referència, mostrant una millor sensibilitat, especificitat, precisió, i linealitat. La capacitat múltiplex de la tecnologia de disc compacte va permetre dur a terme paral·lelament estudis de reactivitat creuada enfront de diferents antibiòtics ß-lactáms esclarint el patró de reconeixement dels pacients. En aquesta línia de treball, l'ús d'altres estratègies de conjugació d'haptens ha resultat en la millora de la sensibilitat clínica de l'assaig, identificant nous epítops[EN] ß-lactam antibiotics are one of the most widely used antimicrobials worldwide. However, up to 10% of the population reports having presented allergic symptoms derived from their consumption. Consequently, this portion of the population is considered "allergic". In the diagnosis of allergy to ß-lactam antibiotics there are several types of tests that serve to orient and confirm the presence of an allergy. These diagnostic methods are classified as in vivo and in vitro assays. Regarding in vivo tests, the most standardized tests are the provocation, prick and intradermal test. The aim of these assays is to observe the response produced by the different beta-lactam antibiotics in the patient after oral or cutaneous administration. Despite their wide use, these tests have their limitations, such as the risk of inducing severe systemic allergic reactions. Therefore, their practice requires specialized professionals for their indication, performance and interpretation. This requirement limit the performance of this type of test to specialized hospitals. The use and development of in vitro diagnostic techniques can overcome these disadvantages and allow the diagnosis of allergy without risks. In vitro assays are less invasive and therefore neither pose a risk of adverse reactions. Among the different serological and cellular tests that can be used, the detection of specific IgE is one of the most widespread due to its sensitivity and specificity. Current in vitro diagnostic systems use expensive and bulky analytical instrumentation and high-cost single-use materials, handled by qualified professionals. Therefore, such tests are performed only by allergy and/or clinical analysis services of hospitals or by companies specialized in clinical diagnostics. Consequently, there is a need to develop new diagnostic methods that can be implemented in all types of clinical laboratories at diverse levels of health care, meeting the requirements of sensitivity, speed, simplicity, multiplexing and portability at a reduced price. For this reason, the main objective of this doctoral thesis is the development of a multiplex immunoassay using compact disc technology for the detection and quantification of specific IgE levels to a wide variety of ß-lactam antibiotics in human serum samples. The most crucial limitations for the determination of multianalyte specific IgE by immunochemical methods are those related to sensitivity and selectivity. Hence, an important part of the thesis has been focused on the preparation and characterization of a pool of beta-lactam antigens, selection of immunoreagents, format and optimization of different critical parameters of the immunoassay. Another important aspect of the thesis has been focused on improving the reproducibility of the results. The strategy consisted of studying different calibration systems with the aim of standardizing the quantification of in vitro diagnostic tests for this type of allergy. To achieve that goal, the performance of homologous and heterologous calibration and the use of an internal standard have been evaluated, comparing their analytical performance (signal-to-noise ratio, sensitivity, reproducibility, etc.) with the reference system. Finally, the validation of the immunoassay was performed with a total of 101 serum samples from patients and controls. The results obtained have been compared with those obtained using the reference techniques, showing improved sensitivity, specificity, precision, and linearity. The multiplex capability of the compact disc technology allowed carrying out parallel cross-reactivity studies against different beta-lactam antibiotics both from the penicillin family and from other families, elucidating the recognition profile. Following this working line, the use of other hapten conjugation strategies improved clinical sensitivity of the assay by identifying new epitopes.Juárez Rodriguez, MJ. (2022). Metodologías bioanalíticas para el diagnóstico in vitro de alergia a antibióticos ß-lactámicos [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/184011TESISPremios Extraordinarios de tesis doctorale

Los nuevos conflictos bélicos del siglo XXI: las amenazas híbridas

El propósito de este trabajo es analizar la guerra asimétrica, compararla con la guerra convencional, y mostrar las medidas en que los países afectados pueden beneficiarse de los resultados de la investigación y elaborar al final un plan para hacer frente a cualquier agresión. En esta investigación, se abordarán los diferentes tipos de guerra y métodos de lucha, y la definición de cada tipo o método de ellos, según diferentes escuelas de guerra. Seguidamente se presentará el desarrollo de estos métodos de combate hasta el día de hoy, centrándose en los conceptos y principios de la lucha en ambas guerras convencional y asimétrica, con una explicación exhaustiva de la guerra asimétrica y su evolución de generación en generación. Se abordarán entonces las formas de enfrentar a las tácticas y métodos de combate formas que algunos Estados utilizaron para enfrentar a tales métodos, y las acciones que han tomado para superar este dilema. Las Tecnologías de la Información y las Comuniaciones (TIC´s) han provocado el nacimiento de la llamada Sociedad de la Información y del Conocimiento. Actualmente, el ciberespacio se entiende como lugar de encuentro para millones de personas en el que todo está interconectado, lo que está provocando que la red no pare de aumentar, y que su repercusión para la sociedad tenga efectos extraordinarios, diciéndose que su aparición ha supuesto un antes y un después en la era de la información y la comunicación. La revolución de las TIC´s, como concepto amplio, abierto y dinámico que recoge todos los elementos y sistemas empleados hoy en día para el tratamiento de la información, su intercambio y comunicación en la sociedad actual, aún no ha finalizado ni lo hará en mucho tiempo, lo que supone que la cibercriminalidad o delincuencia asociada al ciberespacio continuará expandiéndose y evolucionando en las décadas venideras. En los últimos años se ha debatido mucho sobre la naturaleza y características de las amenazas híbridas, concepto ambiguo, innovador, dinámico y flexible que incluye casos tan diversos como los actos violentos perpetrados por civiles militarizados filo- rusos en el Este de Ucrania, o ciber-ataques contra estructuras críticas públicas en los Países Bálticos, o las masivas campañas de fakenews y manipulación de las redes sociales durante el referéndum por el Brexit en el Reino Unido y las recientes elecciones presidenciales en Estados Unidos y Francia. El objetivo de esta tesis es analizar las diferentes aproximaciones que sobre dicho concepto se han generado, con el objetivo de hacer un primer estudio de los diversos modos de pensar estas nuevas dinámicas conflictuales que moldearán el mundo del futuro. Se intentará aportar aquí claridad conceptual sobre el tema, para afrontar los distintos desarrollos institucionales y de estrategia analítica operativa que se han ido generando a partir de la concienciación por parte de la comunidad internacional de la imperiosa necesidad de regular tan complejo fenómeno.Derech

Revisión del constructo actitud en Educación Matemática: 1959-1979

La actitud es uno de los aspectos psicológicos que ha alcanzado mayor difusión en Educación Matemática (EM); sin embargo, una de las críticas más fuertes que se han hecho a las investigaciones realizadas sobre el tema en ésta área, es la falta de consenso en la definición del constructo actitud por parte de los investigadores. Por esta razón, nos hemos propuesto realizar un análisis histórico del desarrollo del constructo actitud en EM, con la finalidad de generar una serie de reflexiones respecto de su definición que ayude en la realización de futuras investigaciones al momento de definirlo. Debido a que nuestra investigación está comenzando, en este escrito presentamos el análisis hecho en los primeros 20 años de investigación

Recovery and characterization of a Citrus clementina Hort. ex Tan. 'Clemenules' haploid plant selected to establish the reference whole Citrus genome sequence

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>In recent years, the development of structural genomics has generated a growing interest in obtaining haploid plants. The use of homozygous lines presents a significant advantage for the accomplishment of sequencing projects. Commercial citrus species are characterized by high heterozygosity, making it difficult to assemble large genome sequences. Thus, the International Citrus Genomic Consortium (ICGC) decided to establish a reference whole citrus genome sequence from a homozygous plant. Due to the existence of important molecular resources and previous success in obtaining haploid clementine plants, haploid clementine was selected as the target for the implementation of the reference whole genome citrus sequence.</p> <p>Results</p> <p>To obtain haploid clementine lines we used the technique of <it>in situ </it>gynogenesis induced by irradiated pollen. Flow cytometry, chromosome counts and SSR marker (Simple Sequence Repeats) analysis facilitated the identification of six different haploid lines (2<it>n </it>= <it>x </it>= 9), one aneuploid line (2<it>n </it>= 2<it>x</it>+4 = 22) and one doubled haploid plant (2<it>n </it>= 2<it>x </it>= 18) of 'Clemenules' clementine. One of the haploids, obtained directly from an original haploid embryo, grew vigorously and produced flowers after four years. This is the first haploid plant of clementine that has bloomed and we have, for the first time, characterized the histology of haploid and diploid flowers of clementine. Additionally a double haploid plant was obtained spontaneously from this haploid line.</p> <p>Conclusion</p> <p>The first haploid plant of 'Clemenules' clementine produced directly by germination of a haploid embryo, which grew vigorously and produced flowers, has been obtained in this work. This haploid line has been selected and it is being used by the ICGC to establish the reference sequence of the nuclear genome of citrus.</p

DNA expansions generated by human Polμ on iterative sequences

Polm is the only DNA polymerase equipped with template-directed and terminal transferase activities. Polm is also able to accept distortions in both primer and template strands, resulting in misinsertions and extension of realigned mismatched primer terminus. In this study, we propose a model for human Polm-mediated dinucleotide expansion as a function of the sequence context. In this model, Polm requires an initial dislocation, that must be subsequently stabilized, to generate large sequence expansions at different 50-P-containing DNA substrates, including those that mimic non-homologous endjoining (NHEJ) intermediates. Our mechanistic studies point at human Polm residues His329 and Arg387 as responsible for regulating nucleotide expansions occurring during DNA repair transactions, either promoting or blocking, respectively, iterative polymerization. This is reminiscent of the role of both residues in the mechanism of terminal transferase activity. The iterative synthesis performed by Polm at various contexts may lead to frameshift mutations producing DNA damage and instability, which may end in different human disorders, including cancer or congenital abnormalitiesMinisterio de Ciencia y Tecnologia [BFU2009-10085 and CONSOLIDER CSD2007-00015]; Fundacion Ramon Areces (to Centro de Biologia Molecular ‘‘Severo Ochoa’’); Ministerio de Educacion y Ciencia (to A.A.); Comunidad Autonoma de Madrid (to M.J.M.). Funding for open access charge: Comunidad de Madrid grant [S2011/BMD-2361

Flow Cytometric Investigation of Salinicola halophilus S28 Physiological Response Provides Solid Evidence for Its Uncommon and High Ability to Face Salt-Stress Conditions

In a previous work, some bacterial strains isolated from the Saline di Tarquinia marine salterns (Viterbo, Italy) showed very unusual growth profiles in relation to temperature and salinity variations when grown in solid media. In particular, Salinicola halophilus S28 showed optimal or suboptimal growth in a very wide range of NaCl concentrations, suggesting a great coping ability with salinity variations. These intriguing outcomes did not fit with the general Salinicola halophilus description as a moderately halophilic species. Therefore, this study profiles the actual physiological status of S28 cells subjected to different NaCl concentrations to provide evidence for the actual coping ability of strain S28 with broad salinity variations. Flow cytometry was selected as the evaluation method to study the physiological status of bacterial cells subjected to different salinity levels, monitoring the strain response at different growth phases over 72 h. Strain S28 showed maximal growth at 8% NaCl; however, it grew very well with no statistically significant differences at all salinity conditions (4–24% NaCl). Flow cytometric results provided clear evidence of its actual and strong ability to face increasing salinity, revealing a good physiological response up to 24% of NaCl. In addition, strain S28 showed very similar cell physiological status at all salinity levels, as also indicated by the flat growth profile revealed in the range of 4–24% NaCl. This is the first study regarding the physiological response during the growth of halophilic bacteria under different conditions of salinity via flow cytometry. This technique represents an effective tool for the investigation of the physiological status of each cell, even if it is somehow underrated and underused by microbiologists for this purpose

Análisis, simulación y medición de las oscilaciones en la alimentación de un circuito integrado

A medida que la tecnología de los circuitos integrados avanza y los tiempos de conmutación se hacen más rápidos, aparecen fuentes de ruido y distorsión de la señal digital que ocurren dentro de los dispositivos y que generalmente se desconocen fuera del ámbito de los fabricantes de semiconductores. Si bien ocurre dentro del encapsulado, un fenómeno similar ocurre sobre el circuito impreso. Por eso resulta de gran importancia comprender dicho problema para poder minimizarlo.Facultad de Ingenierí