Avaliação da eficácia da vacina contra malária placentária em modelo experimental

Tese de mestrado em Biologia Evolutiva e do Desenvolvimento, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2015A malária é uma doença potencialmente fatal provocada por parasitas do género Plasmodium. Os eritrócitos infetados por Plasmodium exibem antigénios na superfície membranar que se ligam a receptores do endotélio vascular, permitindo a adesão destes eritrócitos infectados a órgãos específicos. Durante a gravidez, as mulheres revelam uma maior suscetibilidade à infecção pelo parasita da malária. Esta suscetibilidade acrescida resulta em consequências negativas tanto para a progenitora como para o(s) neonato(s). Os eritrócitos de mulheres grávidas infectados por Plasmodium falciparum (o mais agressivo dos parasitas do género Plasmodium que infectam humanos) apresentam antigénios na sua superfície que permitem a ligação à placenta, através de recetores aí existentes, como o sulfato de condroitina A (CSA). O CSA interage com VAR2CSA (antigénio presente na superfície de eritrócitos infectados em mulheres grávidas expostas a Plasmodium falciparum). A aquisição natural de anticorpos contra VAR2CSA está associada à ausência de sintomas de malária placentária. Os níveis de anticorpos contra VAR2CSA aumentam ao longo da gravidez e ao longo de sucessivas gravidezes, sendo que mulheres que estiveram grávidas pelo menos uma vez (multigrávidas) são menos vulneráveis à malária placentária do que as que estão grávidas pela primeira vez (primigrávidas). Desta forma, VAR2CSA é um potencial candidato para vacinação contra malária placentária. O principal objetivo deste trabalho foi testar a eficácia da imunização com a sequência extracelular completa de VAR2CSA (recDBL1X-6ε) em fêmeas grávidas de murganho BALB/c infectadas com Plasmodium berghei transgénico, que expressa VAR2CSA. Para isso, as fêmeas foram acompanhadas durante a gravidez e no pós parto e foram analisados os títulos de anticorpos IgG anti-DBL1-6 no seu soro. Os principais resultados deste trabalho mostram que 23% das fêmeas vacinadas com a proteína recDBL1X-6ε foram parcialmente protegidas contra malária placentária, e sugerem que a manutenção de títulos altos de anticorpos IgG1 anti-DBL1X-6ε entre os dias da infeção e do parto possa ser responsável por essa proteção parcial. Também foi observada predominância de IgG1 comparativamente com as subclasses IgG2a e IgG2b, especialmente no pós-parto em mães parcialmente protegidas, o que sugere que pode ser vantajoso apresentar níveis de IgG1 mais altos do que de IgG2a e IgG2b.Malaria is a potentially deadly disease triggered by parasites from the genus Plasmodium. Plasmodium infected erythrocytes exhibit membrane surface antigens which link to vascular endothelium receptors, allowing the adhesion of these infected erythrocytes to specific organs. During pregnancy, women show higher susceptibility to malaria parasite infection, which has negative outcomes for both mother and newborn(s). Pregnant women’s erythrocytes infected by Plasmodium falciparum (the most aggressive among parasites from genus Plasmodium infecting humans) exhibit surface antigens which allow the binding to the placenta through receptors, as chondroitin sulfate A (CSA). CSA interacts with VAR2CSA (an antigen existing on the surface of infected erythrocytes in pregnant women exposed to Plasmodium falciparum). Natural acquisition of antibodies against VAR2CSA is associated to the absence of placental malaria symptoms. Antibody levels against VAR2CSA increase throughout pregnancy and during subsequent pregnancies, and women who were pregnant at least once (multigravid) are less susceptible to placental malaria than the ones who are pregnant for the first time (primigravid). Therefore, VAR2CSA is a potential candidate for vaccination against placental malaria. The main goal of this work was to test the immunization efficacy with full-length extracellular VAR2CSA (recDBL1X-6ε) on BALB/c female pregnant mice infected with transgenic Plasmodium berghei, expressing VAR2CSA. For that purpose, female mice were followed up during pregnancy and in post-delivery, and IgG anti-DBL1-6 antibody titers were analyzed in their sera. The main results of this work show that 23% of female mice vaccinated with recDBL1X-6ε protein were partially protected against placental malaria, and suggest that the maintenance of high IgG1 anti-DBL1X-6ε antibody titers between infection and delivery days can be responsible for that partial protection. It was also observed predominance of IgG1 comparatively to IgG2a and IgG2b subclasses, especially in post-delivery of partially protected mothers, what suggests that can be an advantage having higher levels of IgG1 than IgG2a and IgG2b

Women’s Experiences: Memories of Portuguese Revolution

In this article I attempt to analyze the social memories of wives of soldiers in service on April 25th 1974, through the methodology of analysis recommended by Adele Clarke (2005), using data collected in 11 interviews conducted between 2005 and 2008 under a PhD project. As a conceptual framework I adopt the perspective of social memory in the tradition of Halbwachs (1992) and following Marc Augé (2001) and Paul Ricoeur (2004), which emphasizes the social and collective memory and points out the dynamic role it plays in building a meaning to the world. This analysis takes into account the dimensions of work, family, education, politics and social life, social and economic conditions and the expectations and dreams on which the interviewees draw comparisons between 1974 and the present and also produce judgments

O risco da similaridade das embalagens na dispensa de medicação em Farmácia Comunitária

Os erros de medicação e as suas consequências constituem um grave problema de saúde pública. Segundo o National Coordinating Council for Medication Error Reporting and Prevention, um erro de medicação define-se como ‘qualquer acontecimento prevenível que pode causar dano ao utilizador ou que dê lugar a uma utilização inapropriada dos medicamentos quando estes estão sob a responsabilidade dos profissionais de saúde, do doente ou do consumidor’ podendo […] ‘estar relacionados com a prática profissional, com procedimentos ou com sistemas, incluindo falhas de prescrição, comunicação, rotulagem, embalagem, denominação, preparação, dispensa, distribuição, administração, educação, monitorização e utilização’. Na dispensa de medicamentos os erros de medicação podem dividir-se em dois grupos: sound-alike, relacionados com a semelhança entre sons, e look-alike, relacionados com a semelhança entre embalagens. Considerando o crescimento do mercado dos genéricos, assim como a grande variedade de apresentações comerciais disponibilizadas pelos mesmos laboratórios, este trabalho pretende abordar factores que potenciam os erros na dispensa de medicação em Farmácia Comunitária englobados no grupo look-alike, procurando sensibilizar para esta problemática

The user participation on facebook pages of the three Portuguese tv news channels – RTP3, SIC NOTÍCIAS, AND TVI24

In recent decades, the national and international media contexts, in particular television, media significantly changed. Although they were not created for the purpose, the role that social networks, in particular Facebook, have taken as a content diffusion platform is unquestionable. Nowadays, traditional media (radio, newspaper, television) use the Web’s potential to distribute news content (Canelas, 2011). Currently, all TV news channels in Portugal have a website or a page on social networks. TV stations have increased communication channels with the public on digital platforms and study strategies that promote the participation and interaction with the news content (Cazajeira, 2015). The TV / Internet convergence will not only reach the content, but also the consumer, who becomes an interactive and participative audience. This reality imposes on journalism a continuous and updated news production system, dependent on a user being permanently connected to the Internet (Cazajeira, 2015). In fact, an ERC report (2015) confirms the relevance that social media has assumed in the publication and consumption of news. Social networks are recognised as one of the most important means for news media consultation, right after television, and the practice of sharing news is very common among consumers of online news in Portugal. Furthermore, when compared to other countries analysed by Reuters Institute (Newman, Levy, & Nielsen, 2015), Portuguese consumers are those who make the most comments to online news, preferring social networks to news sites. Considering the importance of new online platforms for journalism, this study aims to present a quantitative analysis of user participation on the Facebook pages of the three Portuguese TV news channels, specifically RTP3, SIC Notícias and TVI24, between 8 and 14 February 2016. To track this participation, the following parameters were used: the "like" button as a way to study the demonstration of publication interest; "sharing" of a particular element, be it a photo, a video or a text, on their own Timeline, the Timeline of a friend or by private message. This monitoring is important to understand the dissemination of news content; and the comments area. The number of comments will help understand the dynamics and the discussion that the publication has on the public. The results of 1063 posts indicate that of the analysed parameters - "Like", "Comment", and "Share" – the one with the greatest power of participation among the users of the pages of the three Portuguese TV news channels is the "Like" system, followed by "Share" and then "Comment". Analysing the thematic that create the most user participation with "Likes" and “Comments” parameters are "Science and Technology". “Education” and “Humorous/Satirical/Unusual Finally, the publications available end of the night (10pm-1am) has better participation rates.The Instituto Politécnico de Viseu, the Center for Studies in Education, Technologies and Health (CI&DETS) and the Portuguese Foundation for Science and Technology (FCT).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Administração de anti-infecciosos orais por sonda de nutrição entérica

Com o crescente recurso à nutrição entérica surgem novos desafios, designadamente pela utilização crescente do mesmo dispositivo de acesso na administração da terapêutica farmacológica (Magnuson, Clifford, Hoskins & Bernard, 2005). Desta situação resulta uma necessidade por parte dos profissionais de saúde de conhecer o potencial de complicações e limitações associadas e este método (Williams, 2008), agravada por estudos que têm vindo a revelar técnicas inapropriadas na administração de formulações orais por sonda de nutrição (Belknap, Seiferd & Petermann, 1997) (Hanssens, Woods, Alsulaiti, Adheir, Al-Meer & Obaidan, 2006) (Seifert & Jonhston, 2005). Entre essas complicações encontramos as interacções fármaco-nutriente, que podem conduzir ao compromisso do estado nutricional do doente ou dos objectivos terapêuticos (August, et al., 2002), podendo resultar em obstrução da sonda, alteração da libertação ou biodisponibilidade do fármaco ou nutriente ou alteração da função gastrointestinal (Robin, Boulatta, Brantley, Corkins, Guenter, & et al, 2009). Considerando os riscos associados ao inadequado cumprimento da terapêutica com anti-infecciosos, o presente trabalho pretende conhecer a viabilidade de administração por sonda dos anti-infecciosos disponíveis para prescrição no Centro Hospitalar de São João, EPE (CHSJ,EPE)

The presence of three Portuguese TV news channels (RTP3, SIC NOTÍCIAS, and TVI24) on facebook

The growing popularity of social networks, and their impact on the daily lives of consumers, contributed to news organizations marking their presence on different online platforms. In the case of Facebook, a social network that began as a personal space, it has gradually transformed into a content-sharing space (Oeldorf-Hirsch & Sundar, 2015). Nowadays, Facebook is the second most viewed website in Portugal (Alexa, 2016), and therefore, it has become crucial for Portuguese news agencies to be present on this social network. Although television continues to be the main information source in Portugal, social networks, and specifically Facebook, are increasingly important in news consumption by users (ERC, 2015). This new way of news dissemination, as well as the proliferation that these contents reach in social networks, led to news agencies exploiting these new channels, both to attract new audiences, and to redirect users to their own websites (Castillo, El-Haddad, Pfeffer, & Stempeck, 2014). Thus, it is important to understand how, and what kind of content these agencies put on their Facebook channels, as well as the strategies they use to share these same contents. This study aims to understand how the main news channels of Portuguese TV (RTP3, SIC Notícias, and TVI24) manage and use the social network Facebook to share news contents. To this end, the authors collected quantitative data of all posts placed on Facebook between February 8 and February 14 2016. Approximately 1063 posts were collected and analysed from the three Facebook pages. The results indicate that two of the three channels extensively used their Facebook pages to share and target content to their official websites. Regarding the news sources and type of media used, the three Portuguese TV news channels use similar strategies. However, in what concerns the main themes and quantity of messages per day, as well as the level of redundancy of information, the three channels manage their pages differently.The Instituto Politécnico de Viseu, the Center for Studies in Education, Technologies and Health (CI&DETS) and the Portuguese Foundation for Science and Technology (FCT).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Estabilização e valorização de subprodutos de brócolo como ingredientes, fonte de compostos bioativos e biomateriais

Losses in the frozen-food industry of broccoli can account for more than 45% of the raw material, resulting in a large amount of by-products with low economic value and of considerable environmental impact. The main byproducts are stalks, inflorescence remains and leaves, sharing broccoli nutritional value and bioactive compounds such as glucosinolates, phenolics, pigments, and polysaccharides (as dietary fibre). However, their high amount of water (around 90%) and consequent perishability limit by-products valorisation. In this regard, broccoli by-products, if adequately stabilized to preserve the characteristics of the bioactive compounds, can be a source of food ingredients and biomaterials to be used in biobased packaging. To stabilize broccoli by-products, microwave hydrodiffusion and gravity (MHG) was used to dehydrate and simultaneously recover the water-soluble diffused compounds for incorporation as food ingredients. The hydrodiffusion allowed to obtain a dried material with 12% moisture in 43 min when 550 g of broccoli by-products were used, preserving polysaccharides and proteins. Diffused water contained up to 317 µg/mL gallic acid equivalents of phenolic compounds, 11 mg/mL free sugars, 9 mg/mL amino acids, and 356 µg/mL glucosinolates, depending on the type of by-product used. The simultaneous stabilization by dehydration and extraction of bioactive compounds showed the potential of MHG technology for valorisation of broccoli by-products. Blanching pre-treatment has been reported to improve the drying rate of broccoli, promoting simultaneous enzyme inactivation. Therefore, the impact of pre-dehydration blanching step, freeze-drying, air-drying, and MHG dehydration on the levels of pigments, glucosinolates, and phenolics, was studied by UHPLCDAD-ESI/MSn . When compared to freeze-drying, a technique known to preserve compounds, a pre-blanching step increased the extractability of both pigments and phenolics, while air-drying only retained 49% of the pigments and 70% of phenolics, both without affecting glucosinolates. However, when air-drying was preceded by blanching, less than 50% of compounds were retained. On the other hand, MHG dehydration increased the phenolics extractability by 26%, particularly that of kaempferol derivatives while also retaining the amount of the glucosinolate glucoraphanin, when compared to freeze-drying. Nevertheless, only 23% of indole glucosinolates were recovered and pigments were severely reduced, with lutein accounting only for 32% and only chlorophyll b was observed in trace amounts after MHG dehydration. Therefore, to valorise broccoli byproducts as ingredients, different drying technologies may be used when targeting different composition richness: freeze-drying is suitable for pigments and glucosinolates, air-drying is suitable for glucosinolates, while MHG promotes the extractability of phenolic compounds. As there is scarce information about broccoli polysaccharide bioactivities, pectic polysaccharides were extracted, fractionated, and characterized and their immunostimulatory activity was evaluated by in vitro incubation with BALB/c splenocytes and flow cytometry. Polysaccharides were further fractionated by size and charge, enzymatically treated, and chemically sulfated to establish structure-function relationships of pectic polysaccharides with B lymphocytes activation. Pectic polysaccharides obtained after preparation of alcohol insoluble residue (AIR, stabilized by solvent drying), hot water extraction, and 80% ethanol precipitation (Et80) stimulated B lymphocytes. In contrast, pectic polysaccharides extracted with imidazole, Na2CO3, and KOH solutions did not stimulate B lymphocytes. Et80 fraction had methyl- and acetyl-esterified pectic polysaccharides, 4-linked galactans, arabinans, and type II arabinogalactans with 4-O-Me-GlcA residues, as well as α-glucans. Fractionation of Et80 polysaccharides by molecular weight (from 12 to 400 kDa) showed that all fractions had immunostimulatory activity. Removal of terminal Ara or small chains of Ara also did not change immunostimulatory activity. However, the methyl deesterification of pectic polysaccharides and removal of galacturonan regions reduced polysaccharides immunostimulatory activity. Fractionation of these polysaccharides allowed to obtain an acidic fraction with immunostimulatory activity, indicating that neutral polysaccharides were masking the immunostimulatory activity of the acidic ones. Chemical sulfation also reduced activity, probably hiding structural features important for B cells activation. These results show that broccoli by-products can be valorised as a source of pectic polysaccharides to serve as functional food ingredients to improve immune function and promote health. Taking the opportunity to contribute to reduce the environmental issues of petroleum-based plastics by developing starch-based renewable and biodegradable materials, broccoli by-products were used to evaluate their impact on mechanical properties and surface hydrophilicity of the films. Addition of byproducts before starch gelatinization and filtration steps allowed to obtain films with higher strength, stiffness, and elasticity than starch control film. Moreover, less hydrophilic surfaces were obtained with addition of broccoli by-products. Antioxidant activity, water content, and water solubility were maintained with addition of broccoli by-products. Water extractable compounds were the main contributors to the observed mechanical properties changes. Even higher elasticity was obtained when genipin was added. After one-year storage, films tended to be more strength, less flexible, stiffer, and with increased hydrophobicity of surfaces, indicating that broccoli by-products addition promoted starch matrix rearrangements along storage. These promising results of incorporation of broccoli by-products in starch films show the valorisation potential of broccoli by-products by application as bioplastics on the packaging field. In conclusion, broccoli by-products can be stabilized after simultaneous dehydration and extraction of bioactive compounds that can be valorised as food ingredients and as additives in the packaging field, contributing to a circular economy and reduction of industrial wastes.Na indústria de congelação de brócolo, as perdas podem ultrapassar mais de 45% da matéria-prima, resultando numa grande quantidade de subprodutos com baixo valor económico e impacto ambiental considerável. Os principais subprodutos são caules, folhas e restos de inflorescências, partilhando o valor nutricional e os compostos bioativos dos brócolos, como glucosinolatos, fenólicos, pigmentos e polissacarídeos (como fibra alimentar). No entanto, a elevada quantidade de água (cerca de 90%) e consequente perecibilidade limitam a valorização destes subprodutos. Neste sentido, os subprodutos de brócolo, quando adequadamente estabilizados para preservar os compostos bioativos, podem ser uma fonte de ingredientes alimentares e biomateriais para serem utilizados em embalagens de base biológica. Para estabilizar os subprodutos de brócolo, a tecnologia de microondas por hidrodifusão e gravidade (MHG) foi usada para desidratar e recuperar simultaneamente os compostos solúveis em água para incorporação como ingredientes alimentares. A hidrodifusão permitiu obter um material seco com 12% de humidade em 43 min, quando foram utilizados 550 g de subprodutos de brócolo, preservando os polissacarídeos e a proteína. A água recuperada por hidrodifusão continha até 317 µg/mL de compostos fenólicos como equivalentes de ácido gálico, 11 mg/mL de açúcares livres, 9 mg/mL de aminoácidos e 356 µg/mL de glucosinolatos, dependendo do tipo de subproduto utilizado. A estabilização por desidratação e simultânea extração de compostos bioativos mostrou o potencial da tecnologia MHG para valorização de subprodutos de brócolo. O branqueamento como pré-tratamento tem sido usado para melhorar a taxa de secagem dos brócolos, promovendo simultaneamente a inativação das enzimas. Atendendo a esta informação, o impacto do branqueamento antes da desidratação por liofilização, por convecção de ar e assistida por MHG nos níveis de pigmentos, glucosinolatos e fenólicos foi estudada por UHPLC-DADESI/MSn . Quando comparada à liofilização, uma técnica conhecida por preservar compostos, o branqueamento aumentou a capacidade de extração de pigmentos e fenólicos, enquanto a secagem por convecção de ar reteve apenas 49% dos pigmentos e 70% de fenólicos, ambos os tratamentos sem afetar os glucosinolatos. No entanto, quando a secagem por convecção de ar foi precedida de branqueamento, menos de 50% dos compostos foram retidos. Por outro lado, a desidratação por MHG aumentou a capacidade de extração de fenólicos em 26%, particularmente a dos derivados de kaempferol, além de reter a quantidade do glucosinolato glucorafanina, quando comparada à liofilização. No entanto, apenas 23% dos glucosinolatos com um grupo indole foram recuperados e os pigmentos foram severamente reduzidos, com a luteína representando apenas 32% e apenas a clorofila b foi observada em pequenas quantidades após a desidratação por MHG. Portanto, para valorizar os subprodutos de brócolo, diferentes tecnologias de secagem podem ser usadas para se obter ingredientes com composição variada: a liofilização é adequada para pigmentos e glucosinolatos, a secagem por convecção de ar é adequada para glucosinolatos, enquanto a tecnologia de MHG promove a extração de compostos fenólicos. Como existem poucas informações sobre a bioatividade dos polissacarídeos de brócolo, os polissacarídeos pécticos foram extraídos, fracionados e caracterizados, e a sua atividade imunoestimuladora foi avaliada por incubação in vitro com BALB/c splenócitos e citometria de fluxo. Os polissacarídeos foram posteriormente fracionados por tamanho e carga, tratados enzimaticamente e sulfatados quimicamente para estabelecer relações estrutura-função dos polissacarídeos pécticos com ativação dos linfócitos B. Polissacarídeos pécticos obtidos após a preparação de resíduo insolúvel em álcool (AIR, estabilizado por secagem com solvente), extração com água quente e precipitação com etanol a 80% (Et80) estimularam os linfócitos B. Por outro lado, os polissacarídeos pécticos extraídos com soluções de imidazol, Na2CO3 e KOH não estimularam os linfócitos B. A fração Et80 possuía polissacarídeos pécticos esterificados com grupos metilo e acetilo, galactanas em ligação 1-4, arabinanas e arabinogalactanas tipo II com resíduos de 4-O-Me-GlcA. O fracionamento dos polissacarídeos Et80 por peso molecular (de 12 a 400 kDa) mostrou que todas as frações apresentavam atividade imunoestimuladora. A remoção da Ara terminal ou pequenas cadeias de Ara também não alterou a atividade imunoestimuladora. No entanto, a desesterificação dos grupos metilo e remoção das regiões de homogalacturonanas dos polissacarídeos pécticos reduziram a atividade imunoestimuladora. O fracionamento desses polissacarídeos permitiu obter uma fração acídica com atividade imunoestimuladora, indicando que a atividade destes polissacarídeos acídicos era ocultada pela presença de polissacarídeos neutros. A sulfatação química também reduziu a atividade, provavelmente por obstruir as características estruturais importantes para a ativação das células B. Estes resultados mostram que os subprodutos de brócolo podem ser valorizados como fonte de polissacarídeos pécticos para ingredientes funcionais que melhorem a função imunológica e promovam a saúde. Com a preocupação de reduzir as questões ambientais dos plásticos à base de petróleo, desenvolveram-se materiais renováveis e biodegradáveis à base de amido com inclusão de subprodutos de brócolo e foi avaliado o impacto da sua adição nas propriedades mecânicas e na hidrofilicidade da superfície dos filmes. A adição de subprodutos antes das etapas de gelatinização e filtração do amido permitiu obter filmes com maior resistência, rigidez e elasticidade do que o filme de amido controlo. Além disso, superfícies menos hidrofílicas foram obtidas com a adição de subprodutos de brócolo. A atividade antioxidante, o teor de água e a solubilidade em água foram mantidos com a adição destes subprodutos. Os compostos extractáveis com água foram os principais contribuintes para as alterações observadas nas propriedades mecânicas. Uma elasticidade ainda maior foi obtida quando a genipina, um reticulante natural, foi adicionada. Após um ano de armazenamento, os filmes tenderam a ser mais resistentes, menos flexíveis, mais rígidos e com superfícies mais hidrofóbicas, indicando que a adição de subprodutos de brócolo promoveu rearranjos da matriz de amido ao longo do armazenamento. Estes resultados promissores da incorporação de subprodutos de brócolo nos filmes de amido mostram o potencial de valorização dos subprodutos de brócolo para aplicação em bioplásticos para embalagens. Em conclusão, os subprodutos de brócolo podem ser estabilizados após desidratação e extração simultâneas de compostos bioativos que podem ser valorizados como ingredientes alimentares e como aditivos na área de embalagens, contribuindo para a redução de resíduos industriais e uma economia circular.Programa Doutoral em Ciência e Tecnologia Alimentar e Nutriçã