A avaliação de investimentos infraestruturais na perspetiva financeira, económica e do bemestar social: conceptualização de um método de avaliação utilizando a análise de opções reais

Tese de Doutoramento, Ciências Económicas e Empresariais, 13 de setembro de 2024, Universidade dos Açores.Tradicionalmente, a avaliação de investimentos tem-se focado em aspetos maioritariamente financeiros, procurando a maximização do valor a criar para os acionistas. Não obstante, existem investimentos que, pela sua natureza infraestrutural ou importância na oferta de bens e serviços essenciais, têm impactos que se estendem a vários stakeholders e, até, a toda a sociedade. Entre os vários impactos, destacam-se os de natureza económica, social e ambiental. Num mundo marcado pela incerteza e pelas alterações climáticas e com compromissos firmados para reduzir as emissões de carbono e promover o desenvolvimento sustentável, a decisão de realizar investimentos, sobretudo por decisores públicos, não deverá ter por base critérios meramente financeiros, mas também aspetos relacionados com o ambiente e o bem-estar social, procurando maximizar o valor para a sociedade, incluindo a minimização do impacto ambiental. Apesar de existirem modelos de avaliação que procuram quantificar esses impactos, estes ainda apresentam várias limitações, entre as quais se destaca o tratamento de fatores de incerteza. Neste sentido, esta tese pretende apresentar modelos de avaliação de investimento que conjuguem fatores de incerteza e impactos socioambientais. Para o efeito, recorre-se à análise de opções reais para apresentar três modelos que avaliam investimentos sob o ponto de vista económico e socioambiental. Como estudos de casos, apresentam-se três casos baseados na área do transporte aéreo e marítimo de passageiros, um dos setores com maior emissão de carbono, na Região Autónoma dos Açores, uma região ultraperiférica e fragmentada composta por nove ilhas e conhecida pela sua ambição de se tornar uma região sustentável. Os resultados obtidos apontam para o facto de, na Região Autónoma dos Açores, o transporte aéreo, sujeito a Obrigações de Serviço Público, apresentar uma elevada criação de valor para a sociedade quando comparado com o transporte marítimo, devido à poupança de tempo de viagem, mesmo considerando os impactos ambientais. Adicionalmente, é possível verificar que, entre ilhas com menor distância, a aquisição de embarcações elétricas para o transporte marítimo de passageiros revela possuir potencial de criação de valor para a sociedade quando comparado com o transporte aéreo, reduzindo os impactos ambientais e promovendo o desenvolvimento sustentável neste setor.ABSTRACT: Traditionally, investment valuation has primarily focused on financial aspects, aiming to maximize and create value for shareholders. However, there are investments that, due to their infrastructural nature or importance in providing essential goods and services, have impacts that extend to various stakeholders and even society as a whole. Economic, social, and environmental consequences are particularly significant among these various impacts. In a world marked by uncertainty and climate change, with commitments to reduce carbon emissions and promote sustainable development, the decision to make investments, especially by public decision-makers, should not rely solely on financial criteria. Instead, it should also consider aspects related to the environment and social well-being, aiming to maximize value for society and minimize environmental impact. Although evaluation models are attempting to quantify these impacts, they still have several limitations, particularly in addressing uncertainty factors. Consequently, this thesis aims to present investment valuation frameworks that incorporate uncertainty and socio-environmental impacts. ROA is used to introduce three models that assess investments from an economic and socio-environmental perspective. As case studies, three instances related to air and maritime passenger transport, a sector known for its high carbon emissions, are presented in the Autonomous Region of the Azores, an outermost and fragmented region composed of nine islands recognized for its commitment to sustainability. The obtained results indicate that in the Autonomous Region of the Azores, air transport, subject to Public Service Obligations, holds significant value for society when compared to maritime transport, chiefly due to time savings, even when considering the environmental impacts. Furthermore, for islands with shorter distances between them, the acquisition of electric boats for maritime passenger transport demonstrates the potential to create value for society compared to air transport, as it reduces environmental impacts and fosters sustainable development in this sector

Modeling population dynamics and assessing the stock status of the blackspot seabream (Pagellus bogaraveo) in the Azores.

Tese de Doutoramento, Ciências do Mar, 30 de novembro de 2023, Universidade dos Açores.O goraz (Pagellus bogaraveo) é o principal recurso de pesca explorado pela frota demersal açoriana devido à sua abundância e preço médio, que define a dinâmica do regime de exploração multiespecífico da frota. Atualmente, este recurso é considerado intensivamente explorado. Várias avaliações analíticas têm sido implementadas para este stock na Região Autónoma dos Açores, mas as restrições dos modelos são a principal limitação para a sua gestão e exploração sustentável. Esta situação decorre da incerteza dos resultados das atuais avaliações de stocks que não explicam a dinâmica observada nos dados, indicando que os modelos disponíveis não ajudam a prever as características do stock e da pescaria. Por conseguinte, o Grupo de Trabalho sobre Biologia e Avaliação de Recursos Pesqueiros de Profundidade (WGDEEP) do Conselho Internacional de Exploração do Mar (CIEM) classifica este recurso como "limitado em termos de dados" e recomenda a exploração de metodologias de avaliação mais flexíveis, adaptadas à dinâmica dos recursos e à natureza incerta dos dados de entrada. No entanto, os objetivos de gestão do recurso ainda não foram definidos. Neste estudo, todos os dados biológicos, ecológicos e pesqueiros disponíveis (dependentes e independentes da pesca) foram recolhidos, analisados e resumidos sob a forma de dados de entrada para a avaliação do stock de Pagellus bogaraveo, organizados em camadas ou submódulos de informação. Foram exploradas duas abordagens de modelação estruturadas por idade para a avaliação das unidades populacionais: uma convencional, a eXtended survivor analysis, e uma nova, uma abordagem de modelação estatística de análise integrada – Stock Synthesis. O recurso foi avaliado, combinando todas as informações disponíveis. Os resultados mostram uma melhoria significativa do volume de dados disponíveis, mas uma incerteza considerável nas estimativas dos parâmetros de reprodução (maturação e proporção entre os sexos) e de crescimento, incluindo as chaves idade-comprimento, provavelmente devido a questões metodológicas na recolha de dados. Os desembarques registam uma tendência crescente até 1992 e uma diminuição acentuada a partir de 2005. Os índices de abundância relativa registam uma tendência decrescente ao longo de toda a série histórica. Nos últimos anos, foi observada uma tendência contraditória nos índices de abundância relativa. Enquanto se regista um aumento do índice de abundância do estudo, verifica-se uma diminuição do índice de abundância da pesca comercial. Este conflito nos índices é explorado através de hipóteses de um aumento real da abundância ou de efeitos de capturabilidade formulados para explicar as tendências observadas. A estrutura etária da população parece manter a sua distribuição geral com uma moda entre 24-34cm LF. No entanto, parecem existir variações interanuais na disponibilidade do goraz para a pesca. Os métodos de avaliação utilizadas revelam muitas diferenças na caraterização dos dados. A abordagem convencional não apresentou melhorias na estimativa das características do stock. Em contrapartida, o modelo de análise integrada mostrou uma maior flexibilidade na análise e compreensão dos dados, permitindo a exploração de hipóteses para resolver conflitos observados nos dados, como a tendência oposta observada nos índices de abundância ou potenciais alterações observadas nos dados de crescimento. Da análise exploratória SS3, que explorou um total de 54 modelos de referência, 35 convergiram, sugerindo, em geral, que a interpretação do estado do stock de Pagellus bogaraveo nos Açores é altamente dependente dos pressupostos do modelo. Considerando todas as conclusões obtidas durante este estudo, os resultados demonstram uma melhoria no conhecimento e uma melhor compreensão da dinâmica populacional de Pagellus bogaraveo no Arquipélago dos Açores.ABSTRACT: The blackspot seabream (Pagellus bogaraveo) is the primary fishery resource exploited by the Azorean demersal fleet due to its abundance and average price, which defines the dynamics of the fleet's multispecific operating regime. Presently, this resource is considered intensively exploited. Several analytical assessments have been implemented for this stock in the Azores Area, but the restrictions of the models are currently the main limitation for its management and sustainable exploitation. This arises from the uncertainty of the current stock assessment results that do not explain the observed dynamics in the data, indicating that the available models do not help predict the stock and fishery characteristics. Therefore, the Working Group on Biology and Assessment of Deep-sea Fisheries Resources (WGDEEP) of the International Council for the Exploration of the Sea (ICES) classifies this resource as “data limited” and recommends exploring more flexible assessment methodologies adapted to the resource dynamics and the uncertain nature of the input data. Nonetheless, the management objectives for the resource have not yet been defined. In this study, all available biological, ecological, and fisheries data (fishery-dependent and fisheries-independent data) were collected, analyzed, and summarized in the form of input data for the assessment of the Pagellus bogaraveo stock, organized into layers or sub modules of information. Two age-structured modeling approaches for the stock assessment were explored: one conventional, the eXtended survivor analysis, and one novel, an integrated analysis statistical modeling approach - Stock Synthesis. The resource was assessed, combining all available information. The results show a significant improvement in the volume of data available but considerable uncertainty in the estimations of the reproduction parameters (maturation and sex ratio) and growth, including the age-length keys, probably because of methodological issues in the data collection. Landings show an increasing trend until 1992 and a sharp decrease from 2005. Relative abundance indices show a decreasing trend throughout the historical series. In recent years, a contradictory trend has been observed in relative abundance indices. Whereas there is an increase in the abundance index of the survey, there is a decrease in the abundance index of the commercial fishery. This conflict in indices is explored through hypotheses of a real increase in abundance or catchability effects formulated to explain the observed trends. The population's age structure seems to maintain its general distribution with a mode between 24-34cm LF. Still, there appear to be inter-annual variations in the availability of blackspot seabream to fishing. The assessment methods used show many differences in the characterization of the data. The conventional approach did not show improvement in the estimation of stock characteristics. In contrast, the integrated analysis model showed greater flexibility in the analysis and understanding of the data, allowing the exploration of hypotheses to resolve conflicts observed in the data, such as the opposite trend observed in the abundance indices or potential changes observed in growth data. From the SS3 exploratory analysis, which explored a total of 54 reference models, 35 converged, suggesting, in general, that the interpretation of the stock status of Pagellus bogaraveo in the Azores is highly dependent on model assumptions. Considering all the insights obtained during this study, the results demonstrate an improvement in knowledge and a better understanding of the population dynamics of Pagellus bogaraveo in the Azores Archipelago

Tracking Machado-Joseph disease (MJD): identification of prodromal and early disease molecular biomarkers

Tese de Doutoramento, Biologia, 11 de novembro de 2022, Universidade dos Açores.A doença de Machado-Joseph (DMJ) é uma doença neurodegenerativa de poliglutamina (poliQ) rara, causada pela expansão de uma repetição CAG no gene ATXN3 que codifica a proteína ataxina-3 (ATXN3). A DMJ é uma doença multissistémica de início tardio, envolvendo predominantemente os sistemas cerebeloso, piramidal, extrapiramidal, oculomotor e periférico. A ataxia da marcha é geralmente definida como o início da doença, por ser o sintoma inicial mais frequente (≈92%); no entanto, alguns doentes apresentam outros sinais/sintomas ainda antes das alterações da marcha, incluindo diplopia. A DMJ é caracterizada por uma longa fase pré-clínica durante a qual algumas manifestações clínicas não específicas, alterações no encéfalo e modificações moleculares já estão presentes, antes do aparecimento da doença. A ATXN3 é uma desubiquitinase, sendo que quer a proteína ATXN3 nativa quer a mutada são ubiquamente expressas em vários tipos de células de tecidos neuronais e não neuronais. A presença da expansão (CAG)n/trato poliQ expandido acima de um limiar patológico no transcrito/proteína ATXN3 inicia uma cascata de eventos patogénicos, os quais incluem a falhas na homeostasia celular, disfunção mitocondrial e stress oxidativo, alterações da apoptose, bem como desregulação transcricional. Algumas destas alterações moleculares têm potencial de serem usadas como biomarcadores da doença. Uma vez que as medidas clínicas atuais se revelam insuficientes para medir com rigor a eficácia de eventuais agentes terapêuticos modificadores da doença, em particular na fase pré-clínica, a identificação de biomarcadores para as fases iniciais da doença é extremamente importante no que diz respeito à sua monitorização da progressão, nomeadamente no contexto do desenvolvimento de terapêuticas. O principal objetivo desta tese é melhorar o conhecimento acerca das alterações moleculares associadas com a DMJ e contribuir para a identificação de novos biomarcadores transcricionais periféricos para a DMJ, particularmente nas fases iniciais da doença. No total, foram utilizadas amostras de RNA de sangue de 101 indivíduos molecularmente confirmados para a DMJ (20 indivíduos pré-clínicos, e 81 doentes incluindo 36 doentes da fase inicial – doentes com cinco ou menos anos de progressão) e 98 indivíduos controlo saudáveis dos Açores, bem como 20 doentes DMJ e 20 controlos saudáveis do Brasil. Foram também usadas amostras de cérebros post-mortem de doentes com confirmação molecular de DMJ (n=5) e de indivíduos controlo excluídos molecularmente para a DMJ (n=9); duas regiões severamente afetadas na DMJ (núcleos dentados do cerebelo e ponte) e uma região menos afetada (córtex frontal) foram analisadas. Foram também usadas amostras de sangue e cérebro (ponte e córtex cerebral) de ratinhos transgénicos YACMJD84.2 (n=11) e wild-type (n=11) de 9 meses de idade, assim como de amostras de cérebro (ponte e córtex cerebral) de ratinhos transgénicos (n=4) e wild-type (n=5) de 18 meses de idade. Uma caracterização demográfica, genética e clínica detalhada dos sujeitos DMJ açorianos confirmou que os indivíduos pré-clínicos já apresentam alterações antes do aparecimento da doença, tais como nistagmo e/ou disfagia; para além disso, na coorte total de doentes, e tal como seria expectável, a pontuação total da NESSCA (Neurological Examination Score for Spinocerebellar Ataxia) aumenta com a progressão da doença. No subgrupo de doentes da fase inicial com dois momentos de avaliação disponíveis, a análise dos subitens da NESSCA revelou que as alterações não cerebelosas desta escala deram o contributo principal para o aumento anual da pontuação total, indicando que ambos os parâmetros cerebelosos e não cerebelosos dos doentes DMJ são úteis para avaliar a progressão da doença, nas suas fases iniciais. Sendo a PCR quantitativa em tempo real a principal técnica experimental escolhida para avaliar a expressão transcricional, no âmbito deste trabalho, os genes a utilizar como genes de referência foram primeiro selecionados com base na sua estabilidade de expressão. Todos os cinco genes candidatos testados (PPIB, TRAP1, B2M, DECR1 e FPGS) mostraram expressão estável em amostras de sangue de indivíduos DMJ e controlos açorianos, indicando que todos eles podem ser usados para normalizar dados de PCR quantitativa em tempo real em estudos utilizando amostras de sangue de indivíduos DMJ; o TRAP1 foi identificado como o gene de referência mais estável de entre os cinco analisados. Para melhor elucidar o envolvimento da via mitocondrial da apoptose na patogénese da DMJ, foram analisados os níveis de expressão de três genes relacionados com este mecanismo (BCL2, BAX e TP53) em amostras de sangue e de cérebro post-mortem de indivíduos da DMJ e controlos. Os nossos resultados sugerem que a ativação da via mitocondrial da apoptose pode estar favorecida na periferia (amostras de sangue) dos indivíduos DMJ, tal como anteriormente reportado. Da mesma forma, os dados do cérebro post-mortem dos doentes DMJ mostraram que as células do córtex frontal, que se sabe estar pouco afetado na DMJ, podem ser mais vulneráveis a estímulos apoptóticos, enquanto as células nos núcleos dentados do cerebelo e ponte, que se sabem ser atingidas na DMJ, são mais propensas a sobreviver, sugerindo que as mesmas possam ativar mecanismos protetores de sobrevivência na fase final da doença. Com o objetivo de avaliar se os ratinhos transgénicos replicavam os resultados obtidos em indivíduos DMJ, analisou-se os níveis de expressão do Bcl2, Bax e Tpr53, e avaliou-se se a expressão destas moléculas variava com a progressão da doença. Os resultados indicam que quantidade das proteínas Blc2 e Bax está alterada no cérebro de ratinhos transgénicos pré-sintomáticos de 9 meses de idade e sintomáticos de 18 meses de idade, tendo estas alterações variado com a progressão da doença, indicando que a resposta das células a estímulos apoptóticos depende da fase da doença. Os nossos resultados indicam, ademais, que os ratinhos transgénicos de 18 meses de idade e os cérebros post-mortem DMJ estão em diferentes fases da doença. Com o objectivo de identificar novos biomarcadores transcricionais periféricos para a DMJ, utilizámos dados de um whole genome microarray realizado em amostras de sangue total de indivíduos DMJ e controlos, bem como dados disponíveis a partir de um estudo de expressão já realizado, tendo identificado os genes DDIT4, TRIM13 e P2RY13 como estando consistentemente desregulados em sangue de indivíduos DMJ em diferentes coortes (Açores e Brasil). Além disso, os níveis de expressão destes três genes correlacionam com características clínicas/genéticas dos doentes, sendo que quantidade das suas respetivas proteínas, estavam também alteradas nos cérebros dos doentes DMJ, ligando estas alterações transcricionais à patogénese da doença. É de salientar que os nossos resultados indicam que os níveis de DDIT4 e TRIM13 em sangue periférico possam constituir biomarcadores transcricionais fiáveis para a DMJ, em particular para as fases iniciais da doença. É ainda importante referir que o(s) mecanismo(s) da doença nos quais as proteínas TRIM13 e P2RY13 estão envolvidas – respetivamente, a eliminação de proteínas mal enroladas e agregadas durante o stress do reticulo endoplasmático, bem como a resposta inflamatória – aparentam estar mantidos no sistema nervoso central e na periferia (sangue) dos doentes DMJ. Globalmente o trabalho desenvolvido nesta tese demonstrou que os genes DDIT4 e TRIM13 são iomarcadores transcricionais periféricos em particular para as fases iniciais da DMJ; assim nós antecipamos que estes podem ser incluídos num conjunto de vários biomarcadores fluidos e/ou outros biomarcadores de neuroimagem e neurofisiologia para complementar as escalas clínicas para uma precisa monitorização da progressão da doença e medição da eficácia das terapias em ensaios clínicos. Analisando uma via que se sabe estar alterada na DMJ, este trabalho evidenciou também que diferentes regiões do cérebro têm uma vulnerabilidade específica à apoptose; tal foi verificado em amostras de indivíduos DMJ e de um modelo de ratinho DMJ.ABSTRACT: Machado-Joseph disease (MJD) is a rare late-onset polyglutamine (polyQ) neurodegenerative disease caused by the expansion of a CAG repeat in the ATXN3 gene encoding the ataxin-3 (ATXN3) protein. MJD is a multisystem disease involving predominantly the cerebellar, pyramidal, extrapyramidal, motor neuron and oculomotor systems. Disease onset is usually defined by gait ataxia, as it is the most frequent initial symptom of MJD (≈92%), but some patients already show other signs/symptoms prior to gait disturbances, including diplopia. MJD is characterized by a long preclinical phase during which some unspecific clinical manifestations, brain abnormalities and molecular changes are known to be already present, preceding disease onset. ATXN3 is a deubiquitinase, and both native and mutant ATXN3 are ubiquitously expressed in several cell-types in neuronal and non-neuronal tissues. An abnormal expansion of the (CAG)n/polyQ tract above a pathological threshold in the ATXN3 transcript/protein is thought to initiate a cascade of pathogenic events, such as failure of cellular protein homeostasis, mitochondrial dysfunction and oxidative stress, alterations in apoptosis, as well as transcriptional impairment. Importantly, some of these molecular alterations have the potential to be used as biomarkers of disease, which are urgently needed, in the context of the emergent clinical trials for MJD. Because current clinical measures are insufficient to rigorously measure the efficacy of disease-modifying therapeutic agents, in particular in the preclinical phase, the identification of biomarkers for the early stages of the disease is extremely important to allow monitoring the disease progression, namely for the development of therapeutics. The main goal of this thesis is to improve our knowledge of molecular alterations associated with MJD and to contribute for the identification of novel blood-based transcriptional biomarkers for MJD, particularly of the initial stages of the disease. In total, blood RNA samples from 101 molecularly confirmed MJD carriers (20 preclinical subjects, and 81 patients including 36 patients with five or less years of disease duration – early patients) and 98 healthy individuals from the Azores, as well as 20 MJD patients and 20 controls from Brazil were used in this thesis. Furthermore, frozen samples from post-mortem brain regions of deidentified molecularly confirmed MJD patients (n=5) and of control individuals molecularly excluded for MJD (n=9) were used; for each subject, two brain regions severely affected in MJD (dentate cerebellar nucleus and pons), and a region with lower degree of disease affectation (frontal cortex) were analyzed. Blood and brain samples (pons and cerebral cortex) from 9-month-old (MO) YACMJD84.2 (Q84) (n=11) and wild-type mice (n=11), as well brain samples (pons and cerebral cortex) from 18 MO Q84 (n=4) and wild type mice (n=5) were also used. A detailed demographic, genetic and clinical characterization of the Azorean MJD subjects confirmed that preclinical subjects show alterations before disease onset, such as nystagmus and/or dysphagia, and that for the overall MJD patients, total NESSCA (Neurological Examination Score for Spinocerebellar Ataxia) score increased with disease progression. Importantly, the analysis of the NESSCA subscores in the subset of early patients with follow-up data revealed that non-cerebellar NESSCA features were the major contributors to the annual increase of the total score, indicating that the evaluation of both cerebellar and non-cerebellar features of MJD patients would be useful to assess disease progression in the early stages of the disease. Because quantitative real-time PCR was the major experimental technique chosen to evaluate transcriptional expression in this work, the genes to be used as reference in expression studies were firstly selected based on their expression stability. All the five selected candidate housekeeping genes (PPIB, TRAP1, B2M, DECR1, and FPGS) showed stable expression in blood samples from Azorean MJD carriers and healthy controls, indicating that all of them can be used for normalizing quantitative real-time PCR data in studies using peripheral blood samples from MJD subjects; noteworthy, TRAP1 was identified as the most stable reference gene among the five analyzed. To better elucidate the involvement of the mitochondrial apoptosis pathway in MJD pathogenesis, the expression levels of three major apoptosis-related genes (BCL2, BAX and TP53) were analyzed in blood and post-mortem brain samples from MJD carriers and controls. Our results suggest that in MJD carriers’ activation of the mitochondrial apoptotic pathway might be favored at the periphery, as previously reported. Similarly, the data from post-mortem MJD patients’ brains showed that cells in the less-affected frontal cortex might be more vulnerable to apoptotic stimuli, while the remaining cells in the degenerative dentate cerebellar nucleus and pons are more prone to survive, suggesting that they may activate protective survival mechanisms at the end-stage of the disease. In addition, we determined whether Q84 mice replicate the findings in MJD subjects and evaluated how Bcl2, Bax and Tpr53 expression levels changed with disease progression. Blc2 and Bax proteins were altered in the brains of pre-symptomatic 9 MO and symptomatic 18 MO transgenic Q84 mice, and these alterations fluctuated with the disease progression, indicating that the response of the cells to apoptotic stimuli depends on the stage of disease. Also, our results also indicate that 18 MO Q84 transgenic mice and post-mortem MJD brains are at different stages of the disease. Pursuing the goal to identify novel blood-based transcriptional biomarkers for MJD, building on data from a cross-sectional blood-based whole genome microarray of MJD subjects and controls and of a previous expression study, we identified DDIT4, TRIM13 and P2RY13 as being consistently dysregulated in blood of MJD subjects across different cohorts (Azores and Brazil). Additionally, the expression levels of these three genes correlated with patients’ clinical/genetic features and their respective protein abundance was altered in brains of MJD patients, linking these transcriptional changes with MJD pathogenesis. Noteworthy, our results indicate that DDIT4 and TRIM13 are reliable blood-based transcriptional biomarker for MJD, in particular for the early stages of the disease. Importantly, our results further show that the disease mechanism(s) in which TRIM13 and P2RY13 proteins are involved – respectively, elimination of misfolded and aggregates proteins during endoplasmic reticulum stress, and inflammatory response – could be preserved in the central nervous system and the periphery (blood) of MJD patients. Overall, the work developed in this thesis demonstrates that DDIT4 and TRIM13 are blood-based transcriptional biomarkers for the early stages of MJD; thus we anticipate that they can be included in a set of various fluid biomarkers and/or other neuroimaging and neurophysiology biomarkers to complement clinical scales for the accurate monitoring of disease progression and measurement of the efficacy of therapeutics in clinical trials. Targeting an important pathway known to be disrupted in MJD, this work also evidenced that there is tissue-specific vulnerability to apoptosis in MJD subjects and in a MJD mouse model

Trophic position of dolphins tracks recent changes in the pelagic ecosystem of the Macaronesian region (NE Atlantic)

Dolphins play a key role in marine food webs as predators of mid-trophic-level consumers. Because of their mobility and relatively long life span, they can be used as indicators of large-scale changes in the ecosystem. In this study, we calculated the trophic position (TP) of 5 dolphin species from the Canary, Madeira and Azores Islands using bulk and compound-specific stable isotope ratios from muscle tissue to assess trophic adaptations to recent changes in the availability of feeding resources. Dolphin TP values were then compared with those of 7 other species of cetaceans from this region. Analysis of stable nitrogen isotopes in amino acids of the common dolphin indicated non-significant effects of changes in the basal resources of the food web and thus supported the use of bulk samples for TP estimations. Dolphins occupied an intermediate TP (mean: 3.91 to 4.20) between fin (3.25) and sperm whales (4.95). Species-specific TP were equivalent among islands. However, TP increased for the common dolphin and decreased for the bottlenose dolphin (the latter also becoming more oceanic) between 2000 and 2018 in the Canary Islands. These results suggest different impacts of recent changes in the oceanography and in the pelagic food web of the Macaronesian region on the trophic ecology of dolphin species.This study was supported in part by the projects QLOCKS (PID2020-115620RB-I00), funded by MCIN/AEI/10.13039/501100011033 (Spain), MISTIC SEAS 2 (‘Applyinga subregional coherent and coordinated approach to the monitoring and assessment of marine biodiversity in Macaronesia for the second cycle of the MSFD’), funded by the Directorate General Environment of the European Commission (Grant Agreement No. 11.0661/2017/750679/SUB/ENV.C2), MISTIC SEAS 3 (‘Developing a coordinated approach for assessing Descriptor 4 via its linkages with D1 and other relevant descriptors in the Macaronesian subregion’), funded by the Directorate General Environment of the European Commission (Grant Agreement No. 110661/2018/794676/SUB/ENV.C2), RACAM (Rede de Arrojamentos de Cetáceos do Arquipélago da Madeira), implemented by the Madeira Whale Museum and funded by the Machico Municipality and projects MARCET (MAC/1.1b/149) and MARCET II (MAC/2.6c/392), both co-financed by EU Programme INTERREG MAC 2014−2020, and through the Commission (28-5307) for ‘Technical scientific advice for the protection of the marine environment: assessment and monitoring of marine strategies, monitoring of marine protected areas of state competence (2018−2021)’ of the Spanish Ministry of Economy and Competitiveness Demographic Challenge (MITECO). Data collection in the Azores was supported by FCT and FRCT through TRACE-PTDC/MAR/74071/2006, MAPCET-M2.1.2/F/012/2011, IF/00943/2013/CP1199/CT0001 (FEDER, COMPETE, QREN, POPH, ESF, Portuguese Ministry for Science and Education, Azores 2020 Operational Programme). M.A.S. was funded by SUMMEREU-H2020 GA 817806. M.A.S. and R.P. were funded by OP AZORES 2020, through the EU Fund 01-0145-FEDER-000140. Okeanos is funded by FCT (UIDB/05634/2020) and by the Regional Government of the Azores (M1.1.A/REEQ.CIENTÍFICO UI&D/2021/010). J.G. was supported by the Spanish National Programme Juan de la Cierva-Formación (MCIN/AEI/10.13039/501100011033 FJC2019-040016-I). This work acknowledges the ‘Severo Ochoa Centre of Excellence’ accreditation (CEX2019-000928-S) to the Institute of Marine Science (ICM-CSIC).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Development of novel insecticidal nanoformulations for plant protection

Tese de Doutoramento, Biologia, 11 de dezembro de 2023, Universidade dos Açores.Durante vários anos, as pragas foram responsáveis por perdas nos produtos hortícolas, o que, consequentemente, teve um impacto significativo na oferta e qualidade dos alimentos e na evolução da sociedade humana. Embora os recentes avanços na ciência e na tecnologia tenham reduzido consideravelmente a incidência e a severidade causadas por pragas, uma grande parte da produção real ainda é perdida todos os anos. Por esta razão, a proteção das culturas agrícolas exige o controle de vários insetos praga de forma segura, eficaz e de baixo custo. Esse desafio pode ser uma oportunidade para os agentes de controle biológico uma vez que são alternativas mais seguras do que os pesticidas químicos usados atualmente. Desta forma, o objetivo desta tese foi produzir e formular moléculas biológicas conhecidas como fatores de virulência do nematode entomopatogénico da espécie Steinernema carpocapsae, para avaliar seu potencial uso como novos bioinseticidas contra insetos-praga. Esta investigação iniciou-se com a clonagem e a expressão heteróloga de duas proteínas putativas tóxicas do nematode, conduzidas em Escherichia coli, sendo estas um domínio proteico, designado de péptido ScK1 e a proteína Sc-CAP. A primeira referida assemelha-se aos bloqueadores de canais de potássio das anémonas do mar e a segunda faz parte de uma extensa família de proteínas que recebe o nome de CAP (Proteínas secretoras ricas em cisteína, antígeno 5 e proteínas 1 relacionadas à patogénese). Devido à complexidade dessas proteínas ricas em cisteína, só foi possível a produção bem-sucedida das recombinantes em fusão com a proteína chaperone designada por isomerase de ligação dissulfeto (DsbC). A estrutura secundária do péptido ScK1 que apresentou um tamanho molecular de 5.7-kDa, cujo a purificação indicou ser redox-sensível, exibiu um espectro de dicroísmo circular far-UV consistente com uma estrutura secundária alfa-helicoidal. A desnaturação térmica do péptido ScK1 permitiu estimar uma temperatura de desnaturação de 59,2 ± 0,1 ºC. A análise de interação proteína-proteína in silico revelou uma forte afinidade para com os canais de potássio dos insetos. Os resultados dos ensaios de toxicidade usando Drosophila melanogaster como modelo mostraram que a injeção deste péptido é letal contra insetos de forma dose-dependente, com uma dose letal média (LD50) de 52,29 ng por adulto. A administração oral da proteína de fusão reduziu significativamente a atividade locomotora dos insetos tratados após 48 horas do ensaio. A estrutura terciária predita da proteína Sc-CAP revelou uma conformação de alfa-beta-alfa com grande homologia com proteínas de outros nematodes parasitas de vertebrados, conhecidos por terem capacidade de ligação a esteróis. A versão recombinante apresentou um tamanho molecular estimado de 50 kDa e apesar da proteína não apresentar toxicidade por injeção ou administração oral, os experimentos de interação revelaram uma forte capacidade de ligação de esteróis. A análise de interação ligandoproteína mostrou uma alta afinidade do colesterol e do palmitato para diferentes motivos de ligação da proteína com uma energia de ligação de -6,3 e -4,5 kcal/mol, respetivamente. Estes resultados foram confirmados pelo ensaio in vitro, onde a proteína recombinante apresentou, de forma dose-dependente, grande afinidade de ligação ao colesterol. A Nanoencapsulação destas duas proteínas toxicas foi conseguida através da preparação de nanopartículas de quitosano pelo método de gelificação iónica. A caracterização geral das nanopartículas revelou um tamanho nanométrico para as formulações NanoScK e NanoCAP, com um tamanho médio de 182,0 e 676,9 nm, respetivamente, e uma liberação rápida inicial seguida por um perfil de liberação mais lento para ambas as formulações. Estas nanoformulações permitiram a libertação destas proteínas em insetos. Além disso, foi notável a acumulação dessas moléculas em diferentes tecidos do inseto, nomeadamente, no sistema digestivo e no sistema nervoso. A formulação NanoScK causou efeitos imediatos em insetos, induzindo uma evidente redução da atividade locomotora, paralisia e mortalidade, ao contrário do NanoCAP, onde se observou baixa mortalidade. Por fim, foram avaliados os efeitos dessas formulações sobre a progenia do inseto. NanoScK desencadeou uma redução significativa no número de ovos depositados por insetos tratados, enquanto o NanoCAP causou uma redução significativa na taxa de emergência de adultos. Os resultados desta tese conferem um estatuto de prova de conceito em relação ao uso de proteínas do secretado do nematode para o desenvolvimento de novas formulações inseticidas. Esta nova classe de biomoléculas pode dar origem à próxima geração de inseticidas biológicos visto que são específicos para as pragas alvo, biodegradáveis, não tóxicos, amigos do ambiente e de baixo custo de produção.ABSTRACT: For several years, crop losses due to pests had a significant impact on the evolution of human society and food supply. Although recent advances in science and technology have considerably reduced the incidence and severity caused by plant pests, a big portion of actual production is still lost each year. For this reason, plant protection in agriculture demands the control of several insect pests in a safe, effective, and low-cost way. This challenge can be an opportunity for biological control agents since they are much safer alternatives than several chemical pesticides. Therefore, the purpose of this thesis was to produce and formulate biological molecules known as the virulence factors of entomopathogenic nematodes to evaluate their potential use as bioinsecticides against insect pests. This thesis started with the cloning and heterologous expression of two putative toxic proteins from Steinernema carpocapsae conducted in Escherichia coli. A small protein domain, named ScK1 peptide, which resembles a potassium channel blocker from a sea anemone, and a second larger protein, named Sc-CAP, from the cysteine-rich secretory protein/antigen 5/pathogenesis related-1 superfamily. Due to the complexity of these cysteine-rich proteins, the successful production of the recombinant proteins was only possible in fusion with the chaperone protein called disulfide bond isomerase. The secondary structure of the purified 5.7-kDa ScK1 peptide after proteolytic cleavage of the fusion protein appeared to be redox-sensitive, exhibiting a far-UV circular dichroism spectrum consistent with alpha-helical secondary structure. ScK1 thermal denaturation allowed estimating a melting temperature of 59.2 ± 0.1 °C. In silico proteinprotein interaction analysis revealed a strong affinity towards insect potassium channels. The results from toxicity assays using Drosophila melanogaster as a model show that injection of this peptide can kill insects in a dose-dependent manner with an LD50 of 52.29 ng per adult within 24 hours. Oral administration of the fusion protein significantly reduced the locomotor activity of the treated insects after 48 hours of the assay. The predicted tertiary structure of the Sc-CAP protein revealed a unique alphabeta-alpha sandwich with high structural homology to sterol-binding proteins from other parasitic nematodes. The recombinant version had an estimated molecular weight of 50 kDa and despite the protein did not show toxicity by injection or oral administration, the interaction experiments revealed a strong sterol binding capability. Docking analysis showed a high affinity of cholesterol and the palmitate to different binding motifs of the protein with an energy binding of -6.3 and -4.5 kcal/mol, respectively. These results were confirmed by the In vitro assay, where the recombinant protein showed increasing binding affinity to the cholesterol in a dose-response manner. The Nano-encapsulation of these two venom proteins was achieved by the preparation of chitosan nanoparticles via the ionic gelation method. The overall characterization of chitosan nanoparticles revealed a nanometric size for both NanoScK and NanoCAP formulations, with a mean size of 182.0 and 676.9 nm, respectively, and an initial rapid release followed by a slower release profile in both formulations. These nanoformulations allowed the delivery of the venom proteins into insects. Furthermore, it was notable the increase of these molecules in different insect tissues, such as the gut and nervous system. The NanoScK formulation caused immediate effects in treated insects with an evident reduced locomotor activity, paralysis, and mortality, contrary to the NanoCAP, where low mortality occurred later in the assay. Lastly, the effects of these formulations on the insect progeny were assessed. NanoScK triggered a significant reduction in the number of eggs laid by treated insects, while the NanoCAP caused a significant reduction in adult emergence. The outputs of this thesis confer a proof-of-concept status regarding the use of nematode venom proteins for the development of new insecticidal formulations. This new class of nanoinsecticides may soon become the next generation of insecticides because they are cost-effective, non-toxic, biodegradable, and beneficial to the environment

Unveiling the role of methylation prone (MP) and untranslated (UTRs) regions in the clinical variability of Spinocerebellar Ataxia Type 3(SCA3) /Machado-Joseph Disease (MJD): a genome-wide approach

Tese de Doutoramento, Biologia, 22 de junho de 2023, Universidade dos Açores.A Ataxia espinocerebelosa do tipo 3 (SCA3), também conhecida como doença de Machado-Joseph (MJD), é uma doença neurodegenerativa rara de manifestação tardia e pertencente ao grupo das doenças de poliglutamina (poliQ). O gene causal desta doença, ATXN3, apresenta como mutação causal a expansão do motivo repetitivo CAG. Este gene codifica a proteína ATXN3, uma proteína ubíqua que pode estar envolvida nos mecanismos de transcrição. As regiões não traduzidas (UTRs), 5’ e 3’ UTRs, juntamente com elementos cis-acting (tais como os promotores dos genes), são essenciais para a regulação da expressão génica. Além disso, também a metilação do ADN tem um papel importante na referida regulação. O principal objetivo desta tese de doutoramento foi analisar o impacto das regiões não traduzidas e das regiões propensas à metilação, na variabilidade clínica da SCA3. Para este efeito, estudámos a variação encontrada em 3'UTR do gene ATXN3 e analisámos o impacto destas variantes na variação da idade de início da doença nos doentes com SCA3. Reportámos nove variantes presentes em 3'UTR do gene ATXN3 que podem ter um papel na sua própria regulação génica. Na coorte Açoriana, composta por doentes com SCA3, nenhuma das variantes que foram identificadas apresentou um efeito modulador significativo na variação da idade de início da doença, e não fomos capazes de replicar os resultados para a variante rs709930 (e rs910369) obtidos por outro grupo de investigadores. Neste estudo, conseguimos identificar haplótipos associados à doença e que podem fazer a discriminação dos alelos expandidos; este facto pode ser relevante para o desenvolvimento de novas estratégias de allele-specific silencing. Estudámos também a variação encontrada nas UTRs de diferentes genes que foi obtida através da sequenciação alargada do exoma e efetuámos correlações genótipo- fenótipo para avaliar o impacto de tais variantes/genes na variação da idade de início dos doentes com SCA3. Neste estudo identificámos quatro genes candidatos a modificadores da variação da idade de início da doença: GLI4, TGFA, ERBB4 e MPHOSPH9. Os alelos alternativos das variantes no gene GLI4, apresentaram uma modificação prevista nos locais de ligação dos factores de transcrição e nos factores de transcrição, que se ligam a esses locais; este gene apresentou ainda uma variação na idade de início da SCA3 de três anos (a idade de início é mais tardia). Os restantes genes modificadores (TGFA, ERBBB4 e MPHOSPH9) identificados neste estudo, apresentam variantes em 3’UTRs, são conhecidos como interatores do gene ATXN3, e influenciam significativamente a variação na idade de início da doença. Também conseguimos obter oito pathways estatisticamente enriquecidas, duas delas contendo genes com efeito modificador (TGFA e ERBBB4): HIF1α Signaling e Neuregulin Signaling. Estas pathways podem ser importantes para outras aplicações terapêuticas nesta doença. Por fim, efetuámos um estudo piloto de metilação genome-wide. Tanto quanto nos é possível saber, este é o primeiro estudo que investiga as alterações de metilação do ADN em doentes com SCA3 e em controlos emparelhados. Como o tamanho da amostra foi pequeno, não esperávamos a ocorrência de CpGs diferencialmente metiladas, entre doentes e controlos. A análise de enriquecimento da lista de 1279 genes que obtivemos, mostrou um enriquecimento para pathways envolvidas em doenças neurodegenerativas, tais como a Calcium signaling pathway. Também realizámos uma análise com epigenetic clocks (Hannum e Horvath) para doentes com SCA3 e controlos emparelhados. Não conseguimos encontrar diferenças entre doentes e controlos para a idade de metilação do ADN, para ambos epigenetic clocks . No caso da diferença da idade de metilação do ADN e a diferença da idade de metilação residual do ADN, também não fomos capazes de encontrar diferenças entre os dois grupos para ambos os epigenetic clocks. Estes resultados podem ser explicados pelo tamanho da amostra e pelo poder limitado deste estudo. Esta tese de doutoramento tentou contribuir para a descoberta do papel das regiões não traduzidas e às regiões propensas à metilação na variabilidade clínica da SCA3. Para este efeito, obtivemos: a) variantes com impacto previsto em 3'UTR do gene ATXN3; b) genes candidatos a modificadores, com variantes em UTRs; c) nenhum resultado significativo para o primeiro estudo a nível do genoma sobre a metilação do ADN, comparando doentes e controlos; serão necessários mais estudos, num número maior de doentes e controlos para obter um perfil de metilação para a SCA3.ABSTRACT: Spinocerebellar ataxia type 3 (SCA3), also known as Machado-Joseph disease (MJD) is a rare late-onset neurodegenerative disorder, which belongs to the polyglutamine (polyQ) group of diseases. The causal gene of this disease, ATXN3, presents CAG repeat expansion as the causative mutation. This gene encodes the protein ATXN3 an ubiquitous protein that can be involved in transcription mechanisms. Untranslated regions (UTRs), 5’ and 3’ UTRs, along with cis-acting elements (such as gene promoters), are essential for the regulation of gene expression. Also, DNA methylation has an important role in such regulation. The main goal of this thesis was to analyse the impact of untranslated and methylation prone regions in the clinical variability of SCA3. For this purpose, we studied the variation found in 3’UTR of ATXN3 and analysed the impact of these variants in the variance of the onset of SCA3 patients. We reported nine variants present in the 3’UTR of ATXN3 that can have a role in its own expression regulation. In the Azorean SCA3 cohort studied, none of the variants that were identified presented a significant modulatory effect on the disease onset and we were not able to replicate results for rs709930 (and rs910369) obtained by other group of researchers. In this study, we were able to identify disease-associated haplotypes that can discriminate expanded allele; this fact can be relevant for the design of new allele-specific silencing strategies. We also studied the variation found in the UTRs of different genes that was obtained through an extended exome sequencing and performed genotype-phenotype correlations to evaluate the impact of such variants/genes in the onset of SCA3 patients. In this study we identified four candidate modifier genes of the disease onset: GLI4, TGFA, ERBB4 and MPHOSPH9. The alternative alleles of the variants in GLI4, presented a predicted modification in transcription factors binding sites and in transcription factors, that bind to those sites; this gene showed a delay of three years in SCA3 onset. The remaining modifier genes (TGFA, ERBB4 and MPHOSPH9) identified in this study, are known ATXN3 interactors, and significantly influence the onset of the disease. These genes presented variants in the 3’UTRs. We were also able to obtain eight statistically enriched pathways, two of them containing genes with a modifier effect on the onset (TGFA and ERBB4): HIF1α Signaling and Neuregulin Signaling. These pathways can be important for further therapeutic applications in this disease. Finally, we performed an epigenome-wide pilot study. As far as we are aware, is the first study investigating genome-wide DNA methylation changes in SCA3 patients compared to matched controls. As the sample size was small, we were not expecting genome-wide significant differentially methylated CpG sites, between patients and controls. Enrichment analysis of the obtained list of 1279 genes showed an enrichment for pathways involved in neurodegenerative diseases such as Calcium signaling pathway. We also performed an analysis of epigenetic clocks (Hannum and Horvath) for SCA3 patients and matched healthy controls. We were not able to find differences between patients and controls for DNA methylation age for both epigenetic clocks. For DNA methylation age acceleration difference and DNA methylation age acceleration difference residuals we were not able to find differences between the two groups for both clocks. These results can be explained by sample size and the limited power of this study. This PhD thesis tried to contribute to the unveiling the role of untranslated and methylation prone regions in the clinical variability of SCA3. For this purpose, we obtained: a) variants with predicted impact in 3’UTR of ATXN3 gene; b) candidate modifier genes, with variants in UTRs; c) no significant results for the first genome-wide study on DNA methylation comparing patients and controls; further studies in a higher number of patients and controls are required to obtain a methylation profile for SCA3

O estado da arte do marketing digital na Região Autónoma dos Açores: Uma visão de empresas e consumidores

Dissertação de Mestrado, Ciências Económicas e Empresariais, 23 de janeiro de 2026, Universidade dos Açores.Em regiões geograficamente isoladas, como é o caso da Região Autónoma dos Açores, o marketing digital constitui um meio estratégico para ultrapassar barreiras geográficas, reforçar a relação entre a marca e os consumidores e aumentar a competitividade empresarial. Contudo, o grau em que as empresas e os consumidores locais exploram e interagem com as ferramentas digitais permanece pouco explorado. Este estudo analisa os comportamentos, perceções e atitudes dos consumidores açorianos face ao marketing digital, sob duas perspetivas: dos próprios clientes e das pequenas e médias empresas com que eles interagem, avaliando o seu impacto na interação, confiança e intenção de compra, bem como identificando os desafios estruturais e contextuais que condicionam a sua eficácia. Para tal, foi adotada uma abordagem metodológica mista, combinando um inquérito a 250 consumidores das nove ilhas com entrevistas semiestruturadas a 28 micro e pequenas empresas de diversos setores. Os resultados quantitativos indicam que a exposição digital está positivamente associada à frequência de compras online e à interação com marcas regionais. O tipo de conteúdo e a rede social preferida emergem como determinantes da perceção de eficácia da comunicação, enquanto a valorização da sustentabilidade, mais acentuada entre os consumidores mais jovens, influencia positivamente a confiança e a intenção de compra. Os resultados qualitativos evidenciam maturidade digital assimétrica entre setores: empresas tradicionais mantêm presença digital limitada, enquanto outras recorrem a estratégias avançadas como Search Engine Optimization, comércio eletrónico, parcerias com influenciadores e análise de dados. Persistem barreiras como a escassez de recursos humanos qualificados, dificuldades de adoção tecnológica e fraca integração de métricas de desempenho. Assim, este estudo contribui para a compreensão da interseção entre comportamento do consumidor, práticas empresariais e desenvolvimento regional, oferecendo orientações práticas para potenciar a eficácia do marketing digital em territórios ultraperiféricos.ABSTRACT: In peripheral regions such as the Autonomous Region of the Azores, digital marketing offers a strategic means to overcome spatial barriers, strengthen brand–consumer relationships, and enhance business competitiveness. However, the degree to which local companies and consumers engage effectively with digital strategies remains underexplored. This study examines consumer behaviors, perceptions, and attitudes towards digital marketing in the Azores, assessing its impact on interaction, trust, and purchase intention, while identifying structural and contextual challenges to its effectiveness. A mixed-methods approach was employed, combining a survey of 250 consumers across the nine islands with semi-structured interviews involving 28 micro and small enterprises from diverse sectors. Quantitative findings reveal that digital exposure is positively associated with the frequency of online purchases and interactions with regional brands. Content type and preferred social media platforms emerged as key determinants of perceived communication effectiveness, while younger consumers’ strong emphasis on sustainability positively influenced trust and purchase intention. Qualitative results highlight asymmetric digital maturity across sectors: traditional businesses often maintain limited online presence, whereas others employ advanced strategies such as Search Engine Optimization, e-commerce, influencer partnerships, and analytics. Persistent barriers include a shortage of qualified human resources, difficulties with technological adoption, and weak integration of performance metrics. The study contributes to understanding the intersection between consumer behavior, business practices, and regional development in outermost territories. It offers practical guidance for enhancing digital marketing effectiveness through personalized and sustainability-oriented communication, investment in analytical capabilities, and capacity-building initiatives tailored to the unique constraints and opportunities of peripheral economies

Filosofia da História em Teófilo Braga

Compreendemos a relevância da história no pensamento de Teófilo pela sua ligação às ciências sociais. Para que os fenómenos sociais não sejam considerados um agregado de casos isolados, compete à filosofia da história destrinçar o fio condutor que os torna parte de um jogo de dependências recíprocas. Avançamos também com alguns exemplos em que esta conceção se reflete na obra de Teófilo, nomeadamente na produção poética, na análise literária e no pensamento político.ABSTRACT: We understand the relevance of history in Teófilo’s thought through its connection to the social sciences. In order to ensure that social phenomena are not considered an aggregate of isolated cases, the philosophy of history must unravel the common thread that makes them part of a game of reciprocal dependences. We also present some examples in which this conception is reflected in Teófilo’s Work, namely in his poetic production, literary analysis and political thought

Tesla e Tesla: Da Corrente Elétrica ao Carro Elétrico

Já ouviste falar dos carros Tesla, certo? Aqueles elétricos, modernos, super-rápidos e cheios de tecnologia? Mas sabias que o nome ¯Tesla° não foi escolhido por acaso? É uma homenagem a Nikola Tesla, um inventor do século XIX, cujas ideias, muitas delas à frente do seu tempo, só agora estão a tornar-se realidade

Play with History: o lúdico no ensino de História no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Secundário

Dissertação de Mestrado, Ensino da História no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Ensino Secundário, 13 de março de 2025, Universidade dos Açores.O presente Relatório tem como principal objetivo apresentar, analisar e refletir sobre a ação educativa desenvolvida no âmbito do Estágio Pedagógico, integrado no Mestrado em Ensino de História no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Secundário, da Universidade dos Açores. Em paralelo com a nossa reflexão em redor da globalidade das ações desenvolvidas no nosso Estágio, entendemos aprofundar um tema em específico, face àquele que consideramos ser o potencial do lúdico no ensino de História. Trata-se de uma disciplina que vem sofrendo com o crescente desinteresse dos alunos, sendo um dos desafios enfrentados pelos professores torná-la interessante. Assim, intitulamos este Relatório de “Play with History: o lúdico no ensino de História no 3.º Ciclo do Ensino Básico e no Secundário”. Desta forma, para além de darmos a conhecer todo o trabalho realizado durante o nosso Estágio, apresentamos também os desafios do ensino de História e de que forma podemos, ou devemos, enquanto futuros docentes da disciplina, cativar os nossos alunos e tornar o processo ensino-aprendizagem mais interessante e eficiente, dando ênfase ao papel que os recursos lúdicos podem exercer neste contexto. De modo a cumprir os nossos propósitos, e para além da análise que fazemos à nossa ação educativa, recorremos ao inquérito por questionário para recolher as informações e conceções pretendidas. Foram questionados vinte docentes do 3.º Ciclo do Ensino Básico e/ou do Secundário de diversas escolas dos Açores. Numa fase em que é urgente repensar as estratégias e recursos utilizados em sala de aula, concluímos que o lúdico apresenta imensas potencialidades no ensino de História, tornando-se num valioso aliado para o professor, na procura por um processo ensino-aprendizagem mais eficiente. Em 1845, o célebre Almeida Garrett escreveu a peça “Falar verdade a mentir”. Pois bem, nós acreditamos que é possível “Ensinar História a brincar”.ABSTRACT: The main objective of this Report is to present, analyze and reflect on the educational action developed within the scope of the Pedagogical Internship, integrated in the Master's Degree in History Teaching in the 3rd Cycle of Basic and Secondary Education, at the University of the Azores. In parallel with our reflection on the globality of the actions developed in our Internship, we intend to deepen a specific theme, in view of what we consider to be the potential of play in the teaching of History. It is a discipline that has been suffering from the growing disinterest of students, and one of the challenges faced by teachers is to make it interesting. Thus, we title this Report "Play with History: the ludic in the teaching of History in the 3rd Cycle of Basic and Secondary Education". In this way, in addition to making known all the work done during our Internship, we also present the challenges of teaching History and how we can, or should, as future teachers of the discipline, captivate our students and make the teaching-learning process more interesting and efficient, emphasizing the role that playful resources can play in this context. In order to fulfill our purposes, and in addition to the analysis we make of our educational action, we use the questionnaire survey to collect the desired information and conceptions. Twenty teachers of the 3rd Cycle of Basic Education and/or Secondary Education from various schools in the Azores were questioned. At a time when it is urgent to rethink the strategies and resources used in the classroom, we conclude that playfulness has immense potential in the teaching of History, becoming a valuable ally for the teacher, in the search for a more efficient teaching-learning process. In 1845, the famous Almeida Garrett wrote the play "Speaking truth to lie". Well, we believe that it is possible to "Teach History through play"