Optimising the production of a silk-elastin-like protein in E. coli: overcoming acetate accumulation and plasmid instability

Silk-elastin-like proteins (SELPs) combining the physicochemical and biological properties of silk and elastin have a high potential for use in the pharmaceutical, regenerative medicine and materials fields. Their development for use is however restrained by their production levels. Here we describe the production optimisation for a novel recently described SELP in the pETE. coli BL21(DE3) expression system. Both batch production in shake flasks and fed-batch production approaches were investigated and optimised. In both cases a comprehensive empirical approach examining all process variables (media, medium composition, inducer, induction time and period, temperature, pH, aeration, agitation, pre- and post-induction growth rates) and a detailed characterisation of the bioprocesses were used in an attempt to maximise production and identify the factors limiting higher production levels. The major factors limiting SELP yields have been identified as acetate accumulation, plasmid instability on induction and a heightened host cell metabolic burden during SELP production. To circumvent these limitations we have optimised the fed-batch production approach and engineered the production plasmid for an improved stability. Using the optimised conditions, approximately 0.5 g/l of purified SELP was obtained in shake flasks and as much as 4.3 g/L was obtained when using the fed-batch approach. These are the highest reported SELP productivities to date and represent, respectively, approximately 10- and 150-fold increases on that previously reported.Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT)This work was financed by the European Commission, via the 7th Framework Programme Project EcoPlast (FP7-NMP-2009-SME-3, collaborative project number 246176), by FEDER through POFC – COMPETE and by national funds from Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT) through PEst project C/BIA/UI4050/2011C/BIA/UI4050/2011

Optimising a cell factory system for the bioproduction of silk-elastin-like polymers.

Silk-elastin-like proteins (SELPs) combining the physicochemical and biological properties of silk and elastin have a high potential for use in the pharmaceutical, regenerative medicine and materials fields. Their development for use is however restrained by their production levels. Here we describe the production optimisation for a novel recently described SELP in the pETE. coli BL21(DE3) expression system. Both batch production in shake flasks and fed-batch production in fermenters were investigated and optimised. A comprehensive empirical approach optimising all process variables for both processes, in addition to molecular biology approaches for improving performance of the production plasmid were used to maximise production levels. Typical volumetric productivities reported for SELPs are approximately 30 mg/L but here we have increased production levels up to approximately 4 g/L, representing the highest reported SELP productivity to date.Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT)European CommissionThis work was financed by the European Commission, via the 7th Framework Programme Project EcoPlast (FP7-NMP-2009-SME-3, collaborative project number 246176), by FEDER through POFC – COMPETE and by national funds from Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT) through PEst project C/BIA/UI4050/2011C/BIA/UI4050/2011

Estudo dos critérios de falhas em flexão em Compósitos PPS/Fibras de Carbono utilizando elementos finitos

O constante desenvolvimento dos materiais aliado à necessidade de se obter componentes estruturais de alto desempenho como materiais alternativos na indústria aeronáutica, bem como, considerando a aplicabilidade atual dos compósitos estruturais, previsões de falha da estrutura e análise das cargas máximas que as mesmas podem suportar se tornam tópicos fundamentais de pesquisas com a finalidade de garantia da confiabilidade quanto ao emprego dos mesmos em diversas áreas. Considerando que o compósito termoplástico PPS/C – Poli (sulfeto de fenileno) reforçado com fibras de carbono – está surgindo como uma alternativa para a substituição de compósitos poliméricos termorrígidos para aplica- ções específicas e que ainda há escassez na literatura atual de dados relativos à previsão de falhas, este trabalho tem como objetivo realizar uma analise bidimensional do comportamento mecânico do compósito PPS/C sob carregamento estático linear em flexão de três pontos. Neste estudo, foram analisados os critérios de falha de máxima tensão, critérios polinomiais dos índices de força e das relações inversas dos índices de força de Tsai-Wu, de Hill e de Hoffman. Por fim, foram comparados os resultados obtidos a partir do modelo computacional com resultados experimentais obtidos a partir de ensaios de flexão com o objetivo de analisar, avaliar e validar a simulação numérica utilizada

Surto de raiva em morcegos frugívoros no município de Niterói, RJ, 2018

A raiva é uma doença viral gravíssima que pode afetar todos os mamíferos. Trata-se de um estudo exploratório descritivo documental desenvolvido a partir dos dados do Centro de Controle de Zoonoses do município de Niterói, RJ.  No mês de julho de 2018 ocorreram três casos de raiva em morcegos, diagnosticados por imunofluorescência direta e inoculação em camundongos, todos envolvendo Artibeus sp. e localizados numa pequena área do bairro São Francisco. O Centro de Controle de Zoonoses desenvolveu uma série de ações visando impedir a transmissão da doença para humanos e outras espécies de animais. Os resultados sugerem um possível surto de raiva em morcegos no bairro São Francisco, em julho de 2018. A ocorrência de um evento desse em um bairro da área urbana de uma metrópole pode ser considerado um fator preocupante pela possibilidade de ocorrência de casos da doença em humanos ou animais domésticos, principalmente tendo em vista a existência dos demais fatores condicionantes e determinantes da ocorrência da enfermidade encontrados no município. Nesse sentido, esforços devem ser envidados pelo poder público no sentido de eliminar ou mitigar tais fatores, visando salvaguardar a saúde da população

O mártir, o humanista, o pedagogo: a contemporaneidade de Rui Barbosa e a educação nas comemorações do centenário de seu nascimento (1949)¹

Este artigo busca analisar as intervenções de três intelectuais brasileiros - Clemente Mariani, Lourenço Filho e Fernando Azevedo - na celebração do centenário de Rui Barbosa em 1949. Mais especificamente, analisa como eles abordam a questão da educação na obra de Rui Barbosa. O texto estabelece uma relação entre as celebrações do centenário e a publicação das Obras Completas de Rui Barbosa, atividade esta cujo investimento inicial data do final da década de 1930 e que logrou publicar o primeiro tomo das obras em 1942. Ambos os movimentos - a publicação das Obras Completas e a celebração do centenário - fazem parte de um mesmo investimento de demonstrar, a um só tempo, a atuação marcante do jurista, político e intelectual baiano na defesa das mais nobres causas, dentre elas a da educação, e a sua contemporaneidade na discussão dos grandes desafios que marcam o país naquele momento

Predictors of Fabry disease in patients with hypertrophic cardiomyopathy: how to guide the diagnostic strategy?

Fabry disease (FD) is a treatable cause of hypertrophic cardiomyopathy (HCM). We aimed to determine the independent predictors of FD and to define a clinically useful strategy to discriminate FD among HCM.Shire Human Genetic Therapies, Inc.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Spatial Factors Play a Major Role as Determinants of Endemic Ground Beetle Beta Diversity of Madeira Island Laurisilva

The development in recent years of new beta diversity analytical approaches highlighted valuable information on the different processes structuring ecological communities. A crucial development for the understanding of beta diversity patterns was also its differentiation in two components: species turnover and richness differences. In this study, we evaluate beta diversity patterns of ground beetles from 26 sites in Madeira Island distributed throughout Laurisilva – a relict forest restricted to the Macaronesian archipelagos. We assess how the two components of ground beetle beta diversity (βrepl – species turnover and βrich - species richness differences) relate with differences in climate, geography, landscape composition matrix, woody plant species richness and soil characteristics and the relative importance of the effects of these variables at different spatial scales. We sampled 1025 specimens from 31 species, most of which are endemic to Madeira Island. A spatially explicit analysis was used to evaluate the contribution of pure environmental, pure spatial and environmental spatially structured effects on variation in ground beetle species richness and composition. Variation partitioning showed that 31.9% of species turnover (βrepl) and 40.7% of species richness variation (βrich) could be explained by the environmental and spatial variables. However, different environmental variables controlled the two types of beta diversity: βrepl was influenced by climate, disturbance and soil organic matter content whilst βrich was controlled by altitude and slope. Furthermore, spatial variables, represented through Moran’s eigenvector maps, played a significant role in explaining both βrepl and βrich, suggesting that both dispersal ability and Madeira Island complex orography are crucial for the understanding of beta diversity patterns in this group of beetles.Peer reviewe

Indivíduos fisicamente ativos submetidos ao tratamento com Tribulus terrestris versus placebo

The purpose of the present study is to evaluate anthropometric, biochemical, hormonal and performance differences among physically active individuals who utilize (or not) Tribulus terrestris (TT) supplementation.  The cohort is composed of 32 subjects divided into two groups: 1) 8 males and 8 females individuals who are physically active and utilize Tribulus terrestres; 2) 8 males and 8 females individuals who are physically active and utilize placebo. Inclusion criteria for all subjects consisted of age requirement within the range of 18 and 40 years old, a history of at least 6 months of physical activity and absence of any drug treatment/consumption. Analysis of body composition, physical performance test and blood collection for subsequent hormonal and biochemical tests were collected. Data were processed and analyzed based on descriptive statistical tests and one-way-ANOVA. Results were considered statistically significant when p<0.05. Results show significant increase in testosterone levels for both females and males treated with TT, decreased levels of body fat among the treated women, increased libido for treated individuals and enhanced strength among treated women. Biochemical parameters among all groups were within normal limits.O objetivo do presente estudo é avaliar as diferenças antropométricas, bioquímicas, hormonais ede desempenho entre indivíduos fisicamente ativos que utilizam (ou não) a suplementação comTribulus terrestris (TT). A coorte é composta por 32 indivíduos divididos em dois grupos: 1) 8indivíduos do sexo masculino e 8 do sexo feminino, fisicamente ativos e que utilizam Tribulusterrestres; 2) 8 indivíduos do sexo masculino e 8 do sexo feminino que são fisicamente ativos eutilizam placebo. Os critérios de inclusão para todos os sujeitos consistiram na exigência de idadeentre 18 e 40 anos, histórico de pelo menos 6 meses de atividade física e ausência de qualquertratamento / consumo de drogas. Análise da composição corporal, teste de desempenho físico ecoleta de sangue para testes hormonais e bioquímicos subsequentes foram coletados. Os dadosforam processados e analisados com base em testes estatísticos descritivos e ANOVA one-way. Osresultados foram considerados estatisticamente significantes quando p <0,05. Os resultadosmostram aumento significativo nos níveis de testosterona para mulheres e homens tratados comTT, diminuição dos níveis de gordura corporal entre as mulheres tratadas, aumento da libido paraindivíduos tratados e aumento da força entre mulheres tratadas. Parâmetros bioquímicos entretodos os grupos estavam dentro dos limites normais